nấm men (tt) pot

B - CÁC PHƯƠNG PHÁP THỰC
NGHIỆM DÙNG ĐỂ ĐỊNH TÊN NẤM
MEN
1. Quan sát hình thái tế bào
nấm men và đo kích thước
Khi xác định hình thái và kích
thước tế bào nấm men người ta
thường nuôi cấy nấm men trong
môi trường thạch - mạch nha và
môi trường mạch nha dịch thể. Nếu
sử dụng các môi trường khác thì
hình thái và kích thước tế bào nấm
men có thể thay đổi, không phù
hợp với hình thái và kích thước tiêu
chuẩn đã được ghi trong bảng phân
loại.
- Môi trường mạch nha: Lấy lúa
đại mạch đã ủ cho nảy mầm (loại
nhập khẩu dùng để làm bia), đem
phơi khô rồi xay nhỏ thành bột.
Cân 1kg bột này, thêm 3 lít nước,
giữ ở 60
0
C để đường hoá cho đến
khi hết tinh bột (thử với dịch Lugol
không thấy có màu xanh lam). Lọc
lấy dịch trong có thể thêm 3 lòng

trắng trứng rồi trộn đều, đun sôi rồi
lọc lấy dịch trong. Điều chỉnh bằng
nước để có nồng độ đường đạt
6
o
Baume.
Phân vào các dụng cụ thuỷ tinh đã
khử trùng. Nếu làm môi trường đặc
thì thêm 2% thạch. Tốt nhất là dùng
mầm đại mạch, nếu không thì có
thể dùng mầm lúa. Nồng độ thích
hợp để nuôi cấy nấm men dùng khi
phân loại là 5,7
o
Baume. Có tài liệu
lại sử dụng nồng độ 5-8
0
Baume.
Nấm men được nuôi cấy trong các
ống nghiệm thạch nghiêng hoặc các
ống nghiệm đựng 3 ml môi trường
dịch thể. Nuôi cấy ở 25-30
0
C trong
3 ngày, sau đó lấy ra làm tiêu bản
và quan sát. Muốn đo kích thước tế
bào nấm men người ta thường sử
dụng trắc vi thị kính). Số tế bào
nấm men được đo không ít hơn 20.
Chú ý là phải đo các tế bào trưởng

thành chứ không đo các chồi mới
nảy sinh. Tế bào nấm men có hình
thái và kích thước khác nhau tuỳ
loài, tuỳ chi. Chúng có thể có hình
cầu, hình bầu dục, hình trứng, hình
quả chanh châu Âu, hình ống v.v
Khi quan sát tế bào nấm men dưới
kính hiển vi có thể phân biệt được
thành tế bào, tế bào chất, không
bào (vacuole) và các hạt dị nhiễm
(metachromatic granules). Thành tế
bào nấm men thẫm hơn so với
nguyên sinh chất, còn không bào
thường có hình tròn, màu nhạt hơn.
Các hạt dị nhiễm thường bắt ánh
sáng mạnh hơn, chúng lắc lư trong
nguyên sinh chất theo chuyển động
Brown. Kích thước của tế bào nấm
men khác nhau rất nhiều tuỳ loài
thuỳ chi, tuỳ điều kiện sinh trưởng
và có thể thay đổi trong khoảng 1-5
x 5-30àm hay có khi dài hơn nữa.
Kích thước tế bào của các loại nấm
men thông thường vào khoảng 4-
5àm.