TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ
KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG
-oOo-
NGÔ KIM PHƯỢNG
PHÂN LẬP, ĐỊNH DANH VÀ KIỂM TRA TÍNH
NHẠY CẢM VỚI KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN
ENTEROTOXIGENIC ESCHERICHIA COLI GÂY
BỆNH TIÊU CHẢY Ở HEO CON TẠI HUYỆN CỜ
ĐỎ VÀ THỚI LAI, THÀNH PHỐ CẦN THƠ
Luận văn tốt nghiệp
Ngành: THÚ Y
Cần Thơ, 2013
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ
KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG
-oOo-
Luận văn tốt nghiệp
Ngành: THÚ Y
PHÂN LẬP, ĐỊNH DANH VÀ KIỂM TRA TÍNH
NHẠY CẢM VỚI KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN
ENTEROTOXIGENIC ESCHERICHIA COLI GÂY
BỆNH TIÊU CHẢY Ở HEO CON TẠI HUYỆN CỜ
ĐỎ VÀ THỚI LAI, THÀNH PHỐ CẦN THƠ
Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện:
TS. LÝ THỊ LIÊN KHAI NGÔ KIM PHƯỢNG
MSSV: 3092632
LỚP: THÚ Y K35
Cần Thơ, 2013
TRNG I HC CN TH
KHOA NÔNG NGHIP VÀ SINH HC NG DNG
MÔN THÚ Y
tài: “Phân lp, nh danh và kim tra tính nhy cm vi kháng sinh
a vi khun Enterotoxigenic Escherichia coli gây bnh tiêu chy heo
con ti huyn C và Thi Lai, thành ph Cn Th” do sinh viên Ngô
Kim Phng, thc hin ti phòng thí nghim V sinh thc phm, B môn Thú
Y, Khoa Nông nghip và Sinh hc ng dng, Trng i hc Cn Th, t
tháng 08/2013 n tháng 11/2013.
n Th, ngày tháng nm 20… Cn Th, ngày ….tháng nm 20…
Duyt B môn Cán b hng dn
TS. LÝ TH LIÊN KHAI
n Th, ngày tháng nm 20…
Duyt Khoa Nông Nghip & SHD
ii
I CAM OAN
Tôi xin cam oan ây là công trình nghiên cu ca bn thân. Các s liu, kt
qu trình bày trong lun vn là trung thc và cha tng c ai công b trong
t k công trình lun vn nào trc ây.
Sinh viên thc hin
Ngô Kim Phng
iii
I CM T
Qua bao nhiêu nm tháng khó nhc, cha mã sinh con ra và nuôi con khôn
n nên ngi. Trong trái tim con vn luôn cm thy may mn và t hào khi
c sinh ra là con ca cha m. Cùng vi lòng yêu thng bao la, ch che và
vun p cho con tt c nhng u tt p nht, cha mã cho con ngun
ng lc thc hin nhng khát vng cuc sng và hc tp tt. Xin kính
dâng n cha m, tm lòng bit n sâu sc t trái tim con.
Chân thành bày t lòng bit n Cô Lý Th Liên Khai – ngi ã hng dn tn
y, to u kin thun li tôi hoàn thành lun vn tt nghip và ch dy
cho tôi nhng u b ích làm hành trang cho cuc sng sau này.
m n Cô Nguyn Th Thu Tâm ã giúp tôi trong khong thi gian u
còn b ng vi vic hc tp ca tân sinh viên.
Tôi xin gi li tri ân n quý Thy Cô thuc B môn Thú Y và Chn Nuôi,
Khoa Nông Nghip và Sinh hc ng dng, Trng i hc Cn Th ã
truyn th kin thc sâu rng trong sut thi gian qua.
Trân trng cm n Ban lãnh o, cán b Thú Y Trm Thú Y huyn C,
Trm Thú Y huyn Thi Lai cùng các cô chú ti các tri chn nuôi ã to u
kin tt và giúp tôi rt nhiu trong vic ly mu.
Xin cm n ch Nguyn Th Hnh Chi, các anh ch Cao hc Thú Y K18, K19;
các anh ch Thú Y K32, K33, K34 và các em sinh viên hc vic ti phòng thí
nghim cùng tt c bn bè trong lp Thú Y K35 ã truyn t nhng kinh
nghim quý báu và giúp tôi trong quá trình thc hin tài. Tôi s mãi ghi
nh nhng k nim ti p bên mi ngi trong sut thi gian hc i hc
và thc hin tài va qua.
Ngô Kim Phng
iv
DANH MC CH VIT TT
Ch vit tt Din gii
E. coli Escherichia coli
ETEC Enterotoxigenic Escherichia coli
EPEC Enteropathogenic Escherichia coli
EIEC Enteroinvasive Escherichia coli
EHEC Enterohaemorrhagic Escherichia coli
EAEC Enteroaggregative Escherichia coli
DAEC Diffusely adhering Escherichia coli
ST Heat stable toxin
LT Heat labile toxin
TGE Transmissible gastroenteritis
PRRS Porcine reproductive and respiratory syndrome
PED Porcine epidemic diarrhea
PPV Porcine parvovirus
PCV Porcine circovirus
FMD Foot and mouth disease
TP. Thành ph
ctv ng tác viên
v
C LC
Trang bìa
Trang duyt i
i cam oan ii
i cm t iii
Danh mc ch vit tt iv
c lc v
Danh sách hình viii
Danh sách bng ix
Tóm lc x
CHNG 1: T VN 1
CHNG 2: C S LÝ LUN 3
2.1 Tình hình nghiên cu trong và ngoài nc v vi khun E. coli gây
nh tiêu chy trên heo con 3
2.1.1 Tình hình nghiên cu trong nc 3
2.1.2 Tình hình nghiên cu ngoài nc 4
2.2 Mt s nguyên nhân gây tiêu chy heo con 5
2.2.1 Nguyên nhân do truyn nhim 5
2.2.2 Nguyên nhân không do truyn nhim 8
2.3 Vi khun Escherichia coli 9
2.3.1 Vi khun Enterotoxigenic E. coli (ETEC) gây tiêu chy trên heo 10
2.3.2 c m hình thái 11
2.3.3 c tính nuôi cy và c tính sinh hóa ca E. coli 12
2.3.4 Cu trúc kháng nguyên ca vi khun E. coli 13
2.3.5 c t gây bnh ca vi khun E. coli 16
2.3.6 Sc kháng ca vi khun E. coli 16
2.3.7 Kh nng gây bnh ca vi khun E. coli 17
2.4 Bnh tiêu chy heo con do E. coli 17
vi
2.4.1 C ch gây bnh tiêu chy 18
2.4.2 Triu chng và bnh tích 18
2.4.3 Chn oán và chn oán phân bit 19
2.4.4 Phòng và u tr bnh 21
2.4.5 S dng kháng sinh trong u tr bnh tiêu chy do E. coli gây ra
heo con 22
CHNG 3: PHNG TIN VÀ PHNG PHÁP THÍ NGHIM 23
3.1 Thi gian, a m và i tng nghiên cu 23
3.1.1 Thi gian và a m thc hin 23
3.1.2 i tng nghiên cu 23
3.2 Phng tin nghiên cu 23
3.2.1 Dng c và trang thit b thí nghim 23
3.2.2 Hóa cht, môi trng 23
3.2.3 Thuc u tr bnh tiêu chy cho heo con 24
3.3 Phng pháp tin hành thí nghim 25
3.3.1 Phng pháp ly mu 25
3.3.2 Phng pháp nuôi cy phân lp vi khun E. coli 26
3.3.3 Phng pháp nh danh các chng vi khun E. coli bng phn
ng huyt thanh hc 28
3.3.4 Phng pháp kim tra tính nhy cm i vi kháng sinh ca vi
khun E. coli phân lp c 29
3.3.5 Phng pháp b trí phác u tr bnh tiêu chy cho heo con 31
3.3.6 Ch tiêu theo dõi 32
3.3.7 Phng pháp x lý s liu 32
CHNG 4: KT QU VÀ THO LUN 33
4.1 Kt qu kho sát t l heo con tiêu chy mt s tri chn nuôi heo
i thành ph Cn Th 33
4.2 Kt qu phân lp vi khun E. coli trên phân heo con tiêu chy ti
huyn C và Thi Lai, thành ph Cn Th 36
vii
4.3 t qu xác nh t l nhim vi khun E. coli trên heo con theo m
và heo cai sa ti TP. Cn Th 37
4.4 l dng tính vi khun E. coli trong môi trng chung tri ti
t s tri chn nuôi heo thành ph Cn Th 39
4.5 Kt qunh danh các chng vi khun E. coli K88, K99, 987P trên
phân heo con tiêu chy theo a m 41
4.6 t qunh danh các chng vi khun E. coli K88, K99, 987P trên
phân heo con tiêu chy theo loi heo con 42
4.7 Kt qunh danh các chng vi khun E. coli K88, K99, 98P trong
môi trng chung tri ti mt s tri chn nuôi heo thành ph Cn
Th 44
4.8 Kt qu kho sát tính nhy cm ca các chng E. coli phân lp c
i mt s loi kháng sinh 46
4.9 Kt quu tr bnh tiêu chy trên heo con nghi do vi khun E. coli
gây ra ti thành ph Cn Th 48
CHNG 5: KT LUN VÀ NGH 50
5.1 Kt lun 50
5.2 ngh 50
TÀI LIU THAM KHO 51
PH CHNG 55
viii
DANH SÁCH HÌNH
Hình Tên hình Trang
2.1 Vi khun E. coli di kính hin vi 12
2.2 Khun lc vi khun E. coli trên môi trng MC 13
3.1 o pH phân heo con tiêu chy 25
3.2 Ly mu phân heo con tiêu chy 25
3.3 Quy trình phân lp vi khun E. coli 26
3.4 Phng pháp nh danh chng vi khun E. coli bng phn
ng ngng kt nhanh trên phin kính
28
3.5 a kháng sinh trên môi trng thch MHA 30
4.1 Chung tri c, xung cp 34
4.2 Chung tri mi, thoáng mát 34
4.3 pH phân heo con tiêu chy nghi do E. coli gây ra 36
4.4 Heo con bnh tiêu chy 38
4.5 Heo con b phân tiêu chy bt ít 38
4.6 Heo con trong úm lót rm r 40
4.7 Heo con trong úm che chn s sài 40
4.8 Heo con trong kiu chung sàn 45
4.9 Heo con trong kiu chung xi mng 45
4.10 Nn chung sàn không c v sinh 45
4.11 Nn chung xi mng s dng lâu nm b xung cp 45
ix
DANH SÁCH BNG
ng Tên bng Trang
3.1 Các phn ng sinh hóa nh danh vi khun E. coli 27
3.2 Bng tiêu chun ng kính vòng vô khun ca mt s loi
kháng sinh (CLSI, 2011)
30
3.3 Phác u tr bnh tiêu chy nghi do E. coli trên heo con 31
4.1 Kt qu kho sát t l heo con tiêu chy mt s tri chn
nuôi heo ti thành ph Cn Th
33
4.2 Kt qu phân lp vi khun E. coli trên phân heo con tiêu
chy ti huyn C và Thi Lai, thành ph Cn Th
35
4.3 Kt qu xác nh t l nhim vi khun E. coli trên heo con
theo m và heo cai sa ti TP. Cn Th
37
4.4 T l dng tính vi khun E. coli trong môi trng chung
tri ti mt s tri chn nuôi heo thành ph Cn Th
39
4.5 Kt qu nh danh các chng vi khun E. coli K88, K99,
987P trên phân heo con tiêu chy theo a m
41
4.6 Kt qu nh danh các chng vi khun E. coli K88, K99,
987P trên phân heo con tiêu chy theo loi heo con
42
4.7 Kt qu nh danh các chng vi khun E. coli K88, K99,
987P trong môi trng chung tri ti mt s tri chn nuôi
heo thành ph Cn Th
44
4.8 Kt qu kho sát tính nhy cm ca các chng E. coli phân
p vi mt s loi kháng sinh
46
4.9 Kt qu u tr bnh tiêu chy trên heo con nghi do vi
khun E. coli gây ra ti thành ph Cn Th
48
x
TÓM LC
nh tiêu chy là mt trong nhng bnh xy ra thng xuyên heo con, gây
n tht áng k cho ngành chn nuôi heo nc ta. Bnh do nhiu nguyên
nhân gây ra, tuy nhiên xét v khía cnh vi khun hc thì E. coli là loi vi
khun thng xuyên lu trú trong ng rut ngi và ng vt, có kh
ng sinh c tng rut Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC), là mt
trong các nguyên nhân quan trng và thng gp gây bnh tiêu chy heo
con. Qua thi gian t tháng 8 n tháng 11 nm 2013, ti huyn C và
huyn Thi Lai, thành ph Cn Th. Bng phng pháp kho sát, phân lp,
nh danh các chng vi khun E. coli và kim tra tính nhy cm ca vi khun
E. coli vi kháng sinh bng phng pháp khuch tán trên thch. Tin hành
kho sát trên 2.778 heo con theo m và heo cai sa, t l tiêu chy là 33,11%,
trong ó tiêu chy do E. coli chim t l 100%. Kt qunh danh các chng
E. coli K88, K99, 987P gây tiêu chy trên heo con có t l là K88 36,06%,
K99 26,22%, và 987P chim 13,11%. Quá trình kim tra s nhy cm ca 35
chng E. coli phân lp c vi 7 loi kháng sinh, cho thy có s nhy cm
cao i vi các loi kháng sinh ceftazidine (91,42%), amoxicillin/clavulanic
acid (71,42%), norfloxacin (77,14%), kháng cao i vi ampicillin
(88,57%), trimethoprime/sulfamethoxazol (62,85%). Trong 2 phác u tr
thì Multibio có hiu qu 75% và Coli - Norgent hiu qu là 62,5%.
1
CHNG 1
T VN
c ta có nn nông nghip lâu i, gn lin vi quá trình xây dng và phát
trin t nc ngày càng vng mnh. Trong ó, chn nuôi heo óng vai trò
quan trng trong vic cung cp thc phm, góp phn ci thin cuc sng, tng
thu nhp cho ngi dân. Tuy nhiên khu vc ng bng sông Cu Long nói
chung và Cn Th nói riêng trong nhng nm gn ây, tình hình dch bnh
y ra trên àn heo ngày càng ph bin và phc tp. Thit hi hàng nm do
ch bnh gây ra còn nhiu, chi phí cho thuc dùng phòng và tr bnh khá cao
gây ra s gim àn và thu hp quy mô sn xut. c bit là bnh tiêu chy
heo con ã và ang là mt trong s các bnh gây thit hi áng k cho ngành
chn nuôi.
nh do nhiu nguyên nhân gây ra, có th do nh hng ca các nhân t bên
ngoài nh s thay i t ngt ca thi tit, thc n kém phm cht, v sinh
chung tri… các nhân t này làm gim sc kháng ca heo con, to u
kin thun li cho các vi khun xâm nhp và phát trin gây bnh. áng lu
tâm nht là Escherichia coli, loi vi khun thng xuyên khu trú, hot ng
trong ng rut ca heo và cng có th tr thành nghuyên nhân gây tiêu chy
cho heo con. Trong ó, E. coli thuc nhóm có kh nng sinh c tng rut
Enterotoxingenic E. coli (ETEC) vi nhiu chng nguy him khác nhau nh
K88 (F4), K99 (F5), 987P (F6), F41… là nhng chng ph bin gây tiêu chy
cho heo con (Moon et al., 1990). Bên cnh ó, vic s dng kháng sinh trong
phòng và u tr bnh tiêu chy ca heo con cng tr nên áng lo ngi vì E.
coli là vi khun có sc kháng nhanh, hin tng a kháng vi nhiu loi
thuc có t l khá cao. S dng kháng sinh tràn lan, không tuân theo nguyên
c và phác c th cng s gây khó khn v sau cho vic u tr dt bnh.
thành ph Cn Th, trong nhng nm gn ây ngành chn nuôi heo có tc
tng trng khá nhanh. Nm 2009, s lng heo c nuôi trong a bàn là
113.900 con nhng tính n thi m 10/2012 thì lên n 125.300 con. Trong
ó, huyn C (21.867 con) và huyn Thi Lai (22.772 con) là hai ni có s
ng heo khá ln trong a bàn (Cc thng kê TP. Cn Th, 2012). Tuy ã có
t vài tác gi nghiên cu v bnh tiêu chy heo con do E. coli gây ra TP.
n Th nh Nguyn Minh Lc (2007), Nguyn Vn Ngha (2011), nhng ch
u tra mc gây nhim, còn các yu t nh chng gây bnh, kháng sinh
2
u tr hay vic kim tra tính nhy cm ca các chng E. coli i kháng sinh
trên tng a m c th thì cha c quan tâm.
Xut phát t nhng lý do trên, chúng tôi tin hành thc hin tài “Phân lp,
nh danh và kim tra tính nhy cm vi kháng sinh ca vi khun
Enterotoxigenic Escherichia coli gây bnh tiêu chy heo con ti huyn
và Thi Lai, thành ph Cn Th”
c tiêu tài:
Xác nh t l bnh tiêu chy trên heo con ti huyn C và Thi Lai, TP.
n Th.
Xác nh t l bnh tiêu chy do E. coli và các chng E. coli K88, K99, 987P
gây tiêu chy cho heo con.
Xác nh tính nhy cm ca vi khun E. coli phân lp c vi mt s loi
kháng sinh và u tr bnh tiêu chy nghi do E. coli gây ra heo con.
3
CHNG 2
S LÝ LUN
2.1 Tình hình nghiên cu trong và ngoài nc v vi khun E. coli gây
nh tiêu chy trên heo con
2.1.1 Tình hình nghiên cu trong nc
Cù Hu Phú và ctv. (2003), cho bit tình hình tiêu chy do E. coli trên heo con
theo m ti mt s tri heo min Bc Vit Nam chim t l khá cao nh
Hà Ni là 88,37%, Hà Tây là 86,21%, Thái Nguyên là 75,93% và Hi Phòng
là 69,23%. Các chng phân lp c ch yu mang kháng nguyên K88 và K99
i t l ln lt là 45,24% và 16,67%. Hin tng kháng vi các loi kháng
sinh thông thng vn dùng u tr bnh nh amoxicillin (76,42%),
chloramphenicol (79,25%), streptomycin (88,68%), tetracyclin (97,17%)
trimethroprim/sulfamethoxazole (80,19%).
Theo nghiên cu ca Lý Th Liên Khai và ctv. (2003), t l nhim vi khun E.
coli trên heo con theo m b tiêu chy Cn Th là 87,5%. Trong ó ã xác
nh c các chng K88, K99, 987P vi t l ln lt là 7,32%, 18,29%,
13,41%.
Theo Phm Quí Trng (2007), t l E. coli phân lp trên heo tiêu chy ti mt
tri chn nuôi thuc thành ph Cn Th là 85% và t l kháng vi các
loi kháng sinh ampicilin, colistin, ciprofloxacin, gentamicin, ofloxacin và
bactrim ca E. coli phân lp t heo con sau cai sa ln lt là 83,3%, 33,34%,
27,80%, 61,10%, 36,90% và 94,4%.
Trn Th Dim Châu (2010), t l phân lp E. coli trên mu phân heo con theo
b tiêu chy ti Trà Vinh là 100%, vi t l các chng K88, K99 và 987P
n lt là 33,33%, 17,28%, 13,58%.
Theo Nguyn Thành Tâm (2007), thì t l dng tính E. coli chim 87,88%.
E. coli phân lp c có t l kháng kháng sinh cao là streptomycin (100%),
ampicillin (98,04%), bactrim (90,20%), gentamicin (62,75%). Hin trng vi
khun E. colia kháng vi 5 loi kháng sinh là ph bin nht (43,14%).
t nghiên cu ca Nguyn Minh Lc (2007), cho thy t l nhim vi khun
E. coli, Samonella spp. và Proteus spp. Cn Th ln lt là 96,96%, 10,10%
và 6,06%. Vi khun E. coli nhy cm vi ofloxacin 75%, gentamicin 70% và
ã kháng vi streptomycin 95%, bactrim 85% và ampicillin 55%.
4
l nhim E. coli trên heo con b tiêu chy tnh Hng Yên là 56%, trong
ó t l mang kháng nguyên K88 là 80% và K99 là 20% (Phm Th Sn và
ctv., 2008).
Nghiên cu Chí Hng (2012), kt qu phân lp E. coli trên mu phân heo
con sau cai sa b tiêu chy ti tnh Bn Tre là 100%, vi t l chng K88,
K99 và 987P ln lt là 35,13%, 10,84%% và không tìm thy chng 987P.
2.1.2 Tình hình nghiên cu ngoài nc
Theo nghiên cu ca Frydendahl (2002), ti an Mch s chng vi khun E.
coli phân lp t heo sau cai sa tiêu chy mang kháng nguyên bám dính K88
chim t l 44,7%, 987P là 0,9% và F18 là 39,3%.
Theo nghiên cu ca V Khc Hùng và M. Pilipcinec (2003), Cng hòa
Slovakia thì trong 220 mu phân heo con theo m b tiêu chy dng tính vi
E. coli có 83 mu mang kháng nguyên bám dính F4, chim 37,7%; 7 mu
mang t hp F5 và F41; 6 mu mang kháng nguyên F6; 19 mu mang kháng
nguyên F18.
t nghiên cu ca Ken Katsuda et al. (2006), các nguyên nhân gây tiêu chy
a heo con Nht Bn cho rng E. coli chim 2% trong các nguyên nhân gây
tiêu chy heo con. Vi khun E. coli các la tui 1 - 7 ngày (13,30%), 8 - 14
ngày (13,6%), 15 - 21 ngày (13%) và ln hn 21 ngày là (55%).
Nghiên cu ca Vidotto et al. (2009), ti Brazil nhn thy trong 100 mu phân
ng tính vi E. colic phân lp t heo con mc bnh tiêu chy có 44%
mang kháng nguyên bám dính K88, K99 (30%) và 987P (25%).
Theo Jadranka et al. (2010), trong s 91 mu phân lp t heo con ti Serbia thì
mu có kháng nguyên O chim 61,48%, 47 mu (51,64%) cha các kháng
nguyên bám dính K88, K99 và 987P vi t l ln lt là 80,85%, 8,51% và
6,38%.
t nghiên cu gn ây ca Chae et al. (2012), trên 105 chng vi khun E.
coli phân lp t heo con tiêu chy t 1 - 6 tun tui ti Hàn Quc thì t l
ng tính vi kháng nguyên bám dính K88, 987P ln lt là 27,62%, 31,43%
không tìm thy chng nào mang kháng nguyên bám dính K99.
Theo Fairbrother (1992), kt qu kho sát s nhy cm vi kháng sinh i vi
chng E. coli gây tiêu chy cho heo con có s nhy cm khá tt vi colistin,
gentamicin, norfloxacin…
5
2.2 Mt s nguyên nhân gây tiêu chy heo con
2.2.1 Nguyên nhân do truyn nhim
v Truyn nhim do vi khun
Có nhiu loi vi khun gây tiêu chy heo con nh E. coli, Salmonella spp.,
Proteus spp., Shigella, Clostridium perfringens…
nh do E. coli
nh do E. coli gây ra din bin cp tính dng nhim trùng huyt hoc
nhim c ng rut, viêm rut ng vt non nht là vào 3 - 6 ngày tui,
thm chí bnh t 1 ngày tui. ây là giai n có t l mc bnh và t vong
cao nht (Fairbrother, 1992).
Hin nay có nhiu nhóm E. coli gây bnh c bit n. Trong ó,
Enterotoxgenic E. coli (ETEC) là nhóm vi khun thng xuyên khu trú trong
rut ngi và ng vt. ETEC có kh nng sinh ra c t rut (enterotoxin),
có kh nng gây bnh rt nng (Smith và Gyles, 1970).
nh do Salmonella spp.
Salmonella là trc khun hình gy, hai u tròn, không hình thành giáp mô và
nha bào, di ng, gram âm thuc h Enterobacteriaeceae. Hin nay, các nhà
khoa hc phát hin c khong 1600 chng Salmonella khác nhau. Ngoài 2
chng Salmonella có c lc cao gây ra bnh phó thng hàn cho heo là
Salmonella choleraesuis chng Kunzendorf gây bnh th cp tính và
Salmonella typhysuis chng Voldagsen gây bnh th mãn tính, các chng
còn li thng xuyên có mt trong ng rut ca gia súc khe. Khi sc
kháng ca c th thay i, hot ng tiêu hóa b ri lon thì chúng hot ng
nh và gây tiêu chy. i vi heo con theo m, chúng thng xuyên gây ri
lon tiêu hóa, gây tiêu chy do tit ni c t làm viêm loét rut (Lê Vn
Nam, 1999).
nh do Proteus spp.
Các chng thuc loài Proteus mirabilis và Proteus amoniae khá ph bin,
chúng thng có s kt hp vi nhim trùng ng niu các thú nh, mc
dù chúng c phân lp t nhng bnh khác nhau, bao gm viêm tuyn tin
lit, viêm hô hp, tn thng da chó, viêm ni tâm mc heo, nhim khun
huyt gà tây. Các ging vi khun Proteus thng xuyên có mt trong ng
rut ng vt, song ít khi gây bnh (Nguyn Nh Thanh, 1997).
6
nh do Shigella
Shigella gây bnh tiêu chy heo con theo m và heo con sau cai sa. Các
chng thng gây bnh là: Shigella dysentery và Shigella flexmitia.
Chúng xâm nhp vào ng tiêu hóa, sinh sn và tit c t gây bnh tiêu
chy.
nh do Clostridium perfringens
Clostridium perfrigensc phân thành 6 serotype: A, B, C, D, E, F nhng
ch có 3 chng Clostridium perfringens A, B, C là gây bnh ng rut quan
trng i vi heo (ào Trng t và ctv., 1996).
Clostridium perfringens thng gây tn thng rut, vi khun thng xâm
nhp vào biu bì ca lông nhung, tng sinh khp màng nhày ca rut và hoi
ó, ng thi gây xut huyt, vùng hoi t lan dn và gây tn thng sâu
n niêm mc và lp di niêm mc. Vi khun còn gây tác hi sut chiu dài
a không tràng nên tiêu chy thng có máu và niêm mc hoi t trong phân.
l cht và còi cc cao heo s sinh, heo 3 - 4 tun tui thì khó hi phc,
c tng trng chm.
v Truyn nhim do virus
nh tiêu chy do virus xy ra trên heo mi la tui, thng thì bnh lây lan
nhanh nhng ch yu xy ra trên heo con theo m. Mt s loi virus nh:
Coronavirus, Rotavirus… có kh nng gây tiêu chy cho heo con, c bit là
Coronavirus, vi t l heo cht có th lên ti 100% (Claudia Gagnes-Fortin,
2011).
Viêm d dày và rut truyn nhim (TGE: Transmissible Gastroenteritis).
Do virus thuc nhóm Coronavirus gây ra, thng xy ra heo 3 - 21 ngày
tui, tui càng nh thì t l cht càng cao. Nhng heo b nhim TGE, phân có
màu vàng, cha thc n không tiêu, heo gy, mt nc nng, suy nhc do
t cht n gii. Thng heo cht t 3 - 5 ngày sau khi mc bnh, không có
biu hin st hoc triu chng thn kinh. D dày cng lên, cha sa ông c,
rut non cng lên cha dch màu vàng.
Heo con nhim TGE trng hp mt dch, mt cht n gii gây tiêu chy,
do làm phá v s cân bng các cht này trong c th, dn n heo b suy
nhc và cht. Khi mm bnh xut hin trong c th, nó xâm nhp vào các t
bào, chúng nhân lên và phá hy nhanh các t bào nhung mao rut làm ngn
chn s hp thu và tiêu hóa dng cht vt ch.
7
nh do Rotavirus
Thuc nhóm Rotavirus, h Reoviridae. Bnh càng tr nên nghiêm trng khi
t hp vi TGE hoc E. coli.
Rotavirus phát trin trong bào tng ca t bào biu mô lông nhung ca rut
non và mt s phát trin t bào biu mô manh tràng và kt tràng. Bnh gây
hin tng teo lông nhung ca heo con thng nng và trên din rng. Lông
nhung teo có biu hin co ngn li và b che ph bi các t bào biu mô ln t
nang tuyn, do ó các men disaccharidase nh lactase b gim thp và tr ngi
n chuyn glucose gn kt sodium. Lactase trong sa không tiêu hóa c s
o u kin kích thích vi khun phát trin và nh hng ti hiu ng thm
thu và hp thu kém dn ti tiêu chy.
c m bnh: tiêu chy phân vàng vi nhiu bt và cht nhy, bnh rt nng
trên heo con theo m và nh hn trên heo con sau cai sa. Bnh lây truyn ch
u qua ng tiêu hoá.
v Bnh do ký sinh trùng
Ký sinh trùng ký sinh trong c th heo là mt trong nhng yu t gây tn tht
cho chn nuôi heo. Các loi ký sinh trùng có kh nng gây bnh tiêu chy
thng gp nh: Isospora suis (cu trùng), Cryptosporidium, Strongyloides
ransomi (giun ln), Oesophagostomum dentatum (giun kt ht), Trichuris
suis (giun tóc)…(ào Trng t và ctv., 1999). heo con trc khi cai sa,
ký sinh trùng do truyn qua nhau thai, qua sa non làm cho heo con mi sinh
ra ã mc bnh. Nhìn chung, các loi ký sinh trùng ký sinh trong c th cp
t dng cht ng thi tit c t làm ri lon tiêu hóa, dn n tiêu chy
cho heo con, làm heo con gim kh nng tng trng, còi cc, chm ln.
c m ch yu tiêu chy do ký sinh trùng là con vt mc bnh tiêu chy
nhng không liên tc, có s xen k gia tiêu chy và bình thng, c th thiu
máu, da nht nht, gia súc kém n, th trng sa sút (The Merck Veterinary
Manual, 2000).
Isospora suis (cu trùng): các giai n phát trin khác nhau s phá hoi các t
bào ca lp biu mô lông nhung và nhng t bào hoi t lan vào xoang rut.
Do làm mt nc và to nên quá trình viêm nhim, gây ri lon tiêu hoá dn
n tiêu chy.
Cryptosporidium: là loài nguyên sinh ng vt ký sinh, nu gia súc non n
phi s phát trin trên b mt rut. Nu nhim nng, ký sinh trùng làm nhung
mao rut b ngn li và dính vào nhau. Bnh tiêu chy do Cryptosporidium
8
dai dng trong vài ngày và mc nghiêm trng tu thuc vào mc nhim
nh.
Strongyloides ransomi (giun ln): Strongyloides ransomi ký sinh nhung
mao rut gây bnh tích niêm mc rut, ri lon tiêu hoá và dinh dng do
không tiêu hoá và hp thu thc n. Heo b nhim nng gây hp thu acid amin
kém do tn thng chc nng ca rut non.
2.2.2 Nguyên nhân không do truyn nhim
Do heo m
Do khu phn n cho heo m thiu các cht dinh dng nh m, khoáng,
vitamin… nên sau khi sinh sa heo m b thiu cht, heo con b suy dinh
ng, màng nhày ca rut không c bo v rt d cm nhim vi vi trùng
Colibacille, Salmonell spp., … gây nên tiêu chy (Nguyn Xuân Bình, 2000).
Do thay i khu phn n ca heo mt ngt hoc do sa heo m quá nhiu,
heo con bú không s dng ht cht m, trôi xung rut già mà ó có nhiu
vi khun E. coli s dng m, sinh sn và tit ra c t gây ri lon tiêu hóa
n n tiêu chy (Trn Cm Vân, 2001).
Ngoài vn v dinh dng, mt s bnh heo nái nh: viêm vú, viêm t
cung, st cao… Làm thay i cht lng sa gây tiêu chy cho heo con (ào
Trng t và ctv., 1996).
Do heo con
c m sinh lý ca heo con cng là mt trong nhng nguyên nhân làm cho
heo con b tiêu chy.
Không cung cp y sa u cho heo con trong giai n s sinh. Ngun
a u i vi heo con rt quan trng vì ó là ngun thc n, ngun cung cp
c trong thi gian u sau khi c sinh ra, cung cp cho heo con ngun
kháng th thng, chng li s xâm nhim ca các mm bnh gây tiêu chy
cho heo con. Heo con bình thng bt u sn xut kháng th khi c
khong 10 ngày tui, trc thi gian này heo con hoàn toàn c bo h bi
kháng th do heo m cung cp.
t s ngun dng cht nh khoáng và vitamin khi b thiu cng nh hng
n tiêu chy heo con. Trong trng hp thiu Cl trong khu phn s làm
gim s phân tit acid clohydric trong d dày, u này có th to u kin d
dàng cho vi khun ng rut phát trin, ng thi làm gim kh nng tiêu
hóa protide a n tình trng ri lon tiêu hóa và gây nên tiêu chy heo con
(Trn C, 1972).
9
t hin din vi hàm lng rt ít trong c th heo con nhng li óng mt vai
trò sinh lý rt quan trng trong vic thành lp hemoglobin. Khi c sinh ra,
heo con cha khong 50 mg st ch yu gan. Nhu cu v st i vi heo con
i ngày cn khong 7 – 15 mg, trong khi qua sa m mi ngày ch cung cp
khong 1 mg, do dó heo con b thiu st dn n gim tng trng, d b chng
n huyt làm gim sc kháng và d b nhim bnh tiêu chy.
Nhu cu nc heo con rt cao, trong c th heo con nc chim 80%. ây là
thành phn rt quan trng ca dch tiêu hóa, dch t chc, máu… Ngoài ra,
c còn là dung môi ca các phn ng hóa hc bên trong c th vì c th ca
heo con cng òi hi nhiu nc tiêu hóa sa. Trong nhng ngày u sau
khi sinh, heo con b mt nhiu nc qua da và trong quá trình hô hp. Nh
y, vic cung cp nc y cho heo con là u cn thit giúp c th heo
con tiêu hóa tt thc n, ng thi hn ch vic s dng nc bn trong
chung có kh nng gây ri lon tiêu hóa dn n bnh tiêu chy cho heo con
(Trn C, 1972).
Do u kin ngoi cnh
bt li v môi trng thông thng i vi heo con là nóng, lnh, nhit
thay i, v sinh kém, chung tri không thích hp và u kin nh máng n,
n chung, sân chi, ngun nc… Không phù hp nh hng n bnh tiêu
chy ca heo con.
Stress do tách m hay do chuyn chung có th gây c ch si phó giao cm,
làm gim nhu ng rut, gim tit dch tiêu hóa, to u kin cho vi khun có
i ng rut phát trin (Nguyn Nh Thanh, 1997).
Trong nhng yu t v tiu khí hu, thì quan trng nht là nhit và m .
m thích hp cho heo con vào khong 75 - 85%. Do ó, trong nhng tháng
a nhiu, t l tiêu chy heo con có khi lên ti 90 - 100%. Vì vy, vic gi
khô chung là vô cùng quan trng (ào Trng t và ctv., 1996).
Bên cnh ó, vic cho n vi khu phn không thích hp, trng thái thc n
không tt, thc n nhim các tp cht, thay i t ngt v thc n… cng s
làm gim sc kháng ca heo con, các vi khun thng trc trong rut s
ng tit c t và gây tiêu chy.
2.3 Vi khun Escherichia coli
Vi khun E. colic Theodore Escherich phân lp t phân tr em vào nm
1885 và công b vi tên gi u tiên là Bacterium colicommune. Ch 4 nm
sau vi khun này c gii chuyên môn i tên thành Escherich nhm tri ân
10
ngi có công khám phá. Tuy nhiên, ã có thêm vài kiu gi (Bacillus coli
m 1895, Bacterium coli nm 1896) trc khi c nh danh thng nht
toàn cu vào nm 1991 là Escherichia coli. Vi khun E. coli thuc b
Eubacteriales, h Enterobacteriaceae, tc Escherichae, ging Escherichia
(Nguyn Nh Thanh, 1997).
Trong h vi sinh vt ng rut, Escherichia coli là loài ph bin nht, chim
khong 80% vi khun hiu khí sng rut. Loài này xut hin và sinh sng
trong ng vt ch vài gi sau khi sinh và tn ti cho n khi con vt cht. E.
coli sinh sng bình thng trong ng rut ca ngi và ng vt, khi các
u kin nuôi dng, khu phn thc n, v sinh thú y kém, sc chng
nh tt ca con vt yu thì E. coli tr nên cng c và có kh nng gây bnh
ào Trng t và ctv., 1999).
Trong rut, chúng sng i kháng vi mt s vi khun khác nh Salmonella
và Shigella nh có kh nng to ra mt loi cht c ch có tên là Colixin.
Chúng còn có kh nng tng hp mt s vitamin thuc nhóm B, E và K. Vì
th, khi không gây bnh thì chúng có li cho ng rut nh hn chc
t s vi khun khác, gi th cân bng sinh thái trong rut và sinh tng hp
t s vitamin (ào Trng t và ctv., 1999).
Hin nay, có 6 nhóm E. coli gây bnh c bit n ó là: Enteropathogenic
E. coli (EPEC), Enterotoxigenic E. coli (ETEC), Enteroinvasive E. coli
(EIEC), Enterohaemorrhagic E. coli (EHEC), Enteroaggregative E. coli
(EAEC) và Diffusely adhering E. coli (DAEC) (Nataro and Kaper, 1998).
2.3.1 Vi khun Enterotoxigenic E. coli (ETEC) gây tiêu chy trên heo
Enterotoxigenic E. coli (ETEC) là nhóm vi khun khu trú thng xuyên trong
rut ngi và ng vt. ETEC có kh nng xâm nhp và bám dính vào biu
mô rut non gây bnh, cng vi kh nng sn sinh c t kém chu nhit
(LT) hay c t chu nhit (ST) (Shinagawa et al.,1993).
nh tiêu chy cp tính do ETEC gây ra qua hai bc chính yu. u tiên,
ETEC phi tng s lng trong rut non, ETEC xâm nhp vào rut non
nh các yu t bám dính b mt vi khun nh F4 (K88), F5 (K99), F6
(987P), F41, F18, kó chúng tit c t rut gây tích t nc và cht n
gii rut non (Nagy et al.,1978).
ETEC có kh nng sinh mt hoc nhiu loi c tng rut, bao gm c
chu nhit heat stable enterotoxin (ST) và c t kém chu nhit heat labile
enterotoxin (LT) (Fairbrother and Gyles, 2006). Nhng dòng ETEC tit ra mt
11
hay hai loi c t tùy plasmid ca chúng. Tiêu chy kéo dài và trm trng khi
t b nhim vi khun có th tit c hai loi c t này.
ETEC c nhiu tác gi trên th gii thng nht là mt trong nhng nguyên
nhân thng gp và quan trng nht gây bnh tiêu chy heo con thi k bú
(1-3 tun tui). Nên vic dùng kháng sinh t lâu ã c coi là bin pháp
u hiu phòng và tr bnh (Cù Hu Phú và ctv., 2003). Trong các chng E.
coli tìm thy trên heo, ETEC c xem là chng gây bnh quan trng nht vì
ETEC gây tiêu chy nng th phân lng nh nc làm cht heo s sinh (Lý
Th Liên Khai và ctv., 2003).
Phn ln các chng ETEC phân lp c t heo b colibacilosis u mang mt
hoc nhiu loi kháng nguyên bám dính nh: F4, F5, F6, F18 và F41. Trong
ó, F4, F5, F6 và F41 thng gp heo con mi sinh (1-7 ngày tui). F4 và
F18 thng gp heo con sau cai sa (V Khc Hùng và Pilipcinec, 2003).
2.3.2 c m hình thái
Escherichia coli là mt loi trc khun hình gy ngn, kích thc 2 – 3 x 0,6
m. Trong c th trc khun có hình cu, chúng ng riêng l ôi khi xp
thành chui ngn (Nguyn Nh Thanh, 1997).
Phn ln E. coli di ng do có lông xung quanh thân, nhng cng có mt s
chng không có kh nng di ng. Vi khun không sinh nha bào, có kh nng
hình thành giáp mô khi gp môi trng dinh dng tt (Nguyn Nh Thanh,
1997).
Vi khun bt màu Gram âm, có th bt màu u hoc sm hai u. Nu ly
vi khun t khun lc nhum có th quan sát thy giáp mô. Di kính hin
vi n t ngi ta còn phát hin c cu trúc pilli - yu t mang kháng
nguyên bám dính ca vi khun E. coli.
12
2.3.3 c tính nuôi cy và c tính sinh hóa ca E. coli
c tính nuôi cy
E. coli phát trin d dàng trên các môi trng nuôi cy thông thng, mt s
chng có th phát trin c môi trng tng hp n gin nên chúng c
chn làm mu nghiên cu v sinh vt hc.
E. coli là trc khun hiu khí và ym khí tùy tin, có th sinh trng nhit
t 5
0
C – 40
0
C, nhit ti ho là 37
0
C, pH thích hp là 7,2 - 7,4, phát
trin c pH t 5,5 - 8 (Nguyn Nh Thanh, 1997).
Trong nhng u kin thích hp E. coli phát trin rt nhanh, thi gian th h
ch khong 20 - 30 phút. Cy vào môi trng lng sau 3 - 4 giã làm c
nh môi trng, sau 24 gi làm c u, sau hai ngày trên mt môi trng có
váng mng, nhng ngày sau di áy có th thy cn.
Trên môi trng NA và môi trng TSA sau 18 - 24 gi trong tm 37
0
C
hình thành nhng khun lc tròn, màu trng nht, mt khun lc hi li, ng
kính 2 - 3 mm. Nuôi lâu khun lc gn nâu nht và mc rng ra (Nguyn Vnh
Phc, 1977).
Trên môi trng EMB, khun lc tròn, bóng, màu tím en, có ánh kim.
Trên môi trng MC vi khun E. coli hình thành khun lc to, tròn u, màu
ng m, mt khun lc hi li, kích thc 2 - 3 mm (Nguyn Vnh Phc,
1977).
/>Hình 2.1 Vi khun E. coli di kính hin vi
13
c tính sinh hóa
Vi khun c nh danh bng phn ng sinh hóa qua các môi trng nh:
môi trng KIA, môi trng Indole, môi trng MR, môi trng VP và môi
trng Simmons’ Citrate.
Vi khun E. coli lên men sinh hi Glucose, Galactose, Lactose, Mantose,
Arabise, Xylose, Samnose, Malnitol, Fructose. Có th lên men hoc không lên
men các ng Saccharose, Rafinose, Xalixin, Esculin, Dunxit, Glycerol.
Vi khun E. coli không lên men các ng Dextrin, Amidol, Glycogen, Inosit,
Xenlobiose, Methylglycosit.
Vi khun E. coli không sinh H
2
S, thng sinh Indole khi th vi thuc th
Kowacs, kt qu dng tính s thy xut hin vòng màu trên b mt.
Phn ng Methyl Red dng tính.
Phn ng Voges Prauskauer âm tính, hoàn nguyên nitrate thành nitrite và
không s dng urea (Nguyn Vnh Phc, 1970).
2.3.4 Cu trúc kháng nguyên ca vi khun E. coli
u trúc kháng nguyên ca E. coli gm: kháng nguyên thân O (somatic),
kháng nguyên lông H (flagellar), kháng nguyên v K (capsular) và kháng
nguyên bám dính F (fimbriae) (Lê Vn To, 2006).
Vi khun E. coli c chia thành các serotype khác nhau da vào cu trúc
kháng nguyên thân O, kháng nguyên v K, kháng nguyên lông H và kháng
/>Hình 2.2 Khun lc vi khun E. coli trên môi trng MC