Sự chuyển hoá các hợp chất hữu cơ chứa doc

Sự chuyển hoá các hợp chất hữu cơ chứa N:
1. Quá trình amôn hoá:
a. Amôn hoá protein:
* Các bước tiến hành thí nghiệm:
- Tiến hành pha môi trường: 30 gam pepton, 1000ml
nước cất.
- Đưa môi trường vào ống nghiệm, mỗi ống nghiệm
chứa 5 – 7 ml môi
trường.
- Khử trùng môi trường ở 1 atm trong 15 phút.
- Đặt vào thành ống nghiệm và nút bông 1 mảnh giấy
quỳ đỏ có thấm nước
vô trùng.
- Cho vào ống nghiệm một ít dung dịch đất.
- Để vào tủ ấm 28 – 30oC trong thời gian 1 tuần.
* Phân tích kết quả:
- Xác định sự có mặt của NH3: nếu tạo thành NH3 thì
giấy quỳ đỏ chuyển
thành xanh.
- Làm tiêu bản nhuộm đơn, quan sát các vi sinh vật
amon hoá: chủ yếu là
Bacillus mycoides, Bacillus subtilis, đây là những
trực khuẩn Gram dương, ngoài ra
còn có mọt số vi khuẩn Gram âm khác.
b. Amôn hoá urê:
* Các bước tiến hành thí nghiệm:
- Pha môi trường: urê 5 gam, K2HPO4 0,5 gam, nước
cất 100 ml.
- Cho vào bình tam giác 100 ml, mỗi bình 30 ml môi
trường.
- Khử trùng 1 atm trong 15 phút.

- Cho vào bình tam giác một ít đất.
- Để 1 mảnh giấy quỳ đỏ treo ở nút bông của bình
tam giác.
- Nuôi cấy ở 28 – 30oC trong thời gian từ 3 – 4 ngày.
* Phân tích kết quả:
- Xác định sự có mặt của NH3 bằng cách:
+ Quan sát sự đổi màu của giấy quỳ từ đỏ sang xanh.
+ Nhỏ 1 giọt dung dịch nuôi cấy lên bản xứ lõm. Sau
đó nhỏ dung dịch Nessler
vào, nếu có NH3 thì dung dịch Nessler sẽ chuyển từ
màu vàng nhạt sang màu vàng
xẫm.
- Làm tiêu bản nhuộm đơn để quan sát vi sinh vật
amôn hoá ure: gồm đơn cầu
khuẩn, song cầu khuẩn hoặc trực khuẩn, chẳng hạn:
Micrococcus urea,
Planosarcina urea, Bacillus pasteurii.