Các phương pháp chuyển gen ở thực vật

Các phương pháp chuyển
gen
Tạ Ngọc Ly
CH NG 6ƯƠ
Nội dung
1. Chuyển gen gián tiếp
2. Chuyển gen trực tiếp
Chuyển gen bằng agrobacterium
Chuyển gen bằng virus
Chuyển gen súng bắn gen
Chuyển gen bằng điện di
Chuyển gen bằng silicon carbide
Chuyển gen bằng vi tiêm
Chuyển gen nhờ Agrobacterium

Agrobacterium tumefaciens và Agrobacterium
rhizogenes
Plasmid Ti và T-DNA
Quá trình xâm nhiễm tự nhiên
của Agrobacterium
Quá trình xâm nhiễm tự nhiên
của Agrobacterium
Quá trình xâm nhiễm tự nhiên
của Agrobacterium
Quá trình xâm nhiễm tự nhiên
của Agrobacterium
Quá trình xâm nhiễm tự nhiên
của Agrobacterium
Quá trình xâm nhiễm tự nhiên của
Agrobacterium

Ti plasmid
Agrobacterium
Genomic DNA
Tế bào thực vật
Genomic DNA
(mang gen mong
muốn)
+
Ti plasmid mang gen mong muốn
Gene
mong
muốn
Plasmid
trống
Enzyme
cắt giới
hạn
Enzyme
cắt giới
hạn
Agrobacterium
Ti plasmid mang gen mới
Tế bào thực vật
DNA
tế
bào
Cây chuyển gen
Tế bào phân chia
Gen mới

+
Chuyển gen
Vector hai nguồn

Vector 2 nguồn ( binary vector )

Được lắp ghép trong Ecoli, sau đó
chuyển toàn bộ vào Agrobacterium

Vector 2 nguồn chứa T-DNA của Ti-plasmid đã loại bỏ các phần
khác, một gen chọn lọc và một vùng để chèn gen đích. Các phần
này được gắn vào một vector có mang các yếu tố giúp quá trình
nhân lên trong E.Coli
Giao phối bộ ba
General scheme for Agrobacterium-mediated transformation of cereal
plants