Các phương pháp phân tích hóa lý
Nội Dung: tách rutin từ hoa hòe bằằng HPLC
Nhóm 4 trình bày:
Sinh viên:
Trịnh Ngọc Toàn
Trâằ
n Vằn Nam
Nguyễn Duy Tuâấ
n
Giáo Viên Hướng dẫn: Nguyễn Thị Hồng Thắm
Phân tích rutin
• Chuẩn bị
• Tiêấn hành
Giới thiệu
• HPLC
I, Giới thiệu
1, Khái niệm HPLC
Phương pháp sằấc ký lỏng hiệu nằng cao (HPLC) ra đời nằm 1967-1968 trên c ơ sở phát triển
và cải tiêấn từ phương pháp sằấc ký cột cổ điển. HPLC là một phương pháp chia tách trong
đó pha động là châất lỏng và pha tĩnh chứa trong cột là châất rằấn đã đ ược phân chia d ưới
dạng tiểu phân hoặc một châất lỏng phủ lên một châất mang rằấn, hay một châất mang đã
được biêấn bằằng liên kêất hóa học với các nhóm chức hữu cơ.
Phương pháp này ngày càng được sử dụng rộng rãi và phổ biêấn vì nhiêằu lý do: có độ nh ạy
cao, khả nằng định lượng tốất, thích hợp tách các hợp châất khó bay hơi hoặc dễ phân hủy
nhiệt.
3, Sơ lược vêằHPLC
Một vài hình ảnh thiêất bị HPLC tại CASE
Hệ thốống HPLC 10A
Hệ thốống HPLC 20A
2, Sơ lược vêằhoa hòe và rutin
a, hoa hòe
tên khoa HọC: sopora saponica
k í c h t h ướ c : c a o 5 - 1 0 m .
H o a n h ỏ m à u t r ằấn g , v à n g n h ạ t , đ à i h ì n h v u ố n g
Click to edit Master text styles
Second level
Third level
Fourth level
Fifth level
b. Rutin
Rutin là một glucozit mà phâằ
n aglycon là quercetin và đường là rutinose
Cống thức phân tử: C27H30O16.3H2O
Khốấi lượng phân tử:
+ Khi ngậm 3pt nước :
644,57
+ Khốấ
i lượng Khan
610,53
Cống thức câấu tạo
:
* Tính chấố
t
Rutin kêất tinh ở dạng bột kim nhỏ, màu vàng hơi xanh lục, khống mùi, khống vị, ra ánh
sáng có thể hơi sẫm màu
Khó tan tron nước lạnh : 1g/ 10000ml
Tan trong nước sối : 1g/100ml
Khó tan trong cốằn lạnh: 1g/650ml
Tan trong cốằn nóng: 1g/60ml
0
0
Từ 183-194 c rutin bị chảy. Và phân hủy khi quá 194 c
II, Phân tích rutin bằằng HPLC
Thiêấ
t bị HPLC: Merk& HITACHI với bơm: L-600 Pump, detector: L-400 UV Detector, B ước sóng Xnm
Pha động: Hỗn hợp methanol/axit acetic 0,4%( tỉ l ệ 60/40)
Thể tích bơm mẫu: 20l
Tốấc độ dòng : a ml/phut
Nhiệt độ : 20-230C
Dung dịch chuẩn chứa rutin từ 1,0 đêấn 10g/20l
mg nụ hòe chiêấ
t soxhlet với mg ethanol 960 cho đêấ
n khi nhạt màu
Loại ethanol dưới áp suâấ
t giảm và hòa tan kêất tủa trong methanol
II, Phân tích rutin bằằ
ng pp HPLC
Các bước tiêấn hành phân tích
Được chiêất soxhlet với
Bột nụ hòe sâấy khố
methanol tuyệt đốấi (hoặc
ethanol).
Dịch chiêấ
t đem loại dung mối
Pha dd ch ứa hàm lượng
rutin chuẩn thay đổi
xây dựng đường chuẩn
Hòa tan trong methanol
Phân tích HPLC nhiêằ
u lâằn,
lâấy gia trị trung bình
Thank you
The End