Báo Cáo Thực Tập Nghề Nghiệp - Tổng Quan Về Tôm Chân Trắng

LOGO

Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy Sản
I
Trường Đại Học Nông Nghiệp Hà Nội

BÁO CÁO THỰC TẬP NGHỀ NGHIỆP

1


Nội dung
1

Tổng quan về tôm chân trắng

2

Kiểm tra độ sạch bệnh virus YHV1/GAV

3

Kiểm tra độ sạch bệnh virus WSSV

4

Một số kỹ thuật khác

LOGO 2

Tổng quan về tôm chân trắng
Giới (regnum)

Animalia

Ngành (phylum)

Arthropoda

Lớp (class)

Malacostraca

Họ (familia)

Penaeidae

Chi (genus)

Litopenaeus

Loài (species)

Litopenaeus
vannamei
3
LOGO


Tổng quan về tôm chân trắng







Độ mặn: 0,5-45‰
Nhiệt độ: 23-300C
Nhu cầu đạm: 20 - 35%
Tốc độ sinh trưởng: 3g/tuần
Bệnh virus: 30 loài virus gây bệnh
như WSSV, YHV, TSV…

4
LOGO


Kiểm tra độ sạch bệnh virus YHV1/GAV
Thu mẫu

PCR

Tách
chiết RNA

Tạo
cDNA

Điện di
5

LOGO


YHV1/GAV geneome
RT (cDNA synthesis)

GAV

G6

GY2

YHV1
Y3

GY2

PCR
406bps

PCR
277bps

6
LOGO


Kiểm tra độ sạch bệnh virus YHV1/GAV
 Thu mẫu: Lấy mẫu mắt, chân bò, hoặc chân
bơi hoặc một phần mang

Cố định trong cồn 95 độ
 Tách chiết RNA:
+ R1RNAPREP : Guanidine, Urea, Phenol, chất tẩy
+ R2RNAPREP : Chloroform
+ R3RNAPREP : Isopropanol
+ R4RNAPREP : Ethanol 75% v/v
+ R5RNAPREP : Nước tinh sạch xử lý DEPC
7
LOGO


Tổng hợp cDNA
RNA

25oC
RNAse H

42oC

RNAse H

42oC

RNAse H

85oC

cDNA
cDNA
cDNA

8
LOGO


Kiểm tra độ sạch bệnh virus YHV1/GAV
 Chu trình PCR
 Điện di : sử dụng đệm TBE
0,5X trên gel agarose 2%
U = 125V, thời gian 30 phút

Nhiệt độ
(oC)

Thời
gian

Số
chu kỳ

40 oC

10’

1

95 oC

3’

1

94 oC

30’’

66oC

30’’

72 oC

45’’

94 oC

30’’

56 oC

30’’

72 oC

45’’

5

35

9

LOGO


Kết quả điện di kiểm tra đàn tôm post
ngày 9/8/2012
Deca

YHV1/GAV

277 bps

(+)

(-) Leader

406 bps

10
LOGO


Kiểm tra độ sạch bệnh virus WSSV
Tách chiết
DNA

PCR

Điện di
11
LOGO

Kiểm tra độ sạch bệnh virus WSSV
Chạy PCR trong máy theo chu trình như
sau:
+ 950C trong 5 phút
+ 940C trong 30 giây
+ 500C trong 30 giây
40 chu kỳ
+ 720C trong 20 giây
+ 720C trong 5 phút
+ 40C hold
12
LOGO


Kiểm tra độ sạch bệnh virus WSSV
Điện di sản phẩm PCR trên gel agarose
1.5% trong đệm TAE 0,5X
Chạy điện di ở 80V, 400mA trong 30 phút
(+)

Leader

(-)

13
LOGO

Các kỹ thuật
khác

Đo kích thước nhân
tế bào máu cá

 Lấy máu của cá bằng cách dùng bơm kim tiêm hút
máu ở cuối vây đuôi dọc đường bên
 Dàn đều máu trên lam kính
 Để khơ khoảng 1 phút sau đó nhuộm bằng Giemsa
trong 60 phút
 Đem rửa sạch thuốc nhuộm bằng nước sạch và để khơ
 Soi trên kính hiển vi ở độ phóng đại 100, đo kích
thước nhân tế bào hồng (chiều dài và chiều rộng) cầu
và chụp ảnh
14
LOGO


Các kỹ thuật khác

Xác định
giới tính của ngao

Tách bỏ vỏ
 Dùng dao mổ rạch một đường ở tuyến
sinh dục của cá thể
 Dùng đầu dao lấy một ít của tuyến sinh
dục của cá thể di lên lam kính, nhỏ một
giọt nước, di đều

Nếu thấy những hạt liti, đó là con cái. Nếu
nó hịa tan vào nước thành màu trắng
đục, là con đực
15
LOGO


Xin chân thành cảm ơn
sự lắng nghe
của quý Thầy Cô và Các Bạn !

16

LOGO