Cảm biến sinh học trên cơ sở Polyme dẫn trong phát hiện vi rút gây bệnh

TR

I H C QU C GIA HÀ N I
NG
I H C CÔNG NGH
***************

Tr n Quang Huy

C M BI N SINH H C TRÊN C

S

POLYME D N

TRONG PHÁT HI N VI RÚT GÂY B NH

Chuyên ngành : V t li u và linh ki n nanô

LU N V N TH C S

NG

IH

NG D N KHOA H C : TS. Mai Anh Tu n

Hà N i - 2007


L I CAM OAN

V i t cách là tác gi c a đ tài : ‘‘C m bi n sinh h c trên c s polyme d n
trong phát hi n vi rút’’, xin cam đoan r ng đây là đ tài do chính tác gi đ xu t và
th c hi n, không trùng l p v i b t k công trình nào khác
th gi i. M t ph n k t qu trong lu n v n đã đ
chí, h i ngh chuyên ngành trong n

Vi t Nam c ng nh trên

c tác gi công b trong m t s t p

c và qu c t . Tác gi xin ch u hoàn toàn trách

nhi m v i n i dung cu n lu n v n này.
Hà N i, ngày 10 tháng 12 n m 2007
Tác gi

Tr n Quang Huy


L IC M
hoàn thành đ tài lu n v n, tr

c tiên tôi xin đ

i thày đã h

s c t i TS. Mai Anh Tu n - ng

N

c bày t lòng bi t n sâu

ng d n, ch đ o khoa h c, t n tình giúp

đ và khích l tôi trong su t quá trình th c hi n đ tài.
Xin chân thành c m n t i s giúp đ vô cùng quí báu c a nh ng c ng s :
Nguy n Th Thanh Th y, Ph

ng ình Tâm, Tr nh V n Trung trong nhóm nghiên c u

c m bi n sinh h c t i ITIMS.
Tôi c ng xin chân thành c m n t i Ban Giám đ c ; Ban ch nhi m khoa Vi
rút ; ThS. Nguy n Thanh Th y, CN. Nguy n Th Minh Liên, TS.
thí nghi m Hi n vi đi n t ; ThS. Nguy n Th Th

Th Thoa - Phòng

ng – Phòng thí nghi m các vi rút

Herpes ; PGS.TS. Phan Th Ngà – Phòng thí nghi m vi rút viêm não/Arbo - Vi n V
sinh D ch t Trung

ng đã t o đi u ki n giúp đ tôi trong su t khóa h c c ng nh

nh ng ý ki n đóng góp quí báu trong quá trình nghiên c u th c hi n đ tài.
có đ
hi u, Phòng

c nh ng k t qu này, tôi c ng xin bày t lòng bi t n t i Ban giám

ào t o sau đ i h c và Nghiên c u khoa h c, Khoa V t lý k thu t và

Công ngh nanô, l p cao h c khóa 12N (2005 -2007) - Tr

ng

i h c qu c gia Hà N i; Ban giám đ c và t p th cán b Vi n
Khoa h c V t li u (ITIMS) - Tr

ng

i h c công ngh ào t o Qu c t v

i h c Bách khoa Hà N i đã t o đi u ki n cho

tôi h c t p và th c hi n đ tài lu n v n.
Con xin dâng t ng thành công này t i cha m , gia đình đ bày t lòng bi t n
t i b c sinh thành, nuôi d

ng và đã luôn tin t

ng, đ ng viên, khích l con trong cu c

s ng và su t khóa h c.
Tôi c ng xin chân thành c m n s đ ng viên tinh th n c a b n bè và nh ng
ng

i thân trong th i gian v a qua.
Hà N i ngày 10 tháng 12 n m 2007
Tác gi

Tr n Quang Huy


M CL C

Trang ph bìa
L i cam đoan
L ic m n
M cl c
Danh m c các ký hi u, ch vi t t t
Danh m c các b ng
Danh m c các hình v , đ th
M

U

CH

NG 1. T NG QUAN

Trang

1.1 L ch s phát tri n c m bi n sinh h c …………………………...

3

1.2 C m bi n sinh h c………………………………………………

5

1.2.1 Khái ni m c m bi n sinh h c……………………………..

5

1.2.2 Nguyên lý c m bi n sinh h c……………………………..

9

1.2.3 Phân lo i c m bi n sinh h c………………………………

10

1.3 Polyme d n………………………………………………………

15

1.3.1 Khái ni m polyme d n ………...………………………….

15

1.3.2 C ch d n c a polyme d n……………………………….

16

1.3.3

ng d ng polyme d n trong c m bi n sinh h c…………..

18

1.4. M t s khái ni m v sinh h c phân t , vi rút h c, vi rút Herpes

21

1.4.1 M t s khái ni m v sinh h c phân t …………………….

21

1.4.2 M t s khái ni m v vi rút h c……………………………

24

1.4.3 Vi rút Herpes………………………………………………

27


CH

NG 2. CH T O C M BI N SINH H C

2.1 Thi t b , hóa ch t………………………………………………..

31

2.1.1 Thi t b …………………………………………………….

31

2.1.2 Hóa ch t…………………………………………………...

31

2.2 Thi t k và ch t o c m bi n vi đi n c c……………………….

32

2.2.1 Thi t k c m bi n vi đi n c c……………………………..

32

2.2.2 Qui trình ch t o vi c m bi n……………………

33

2.3 L a ch n DNA đ u dò………………………………………….

37

2.4 L a ch n polyme d n……………………………………………

38

2.5 C đ nh DNA đ u dò lên b m t vi c m bi n……………..

39

2.6 o đ c các thông s …………………………………………….

41

CH

2.6.1 Kính hi n vi đi n t quét (KHV TQ)…………………….

41

2.6.2 Ph h ng ngo i bi n đ i chu i Fourier (FTIR)……………

42

2.6.3 K thu t ph n ng chu i t ng h p polymerase (PCR)…...

42

2.6.4 Xây d ng h đo tín hi u c m bi n sinh h c……………….

43

NG 3. K T QU VÀ BÀN LU N

3.1 C m bi n vi đi n c c……………………………………………

49

3.2 T o màng polyme d n APTS ….……………………………….

52

3.3 Ph h ng ngo i FTIR……………………………………………

52

3.4 Dò tìm axit nucleic t m u phân tích……………………………

53

3.4.1 Dò tìm DNA b sung……………………………………...

53

3.4.2 Dò tìm DNA đ c hi u c a HSV…………………………..

60

K T LU N
DANH M C CÁC CÔNG TRÌNH Ã CÔNG B
TÁC GI
TÀI LI U THAM KH O
PH L C

C A


DANH M C CÁC KÝ HI U VÀ CH
APTS

VI T T T

3-aminopropyl–triethoxy-silance
(Tên m t lo i polyme d n)

DNA

Deoxyribonucleic acid
(Axít đêoxyribônuclêic – AND)

EDC

1–ethyl-3-(dimethyl-aminopropyl)carbodiimide
(Tên ch t đ ho t hóa g c ph t phát c a ADN)

ELISA

Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay
(K thu t mi n d ch g n men)

IF

ImmunoFlourescence
(K thu t mi n d ch hu nh quang)

FTIR

Fourier Transform Infrared Spectroscopy
(Ph h ng ngo i bi n đ i chu i Fourier)

HSV

Herpes Simplex Viruses type 1 & 2
(Vi rút Herpes týp 1 và 2)

ITIMS

International Training Institute for Material Science
(Vi n ào t o Qu c t v Khoa h c V t li u)

KHV TQ

Kính hi n vi đi n t quét

MIA

1-methylimidazole
(Tên ch t đ làm n đ nh hóa DNA ho t hóa trong n

NCBI

c)

National Center of Biotechnology Information
(Trung tâm Qu c gia v Thông tin Công ngh sinh h c)

PCR

Polymerase Chain Reaction
(K thu t ph n ng chu i t ng h p polymeraza)

RNA

Ribonucleic acid
(Axít ribônuclêic - ARN)

WHO

World Health Organization
(T ch c Y t Th gi i)


DANH M C CÁC B NG
Trang
B ng 1.1

Các lo i th th s d ng trong c m bi n sinh h c và k thu t đo

6

đi n hoá
B ng 1.2 Ki u đo t

ng ng v i các b chuy n đ i đi n hoá và đ i t

ng

8

phân tích
B ng 1.3 M t s t p ch t tiêu bi u dùng đ pha t p trong polyme d n

18

B ng 1.4 C đ nh các phân t sinh h c lên l p polyme d n trong các thi t b

20

c m bi n
B ng 1.5 So sánh hai týp vi rút Herpes

29

B ng 2.1 Thông s quá trình oxy hoá b m t phi n silic

34

B ng 2.2 Thông s quá trình phún x t o màng kim lo i trên phi n silic

36

B ng 2.3 Các thông s hàn dây siêu âm

37

B ng 2.4 B ng m u th c hi n các phép đo theo n ng đ , nhi t đ , th i gian

48

c đi m c a hai lo i c m bi n vi đi n c c

51

B ng 3.2 Tín hi u lai hóa khi n ng đ m u th p t i nhi t đ phòng

54

B ng 3.3 Tín hi u lai hóa c a DNA đ u dò và DNA b sung trong m u phân

55

B ng 3.1 So sánh u, nh

tích
B ng 3.4 Tín hi u lai hóa theo s thay đ i c a nhi t đ , n ng đ và th i gian

57

B ng 3.5 Tín hi u lai hóa khi đo v i s n ph m PCR c a HSV

61


DANH M C CÁC HÌNH V VÀ

TH

c và sau khi lai hoá

Trang
7

Hình 1.1

Hình thái b m t c a c m bi n tr

Hình 1.2

Nguyên lý ho t đ ng c a c m bi n sinh h c

9

Hình 1.3

Mô hình m t lo i c m bi n enzyme….

11

Hình 1.4

Nguyên lý c a c m bi n sinh h c DNA

12

Hình 1.5

Mô hình c m bi n mi n d ch s i nano phát hi n vi rút

14

Hình 1.6

V trí c a c m bi n sinh h c so v i các k thu t truy n th ng

15

khác đ ch n đoán b nh
Hình 1.7

T c đ phát tri n c m bi n sinh h c trong 20 n m tr l i đây
và d báo xu h

15

ng phát tri n

Hình 1.8

Mô hình ng d ng c a màng polyme d n

19

Hình 1.9

C u trúc và s lai hóa c a phân t DNA

21

Hình 1.10a

nh hi n vi đi n t truy n qua c a vi rút Herpes - nhu m âm

27

b n
Hình 1.10b

C u trúc vi rút Herpes

27

Hình 1.11

B nh nhân b nhi m vi rút HSV-1

28

Hình 2.1a

Thi t k c m bi n 70µm x 30µm

32

Hình 2.1b

Mô hình c u trúc vi đi n c c c a c m bi n 70µm x 30µm

32

Hình 2.2a

Thi t k c m bi n 20µm x 20µm

32

Hình 2.2b

Mô hình c u trúc vi đi n c c c a c m bi n 20µm x 20µm

32

Hình 2.3

X lý b m t phi n Si

33

Hình 2.4

T o l p màng SiO2

33

Hình 2.5

Mô ph ng quá trình quang kh c trên phi n silic

35

Hình 2.6

Mô ph ng quá trình phún x cao t n t o màng Pt….

35

Hình 2.7

Quá trình lo i b l p c m quang và l p màng kim lo i Pt/Cr

36

không c n thi t
Hình 2.8

Kính hi n vi đi n t quét phát x tr

Hình 2.9

Máy phân tích ph h ng ngo i bi n đ i chu i Fourier

43

Hình 2.10

D ng sóng t b khu ch đ i Lock-in

43

Hình 2.11

H đo vi sai s d ng máy khuy ch đ i Lock-in SR830

45

ng l nh S-4800-Hitachi

41


ng đ

ng c a h đo vi sai

Hình 2.12

M ch t

45

Hình 3.1A

Vi c m bi n 30µm x 70µm

49

Hình 3.1B

Vùng đi n c c ho t đ ng c a vi c m bi n 30µm x 70µm

49

Hình 3.2A

Vi c m bi n lo i 20µm x 20µm

50

Hình 3.2B

Vùng đi n c c ho t đ ng c a vi c m bi n 20µm x 20µm

50

Hình 3.3

Hình nh HV TQ c a màng polyme d n APTS trên b m t vi

52

c m bi n
Hình 3.4

Ph FTIR xác nh n các liên k t hóa h c gi a DNA đ u dò –

53

màng APTS
Hình 3.5

Tín hi u lai hóa theo th i gian t

ng ng v i n ng đ m u

55

phân tích b ng 0,5nM
Hình 3.6

Tín hi u lai hóa theo s thay đ i n ng đ m u phân tích

56

nhi t đ phòng
Hình 3.7

Tín hi u lai hóa theo th i gian t

ng ng v i các n ng đ

58

m u phân tích khác nhau
Hình 3.8

S

nh h

ng c a nhi t đ lên kh n ng phát hi n DNA b

59

sung c a vi c m bi n theo n ng đ m u phân tích
Hình 3.9

Tín hi u lai hóa theo nhi t đ c a vi c m bi n v i n ng đ

60

m u 1nM
Hình 3.10

Hình nh PCR d

ng tính v i HSV c a b nh nhân ký hi u

61

VN055
Hình 3.11

Kh n ng phát hi n DNA đ c hi u c a HSV trong s n ph m

62

PCR
Hình 4

o đ c th nghi m vi c m bi n trên h đo m i

72

1

M

U

Trong nh ng n m g n đây, r t nhi u các nhà khoa h c trong n

c và Qu c t

đã t p trung nghiên c u ch t o ra lo i c m bi n sinh h c có đ nh y, đ ch n l c cao,
thi t b nh g n, s d ng ti n ích và cho k t qu tin c y. Thi t b này đ
v i nhi u tính n ng v

t tr i và có kh n ng kh c ph c đ

c h u h t nh

các thi t b phân tích truy n th ng khác nh ELISA, PCR... Trong t

c đánh giá
c đi m c a

ng lai g n, các

nhà khoa h c d đoán r ng các thi t b truy n th ng s d n b thay th b i các th h
c m bi n sinh h c do chính nh ng ti n ích c a nó mang l i. Trong l nh v c ch n đoán
b nh, ba lo i c m bi n sinh h c ch y u th

ng đ

c t p trung nghiên c u ch t o là :

i) c m bi n enzyme trên c s ph n ng đ c hi u enzyme – c ch t; ii) c m bi n
mi n d ch trên c s ph n ng đ c hi u kháng nguyên – kháng th ; iii) c m bi n
DNA trên c s lai hóa đ c hi u gi a hai s i đ n DNA có trình t b sung nhau.
Trong phát hi n vi rút gây b nh, hai lo i c m bi n sinh h c th

ng đ

c t p trung

nghiên c u h n c là: c m bi n mi n d ch và c m bi n DNA. V i m c tiêu phát tri n
và ch t o ra lo i vi c m bi n sinh h c đ có th

ng d ng trong phát hi n vi rút gây

b nh t i Vi t Nam, đ ng th i ph c v cho lu n v n cao h c, tác gi đã đ xu t đ
c

ng đ tài ‘‘C m bi n sinh h c trên c s polyme d n trong phát hi n vi rút gây

b nh’’ v i các nhi m v :
- Ch t o b vi c m bi n thích h p cho vi c phân tích, dò tìm nh ng m u sinh
h c có n ng đ th p.
- L a ch n lo i polyme d n thích h p, t

ng thích v i m u sinh h c và có kh

n ng t o màng trên b m t vi c m bi n, không tham gia vào các ph n ng sinh hóa
gi a ph n t sinh h c đ u dò và ph n t đích.
- L a ch n ph n t sinh h c đ u dò, c đ nh lên b m t vi c m bi n
-

o đ c th nghi m v i m u phân tích đ xác đ nh đ nh y và các thông s

khác c a vi c m bi n trong phát hi n vi rút gây b nh.
c

ng này đã đ

c Tr

ng

i h c công ngh -

i h c Qu c gia Hà N i

ch p thu n.
D

is h

ng d n khoa h c c a Ti n s Mai Anh Tu n, s giúp đ c a nhóm

nghiên c u c m bi n sinh h c - Vi n

ào t o Qu c t v Khoa h c V t li u, Tr

ng

i h c Bách khoa Hà N i, tác gi đã tri n khai nghiên c u phát tri n lo i c m bi n


2

sinh h c DNA trên c s polyme d n 3-aminopropyl–triethoxy-silance (APTS) đ phát
hi n axit nucleic c a vi rút Herpes týp 1 và 2 (HSV) thông qua vi c dò tìm đo n DNA
đ c hi u c a lo i vi rút này. So v i m c tiêu và nhi m v đ ra, tác gi đã hoàn thành
đ tài v i nh ng k t qu kh quan. M t s k t qu đã đ
chí, h i ngh chuyên ngành trong n

c tác gi công b trên các t p

c và Qu c t . Tác gi nh n th y r ng, lo i c m

bi n này có đ nh y r t cao, tín hi u lai hóa gi a DNA đ u dò trên b m t vi c m bi n
và DNA b sung xu t hi n r t nhanh kho ng 1 phút t i n ng đ 0,5nM

nhi t đ

phòng và k t qu c ng đ t đ

nhi t đ

ct

ng t đ i v i DNA đ c hi u c a HSV

50°C – 55°C. Tuy nhiên, tín hi u đ u ra thu đ

c t s lai hóa th

ng xu t hi n r t

nh , do đó đ đ a vào ng d ng th c t c n ph i có nghiên c u sâu h n, đ ng b h n
đ khuy ch đ i, t ng tín hi u đ u ra. Quá trình th c nghi m, các k t qu c ng nh
nh ng bàn lu n đ

c tác gi trình bày chi ti t trong lu n v n.

B c c c a lu n v n đ
Ch

c trình bày nh sau :

ng 1 . T ng quan
Trong ch

ng này, tác gi trình bày t ng quan v l ch s , khái ni m c ng nh

nguyên lý, phân lo i c a c m bi n sinh h c. Bên c nh đó, nh ng ki n th c v polyme
d n, cách l a ch n, c đ nh polyme d n lên b m t c m bi n và m t s khái ni m c
b n v vi rút h c, sinh h c phân t c ng đ
Ch

c tác gi nêu ra.

ng 2. Ch t o c m bi n sinh h c
Ch

ng này mô t toàn b quá trình th c nghi m đ th c hi n đ tài. B t đ u t

vi c l a ch n v t li u, hóa ch t, ti p theo là mô t vi c thi t k , ch t o lo i c m bi n
vi đi n c c th h m i lo i 70µm x 30µm và 20µm x 20µm, quá trình l a ch n, pha
t p và t ng h p polyme d n lên b m t vi c m bi n. Cu i cùng, mô t cách c đ nh
ph n t sinh h c đ u dò lên vi c m bi n, đo đ c các thông s và thi t l p h đo,
ph

Ch

ng th c đo đ i v i m u phân tích.
ng 3. K t qu và bàn lu n

Trong ch ng này, toàn b k t qu c a quá trình th c nghi m đ c trình bày và
nh ng bàn lu n c a tác gi đ i v i nh ng k t qu đ t đ c, t đó đ a ra k t lu n và
nh ng ý ki n đ xu t.


3

CH

NG 1. T NG QUAN

1.1 L ch s phát tri n c m bi n sinh h c
Giáo s Lenan C Clark là ng i đ u tiên phát minh ra đi n c c oxy n m 1956,
kh i ngu n c a Công ngh c m bi n sinh h c [16]. N m 1962, t i H i th o khoa h c

c a Vi n Hàn lâm Khoa h c New York, ông đã đ xu t m t h

ng nghiên c u m i :

‘‘Làm th nào đ t o ra c m bi n đi n hóa thông minh h n (pH, phân th , đ
d n,…) ?’’ khi đ a thêm vào ‘‘l p chuy n ti p enzyme gi ng nh màng k p gi a, theo
ki u x p ch ng’’. Khái ni m này sau đó đ

c làm sáng t b ng th c nghi m khi ng

ta s d ng đi n c c oxy Clark đ b y men đ
th m tách.

gi m c a n ng đ oxy đo đ

i

ng (glucose oxidase) thông qua màng
c t l v i n ng đ glucose. Trong m t

công trình công b n m 1962, Clark và Lyon l n đ u tiên đ a ra khái ni m đi n c c
enzyme [15]. Updike và Hick đã tri n khai chi ti t th c nghi m đ ch ng minh s c n
thi t đ t o ra đi n c c enzyme ch c n ng đo n ng đ glucose m c dù nh n đ

cr t

nhi u phê bình t các nhà chuyên môn [59]. N m 1969, Guilbault và Montalvo công
b chi ti t v đi n c c enzyme b ng ph

ng pháp đo th [28]. Hai ông mô t c m bi n

urea trên c s c đ nh ch t urease t i đi n c c màng ch t l ng l c l a amoniac. N m
1975, ý t

ng c a Clark tr thành hi n th c khi công ty thi t b Yellow Springs (Ohio,

M ) gi i thi u l n th hai (l n đ u n m 1973) v thi t b phân tích glucose s d ng
ph

ng pháp đo th . N m 1974, Cooney và đ ng nghi p đ xu t s d ng b chuy n

đ i nhi t cho c m bi n sinh h c. Nh ng thi t b m i lo i này đ

c đ t tên t

ng ng

v i đ u dò enzyme nhi t [18] và men c p nhi t [40].
S phát tri n c m bi n sinh h c đã t o b

c đ t phá m i vào n m 1975, khi

Divis cho r ng có th s d ng vi khu n làm y u t nh n bi t sinh h c trong các đi n
c c vi sinh v t đ đo n ng đ c n [25]. Công trình c a ông đã kh i đ u cho h
nghiên c u chính

ng

Nh t B n nh m t o ra các lo i c m bi n sinh h c có kh n ng ng

d ng trong ki m soát môi tr

ng và Công ngh sinh h c. C ng trong n m 1975,

Lubbers và Optitz đ a ra thu t ng optode đ mô t c m bi n s i quang h c có g n
ch t ch th đ đo oxit cácbon II (CO2) ho c oxy. Trên c s đó, hai ông và đ ng
nghi p đã t o ra c m bi n sinh h c tín hi u quang đ đo n ng đ c n [60].
N m 1976, Clemens và đ ng nghi p đã tích h p thành công c m bi n sinh h c
glucose đi n hoá trong tuy n t y nhân t o [17], sau đó đ

c Miles (Elkhart) tung ra th


67

TÀI LI U THAM KH O
TÀI I U TI NG VI T
1. Lê Huy Chính, Nguy n V Trung. C m nang vi sinh v t y h c. Nxb Y h c,
2005
2. H Hu nh Thùy D

ng. Sinh h c phân t . Nxb Giáo D c, 2003

3. Nguy n Kim Giao. Ch n đoán vi rút gây b nh trên ng

i b ng ph

ng pháp

ng, Nguy n Th Thanh Th y, Ph

ng ình

Hi n vi đi n t . Nxb Y h c, 2005
4. Tr n Quang Huy, Nguy n Th Th
Tâm. Mai Anh Tu n.

ng d ng vi c m bi n DNA trong nghiên c u y sinh h c.

Tuy n t p công trình nh ng v n đ c b n c a khoa h c s s ng 2007, tr 170 171
5. Tr n Quang Huy, Nguy n Th Th

ng, Nguy n Th Thanh Th y, Ph

ng ình

Tâm. Mai Anh Tu n. Phát hi n axit nucleic c a vi rút gây b nh b ng b c m
bi n sinh h c DNA . T p chí Y h c d phòng, t p XVII, s 6 (91) 2007, tr 57 63
6. Nguy n Th Th

ng. M t s đ c đi m c a h Herpesviridae gây b nh

ng

i.

T p chí y h c d phòng (2006), s 3+4 (83), trang 54-58 và s 5 (84) trang 6467

TÀI LI U TI NG ANH
7. A.O. Scott (Ed.), Biosensors for Food Analysis, The Royal Soc. of Chem.,

Cambridge, UK, 1998
8. Alcock, S.J. and Turner, A.P.F. IEEE Engineering in Medicine and Biology,
June/July 1994, 319
9. Antje J. Baeumner et al. Biosensor for Dengue Virus Detection: Sensitive,
Rapid, and Serotype Specific. Anal. Chem., 74 (6), 2002 , 1442 -1448
10. Bansi D. Malhotra et al. Prospects of conducting polymers in biosensors.
Analytica Chimica Acta 578 (2006) 59–74
11. Bobby Pejcic, Roland De Marco. Impedance spectroscopy: Over 35 years of
electrochemical sensor optimization. Electrochimica Acta 51 (2006) 6217–
6229.


68

12. Carrascosa et al. Trac-Trends ; Anal. Chemical. 25 (3) (2006), 196-206
13. Cass, A.E.G., Francis, D.G., Hill, H.A.O., Aston, W.J., Higgins, I.J., Plotkin,
E.V., Scott, L.D.L. and Turner, A.P.F. Anal. Chem. 56, (1984), 667-671
14. Claire L. Morgan et al. Immunosensors : Technology and opportunities in
laboratory medicine. Clinical Chemistry 42 :2, 1996, 193-209
15. Clark, L.C. Jnr. Ann. NY Acad. Sci. 102, (1962) 29-45
16. Clark, L.C. Jnr. Trans. Am. Soc. Artif. Intern. Organs 2, (1956) 41- 48
17. Clemens, A.H., Chang, P.H. and Myers, R.W. Proc. Journes Ann. de
Diabtologie de l'Htel-Dieu, Paris (1976)
18. Cooney, C.L., Weaver, J.C et al. In: "Enzyme Engineering" (Eds. E.K. Pye and
L.B. Wingard Jnr.) 2, Plenum, New York. (1974) 411-417
19. Cooper, M.A.. Optical biosensors in drug discovery. Nat. Rev. Drug Discov. 1,
(2002) 515–528
20. D. C. Cullen, R. S. Sethi, C. R. Lowe. Anal. Chim. Acta 231, (1990) 33
21. D.E. Gunning et al. Performance of ultra-high-density microelectrode arrays.
Nuclear Instruments and Methods in Physics Research A 576 (2007) 215–219

22. Daniel R. Thévenot; Klara Toth et al. Pure Appl. Chem., Vol. 71, No. 12,
(1999) 2333 - 2348,
23. David O. White, Frank J.Fenner. Medical Virology. Academic Press.1994
24. Dennison, M.J. and Turner, A.P.F. Biotechnol. Adv., 1 (1995)13
25. Divis, C. Annals of Microbiology 126A, (1975)175-186
26. Frank Lammers, Thomas Scheper. Thermal Biosensors in Biotechnology.
Volume 64/1999, Springer Berlin / Heidelberg, 35 -67
27. Geoffrey C. Allen, Fabio Sorbello et al. Macro-, micro - and nano investigations on 3-aminopropyltrimethoxysilane self-assembly-monolayers,
Thin Solid Films 483 (2005) 306–311
28. Guilbault, G.G. and Montalvo, J. JACS 91 (1969) 2164-2569
29. Huy.T.Q., Thuy N.T.T., Tam P.D, Tuan M. A., and Chien N.D. Investigation of
electrochemical DNA sensor for biomedical application. Proceedings of the 2sd
International Conference on Biomedical Engineering 2007, 273 – 278
30. J. Catrlik et al. Amperometric biosensors based on two different enzyme systems
and their use for glycerol determination in samples from biotechnological


69

fermentation process. Analytica Chimica Acta ,Volume 566, Issue 1, 27 April
2006, Pages 11-18
31. J. Justin Gooding et al. Biosensor technology for detecting biological warfare
agents: Recent progress and future trends. Analytica Chimica Acta 559 (2006)
137–151
32. Jeffrey D. Newman, Anthony P.F. Turner, Home blood glucose biosensors: a
commercial perspective. Biosensors and Bioelectronics 20 (2005) 2435–2453
33. Jeremy J. Ramsden. Optical biosensors. Journal of Molecular Recognition.
Volume 10, Issue 3 , Pages 109 – 120
34. K. Covington. Pure Appl. Chem. 66 (3), (1994) 565
35. Kress-Rogers, E. "Handbook of Biosensors and Electronic Noses: Medicine,

Food and the Environment", CRC Press, Boca Raton, USA, 1996
36. L. J. Blum, P. R. Coulet. Biosensor Principles and Applications. Marcel
Dekker, New York (1991)
37. Lec, R.M. Piezoelectric biosensors: recent advances and applications.
Proceedings of the 2001 IEEE International Volume , Issue , 2001, 419 – 429
38. Liedberg, B., Nylander, C. and Lundstrm, I. Sensors and Actuators 4, (1983)
299-304
39. M.A. Tuan, T. Q. Huy, N.T.Thuong, L. H. Hoang, C. V. Thach, N. H. Hai.
DNA Enrichment by Functionalized Magnetic Nanoparticles for On-site and
Fast Detection of Virus in Biomedical Application. Journal of Korea Physical
society (accepted, to be published)
40. Mosbach, K. and Danielsson, B. Biochim. Biophys. Acta. 364, 140-145 (1974)
41. Nathalie K. Guimard et al. Conducting polymers in biomedical engineering.
Prog. Polym. Sci. 32 (2007) 876–921
42. Olivier Lazcka et al. Pathogen detection: A perspective of traditional methods
and biosensors. Biosensors and Bioelectronics 22 (2007) 1205–1217
43. P. Bergveld, D. R. Thévenot. In Advances in Biosensors, Supplement 1 (A. P.
F. Turner, ed.), p. 31. JAI Press, London, UK (1993)
44. P. V. Climent et al. Development of a new amperometric biosensor based on
polyphenoloxidase and polyethersulphone membrane. Pure Appl. Chem., Vol.
73, No. 12, 2001, pp. 1993–1999


70

45. P. Van Gerwen, W. Laureyn, G. Huyberechts, M. Op De Beeck, K. Baert, A.
Varlan, W. Sansen, L. Hermans, R. Mertens, Nanoscaled Interdigitated
Electrodes For Biochemical Sensors, Sensors and Actuators B, 49 (1-2) (1998)
pp. 73-80
46. Patolsky, F., Lieber, C.M., Nanowire Nanosensors, Materials Today (2005), 2028

47. Patolsky, F., Zheng, G., Hayden, O., Lakadamyali, M., Zhuang, X., Lieber,
C.M., Electrical detection of single viruses, Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2004),
101, 14017-14022
48. Pinar Kara a, Burcu Meric et al. Electrochemical DNA biosensor for the
detection and discrimination of herpes simplex Type I and Type II viruses from
PCR amplified real samples. Analytica Chimica Acta 518 (2004) 69–76
49. R.M.Lec. Piezoelectric biosensors: recent advances and applications.
Proceedings of the 2001 IEEE International Volume , Issue , 2001,419 – 429
50. R. Gonzalez ., B. Masquelier et al. Detection of Human Immunodeficiency
Virus Type 1 Antiretroviral Resistance Mutations by High-Density DNA Probe
Arrays. Journal of clinical microbiology (July 2004), p. 2907–2912
51. Rich, R.L. and Myszka, D.G. (2005) Survey of the year 2004 commercial
optical biosensor literature. J. Mol. Recognit. 18, 431–478;
52. Sara Rodriguez-Mozaz et al. Biosensors for environmental applications: Future
development trends. Pure Appl. Chem., Vol. 76, No. 4, 2004, pp. 723–752
53. Sergei V. Dzyadevych et al. Potentiometric Biosensors Based on ISFETs and
Immobilized CholinesterasesVolume 16, Issue 22 , ( 2004) Pages 1873 – 1882
54. Shichiri, M., Kawamori, R., Yamaski, R., Hakai, Y. and Abe, H. Lancet ii,
(1982)1129-1131
55. T Gregory Drummond et al. Electrochemical DNA sensors., Nature
Biotechnology, 2003, 1192-1199
56. T.A. Skotheim, R.L. Elsenbaumer, J. Reynold, Marcel Dekker. Handbook of
Conducting Polymers, ed., 2nd Edition, New York, 1998
57. Tarushee Ahuja et al.Biomolecular immobilization on conducting polymers for
biosensing applications. Biomaterials 28 (2007) 791–805


71

58. Turner, A.P.F. "Advances in Biosensors", I; II; Suppl. I; III. JAI Press, London,

UK, 1991; 1992; 1993; 1995
59. Updike, S.J. and Hicks, J.P. Nature 214,(1967) 986-988
60. Voelkl, K.P., Opitz, N. and Lubbers, D.W. Fres. Z. Anal. Chem. 301,(1980)
162-163
61. White, S.F. and Turner, A.P.F. In: "Encyclopedia of Bioprocess Technology:
Fermentation, Biocatalysis and Bioseparation"(Eds. M C Flickinger and S W
Drew). Wiley, New York, USA, 1997
62. Y. Han et al. Surface activation of thin silicon oxides by wet cleaning and
silanization. Thin Solid Films 510 (2006) 175 - 180
63. Y.K. Ye., J.H. Zhao. Electrochemical behavior and detection of hepatitis B
virus DNA PCR production at gold electrode. Biosensors and Bioelectronics 18
(2003) 1501-1508
64.


72

PH L C
ti p t c nghiên c u phát tri n lo i vi c m sinh h c bi n này, song song v i
quá trình ch t o vi c m bi n, thành viên trong nhóm nghiên c u c a chúng tôi đã xây
d ng và phát tri n m t h đo c m tay, có kích th c nh g n v i nh u tính n ng u
vi t h n nh m thay th h Lock in RS830, phù h p và đáp ng đ c yêu c u phân tích
c a vi c m bi n đ i v i m u n ng đ th p nh vi rút,…
Hình 4 là hình nh vi c m bi n sinh h c 20µm x 20µm đang đ
nghi m trên h đo m i

c đo đ c th

Hình 4. o đ c th nghi m vi c m bi n trên h đo m i (thi t b xách tay)