Tb và kt cnsh

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ
HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LIÊN
QUAN ĐẾN KHẢ NĂNG THÚC ĐẨY
TĂNG TRƯỞNG THỰC VẬT CỦA MỘT
SỐ DÒNG XẠ KHUẨN Streptomyces

spp.

TP, HỒ CHÍ MINH, 11/2023

1

Nội dung

1. Tổng quan
2. Vật liệu và phương

pháp nghiên cứu

THÀNH VIÊN NHÓM

HỌ VÀ TÊN MSSV

Cao Minh Trực 21126559
Nguyễn Văn Tân 21126493
Phạm Nhật Trường 21126562

01

TỔNG QUAN

4

Giới thiệu về
Streptomyces

• Vi khuẩn gram dương dạng
sợi.

• Tạo ra các hợp chất có hoạt
tính sinh học như các hợp
chất kháng khuẩn, chống ký
sinh trùng và ức chế miễn
dịch thông qua chuyển hóa
thứ cấp.

5

MỐI LIÊN HỆ VỚI
THỰC VẬT

CÓ MỐI LIÊN HỆ CÓ LỢI VỚI
THỰC VẬT, GIÚP CẢI THIỆN
SỰ PHÁT TRIỂN CỦA THỰC
VẬT VÀ BẢO VỆ CHỐNG LẠI
SÂU BỆNH

6

CƠ CHẾ THÚC ĐẨY TĂNG

TRƯỞNG THỰC VẬT CỦA

STREPTOMYCES

TRỰC TIẾP GIÁN TIẾP

• Cố định nito • Đối kháng
• Hịa tan các hợp chất • Sản xuất siderophore
• Enzyme phân hủy
chứa phosphorus
• Hòa tan các hợp chất thành tế bào
• Sản xuất kháng sinh
chứa kali

0 CỐ ĐỊNH NITO SỰ HOÀ TAN

chuyển đổi nitơ thành dạng 0 PHOTPHORUS
cây có thể sử dụng được và
Sự hòa tan photphat là sự khống hóa
1q trình này được gọi là cố
2photphat từ đất bởi phosphatase hoặc
định N2 sinh học
phosphohydrolase

0 SỰ HOÀ TAN KALI

Kali là chất dinh dưỡng đa lượng

3cần thiết cho sự sinh trưởng và
phát triển của cây trồng

GIÁN TIẾP

ĐỐI KHÁNG SẢN XUẤT ENZYME PHÂN
SIDEROPHORE HỦY THÀNH TẾ

BÀO

9

Sự sản sinh Indole Acetic Acid
(IAA)

• IAA là auxin tự nhiên phổ biến nhất được tìm thấy ở
thực vật và có tác động tích cực đối với sự phát triển
của rễ. Có tới 80% vi khuẩn vùng rễ có thể tổng hợp
IAA

• IAA vi khuẩn nới lỏng thành tế bào rễ và dẫn tới sự gia
tăng lượng dịch tiết rễ, cung cấp thêm chất dinh dưỡng
cho sự tăng trưởng của vi khuẩn.

• Tryptophan (Trp) là một amino acid thường được tìm
thấy trong dịch tiết rễ, là tiền chất cho việc sinh tổng
hợp IAA bởi vi khuẩn

10

STRESS PHI SINH HỌC

Cây trồng có thể bị stress do nhiều nguyên nhân:

11

02

VẬT LIỆU VÀ
PHƯƠNG PHÁP
NGHIÊN CỨU

1

VẬT LIỆU

MƠI TRƯỜNG NI CẤY

• Tryptone soya broth (TSB)
• Tryptone soya agar (TSA)
• Môi trường Pikovskaya Agar
• Môi trường King B

CÁC LOẠI THUỐC THỬ

• Thuốc thử Salkowskii
• Thuốc thử Lugol

PHƯƠNG PHÁP
NGHIÊN CỨU

• Khảo sát
• Nghiên cứu khả năng thúc đẩy

tăng trưởng cho cây trồng
• Nghiên cứu khả năng chống chịu

stress mặn

1

KHẢO SÁT KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI
KHUẨN STREPTOMYCES SPP. BẰNG PHƯƠNG

PHÁP INDOLEPHENOL BLUE

Máy lắc 60 vòng/phút phenol + NH4+ 1 mL dịch vi khuẩn đã ĐO
Nhiệt độ phòng --> màu xanh ly tâm OD
48h 4 mL H2O 636
5 mL Hypocloride nm
buffer
5 mL thuốc thử 1
Phenol Nitroprusside

KHẢO SÁT KHẢ NĂNG TỔNG HỢP IAA
BẰNG PHƯƠNG PHÁP SALKOWSKI

0,1% Tryptophan 3 ngày đem dịch ly tâm 2 ml dịch trong cho

125 vòng/phút 3500 vòng/phút trong 20 vào 8 ml thuốc thử
Tối, 30°C , 72 giờ
phút Salkowski

KHẢO SÁT KHẢ NĂNG HÒA TAN
PHOTPHO

OD600nm = Cấy tại 3 điểm Ủ ở 30°C trong
0,5 mỗi điểm 0,5µL 3 ngày
Pikovskaya Agar

KHẢO SÁT KHẢ NĂNG SINH CÁC
ENZYME NGOẠI BÀO

37º 5000 vòng/phút ở 4ºC

C

40 µl dịch ly tâm King B agar

Nghiên cứu khả năng thúc đẩy của
vi khuẩn đến nảy mầm hạt cà chua

Hạt cà chua được khử trùng

Ngâm trong huyền phù vi khuẩn (OD600nm = 0,1), trong 60 phút

30 hạt được gieo lên đĩa Petritẩm 10mL nước cất hoặc
các dung dịch NaCl 75mM và 150mM

Ủ các đĩa ở (25±1) °C

NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN
ĐỔI KIẾN TRÚC RỄ

Sau 7 ngày đồng nuôi cấy, sử dụng kính
hiển vi quang học để quan sát bộ rễ của
cà chua trên đĩa thạch

Phân tích các thơng số:
• Tổng chiều dài bộ rễ
• Chiều dài rễ chính
• Chiều dài trung bình lơng rễ