Bài thuyết trình nhóm màng tái tổ hợp PLLA bmattacin2 từ peptide kháng khuẩn của tằm và poly l lactic acid (PLLA) cho ứng dụng y sinh học

ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH
KHOA SINH HỌC – CÔNG NGHỆ SINH HỌC

Màng tái tổ hợp PLLA/Bmattacin2 từ peptide kháng khuẩn của tằm và Poly L- lactic acid (PLLA)
cho ứng dụng y sinh học.

GVHD: PGS.TS Trần Lê Bảo Hà.
Nhóm 10

Thành viên:
Mai Thị Thùy Duyên

1318051

Văn Mỹ Lan

1318177

Trần Thị Ngọc

1318251


NỘI DUNG

I

ĐẶT VẤN ĐỀ

II

MÀNG PLLA

III

BMATTACIN2

IV

MÀNG PLLA/BMATTACIN2

V

KẾT LUẬN


I. ĐẶT VẤN ĐỀ

Thiết kế các vật liệu có chức năng chống oxy hóa, chống viêm, kháng khuẩn và chống ung thư bằng cách bổ
sung:
→ Hạt nano bạc: tăng nồng độ → hoạt tính kháng khuẩn tăng nhưng lại tăng khả năng gây độc tế bào
+ Mohiti-Asli, M. et al
+ Jin, G. et al
→ Một số loại thuốc như 5-fluorouracil (5-FU): điều trị ung thư nhưng lại gây hại đến các tế bào bình
thường.

Thiết kế vật liệu kháng khuẩn, chống ung thư cao, gây độc thấp hơn.


Màng PLLA/Bmattacin2

T
UẤ
X
ĐỀ


II. MÀNG PLLA
Polymer nhiệt dẻo, bán

Poly L - lactic acid

tinh thể, giòn và rắn.

Ứng dụng trong màng

Có khả năng phân hủy sinh

bao thực phẩm, dẫn

học

truyền thuốc, vật liệu y
sinh…

Tương thích sinh học


III. BMATTACIN2

-

Là peptide kháng khuẩn được tạo dòng từ 2 gen attacin2 và cecropinB1 ở tằm.
+ Peptide kháng khuẩn (AMP) là nhóm các peptide có khả năng tiêu diệt những vi sinh vật xâm nhập của hệ thống miễn
dịch bẩm sinh ở hầu hết các sinh vật.
+ AMPs mang đặc điểm chung là có điện tích cation bề mặt và có các vùng ưa nước và vùng kỵ nước tạo thành màng
lưỡng cực (phân cực).
+ AMPs thường có sự ổn định nhiệt và kháng sinh phổ rộng.

-

Khả năng nhắm mục tiêu tế bào ung thư
Khả năng kháng khuẩn.


III. BMATTACIN2

1.

ĐẶC TÍNH:
a. Khả năng của Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thư.

•. Đối tượng:
Tế bào ung thư (tế bào hắc tố ác tính A375 và tế bào ung thư đại trực tràng HCT116 ở người)
Tế bào đối ứng bình thường (nguyên bào sợi da bao quy đầu người HFF-1 và tế bào ruột kết của thai nhi FHC).


a. Khả năng của Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thư
Kết quả: 2 mM Bmattacin2 sau 24 giờ ủ

•

Kết luận
Bmattacin2 có thể giết chọn lọc tế bào ung thư A375 và HCT116 mà vẫn duy trì các tế bào đối ứng bình thường của nó


III. BMATTACIN2
1. ĐẶC TÍNH:
b. Khả năng kháng khuẩn của Bmattacin2.

• Đối tượng:
S. maicesceis và B. Bombysepticus ( 2 loại vi khuẩn thường được tìm thấy trong tằm nhiễm).
E. coli ATCC25922, E. coli DH5α và S. aureus ATCC25923 (ba chủng vi khuẩn phổ biến trong phòng thí
nghiệm)


b. Tác dụng kháng khuẩn của Bmattacin2

Kết quả:

KẾT LUẬN: Bmattacin2 có phổ kháng khuẩn rộng, với từng lượng khác nhau Bmattacin2 có thể ức chế tiêu diệt các vi khuẩn
gram âm và gram dương


Thí nghiệm so sánh tác động của Bmattacin2

Ủ với Bmattacin2 trong 30’
Đối tượng:
+E. Coli
+ S. aureus
+HCT116

+FHC
+A375
+HFF-1


2. CƠ CHẾ BMATTACIN2:

Bám lên màng tế bào vi khuẩn
Peptide kháng khuẩn chèn vào lớp màng lipid kép, hình thành các kênh vận
chuyển tự do dẫn đến làm dung giải màng tế bào vi khuẩn.

Khi xâm nhập vào tế bào, kết hợp với các thành
phần quan trọng của tế bào, kích hoạt giải phóng
enzyme tự phân giải, ức chế tổng hợp DNA, RNA,....


Sự tác động chọn lọc của peptide kháng khuẩn Bmattacin2

•

Các yếu tố liên quan đến tác động chọn lọc :
+ Điện tích màng.
+ Cholesterol làm giảm hoạt động của các peptide
kháng khuẩn.
+ Tế bào vi khuẩn dễ bị nhân tố lạ xuyên màng.
=> Các peptide kháng khuẩn luôn ưu tiên tương tác với
vi khuẩn hơn với tế bào động vật, nhờ đó chúng tiêu diệt
các vi sinh vật mà không gây độc đáng kể đến tế bào chủ.

IV. MÀNG PLLA/BMATTACIN2

1. ĐẶC TÍNH

2. PHƯƠNG PHÁP TẠO
MÀNG


1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2

a. Hoạt động chống ung thư của màng PLLA/Bmattacin2

•

Khả năng di động của
HCT116 sau khi gieo hạt
trên màng phức hợp chế tạo
trong 4 giờ, 1 ngày và 3
ngày.


1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2

a. Hoạt động chống ung thư của màng PLLA/Bmattacin2
- Tế bào quan sát: HCT116

-Cấy trên bề mặt màng phức hợp chế tạo
-Thời gian: 3 ngày.
-Kết quả:
+(b1-b4) nhuộm tế bào sống/chết.

+ (b5-b8) nhuộm huỳnh quang của các tế bào bởi
DAPI/FITC.
+(b9-b16) SEM quan sát


1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2.

b. Hiệu lực kháng khuẩn của màng PLLA/Bmattacin2

Tính kháng khuẩn:
Khảo sát đặc tính khác khuẩn của màng
PLLA/Bmattacin2
+ Đối tượng: E. coli and S. aureus
+ Đối chứng âm: màng PLLA


1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2

b. Hiệu lực kháng khuẩn của màng PLLA/Bmattacin2

Nhuộm vi khuẩn bằng SYTO 9 và
propidium iodide
+ vi khuẩn sống (xanh)
+vi khuẩn chết (màu đỏ) => tác dụng
kháng khuẩn của PLLA/Bmattacin2.


1. ĐẶC TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2

c. Khả năng tương thích của màng PLLA/Bmattacin2

IV. MÀNG PLLA/BMATTACIN2

2. PHƯƠNG PHÁP TẠO MÀNG:
3 bước

-

Tạo dòng.
Chuẩn bị dung dịch PLLA/Bmattcin2.
Phương pháp quay điện hóa
(electrospinning) để tạo màng
PLLA/Bmattacin2


V. KẾT LUẬN
-

Màng PLLA / Bmattacin2 là một vật liệu có tính tương thích sinh học cao, có khả năng kháng khuẩn, chống tế bào ung
thư mà không gây ảnh hưởng đến các tế bào bình thường.

-

Với những đặc điểm này, màng nano PLLA / Bmattacin2 là loại vật liệu hứa hẹn, có một tiềm năng lớn cho các ứng
dụng y sinh học trong việc tái tạo da, điều trị ung thư, và chữa lành vết thương.