Tóm tắt luận án Nghiên cứu hình thái và đánh giá liên tục phôi 3 và 5 ngày tuổi của bệnh nhân thụ tinh trong ống nghiệm

1
ĐẶT VẤN ĐỀ
Sự thành công của một chu kỳ thụ tinh ống nghiệm phụ
thuộc rất nhiều yếu tố, trong đó vấn đề lựa chọn phôi chuyển vẫn
luôn là một thách thức với các nhà phôi thai học. Đã có những nghiên
cứu áp dụng sàng lọc di truyền trước chuyển phôi hay đánh giá các
sản phẩm chuyển hóa của phôi để lựa chọn phôi chuyển. Nhưng cho
đến nay, lựa chọn phôi chuyển dựa vào các đặc điểm hình thái phôi
vẫn được xem như là phương pháp dễ áp dụng, nhất là tại các trung
tâm thụ tinh ống nghiệm ở Việt nam.
Trên thế giới cũng đã có những công trình nghiên cứu xây
dựng quy trình tiêu chuẩn chặt chẽ mục đích lựa chọn từ 1 đến 2 phôi
có tiềm năng nhất sử dụng cho chuyển phôi. Tại Việt nam cũng đã có
những nghiên cứu công bố về các đặc điểm hình thái phôi người nuôi
cấy trong ống nghiệm ngày 1, 2 và 3, nhưng chưa có công trình
nghiên cứu hình thái phôi ngày 5 (giai đoạn phôi túi) một cách đầy
đủ và hệ thống. Hơn nữa, chưa có nghiên cứu nào xác định mối liên
quan về mặt hình thái giữa phôi nuôi cấy ngày 3 và phôi ngày 5, để
làm cơ sở xây dựng hệ thống đánh giá lựa chọn phôi có tính liên tục
cho phép lựa chọn được những phôi tiềm năng nhất nhằm nâng cao tỉ
lệ thành công và giảm nguy cơ đa thai.
Vì vậy chúng tôi thực hiện đề tài: “Nghiên cứu hình thái và
đánh giá liên tục phôi 3 và 5 ngày tuổi của bệnh nhân thụ tinh
trong ống nghiệm”.
Với mục tiêu:
1. Xác định đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 3 và phôi nuôi
cấy ngày 5 trong ống nghiệm.


2

2. Đánh giá mối liên quan về đặc điểm hình thái của phôi nuôi
cấy ngày 3 với ngày 5 và bước đầu đánh giá kết quả áp dụng
phân loại phôi liên tục trong nuôi cấy phôi ngày 3 và ngày 5.
Những đóng góp mới của luận án
Nghiên cứu thực hiện trên 181 chu kỳ thụ tinh ống nghiệm với
1323 phôi ngày 3 và 184 phôi ngày 5, đã công bố các thông tin đo
đạc và các đặc điểm hình thái đặc trưng của phôi ngày 3 và ngày 5.
Đề tài đã xây dựng được phương trình tương quan giữa đường kính,
chiều dày màng trong suốt của phôi ngày 3 với các đặc điểm hình
thái phôi. Đề tài cũng cho thấy có mối tương quan giữa hình thái phôi
ngày 3 và hình thái phôi ngày 5. Đây là tài liệu tham khảo hữu ích
trong lĩnh vực phôi thai học, hỗ trợ sinh sản và đặc biệt là lĩnh vực
nuôi cấy phôi trong ống nghiệm trên người.
Đề tài này là cơ sở để khuyến cáo áp dụng phương pháp phân
loại phôi liên tục trong nuôi cấy phôi và lựa chọn phôi chuyển.
Phương pháp này cho phép lựa chọn những phôi có tiềm năng nhất,
góp phần làm tăng hiệu quả của kỹ thuật thụ tinh trong ống nghiệm
trên người.
Nghiên cứu này có tính cấp thiết, có ý nghĩa khoa học, có tính
thực tiễn cao.
Bố cục của luận án
Luận án gồm 140 trang: Đặt vấn đề 2 trang, tổng quan 34
trang, đối tượng và phương pháp nghiên cứu 22 trang, kết quả nghiên
cứu 41 trang, bàn luận 37 trang, kết luận 2 trang, kiến nghị 1 trang,
hướng nghiên cứu tiếp theo 1 trang, danh mục bài báo 1 trang, 110 tài
liệu tham khảo (10 tài liệu tiếng Việt, 100 tài liệu tiếng Anh).
Chương 1: TỔNG QUAN
1.1. Hình thái phôi giai đoạn phôi phân cắt và phôi túi

3
1.1.1. Mối liên quan giữa các yếu tố hình thái phôi ngày 3 và kết
quả thụ tinh trong ống nghiệm
Nhìn chung việc phân loại chất lượng phôi ngày 3 dựa hoàn
toàn trên các đặc điểm:
(1) Số lượng phôi bào của phôi nuôi cấy
(2) Tỉ lệ mảnh vỡ bào tương so với thể tích phôi
(3) Sự đồng đều về mặt kích thước và cân đối của các phôi bào
(4) Tình trạng phôi bào đa nhân
Số lượng phôi bào là một tiêu chí dự báo vô cùng cần thiết cho
phép đánh giá kết quả phôi làm tổ và tỉ lệ có thai của một chu kỳ thụ
tinh trong ống nghiệm.
Mức độ mảnh vỡ bào tương được xác định theo 3 loại:
- Mức độ nhẹ:
tỉ lệ MVBT <10% thể tích phôi
- Mức độ vừa:
tỉ lệ MVBT 10-25% thể tích phôi
- Mức độ nặng:
tỉ lệ MVBT >25% thể tích phôi
Năm 2012, Prados F. J. đã đưa ra tiêu chí đánh giá về sự đồng
đều của các phôi bào. Theo đó nếu các phôi bào có mức độ chênh
lệch nhau về mặt đường kính không vượt quá 20% đường kính của
phôi bào lớn hơn được coi là đồng đều về kích thước.
1.1.2. Hình thái phôi nuôi cấy ngày 5
Phân loại phôi túi dựa trên 3 tiêu chí quan trọng, đó là:
- Sự phát triển của xoang túi phôi
- Lá nuôi tế bào (TE- Trophectoderm)
- Nụ phôi (ICM - Inner Cell Mass)
Tốc độ phát triển xoang túi phôi có liên quan đến kết quả thành
công của một chu kỳ chuyển phôi túi. Hình thái nụ phôi có vai trò

quan trọng trong việc đánh giá tiên lượng kết quả tỉ lệ thai sinh sống
và tiên lượng sảy thai sớm.


4
Lá nuôi (Trophectoderm – TE) là những tế bào có kích thước
nhỏ hơn so với tế bào nụ phôi và nằm bọc phía ngoài ngay sát với
màng trong suốt. Có vai trò hỗ trợ phôi thoát màng và giúp cho phôi
làm tổ vào niêm mạc tử cung của mẹ.
Cả nụ phôi và lá nuôi đều chia thành 3 loại dựa vào số lượng tế
bào và sự gắn kết giữa các tế bào.
Năm 2011, Ahlstrom A. cho rằng lá nuôi có vai trò quan trọng
hơn so với hình thái nụ phôi trong việc dự đoán tỉ lệ làm tổ của phôi
và tiên lượng tỉ lệ thai sinh sống.
1.2. Những nghiên cứu đánh giá phân loại phôi liên tục
Lựa chọn phôi liên tục là tập hợp dữ liệu mang tính hệ thống về
các thông số phát triển của phôi nuôi cấy từ khi thụ tinh đến khi
chuyển phôi, sử dụng các đặc điểm hình thái đặc trưng nhất của phôi.
Việc áp dụng đánh giá phân loại phôi liên tục cho phép lựa chọn
những phôi tiềm năng nhất cho chuyển phôi để đạt hiệu quả cao.
Một số nghiên cứu chỉ ra sự hạn chế khi chỉ sử dụng đơn độc
tiêu chuẩn hình thái của hợp tử hay của phôi ngày 3 để quyết định
phôi chuyển. Từ những kết quả nghiên cứu này, một câu hỏi đặt ra là
phải chăng nên sử dụng kết hợp các dữ liệu mang tính liên tục, xâu
chuỗi các đặc điểm hình thái của từng phôi riêng biệt được nuôi cấy
từ ngày thứ 1đến ngày chuyển phôi để lựa chọn chính xác nhất phôi
tối ưu. Chính vì thế trong khoảng 5 năm gần đây đã có nhiều nghiên
cứu ủng hộ cho việc sử dụng hệ thống tủ cấy time-lapse như một
phương pháp tiên tiến trong việc nuôi cấy, theo dõi và lựa chọn phôi
chuyển. Nhìn chung hệ thống này cho phép thu thập thông tin đầy đủ

nhất về cả quá trình phát triển của phôi trong ống nghiệm để có cái
nhìn tổng quan khi lựa chọn phôi chuyển. Tuy nhiên, vấn đề có nên
áp dụng tủ cấy time-lapse trong nuôi cấy phôi hay không vẫn còn
nhiều tranh cãi. Một vấn đề nữa là về tài chính, khi so sánh giữa giá


5
tủ cấy time-lapse và tủ cấy thường. Đây sẽ là vấn đề cần cân nhắc
nhất là với những trung tâm thụ tinh trong ống nghiệm tại các nước
đang phát triển trong đó có Việt nam.
Tại Việt nam hiện nay chưa có nghiên cứu nào đánh giá ưu
điểm hay cách kết hợp áp dụng đánh giá phân loại phôi liên tục để
lựa chọn phôi chuyển ngày 3 hay giai đoạn phôi túi.
Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Đối tượng nghiên cứu
2.1.1. Đối tượng
Gồm 1323 phôi ngày 3 và 184 phôi túi của 181 bệnh nhân tại
Trung tâm đào tạo nghiên cứu công nghệ phôi, Học viện Quân y
trong thời gian từ năm 2012 đến năm 2014.
Các bệnh nhân được chia thành 3 nhóm khác nhau về thời điểm
chuyển phôi và cách lựa chọn phôi chuyển, cụ thể:
- Nhóm 1: Gồm 441 phôi của 61 bệnh nhân chuyển phôi ngày 3,
không phân loại phôi liên tục (PLPLT).
- Nhóm 2: Gồm 452 phôi của 61 bệnh nhân chuyển phôi ngày 3
có PLPLT.
- Nhóm 3: Gồm 184 phôi túi nuôi cấy kéo dài từ 430 phôi ngày
3 của 59 bệnh nhân chuyển phôi ngày 5 có PLPLT.
Tiêu chuẩn lựa chọn bệnh nhân nghiên cứu
- Chọn các bệnh nhân ≤ 35 tuổi
- Các bệnh nhân có niêm mạc tử cung ngày chuyển phôi từ 8mm

đến 14mm trên siêu âm.
- Có ít nhất 8 noãn thu được ở ngày chọc hút noãn.
- Có ít nhất có 2 phôi có 7-8 phôi bào khi nuôi cấy đến ngày 3.
Tiêu chuẩn loại trừ các bệnh nhân nghiên cứu
- Các bệnh nhân không đủ các điều kiện đã nêu trên.
- Có bệnh lý dị dạng tử cung âm đạo.
- Các trường hợp xin noãn hay xin phôi.


6
2.1.2. Địa điểm nghiên cứu
Trung tâm Công nghệ Phôi – Học viện Quân y.
2.1.3. Thời gian nghiên cứu
Từ tháng 12 năm 2011 đến tháng 6 năm 2014.
2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.1. Thiết kế nghiên cứu
Sử dụng phương pháp nghiên cứu mô tả tiến cứu có so sánh.
2.2.2 Cỡ mẫu và chọn mẫu
* Sử dụng công thức tính cỡ mẫu so sánh 2 tỉ lệ
Trong đó:
n: cỡ mẫu tối thiểu cần thiết cho mỗi nhóm
Zα/2: Là hệ số tin cậy, với độ tin cậy là 95% thì Zα/2 = 1,96
Zβ: Là giá trị ứng với lực mẫu, đối với lực mẫu là 80% thì Z β =
0,84
p1: Tỷ lệ có thai khi chuyển phôi nuôi cấy ngày 3
p2: Tỷ lệ có thai khi chuyển phôi nuôi cấy ngày 5
p = (p1+ p2)/2
∆ = p1- p2
Tỉ lệ có thai chuyển phôi ngày 3 và ngày 5 lần lượt là 43,5% và
69,2% (Frattarelli 2003): p1 = 0,435 và p2 = 0,692

Thay số vào công thức trên ta có n = 57,6. Như vậy số lượng
bệnh nhân tối thiểu cho mỗi nhóm nghiên cứu là 58.
* Để đánh giá tỉ lệ hình thành phôi túi
Sử dụng công thức tính cỡ mẫu ước tính một tỉ lệ.

n=

( Z1−α 2 ) 2 . p (1 − p )
d2

Trong đó:
n : cỡ mẫu nghiên cứu tối thiểu phải có
Z1- α/2 : hệ số tin cậy, ứng với độ tin cậy 95% thì Z1- α/2 = 1,96
p: Tỉ lệ hình thành phôi túi từ nhóm phôi nuôi cấy ngày 5.


7
Cỡ mẫu sẽ lớn nhất khi tỉ lệ này là 50% (p = 0,5).
d: là sai số tuyệt đối 5%
Như vậy, số lượng phôi nuôi cấy ngày 3 tối thiểu phải có là 385 phôi.
2.2.3. Phương pháp, kỹ thuật
Chọc hút noãn: Noãn sẽ được lấy bằng chọc hút dưới hướng dẫn
siêu âm qua đường âm đạo sau khi tiêm thuốc trưởng thành nang
noãn trong khoảng thời gian từ 34 đến 35 giờ.
Kỹ thuật IVF và ICSI
- Đối với kỹ thuật thụ tinh trong ống nghiệm, noãn sau khi chọn sẽ
được cấy vào hộp cấy 4 giếng có tinh trùng đã được chuẩn bị sẵn.
- Đối với kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn, noãn được
làm sạch khối tế bào nang và được cố định bằng kim giữ. Tinh trùng
được hút bằng kim tiêm, và được tiêm vào bào tương của noãn.

Chuyển phôi: Sử dụng thống nhất tiêu chuẩn phân loại phôi theo
đồng thuận để đánh giá chất lượng phôi chuyển. Cụ thể:
 Nhóm 1: Chỉ sử dụng đánh giá phân loại phôi tại thời điểm
chuyển phôi ngày 3, không phân loại phôi liên tục (PLPLT).
 Nhóm 2: Sử dụng PLPLT để lựa chọn phôi chuyển ngày 3.
 Nhóm 3: Sử dụng PLPLT để lựa chọn phôi chuyển ngày 5.
Thời điểm đánh giá chất lượng phôi nuôi cấy: Chất lượng hợp tử
được đánh giá thời điểm 17 ± 1 giờ; chất lượng phôi ngày 3 đánh giá
thời điểm 68 ± 2 giờ và phôi túi đánh giá ở thời điểm 116 ± 2 giờ tính
từ khi tinh trùng tiếp xúc với noãn.
2.2.4. Đánh giá hình thái cấu trúc phôi
Toàn bộ hình thái phôi được phân loại theo tiêu chuẩn đồng
thuận đánh giá chất lượng noãn và phôi của ALPHA năm 2011.
2.2.5. Thu thập số liệu
Toàn bộ 1323 phôi ngày 3 và 184 phôi túi của 3 nhóm nghiên
cứu được chụp ảnh và đo đạc bằng phần mềm chuyên dụng đo đạc RI
của hãng Research Instruments (Anh quốc).


8
* Các chỉ tiêu nghiên cứu
- Các chỉ tiêu về đặc điểm mẫu nghiên cứu: tuổi, số năm vô sinh,
phân loại vô sinh, phân loại nguyên nhân vô sinh, nồng độ FSH, LH,
E2 đầu chu kỳ kinh, phác đồ kích thích buồng trứng, tổng liều FSH sử
dụng, số nang, số noãn thu được, kỹ thuật thụ tinh ống nghiệm.
- Các chỉ tiêu về hình thái phôi nuôi cấy: hình thái phôi giai đoạn hợp
tử, hình thái phôi ngày 3 (đường kính phôi, chiều dày màng trong
suốt, số lượng phôi bào, tỉ lệ MVBT...), hình thái phôi ngày 5 (đường
kính phôi túi, chiều dày màng trong suốt, phân loại túi phôi, hình thái
nụ phôi, lá nuôi).

- Các chỉ tiêu về kết quả chuyển phôi: số lượng phôi chuyển, định
lượng βhCG sau chuyển phôi 14 ngày, số túi ối, số thai, số tim thai,
số lượng thai sinh sống.
2.2.6. Phân tích và xử lý số liệu
Các số liệu được xử lý bằng chương trình SPSS 13.0 for Window.
2.2.7. Vấn đề đạo đức trong nghiên cứu
- Các thủ tục hành chính trong nghiên cứu đã tuân thủ đúng
theo qui định và luật pháp Việt Nam được ban hành trong lĩnh vực
Hỗ trợ sinh sản.
- Đối tượng nghiên cứu đồng ý và tự nguyện tham gia, tự
nguyện có đơn xin hỗ trợ sinh sản và cam kết thực hiện kỹ thuật
thụ tinh ống nghiệm.
- Đo các kích thước theo chỉ tiêu nghiên cứu chỉ thực hiện
trên ảnh, thời gian chụp ảnh khống chế dưới 2 phút nhằm đảm bảo
không ảnh hưởng đến chất lượng phôi.
Chương 3: KẾT QUẢ
3.1. Đặc điểm đối tượng nghiên cứu
* Tuổi và số năm vô sinh trung bình


9
Bảng 3.1. Tuổi và thời gian vô sinh trung bình của các nhóm
bệnh nhân nghiên cứu
Nhóm 1

Nhóm 2

Nhóm 3

p

Tuổi

29,9 ± 2,9

30,9 ± 2,4

30,2 ± 2,5

>0,05

Số năm VS

5,4 ± 2,3

5,9 ± 3,05

5,8 ± 2,8

>0,05

p được tính theo so sánh phương sai ANOVA một yếu tố
Không có khác biệt về tuổi, số năm vô sinh trung bình giữa các
nhóm nghiên cứu (p>0,05).
* Đặc điểm kích thích buồng trứng
Bảng 3.5. Đặc điểm kích thích buồng trứng
Nhóm nghiên cứu
p
Thông số
Nhóm 1

Nhóm 2
Nhóm 3
Tổng liều
1392,2 ± 280,5 1444,7 ± 253,7 1425,0 ± 295,8 >0,05
FSH(IU)
E2N8
1451,3 ± 862,2 1407,2 ±1103,4 1571,7 ± 980,9 >0,05
(ng/mL)
Số nang
14,39 ± 7,41
14,33 ± 6,13
15,07 ± 5,22
>0,05
trứng
Số noãn
10,28 ± 2,80
10,39 ± 2,49
10,42 ± 2,47
>0,05
chọc hút
p được tính theo so sánh phương sai ANOVA một yếu tố
Không có sự khác biệt khi so sánh giá trị trung bình về nồng độ
E2 ngày 8, tổng liều FSH sử dụng, số nang và số noãn trung bình ở
cả 3 nhóm bệnh nhân nghiên cứu (p>0,05).
3.2. Hình thái phôi nuôi cấy ngày 3
3.2.1. Các đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 3
* Phân loại chất lượng phôi ngày 3 giữa các nhóm nghiên cứu
Bảng 3.9. Phân loại chất lượng phôi nuôi cấy ngày 3
Nhóm nghiên cứu
Phân loại

Tổng
chất lượng
Nhóm 1
Nhóm 2
Nhóm 3
Tốt
125
130
119
374


10
(28,4 %)
(28,8 %)
(27,6 %)
(28,3 %)
188
200
186
574
Trung bình
(42,6 %)
(44,2 %)
(43,3 %)
(43,4 %)
128
122
125
375

Xấu
(29,0 %)
(27,0 %)
(29,1 %)
(28,3 %)
441
452
430
1323
Tổng
(100 %)
(100 %)
(100 %)
(100 %)
p1,2; p1,3; p2,3 so sánh giữa các nhóm 1, 2 và 3 được tính theo kiểm
định χ2
Không có sự khác biệt về chất lượng phôi ngày 3 giữa các nhóm
nghiên cứu (p>0,05).
3.2.2. Các thông số đo đạc của phôi nuôi cấy ngày 3
* Đường kính và chiều dày ZP của các nhóm nghiên cứu
Bảng 3.11. So sánh đường kính phôi và chiều dày ZP
giữa các nhóm nghiên cứu
Nhóm
n

Đường kính
(μm)

Nhóm 1

441

154,0 ± 2,5

Nhóm 2

452

154,4 ± 2,7

nghiên
cứu

p

Chiều dày ZP
(μm)

p

15,7 ± 1,4
>0,05

15,6 ± 1,3

>0,05

Nhóm 3
430
154,1 ± 2,6

15,7 ± 1,4
p được tính theo so sánh phương sai ANOVA một yếu tố
Không có sự khác biệt về giá trị trung bình của chiều dày màng
trong suốt và đường kính phôi nuôi cấy ngày 3 của 181 bệnh nhân
trên 3 nhóm nghiên cứu (p>0,05).
* Mối tương quan giữa số lượng phôi bào với đường kính, chiều
dày màng trong suốt (ZP)
Phương trình tương quan giữa đường kính phôi và số lượng phôi bào
(Pearson's r = 0,67):

2


11
Đường kính phôi (μm) = 145,65 + (Số lượng phôi bào) x 1,31
Phương trình tương quan giữa chiều dày ZP và số lượng phôi bào
(Pearson's r = - 0,4):
Chiều dày ZP (μm) = 18,38 - (Số lượng phôi bào) x 0,41
* Mối tương quan giữa tỉ lệ MVBT với đường kính, chiều dày ZP
Phương trình tương quan giữa đường kính phôi với tỉ lệ MVBT
(Pearson's r= -0,55):
Đường kính phôi (μm) = 155,96 - (% MVBT) x 0,11
Phương trình tương quan giữa chiều dày ZP với tỉ lệ MVBT (r=0,3):
Chiều dày màng trong suốt (μm) = 15,19 + (% MVBT) x 0,03
* Mối tương quan giữa chất lượng phôi ngày 3 với đường kính,
chiều dày ZP
Bảng 3.13. So sánh kích thước phôi ở những phôi có chất lượng
khác nhau theo tiêu chuẩn phân loại đồng thuận Alpha
Phân loại
Tốt

Trung bình
Xấu
r

n
374
574
375

Đường kính phôi(μm)
155,8 ± 1,6
154,5 ± 2,3
152,1 ± 2,5
0,54

Chiều dày ZP(μm)
15,1 ± 1,4
15,7 ± 1,2
16,1 ± 1,3
-0,29

p<0,01 được tính theo so sánh phương sai ANOVA một yếu tố
r hệ số tương quan Pearson đo lường mức độ tương quan
Sự khác biệt về đường kính và chiều dày ZP có ý nghĩa thống
kê (p< 0,01).
3.3. Đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 5
Tỉ lệ hình thành phôi túi là 42,8% (184/430).
* Mối liên quan về hình thái lá nuôi và hình thái nụ phôi

12
Chỉ xem xét mối liên quan hình thái nụ phôi và nụ phôi của 162
phôi túi (gồm: 159 phôi độ 3 và 3 phôi độ 4).
Bảng 3.14. Mối liên quan hình thái lá nuôi và nụ phôi
Hình thái nụ phôi
Hình thái
Tổng
lá nuôi
A
B
C
p<0,01
A
21
1
22
r=
B
39
41
10
90
0,55
C
40
10
50
Tổng
60
82

20
p được tính theo kiểm định Fisher's Exact
Có mối liên quan thuận giữa hình thái nụ phôi và hình thái lá
nuôi của 162 phôi túi nuôi cấy ngày 5.
* Đánh giá phân loại phôi túi theo tiêu chuẩn đồng thuận đánh giá
chất lượng noãn và phôi
Bảng 3.15. Phân loại chất lượng 184 phôi túi nuôi cấy ngày 5
Phân loại phôi túi

Tổng

Tốt

Trung bình

Xấu

Số lượng(n)

61

81

42

184

Tỉ lệ(%)

33,2

44,0

22,8

100

* Đường kính, chiều dày ZP trung bình của phôi túi
Chúng tôi chỉ tiến hành đo đường kính và chiều dày màng trong suốt
của 181 phôi trên tổng số 184 phôi túi.
Bảng 3.16. Đường kính và chiều dày màng trong suốt phôi túi
n = 181

Thông số đo đạc
Trung bình

Lớn nhất

Nhỏ nhất

Đường kính phôi μm)

176,9 ± 10,4

203,1

159,6

Chiều dày ZP (μm)

10,2 ± 2,2

16,0

4,3


13
* So sánh kích thước phôi túi theo phân loại chất lượng phôi túi
Bảng 3.17. So sánh kích thước phôi túi theo chất lượng phôi
Phân loại

n

Đường kính (μm)

Chiều dày ZP (μm)

Tốt

58

181,7 ± 8,5

9,4 ± 2,2

Trung bình

81

178,2 ± 10,3

10,1 ± 2,2

Xấu

42

168,1 ± 7,2

11,7 ± 1,3

0,47

- 0,38

r

p<0,01 được tính theo so sánh phương sai ANOVA một yếu tố
r hệ số tương quan Pearson để đo lường mức độ tương quan
Có mối tương quan thuận giữa đường kính phôi túi với chất
lượng phôi túi (p < 0,01). Có sự khác biệt về chiều dày ZP của phôi
túi chất lượng khác nhau (p< 0,01).
3.4. Mối tương quan đặc điểm hình thái phôi ngày 3 và ngày 5
3.4.1. Mối tương quan đặc điểm hình thái phôi ngày 3 đến khả
năng hình thành phôi túi
Bảng 3.18. Khả năng hình thành phôi túi của phôi nuôi cấy ngày
3 có số phôi bào khác nhau
Hình thành phôi túi
Số lượng phôi bào của

n
phôi ngày 3
Số lượng
Tỉ lệ
≤ 4 phôi bào
24
2
8,3 %
5-6 phôi bào
184
36
19,7 %
7-8 phôi bào
205
134
65,4 %
≥ 9 phôi bào
17
12
70,6 %
Tổng
430
184
42,8 %
p<0,01 được tính theo kiểm định Fisher's Extract
Hệ số tương quan Pearson r= 0,45


14
Có mối tương quan thuận giữa số lượng phôi bào của phôi ngày

3 và khả năng hình thành phôi túi (với p<0,01).
Bảng 3.20. Mối tương quan giữa phân loại chất lượng phôi nuôi
cấy ngày 3 và khả năng hình thành phôi túi.
Hình thành phôi túi
Phân loại phôi
n
p
ngày 3
Số lượng
Tỉ lệ
Tốt
119
82
68,9 %
Trung bình
186
76
40,9 %
<0,01
Xấu
125
26
20,8 %
r
430
0,49
2
p được tính theo kiểm định χ
r là hệ số tương quan Pearson dùng để đo lường mức độ tương quan
Có tương quan thuận giữa chất lượng phôi ngày 3 đến khả năng

hình thành phôi túi.
3.4.2. Tương quan về hình thái phôi ngày 3 và chất lượng phôi túi.
* Mối tương quan số lượng phôi bào đến chất lượng phôi ngày 5
Bảng 3.21. Mối tương quan giữa số lượng phôi bào đến tốc độ
phát triển, chất lượng lá nuôi và nụ phôi của phôi ngày 5
Số phôi bào của phôi ngày 3
Tổng
Hình thái
phôi túi
≤4
5-6
7-8
≥9
1
2
1
3
Độ giãn
2
1
11
7
19
rộng
xoang túi 3
1
23
126
9
159

phôi
4
3
3
p<0,01 và r = 0,41
184
A
1
48
11
60
Hình thái
B
1
12
68
1
82
nụ phôi
C
10
10
20
p<0,01 và r = 0,45
162
Hình thái A
14
8
22

15
12
74
4
90
1
11
38
50
p<0,01 và r = 0,37
162
Có tương quan giữa số lượng phôi bào của phôi ngày 3 đến mức
độ giãn rộng xoang túi phôi và hình thái nụ phôi.
* Mối tương quan giữa chất lượng phôi ngày 3 và phôi ngày 5
Bảng 3.24. Mối tương quan giữa chất lượng phôi nuôi cấy ngày 3
và chất lượng phôi túi phân theo 3 loại tốt, trung bình và xấu
Phân loại phôi nuôi cấy ngày 3
Cộng
Tốt
Tr/ bình
Xấu
42
18
1
Tốt
61
(51,2 %)
(23,7 %)
(3,8 %)

Phân
loại
Trung
35
36
10
81
phôi
bình
(42,7 %)
(47,4 %)
(38,5 %)
túi
5
22
15
Xấu
42
(6,1 %)
(28,9 %)
(57,7 %)
82
76
26
Cộng
184
(100 %)
(100 %)
(100 %)
p < 0,01 và r = 0,47

Có mối tương quan thuận giữa chất lượng phôi ngày 3 và chất
lượng phôi ngày 5.
3.5. Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục (PLPLT) trong
nuôi cấy phôi ngày 3 và ngày 5
3.5.1. Bước đầu phân loại phôi liên tục trong nuôi cấy phôi ngày 3
Bảng 3.25 Phân bố 452 phôi nuôi cấy ngày 3 có đánh giá phân
loại phôi ngày 1 và ngày 3
Phân loại phôi ngày 3
Phân loại
Tổng
ngày 1
Tốt
Trung bình
Xấu
Z1
78
52
24
154
Z2
41
71
31
143
Z3
11
67
49
127
Z4

10
18
28
Tổng
130
200
122
452
p<0,01 được tính theo kiểm định χ2
r =0,4 là hệ số tương quan Pearson
Có mối tương quan thuận giữa chất lượng phôi nuôi cấy ngày 3
và chất lượng hợp tử khi áp dụng đánh giá PLPLT.
lá nuôi

B
C


16
3.5.2. Bước đầu phân loại phôi liên tục trong nuôi cấy phôi túi
Bảng 3.26. Mối tương quan giữa đánh giá phân loại liên tục
ngày 1, ngày 3 đến chất lượng phôi túi.
Phân loại phôi N5
Phân loại
Phân loại
Tổng
phôi N1
phôi N3
Tốt
Trung bình Xấu

Tốt
30
22
2
54
Z1
Trung bình
9
15
8
32
Xấu
2
6
8
Tốt
11
11
2
24
Z2
Trung bình
6
13
5
24
Xấu
5
6
11

Tốt
1
2
3
Z3
Trung bình
3
8
6
17
Xấu
1
3
3
7
Tốt
1
1
Z4
Trung bình
3
3
Tổng
184
p<0,001 được tính bằng so sánh kiểm định Fisher's Exact
Hệ số tương quan Pearson r = 0,3
Có mối tương quan thuận giữa chất lượng phôi túi và chất lượng
phôi được PLPLT ngày 1 và ngày 3.
3.6. So sánh kết quả chuyển phôi ngày 3 và ngày 5 có phân loại
phôi liên tục

*So sánh tỉ lệ làm tổ của 3 nhóm nghiên cứu
Bảng 3.29. Tỉ lệ làm tổ của 3 nhóm nghiên cứu
Nhóm

Số lượng

Số lượng

Tỉ lệ làm

nghiên cứu

phôi chuyển

túi ối

tổ (%)

Nhóm 1

155

32

20,6 %

p1,2 = 0,07

Nhóm 2

134

41

30,6 %

p2,3 = 0,32

Nhóm 3

98

37

37,8 %

p1,3 = 0,005

p được tính bằng so sánh kiểm định χ

2

p


17
PLPLT làm tăng tỉ lệ làm tổ của phôi, đặc biệt ở nhóm chuyển
phôi ngày 5 có PLPLT.
* So sánh kết quả thai sinh hóa và thai lâm sàng của 3 nhóm
nghiên cứu

Bảng 3.30. Kết quả thai sinh hóa và thai lâm sàng

Nhóm nghiên
cứu
Nhóm 1
(n = 61)
Nhóm 2
(n =61)
Nhóm 3
(n = 59)

giữa các nhóm nghiên cứu.
Kết quả
Thai sinh hóa
Thai lâm sàng
Số lượng
p
Số lượng
p
23
19
(37,7 %)
(31,1 %)
p1,2 = 0,71
p1,2 = 0,45
26
24
p2,3 = 0,73
p2,3 = 0,48
(42,6 %)

(39,3 %)
p1,3 = 0,37
p1,3 = 0,10
28
28
(47,5%)
(47,5%)

p được tính bằng so sánh kiểm định χ2
Không có sự khác biệt về tỉ lệ thai sinh hóa, thai lâm sàng khi so
sánh chéo kết quả giữa 3 nhóm, với p>0,05.
* Tỉ lệ thai sinh sống trên 3 nhóm bệnh nhân nghiên cứu
Bảng 3.31. So sánh tỷ lệ thai sinh sống ở các nhóm nghiên cứu
Nhóm nghiên cứu

Thai sinh sống
Số lượng

Tỉ lệ

p

Nhóm 1 (n = 61)

15

24,6 %

p1,2 = 0,24

Nhóm 2 (n =61)

22

36,1 %

p2,3 = 0,37

Nhóm 3 (n = 59)

27

45,8 %

p1,3 = 0,03

p được tính bằng so sánh kiểm định χ2


18
PLPLT làm tăng tỉ lệ thai sinh sống đặc biệt là ở nhóm chuyển
phôi ngày 5.
* So sánh số túi ối, số thai sinh sống của các bệnh nhân ở 3 nhóm
nghiên cứu
Bảng 3.32. Số túi ối, số thai sinh sống của các bệnh nhân
ở 3 nhóm nghiên cứu
Nhóm
nghiên
cứu

Số bệnh nhân có
1 túi ối

2 túi ối

Số BN có

3 túi ối

1 thai

2 thai

sinh

sinh

sống

sống

Nhóm 1

11 BN

6 BN

3 BN

7 BN

8 BN

Nhóm 2

10 BN

14 BN

1 BN

11 BN

11 BN

Nhóm 3

19 BN

9 BN

-

22 BN

5 BN

So sánh theo số túi ối: p1,2 = 0,22 ; p2,3 = 0,13 ; p1,3 = 0,13
So sánh theo số thai: p1,2 = 0,38 ;

p2,3 = 0,04 ; p1,3 = 0,004

Có khác biệt về số bệnh nhân phân bố theo số thai sinh sống từ
nhóm 1 đến nhóm 3. Tỉ lệ đa thai ở nhóm 3 là thấp nhất (p<0,01).
Chương 4: BÀN LUẬN
4.1. Đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 3
4.1.1. Về các đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 3
* Phân loại phôi nuôi cấy ngày 3 theo đồng thuận đánh giá chất
lượng noãn và phôi
Tỉ lệ phôi tốt, trung bình và phôi xấu ở nhóm 1 lần lượt là
28,3%; 42,6% và 29%. Ở nhóm 2 các tỉ lệ này lần lượt là 28,8%;
44,2% và 27%. Còn ở nhóm 3 là 27,7%; 43,3% và 29,1% (bảng 3.9).
Có vẻ như tỉ lệ phôi tốt ở nhóm 3 thậm chí còn thấp hơn so với 2
nhóm còn lại. Tuy nhiên, sự khác biệt về tần suất phân bố theo chất


19
lượng phân loại phôi nuôi cấy ngày 3 không khác nhau có ý nghĩa
thống kê khi so sánh ở 3 nhóm nghiên cứu với p>0,05.
4.1.2. Đường kính, chiều dày ZP và mối liên quan với các đặc điểm
hình thái của phôi nuôi cấy ngày 3
Giá trị trung bình của chiều dày màng trong suốt ở nhóm 1 là
15,7 ± 1,4 μm; nhóm 2 là 15,6 ± 1,3 μm và nhóm 3 là 15,7 ± 1,4 μm.
Trong khi đó đường kính trung bình của phôi nuôi cấy ngày 3 ở
nhóm 1 là 154,0 ± 2,5 μm; ở nhóm 2 là 154,4 ± 2,7 μm và ở nhóm 3
là 154,1 ± 2,6 μm (bảng 3.11). Không có sự khác biệt về kích thước
phôi và chiều dày màng trong suốt của phôi nuôi cấy ngày 3 khi so
sánh giữa các nhóm nghiên cứu.
4.2. Về đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 5
* Về tỉ lệ hình thành phôi túi

Tỉ lệ hình thành phôi túi trong nghiên cứu của chúng tôi là
42,8% (184 phôi túi tạo thành trên tổng số 430 phôi nuôi cấy ngày 3).
Tỉ lệ này cũng tương đồng với nghiên cứu của một số tác giả như
Guerif F. (2011), Yang Z. (2012) và Tao T. (2013). Năm 2011, trong
nghiên cứu của Guerif F. ở nhóm bệnh nhân dưới 36 tuổi, có tỉ lệ
hình thành phôi túi ở 2 nhóm nghiên cứu lần lượt là 41% và 56%.
* Về kích thước phôi túi
Trong nghiên cứu của chúng tôi đường kính của phôi túi trung
bình là 176,9 ± 10,4 μm. Những phôi túi chất lượng tốt có đường
kính trung bình là 181,7 ± 8,5 μm, trong khi đó những phôi túi có
chất lượng trung bình và chất lượng xấu có đường kính trung bình lần
lượt là 178,2 ± 10,3 μm và 168,1 ± 7,2 μm. Sự khác biệt về kích
thước phôi túi ở những phôi có chất lượng khác nhau có ý nghĩa
thống kê với p<0,01 (bảng 3.16 và 3.17). Có mối tương quan thuận
giữa chất lượng phôi túi và đường kính phôi túi. Mức độ tương quan
rõ rệt với hệ số tương quan r = 0,47 (p<0,01).
Điều này cho thấy những phôi có túi có chất lượng tốt hơn sẽ có
tiềm năng sống tốt hơn biểu hiện qua tốc độ phát triển của xoang túi


20
phôi làm cho đường kính lớn hơn và màng trong suốt mỏng đi. Nhận
định này cũng phù hợp với nghiên cứu của Shapiro B. S. và cs (2008).
4.3. Mối tương quan hình thái phôi nuôi cấy ngày 3 và ngày 5
4.3.1. Mối tương quan giữa hình thái phôi ngày 3 và khả năng
hình thành phôi túi
Tỉ lệ hình thành phôi túi là 68,9% ở nhóm phôi nuôi cấy ngày 3
có chất lượng tốt, 40,9% ở nhóm có chất lượng trung bình và 20,8%
ở nhóm phôi xấu (bảng 3.20).
Sự khác biệt này cho thấy giá trị phân loại phôi nuôi cấy ngày 3

theo tiêu chuẩn đồng thuận đánh giá chất lượng phôi là rất tốt. Hiện
nay trong các nghiên cứu công bố cũng chưa có nghiên cứu nào đánh
giá riêng tiêu chuẩn phân loại mới này ảnh hưởng đến khả năng tiên
lượng nuôi cấy phôi tiếp tục đến giai đoạn phôi túi.
Như vậy, nếu 1 bệnh nhân có 2 phôi chất lượng tốt khi nuôi cấy
ngày 3 thì xác suất có phôi túi sẽ là 90,4%.
4.3.2. Mối tương quan giữa hình thái phôi ngày 3 và chất lượng
phôi túi
Có sự khác nhau về tỉ lệ phân bố chất lượng phôi nuôi cấy ngày
5 ở những nhóm phôi nuôi cấy ngày 3 có chất lượng khác nhau với
p<0,01. Hệ số tương quan r = 0,47 cho thấy có mối tương quan thuận về
chất lượng phôi ngày 3 và ngày 5, mức độ tương quan là đáng kể.
Năm 2012, Braga D. P. và cs nhận thấy có mối tương quan giữa
chất lượng phôi nuôi cấy ngày 2, ngày 3 đến cả khả năng tiên lượng
hình thành phôi túi và cả chất lượng của phôi túi tạo thành.
4.4. Bước đầu đánh giá phân loại phôi liên tục trong nuôi cấy
phôi ngày 3 và ngày 5
* Sử dụng PLPLT để thu được nhiều thông tin về phôi nuôi cấy.
Đánh giá phân loại phôi liên tục không phải là một hệ thống
phân loại phôi mới, đây chỉ là hệ thống lưu trữ thông tin của từng
phôi được nuôi cấy riêng biệt mang tính liên tục từ ngày thứ 1 đến
ngày chuyển phôi. Để có thể đánh giá chất lượng liên tục cho từng


21
phôi, các phôi phải được nuôi cấy riêng biệt trong giọt môi trường có
thể tích nhỏ và có phủ dầu. Do vậy, ở thời điểm chuyển phôi (ngày 3
hoặc ngày 5) chúng ta sẽ có được nhiều thông tin về phôi hơn để ra
quyết định lựa chọn phôi chuyển chính xác hơn.
* Bước đầu đánh giá PLPLT trong nuôi cấy phôi ngày 3

Khi đánh giá 452 phôi nuôi cấy ngày 3 có sử dụng PLPLT lựa
chọn phôi chuyển, chúng tôi nhận thấy có mối tương quan giữa chất
lượng phôi ngày 1và chất lượng phôi ngày 3. Trong số 154 phôi ngày
1 được phân loại Z1, tỉ lệ hình thành phôi có chất lượng tốt, trung
bình và xấu ngày 3 lần lượt là 50,6% ; 33,8% và 15,6%. Trong khi
143 phôi ngày 1 được phân loại Z2, tỉ lệ này là 28,7%; 49,6% và
21,7% (bảng 3.25). Hệ số tương quan r = 0,4 cho thấy có mối tương
quan thuận giữa chất lượng phôi nuôi cấy ngày 1 và phôi nuôi cấy
ngày 3. Năm 2008, Liu Q. nhận thấy tỉ lệ hình thành phôi tốt tăng lên
ở nhóm phôi ngày 1 có chất lượng Z1. Tỉ lệ này giảm dần ở các
nhóm còn lại, thấp nhất lá ở nhóm phôi ngày 1 có chất lượng Z4.
* Bước đầu đánh giá PLPLT trong nuôi cấy phôi túi
Trong số 54 phôi túi hình thành từ các phôi phân loại Z1-N3T,
có tới 30 phôi là phôi túi chất lượng tốt (chiếm tỉ lệ 55,6%). Khi xem
xét 32 phôi túi hình thành từ các phôi phân loại Z1-N3TB, có 9 phôi
là phôi túi chất lượng tốt (chiếm tỉ lệ 28,1%). Tỉ lệ này lần lượt giảm
xuống ở những phôi túi hình thành từ những phôi PLPLT ngày 1 và
ngày 3 có chất lượng thấp hơn. Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với
p<0,001. Có mối tương quan thuận giữa chất lượng phôi PLPLT khi
nuôi cấy ngày 1 và ngày 3 với chất lượng phôi túi được tạo thành với
r=0,3 (p<0,01). Kết quả nghiên cứu của chúng tôi cũng tương đồng
với nhận định của Conaghan J. và cs (2013), cho rằng nên kết hợp
đặc điểm hình thái của phôi nuôi cấy ngày 3 với thông số đầy đủ về
phôi trước đó để lựa chọn được phôi túi có tiềm năng nhất, chất
lượng tốt nhất nhằm nâng cao tỉ lệ thành công.


22
4.5. So sánh kết quả chuyển phôi ngày 3 và ngày 5 có phân loại
phôi liên tục

* So sánh tỉ lệ phôi làm tổ, tỉ lệ thai sinh hóa, thai lâm sàng
Có sự khác biệt về tỉ lệ làm tổ giữa nhóm 1 và nhóm 3 với
p1,3=0,005. Không có sự khác biệt về tỉ lệ phôi làm tổ giữa nhóm 1
với nhóm 2 và nhóm 3 với nhóm 2. Tuy nhiên với p1,2 = 0,07 và
p2,3=0,32 cho thấy xu thế xuất hiện sự khác biệt về tỉ lệ làm tổ giữa
nhóm 1 với nhóm 2 khi tăng kích thước mẫu, mặc dù sự khác biệt
không có ý nghĩa thống kê. Điều đó cho thấy khi sử dụng PLPLT lựa
chọn phôi chuyển sẽ làm tăng tỉ lệ phôi làm tổ.
Năm 2011, Hendawy S. F. và cs khi so sánh kết quả chuyển
phôi ngày 3 và ngày 5 đã nhận thấy, tỉ lệ làm tổ của nhóm chuyển
phôi ngày 3 là 12,57% so với nhóm chuyển phôi ngày 5 là 21,40%.
Năm 2013, tỉ lệ làm tổ khi chuyển phôi ngày 5 được Tao T. và cs
công bố là 36,7% và 40,9% tương ứng với nhóm chuyển phôi ngày 5
có chất lượng phôi trung bình và phôi tốt. Tỉ lệ làm tổ khi chuyển
phôi ở nhóm bệnh nhân dưới 35 tuổi trong nghiên cứu của tác giả
Lee T. H. và cs là 29,2%.
Về tỉ lệ thai lâm sàng giữa các nhóm lần lượt là 31,1 % ở nhóm
1; 39,3% ở nhóm 2 và 47,5% ở nhóm 3. Mặc dù tỉ lệ có thai lâm
sàng ở nhóm 3 là cao nhất nhưng khi so sánh giữa các nhóm để tìm
hiểu sự khác biệt về ý nghĩa thống kê ta có các giá trị p 1,2 = 0,45 ;
p2,3= 0,48 và p1,3 = 0,1 (bảng 3.30). Nhưng về xu thế cho thấy, nếu
tăng kích thước mẫu thì có thể xuất hiện sự khác biệt về tỉ lệ thai lâm
sàng giữa nhóm 1 và nhóm 3. Đặc biệt, ở nhóm 1 có 4 trường hợp và
ở nhóm 2 có 2 trường hợp xác định có thai sinh hóa nhưng không
phát triển tiếp đến thai lâm sàng. Trong khi đó ở nhóm 3 (nhóm
chuyển phôi ngày 5 có PLPLT) không có trường hợp nào như vậy.
Điều đó cho thấy mặc dù giảm số lượng phôi chuyển ở nhóm 3
và nhóm 2 so với nhóm 1, nhưng tỉ lệ thai sinh hóa và thai lâm sàng

23
vẫn không khác biệt giữa các nhóm nghiên cứu. Phải chăng việc lựa
chọn phôi mang tính liên tục cho phép "sàng lọc" tốt hơn những phôi
có sức sống tốt, làm tăng tiềm năng làm tổ của phôi cho nên mặc dù
số lượng phôi chuyển giảm đi nhưng vẫn duy trì tỉ lệ thai sinh hóa và
thai lâm sàng tương đương nhau giữa các nhóm.
* So sánh tỉ lệ thai sinh sống ở các nhóm nghiên cứu
Tỉ lệ thai sinh sống là 24,6% ở nhóm 1; 36,1 % ở nhóm 2 và
45,8% ở nhóm 3. Tỉ lệ thai sinh sống ở nhóm 3 cao hơn so với nhóm
1 có ý nghĩa thống kê với p 1,3 = 0,03. Mặc dù tỉ lệ thai sinh sống
nhóm 2 cao hơn so với nhóm 1 nhưng sự khác biệt không có ý nghĩa
thống kê khi so sánh tỉ lệ thai sinh sống giữa 2 nhóm này hoặc giữa
nhóm 2 với nhóm 3, với các giá trị p1,2 = 0,24 và p2,3 = 0,37.
Heitmann R. J. và cs nhận thấy tỉ lệ thai sinh sống của 109 bệnh
nhân người châu Á là 47% và 42,8% khi chuyển phôi túi có chất lượng
tốt và chất lượng trung bình. Tỉ lệ thai sinh sống khi chuyển phôi tươi
ngày 5 được tác giả Lee T. H. và cs công bố là khoảng 38-40%. Đặc
biệt với nhóm chuyển 1 phôi túi sử dụng phân loại phôi có lựa chọn
đối với nhóm bệnh nhân <35 tuổi được tác giả Thompson S. M. công
bố có tỉ lệ thai sinh sống lên tới 51,8%.
* So sánh số túi ối, số thai sinh sống trên tứng bệnh nhân giữa các
nhóm nghiên cứu
Trong thực tế, nếu một hệ thống hay cách thức đánh giá chất
lượng phôi không có khả năng sàng lọc những phôi tiềm năng nhất,
khi đó để tăng hiệu quả thành công, các nhà phôi thai học thường lựa
chọn giải pháp nâng số lượng phôi chuyển. Điều này thường kéo theo
tỉ lệ đa thai cũng tăng cao.
Có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê về tỉ lệ đa thai giữa 3 nhóm
nghiên cứu với p<0,05. Khi so sánh số trường hợp có 2 thai sinh sống
so với tổng số ca có thai sinh sống ở nhóm 1 là 8/15 trường hợp; ở

nhóm 2 là 11/22 trường hợp và nhóm 3 là 5/27 trường hợp. Với các giá


24
trị p có được khi so sánh chéo giữa các nhóm là p 1,2 = 0,38 ; p2,3 = 0,04
và p1,3 = 0,004.
KẾT LUẬN
1. Đặc điểm hình thái của phôi nuôi cấy ngày 3 và phôi nuôi cấy
ngày 5
Đặc điểm hình thái phôi ngày 3: Đường kính trung bình của
phôi ngày 3 là 154,2 ± 2,6 μm; chiều dày màng trong suốt trung bình
là 15,7 ± 1,4 μm. Có mối tương quan giữa kích thước phôi và chiều
dày màng trong suốt với số lượng phôi bào, độ đồng đều giữa các phôi
bào, tỉ lệ mảnh vỡ bào tương và chất lượng phôi nuôi cấy ngày 3. Phôi
ngày 3 chất lượng tốt có đường kính lớn hơn và màng trong suốt mỏng
hơn so với phôi có chất lượng xấu. Tỉ lệ phôi tốt, trung bình và phôi
xấu khi nuôi cấy ngày 3 lần lượt là 28,3%; 43,4% và 28,3%.
Đặc điểm hình thái phôi nuôi cấy ngày 5: Tỉ lệ hình thành phôi
túi khi nuôi cấy ngày 5 là 42,8%. Đường kính trung bình phôi túi là
176,9 ± 10,4 μm, chiều dày màng trong suốt trung bình là 10,2 ± 2,2 μm.
Có mối tương quan giữa đường kình và chiều dày màng trong suốt
của phôi túi với chất lượng phôi túi. Phôi túi chất lượng tốt có đường
kính lớn hơn và màng trong suốt mỏng hơn so với phôi túi chất lượng
trung bình và chất lượng xấu.
2. Đánh giá mối liên quan về hình thái của phôi nuôi cấy ngày 3,
ngày 5 và bước đầu đánh giá kết quả áp dụng phân loại phôi liên
tục trong lựa chọn phôi chuyển
Có tương quan đáng kể về số lượng phôi bào, tỉ lệ mảnh vỡ bào
tương và chất lượng của phôi nuôi cấy ngày 3 và khả năng hình thành
phôi túi khi nuôi cấy ngày 5. Tỉ lệ hình thành phôi túi ở nhóm phôi

ngày 3 có chất lượng tốt là 68,9%; chất lượng trung bình là 40,9% và
chất lượng xấu là 20,8%.


25
Hình thái phôi ngày 3 có liên quan đến khả năng hình thành và
chất lượng phôi túi khi tiếp tục nuôi cấy đến ngày 5. Tuy nhiên mức
độ tương quan yếu.
Phân loại phôi liên tục lựa chọn phôi chuyển không làm ảnh
hưởng đến chất lượng phôi nuôi cấy, không làm thay đổi tỉ lệ thai
sinh hóa và thai lâm sàng. Nhưng số lượng phôi chuyển giảm khi sử
dụng đánh giá phân loại phôi liên tục đã làm giảm tỉ lệ đa thai.
Chuyển phôi ngày 5 có sử dụng phân loại phôi liên tục làm tăng
tỉ lệ thai sinh sống, giảm số lượng phôi chuyển và giảm tỉ lệ đa thai.
Tỉ lệ thai sinh sống khi chuyển phôi ngày 5 có kết hợp đánh giá phân
loại phôi liên tục là 45,8%.
KIẾN NGHỊ
Khi lựa chọn phôi chuyển, đặc biệt với các cơ sở thụ tinh ống
nghiệm chưa có tủ cấy time-lapse, nên xem xét áp dụng đánh giá
phân loại phôi liên tục đối với phôi ngày 3, ngày 5 để tăng khả năng
chọn được phôi tiềm năng nhất góp phần tăng tỉ lệ thành công của
chu kỳ thụ tinh ống nghiệm.
Khi tư vấn cho bệnh nhân, khuyến cáo chuyển phôi ngày 5 chỉ
nên áp dụng với những trường hợp có ít nhất 2 phôi tốt khi nuôi cấy
ngày 3, đặc biệt là những trường hợp có kết hợp đánh giá sàng lọc di
truyền trước chuyển phôi cần phải nuôi đến giai đoạn phôi túi. Cân
nhắc khi tư vấn chuyển phôi túi cho những trường hợp có ít hơn 2
phôi tốt khi nuôi cấy ngày 3, những trường hợp này nên khuyên họ
chỉ chuyển phôi ngày 3.