Đề tài kỹ thuật di truyền chuyển nạp gen vào lục lạp

ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG
KHOA KHOA HỌC ỨNG DỤNG
SEMINAR
KỸ THUẬT DI TRUYỀN
CHỦ ĐỀ:
SẢN XUẤT
VACCINE TÁI
TỔ HỢP
Giáo viên bộ môn: TS Trần Thị Dung
Nhóm thực hiện:

Ngô Trần Đình Khoa 61303589

Phạm Trần Cương Lĩnh 61303612

Lê Thị Cẩm 61303027
NỘI DUNG BÁO CÁO
I
•
Giới thiệu chủ đề.
I
Đại dịch
kinh hoàng
1684
Phát
minh
Hơn 100 năm
sau Edward
Jenner
nghiên cứu ra
phương pháp

chủng đậu
1857 đến 1885
Louis Pasteur
chế tạo ra
vaccine phòng
bệnh than và
bệnh dại
Sang nửa thế
kỷ 20 nhiều
bệnh dịch nguy
hiểm tái phát
và mới xuất
hiện.
Đòi hỏi sự phát triển của
công nghệ sx vaccine
đặc biệt là Vaccine thế hệ mới
Khái niệm vaccine, vaccine tái tổ hợp.
II
1.Vaccine là gì?
Vaccine là chế phẩm có tính kháng nguyên dùng để tạo
miễn dịch đặc hiệu chủ động, nhằm tăng sức đề kháng của cơ
thể đối với một (số) tác nhân gây bệnh cụ thể.
2.Tái tổ hợp là gì ?
Khi các gen liên kết không hoàn toàn, xuất hiện các dạng
giao tử mới không giống cha mẹ do có sự sắp xếp lai các gen.
Hiện tượng này gọi là tái tổ hợp (recombination) và các dạng mới
xuất hiện gọi là dạng tái tổ hợp (recombinant).

1. Hai loại ADN được ly trích: ADN có chứa gen cần tạo
dòng và plasmid của vi khuẩn đóng vai trò của một

vector.

2. Cả ADN và plasmid được xử lý với cùng một loại
enzyme giới hạn. Enzyme giới hạn tạo ra đầu dính ở
plasmid và ADN cần tạo dòng.

3. Đoạn ADN cần tạo dòng được trộn với plasmid.

4. Nhờ enzyme ligase, các base ở đầu dính của plasmid
sẽ gắn với các base bổ sung ở đầu dính của ADN tạo
thành plasmid tái tổ hợp.

5. Plasmid tái tổ hợp được chèn vào tế bào vi khuẩn.

6. Sự tạo dòng gen
Các bước tạo DNA tái tổ hợp
3.Vaccine tái tổ hợp
Đây là loại nucleic acid vaccine, dựa trên nguyên lý
một gen mã hóa cho protein kháng nguyên đặc hiệu được
tiêm vào vật chủ (tế bào động vật hoặc vi sinh vật) để sản
xuất các kháng nguyên này và khởi động một phản ứng
miễn dịch.
Vaccine tái tổ hợp là các chế phẩm sinh học của vi sinh
vật được làm giảm độc lực, không còn khả năng gây bệnh
đối với đối tượng nhận vaccine.
Quy trình sản xuất Vaccine tái tổ hợp
III
Bước 1: Tạo DNA tái tổ hợp
Bước 2: Đưa DNA tái tổ hợp vào tế bào chủ

Bước 3: Khuyếch đại
Bước 4: Thu thập mẫu để sản xuất Vaccine, thuốc
minh hỌa bẰng quy trình sẢn xuẤt Vaccine phòng cúm A
H5N1 cho ngưỜi
Bước 1: thu nhận mẫu bệnh và thông tin
tình hình dịch tễ bệnh cúm
Bước 2: chẩn đoán, phân lập virus và các
phân tích sơ bộ
Bước 3: sản xuất kháng huyết thanh chồn
sương
Bước 4: phân tích đặc điểm di truyền và
kháng nguyên
Bước 5: đánh giá và chọn lựa virus ứng cử
làm vaccine
Bước 6: tái tổ hợp virus bằng kĩ thuật di truyền ngược

Kĩ thuật này cho phép 6 gene – mã hóa cho các protein NP,PA,PB1,PB2,M,NS-của virus
cúm A/Puerto Rico/8/34 (thường gọi là PR8) kết hợp với 2 gene mã hóa cho protein HA và
NA (của chủng khuyến cáo làm vaccine) đã được giảm độc lực làm chủng virus mới mang
đặc điểm kháng nguyên HA và NA giống với chủng khuyến cáo làm vaccine và có thể phát
triển trong trứng nhanh kịp thời cung cấp vaccine khi có dịch xãy ra.
Bước 7: xác định đặc điểm kháng nguyên và di
truyền của chủng tái tổ hợp
Bước 8: đánh giá đặc tính phát triển của virus tái tổ
hợp
Bước 9: chuẩn bị hóa chất cho vaccine bất hoạt
Ứng dụng thực tiễn của sản xuất Vaccine tái tổ
hợp

IV
Đầu tiên là với vacxin viêm gan B: Tác nhân gây bệnh là
virut nhóm ADN mà tiểu phần HBs có trong máu bệnh nhân là
kháng nguyên chính.
Vaccine phòng cúm A H5N1 cho người

Ngay từ khi xuất hiện sự sống, trong sự đấu tranh của các
loài sinh vật thì bệnh tật đã xuất hiện. Đặc biệt là sự ký
sinh của các loài vi sinh vật tới các động vật bậc cao đã
gây ra những bệnh tật hiểm nghèo tạo ra những nạn dịch
thảm khốc và cướp đi nhiều sinh mạng. Để giành giật sự
sống con người đã tìm mọi biện pháp nhằm hạn chế tác
động có hại đó của các đối tượng gây bệnh. Vaccine được
coi là một tiến bộ y học quan trọng nhất của thế kỷ XX
Ngày nay cùng với sự phát triển không ngừng của công
nghệ sinh học con người đã tìm ra được vũ khí hữu hiệu
để bảo vệ chính mình với số lượng nhiều, an toàn và
nhanh chóng. Đặc biệt là Vaccine thế hệ mới hay Vaccine
tái tổ hợp.
Kết luận.
V
Câu hỏi cuối bài
1. Ai là người phát minh ra kính hiển vi đầu tiên?
A.Edward Jenner B. Louis Pasteur
C.Carl Von Linnaeus D.Antoni van Leeuwenhoek
2. Kháng nguyên chính có trong máu bệnh nhân nhiễm Virus Viêm
gan B là gì?
3. Trong kỹ thuật di truyền ngược, có bao nhiêu genes mã hóa cho các
protein của virus cúm A/Puerto Rico/8/34 (thường gọi là PR8)?
A.5B.7

C.6D.8
TÀI LIỆU THAM KHẢO:
[1]http
://www.hcmbiotech.com.vn/technology_detail.php?cateid=4&
id=83
[2]
/>gan-A-va-viem-gan-B-tai-to-hop/20005460/188/
[3] http
://daibio.com.vn/cac-ung-dung-trong-y-duoc/vaccine.daibio
[4]http
://vietsciences1.free.fr/vietscience/khaocuu/nguyenlandung/ch
uong22.pdf
[5] Lê Đình Lương, Quyền Đình Thi. Kỹ thuật di truyền và
ứng dụng. NXB Đại học Quốc gia Hà Nội, 2004.
[6] Nguyễn Đình Huyên. Những điều cơ bản về kỹ thuật di
truyền. NXB Nông nghiệp, 1999.
[7] Lê Đình Lương. Nguyên lý kỹ thuật di truyền. NXB Khoa
học kỹ thuật, 2001.