Xác định hàm lượng của Canxi, Sắt, Kẽm trong đài hoa bụp giấm bằng phương pháp phổ hấp thụ và phát xạ nguyên tử (LV thạc sĩ)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC

NGUYỄN THỊ HẠNH

XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CỦA CANXI, SẮT, KẼM
TRONG ĐÀI HOA BỤP GIẤM BẰNG PHƯƠNG PHÁP
QUANG PHỔ HẤP THỤ VÀ PHÁT XẠ NGUYÊN TỬ
Chuyên ngành: Hóa phân tích
Mã số: 60.44.01.18

LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC

Người hướng dẫn khoa học: TS. VƯƠNG TRƯỜNG XUÂN

Thái Nguyên - 2017


LỜI CẢM ƠN
Em xin chân thành cảm ơn TS.Vương Trường Xuân đã hướng dẫn em tận
tình, chu đáo trong suốt quá trình làm luận văn, giúp em hoàn thành luận văn này.
Em xin chân thành cảm ơn các thầy cô trong tổ bộ môn Hoá Phân Tích, Ban
chủ nhiệm khoa Hoá học, trường Đại học Khoa học Thái Nguyên đã giúp em hoàn
thành luận văn này.
Tôi cũng xin chân thành cảm ơn tới ban Giám đốc, lãnh đạo khoa xét nghiệm
trung tâm y tế dự phòng tỉnh Thái Nguyên đã đã tạo điều kiện cho tôi về mặt thời
gian cũng như cơ sở vật chất để tôi hoàn thiện đề tài này.
Tôi xin chân thành cảm ơn tới bạn bè, đồng nghiệp, gia đình đã quan tâm,
giúp đỡ và động viên tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn.
Tôi xin chân thành cảm ơn!

Thái Nguyên, tháng 6 năm
2017 Học viên thực hiện
Nguyễn Thị Hạnh

a


MỤC LỤC
LỜI CẢM ƠN ............................................................................................................. a
MỤC LỤC...................................................................................................................b
DANH

MỤC

CÁC

KÝ

........................................................d

HIỆU
DANH

CHỮ

VIẾT
MỤC

TẮT
CÁC

BẢNG.......................................................................................... e
DANH MỤC CÁC HÌNH ........................................................................................... f
MỞ ĐẦU.................................................................................................................. 1
Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU..................................................................... 2
1.1. Giới thiệu chung về cây bụp giấm................................................................... 2
1.1.1. Tên gọi và mô tả.............................................................................................. 2
1.1.2. Phân bố............................................................................................................ 2
1.1.3. Thành phần hoá học của đài hoa bụp giấm...................................................... 3
1.1.4. Công dụng đài hoa bụp giấm........................................................................... 3
1.2. Sơ lược về các kim loại Ca, Fe, Zn.................................................................. 4
1.2.1. Canxi............................................................................................................... 4
1.2.2. Sắt.................................................................................................................... 6
1.2.3. Kẽm................................................................................................................. 7
1.3. Một số phương pháp xác định canxi, sắt, kẽm................................................. 8
1.3.1. Phương pháp phân tích khối lượng.................................................................. 8
1.3.2. Phương pháp phân tích thể tích........................................................................ 9
1.3.3. Phương pháp phổ hấp thụ phân tử UV - VIS................................................... 9
1.3.4. Phương pháp cực phổ.................................................................................... 10
1.3.5. Phương pháp Von-Ampe hoà tan................................................................... 10
1.3.6. Phương pháp phổ phát xạ nguyên tử (ICP - OES)......................................... 11
1.3.7. Phương pháp phổ hấp thụ nguyên tử.............................................................. 11
1.4. Tình hình nghiên cứu trong nước và trên thế giới về cây bụp giấm...............17
1.4.1. Tình hình nghiên cứu trong nước................................................................... 17
1.4.2. Tình hình nghiên cứu trên thế giới................................................................. 17
Chương 2: THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.................20
2.1. Thiết bị, hóa chất, dụng cụ............................................................................. 20
b

2.1.1. Thiết bị........................................................................................................... 20
2.1.2. Dụng cụ......................................................................................................... 20
2.1.3. Hoá chất......................................................................................................... 20
2.2. Phương pháp nghiên cứu............................................................................... 21
2.3. Phương pháp lấy mẫu, bảo quản và xử lý mẫu............................................... 21
2.4. Phương pháp xử lý số liệu, tính toán.............................................................. 26
2.5. Nội dung nghiên cứu...................................................................................... 26
2.5.1...............................................................................................................Chọ
n nền và môi trường phân tích....................................................................... 26
2.5.2. Khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính của canxi, sắt, kẽm...............................26
2.5.3. Đánh giá sai số, độ lặp, khoảng tin cậy của phép đo, xác định LOD, LOQ.....26
2.5.4. Xác định hàm lượng canxi, sắt, kẽm các mẫu đất bằng phương pháp đường
chuẩn 28
2.5.5...............................................................................................................Kiể
m tra độ chính xác của kết quả phân tích bằng phương pháp thêm chuẩn........28
Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN..................................... 29
3.1. Phương pháp đường chuẩn đối với phép đo AAS.......................................... 29
3.1.1...............................................................................................................Khả
o sát khoảng tuyến tính của nồng độ các kim loại.......................................... 29
3.1.2...............................................................................................................Xây
dựng đường chuẩn của Fe, Zn, Ca................................................................. 32
3.1.3. Đánh giá sai số và độ lặp và giới hạn phát hiện (LOD), giới hạn định

lượng

(LOQ) của phương pháp AAS................................................................................. 36
3.2. Phân tích mẫu thực tế bằng phương pháp đường chuẩn................................. 39
3.2.1. Kết quả xác định hàm lượng kim loại nặng theo phương pháp đường chuẩn...39
3.2.2. Xác định hàm lượng kim loại bằng phương pháp thêm chuẩn.......................45
KẾT LUẬN............................................................................................................ 50

TÀI LIỆU THAM KHẢO..................................................................................... 51

b


DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU CHỮ VIẾT TẮT
STT

Từ viết tắt

1

AAS

2

Abs

3

AES

4

F-AAS

5

GF-AAS

6

HCL

7

HPLC

8

ICP-OES

9

UV - Vis

10

LOD

11

LOQ

12

ppb

13

ppm

Tên đầy đủ
Atomic Absorption Spectrometry
(Phổ hấp thụ nguyên tử)
Absorbance
(Độ hấp thụ)
Atomic Emission Spectrometry
(Phổ phát xạ nguyên tử)
Flame- Atomic Absorption Spectrometry
(Phổ hấp thụ nguyên tử ngọn lửa)
Graphite Furnace- Atomic Absorption Spectrometry
(Phổ hấp thụ nguyên tử không ngọn lửa)
Hollow Cathode Lamp
(Đèn catot rỗng)
High Performance Liquid Chromatography
(Sắc kí lỏng hiệu năng cao)
Optical Emission Spectroscopy
(Quang phổ phát xạ)
Ultra Violet - Visible
Limit of detection
(Giới hạn xác định)
Limit of quantitation
(Giới hạn định lượng)
Part per billion
Phần tỷ
Part per million
Phần triệu

…….

d


DANH MỤC CÁC BẢNG
Bảng 2.1. Các mẫu thu thập được............................................................................ 22
Bảng 3.1. Các điều kiện đo phổ của Ca, Fe, Zn....................................................... 29
Bảng 3.2. Kết quả khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính của Ca............................... 30
Bảng 3.3. Kết quả khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính của Fe................................31
Bảng 3.4. Kết quả khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính của Zn............................... 32
Bảng 3.5. Kết quả xác định sai số của phương pháp với phép đo Ca.......................37
Bảng 3.6. Kết quả xác định sai số của phương pháp với phép đo Fe.......................37
Bảng 3.7. Kết quả xác định sai số của phương pháp với phép đo Zn.......................38
Bảng 3.8. Kết quả xác định nồng độ Ca trong mẫu theo đường chuẩn....................40
Bảng 3.9. Kết quả xác định nồng độ Fe trong mẫu theo đường chuẩn.....................42
Bảng 3.10. Kết quả xác định nồng độ Zn trong mẫu theo đường chuẩn..................43
Bảng 3.11. Kết quả tính toán nồng độ kim loại trong 100g mẫu khô.......................44
Bảng 3.12. Kết quả phân tích Ca bằng phương pháp thêm chuẩn............................ 45
Bảng 3.13. Kết quả phân tích Fe bằng phương pháp thêm chuẩn............................45
Bảng 3.14. Kết quả phân tích Zn bằng phương pháp thêm chuẩn............................ 46
Bảng 3.15. Kết quả phân tích phương sai hàm lượng Ca trong đài hoa
bụp giấm................................................................................................ 47
Bảng 3.16. Kết quả phân tích phương sai hàm lượng Fe trong đài hoa bụp

giấm

................................................................................................................ 47
Bảng 3.17. Kết quả phân tích phương sai hàm lượng Zn trong đài hoa
bụp giấm................................................................................................ 48

e


DANH MỤC CÁC HÌNH

Hình 1.1. Hình ảnh cây và đài hoa bụp giấm............................................................. 2
Hình 1.2. Một số sản phẩm làm từ đài hoa bụp giấm................................................ 3
Hình 1.3. Hình ảnh đài hoa bụp giấm sấy khô........................................................... 3
Hình 1.4. Đồ thị của phương pháp đường chuẩn..................................................... 15
Hình 1.5. Đồ thị của phương pháp thêm chuẩn....................................................... 16
Hình 2.1. Thiết bị phá mẫu của Italia Velp - DK6................................................... 20
Hình 2.2. Máy quang phổ hấp thụ nguyên tử Shimadzu AA -6300.........................21
Hình 2.4. Sơ đồ quy trình xử lý mẫu xác định hàm lượng sắt và kẽm.....................24
Hình 2.5. Sơ đồ quy trình xử lý mẫu xác định hàm lượng canxi.............................25
Hình 3.1. Đồ thị khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính của Ca..................................30
Hình 3.2. Đồ thị khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính của Fe..................................31
Hình 3.3. Đồ thị khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính của Zn..................................32
Hình 3.4. Đường chuẩn của Ca................................................................................ 34
Hình 3.5. Đường chuẩn của Fe................................................................................ 35
Hình 3.6. Đường chuẩn của Zn................................................................................ 36
Hình 3.7. Đồ thị biểu diễn nồng độ các chất trong đài hoa theo tháng.................... 46

f


MỞ ĐẦU

Từ năm 1992, cây bụp giấm đã du nhập vào Việt Nam và được đỡ đầu bởi
nhà khoa học Mai Thị Tấn. Bà đã nhân giống loại cây này trên toàn quốc và đã điều
chế từ bụp giấm như trà, mứt, rượu, nước cốt quả…Những sản phẩm này vừa là

thực phẩm vừa có nhiều tác dụng dược lí được công nhận bởi chính người sử dụng
nó nên bụp giấm ngày càng được ưa chuộng và trở nên gần gũi hơn trong đời sống .
Đài hoa bụp giấm là một loại dược liệu rất có lợi cho sức khỏe. Tính theo
hàm lượng chất khô đài hoa bụp giấm chứa khoảng 15% anthocyanin, axit hữu cơ
khoảng 15-30%, các vitamin A, B1, B2, C, E, F và nhiều loại khoáng chất như sắt,
đồng, canxi, magie, kẽm [1]. Ngoaì ra Bụp giấm coǹ có tać dung phòng trị nhiều
bệnh: tim mạch, cao huyết áp, tiểu đường, suy thận, suy tim, hạn chế cholesterol
trong máu, ngăn ngừa một số bệnh ung thư, hạn chế béo phì, chống lão hóa,... [2].
Để đa dạng hơn về nghiên cứu thành phần hóa học của loại cây này nên
chúng tôi thực hiện đề tài nghiên cứu “Xác định hàm lượng của Canxi, Sắt, Kẽm
trong đài hoa bụp giấm bằng phương pháp phổ hấp thụ và phát xạ nguyên tử”
Đề tài thực hiện nhằm phân tích xác định hàm lượng canxi, sắt, kẽm trong
đài hoa bụp giấm với những mẫu thu thập được tại tỉnh Thái Nguyên.

8


Chương 1
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Giới thiệu chung về cây bụp giấm
1.1.1. Tên gọi và mô tả
Tên khoa học là Hibiscus sabdariffa Linn.Tên thường gọi là atiso đỏ, bụp
giấm, hoa vô thường, hoa lạc thần, cây đay Nhật….
Cây bụp giấm có tên khoa học là Hibiscus sabdariffa Linn, thuộc họ bông.
Cây cao từ 1,5-2m, thân màu lục hoặc đỏ tía, phân nhánh gần gốc, cành nhẵn hoặc
hơi có lông. Lá mọc so le, lá ở gốc nguyên, lá phía trên chia 3-5 thùy hình chân vịt,
mép có răng cưa. Hoa đơn độc, mọc ở nách, gần như không có cuống, đường kính
từ 8-10cm. Tràng hoa màu vàng hồng hay tía, có khi trắng. Quả nang hình trứng, có
lông thô mang đài màu đỏ sáng tồn tại bao quanh quả. Cây ra hoa đúng vụ và tháng
9 đến tháng 11, đài hoa bụp giấm chín rất nhanh và chỉ được thu hái trong vòng 1520 ngày sau khi hoa nở, khi chúng còn mềm, không nhăn héo và có mầu đỏ sẫm. [1]

Hình 1.1. Hình ảnh cây và đài hoa bụp giấm
1.1.2. Phân bố
Cây bụp giấm có nguồn gốc ở Trung Mỹ và Bắc Phi, sau lan sang Ấn Độ,
Malaysia, Philippin, Indonexia, Thái Lan.
Ở nước ta, cây được trồng thử nghiệm để phủ đất trống, đồi trọc cho kết quả
ở Hà Tây, Hoà Bình, Bắc Giang, Thái Nguyên, Ba Vì và một số tỉnh khác. Tuy
nhiên, cây được trồng thành công ở Việt Nam chủ yếu thuộc các tỉnh miền trung,
thích hơp với đất đồi núi và trung du.[1]


1.1.3. Thành phần hoá học của đài hoa bụp giấm.
Đài hoa bụp giấm giầu về acid và protein. Các acid chính tan trong nước
là acid citric, acid malic, acid tartric, acid hibiscus. Chúng cũng chứa gossypetin
và clorid hibiscin là những chất có tính kháng sinh. Đài hoa này có chất màu đỏ
tím chiết ra chứa nhiều sinh tố A, vitamin B1, C, E... và nhiều chất a-xít hữu cơ
khác. Ngoài ra trong đài quả còn chứa nhiều khoáng chất như Canxi, sắt, kẽm,
đồng, kali, natri...[2]
1.1.4. Công dụng đài hoa bụp giấm
Theo Đông y, bụp giấm có vị chua, tính mát; có tác dụng thanh nhiệt, giải
khát, lợi tiểu, lợi mật. Còn theo tài liệu nước ngoài, những nghiên cứu trong phòng
thí nghiệm đã chứng minh hoạt chất từ bụp giấm có tính kháng khuẩn, kháng nấm,
chống viêm, chống ôxy hóa (sự lão hóa của cơ thể), giúp ngăn ngừa bệnh tim mạch,
tăng cường chức năng tiêu hóa, nhuận tràng, hạ huyết áp, làm giảm cholesterol trong
máu, chống xơ vữa động mạch, giảm sự đọng lipid ở gan và bảo vệ tế bào gan. [1]

Hình 1.2. Một số sản phẩm làm từ đài hoa bụp giấm

Hình 1.3. Hình ảnh đài hoa bụp giấm sấy khô

1.2. Sơ lược về các kim loại Ca, Fe, Zn
1.2.1. Canxi
1.2.1.1. Trạng thái tự nhiên và trạng thái vật lý.
Canxi (tiếng la tinh là Calcium) là nguyên tố hoá học có số thứ tự là 20 trong
bảng tuần hoàn.
Kim loại canxi có màu trắng bạc. Mặc dù rất cứng nhưng canxi vẫn có thể dãn
dài được. Nóng chảy ở nhiệt độ 8500C và sôi ở nhiệt độ 14820C. Canxi có tỉ trọng
1.55g/cm3. Khi ở trong dung dịch ion canxi cho nhiều vị giác như mặn, chua. [6]
1.2.1.2. Tính chất hóa học.
Ca có tính chất của một kim loại kiềm thổ, có tính khử. Khi đun nóng canxi
tác dụng dễ dàng với hidro tạo hiđrua
Ca + H2 → CaH2
Khi để trong không khí và ở nhiệt độ thường, Ca nhanh chóng tạo nên lớp
màu vàng nhạt, gồm oxit một phần peoxit và nitrua. Trong không khí ẩm, tạo nên
lớp cacbonat vì vậy cần cất giữ kim loại này trong bình kín hoặc ngâm trong dầu
hoả khan.
Khi đốt nóng trong không khí, Ca cháy tạo nên oxit :
2Ca + O2 → 2CaO
Khi đun nóng, Ca tương tác mãnh liệt với halogen, nitơ, S, P, C, Si, ngoài tạo
oxit còn có nitrua được tạo nên:
Ca3N2 + 6H2O→ 3Ca(OH)2 + 2NH3
Canxi tương tác dễ dàng với nước giải phóng khí hidro và càng dễ dàng
hơn khi tương tác với axit. Canxi có thể tan trong amoniac lỏng cho dung dịch màu
xanh thẫm. [6][14]
1.2.1.3. Vai trò của canxi đối với cơ thể người.
Canxi đối với hệ thần kinh: Canxi cũng có vai trò vô cùng quan trọng đối
với hệ thần kinh. Các Ion Canxi có vai trò quan trọng trong việc truyền dẫn thần
kinh, khi bị thiếu hụt canxi, các hoạt động truyền dẫn của hệ thần kinh bị ức chế,
công năng hưng phấn và công năng ức chế của hệ thần kinh bị suy giảm.

Trẻ em thiếu canxi sẽ có biểu hiện quấy khóc về đêm, ngủ dễ giật mình,
không tập trung tinh thần, dễ nổi cáu và rối loạn chức năng vận động.
Người già thiếu canxi dễ bị suy nhược thần kinh, khả năng điều tiết thần kinh
bị suy giảm, trí nhớ kém, tinh thần không ổn định, đau đầu, tính khí thất thường…
Canxi đối với hệ miễn dịch: Hệ miễn dịch đóng vai trò như một tấm lá chắn
bảo vệ chúng ta khỏi các tác nhân gây bệnh đồng thời phát sinh phản ứng miễn dịch
với một số bệnh đã mắc.
Canxi đối với hệ cơ bắp: Các ion canxi đóng vai trò vô cùng quan trọng
trong các hoạt động co giãn của cơ bắp, thiếu hụt canxi sẽ làm khả năng đàn hồi của
cơ bắp kém đi.
Vai trò của canxi với cơ tim: Thiếu hụt canxi khiến cho khả năng co bóp ở
tim kém hơn, chức năng truyền máu kém khiến máu không được bơm đầy đủ đến
các cơ quan, gây cảm giác hồi hộp, vãi mồ hôi, thở dốc…
Vai trò của canxi với “cơ trơn”: Thiếu hụt canxi sẽ ảnh hưởng đến chức năng
tiêu hóa, gây cảm giác chán ăn, đầy bụng, táo bón, sản phụ sau khi sinh nở tử cung
co chậm và yếu, khó đẻ, đẻ non…người già đái dầm.
Biểu hiện thiếu canxi ở cơ bắp: Khi thiếu hụt canxi ở cơ bắp sẽ khiến cơ thể
mệt mỏi, yếu sức, chân tay rã rời, thể lực kém… nếu bạn gặp phải những biểu hiện
trên, hãy bổ sung canxi cho cơ thể ngay lập tức.
Những công dụng khác của canxi:
- Canxi có vai trò quan trọng trong việc làm đông máu, giảm thiểu tình trạng máu
thấm ra ngoài mao mạch.
- Canxi có tác dụng kích hoạt các enzyme, làm giảm mỡ máu và giảm béo phì hiệu
quả.
- Canxi giúp điều trị một số chứng bệnh xuất huyết và bệnh dị ứng.
- Ion canxi còn có tác dụng kết dính các tế bào lại với nhau. Nếu trong dịch thể thiếu
ion canxi thì tế bào kém khả năng kết dính, tổ chức khí quan sẽ kém hoàn chỉnh, từ
đó công năng của các khí quan sẽ bị suy giảm.

- Ion canxi giúp bảo vệ đường hô hấp: Thường xuyên sử dụng canxi sẽ giúp người
mắc bệnh phế quản mãn tính hoặc bệnh phổi sớm đẩy lùi bệnh tật. [3]


1.2.2. Sắt
1.2.2.1. Trạng thái tự nhiên và tính chất vật lý
Sắt (tiếng la tinh là iron) nằm ở vị trí thứ 26 trong bảng tuần hoàn, phân
nhóm VIIIB chu kỳ 4. Sắt là một trong những nguyên tố phổ biến nhất, đứng hàng
thứ tư sau O, Si, và Al. Trữ lượng sắt trong vỏ Trái đất là 1.5%.
Sắt là kim loại có màu trắng hơi xám, dẻo, dễ rèn, dễ dát mỏng, dễ kéo sợi,
dẫn nhiệt và dẫn điện kém hơn đồng và nhôm. Nhiệt độ nóng chảy của sắt là
15360C. [7]
1.2.2.2. Về tính chất hoá học
Sắt có hoạt tính hóa học trung bình. Ở điều kiện thường nếu không có hơi
ẩm, sắt không tác dụng rõ rệt ngay với những nguyên tố không kim loại điển hình
như O2 , S, Cl2, Br2 vì có màng ôxit bảo vệ, nhưng khiđun nóng, phản ứng xảy ra
mãnh liệt, nhất là khi kim loại ở trạng thái chia nhỏ. Ở trạng thái rất nhỏ Fe còn là
chất tự cháy,có nghĩa là nó có thể cháy trong không khí ở ngay nhiệt độ thường.
Khi đun nóng trong không khí khô, sắt tạo nên Fe 2O3 và ở nhiệt độ cao hơn,
tạo nên Fe3O4.
Fe đều tan trong dung dịch axit giải phóng khí H 2 và tạo muối. Với axit
sunfuric đặc và axit nitric đặc không tác dụng với sắt mà còn thụ động hoá nó khi
nguội. [7, 14]
Đối với không khí và nước, Fe tinh khiết bền. Ngược lại sắt có chứa tạp chất
bị ăn mòn dần dưới tác dụng đồng thời của hơi ẩm, khí CO 2 và khí O2 trong không
khí tạo nên gỉ sắt.
2Fe + 3/2O2 + nH2O → Fe2O3.nH2O
1.2.2.3. Tác dụng sinh hóa và vai trò của sắt đối với cơ thể người.
Sắt là một nguyên tố vi lượng dinh dưỡng rất quan trọng cho cơ thể con
người và động vật. Hầu hết lượng sắt có trong cơ thể đều tồn tại trong các tế bào

máu, chúng kết hợp với protein để tạo thành hemoglobin. Sắt tham gia vào cấu tạo
hemoglobin (là một muối phức của prophirin với ion sắt). Hemoglobin làm nhiệm
vụ tải oxi từ phổi đến các mao quản của các cơ quan trong cơ thể, ở đây năng lượng


được giải phóng ra. Khi con người bị thiếu sắt, hàm lượng hemoglobin bị giảm
xuống và làm cho lượng oxi tới các tế bào cũng giảm theo. Từ đó khi cơ thể bị thiếu
máu do thiếu hụt sắt, con người thường bị mệt mỏi, đau đầu, mất ngủ... hoặc làm
giảm độ phát triểnvà thông minh của trẻ em.
Mặc dù các nhà khoa học đã nghiên cứu và cũng chưa đưa ra được ngưỡng
gây hại do sự thiếu sắt hoặc thừa sắt. Để phòng tránh sự thay đổi lượng sắt trong cơ
thể, người ta thiết lập một giá trị tạm thời cho lượng tiếp nhận tối đa hằng ngày có
thể chịu được là 0,8 mg/kg thể trọng. [3]
1.2.3. Kẽm
1.2.3.1. Trạng thái tự nhiên và trạng thái vật lý.
Kẽm (tiếng la tinh là zinc) nằm ở vị trí thứ 30 trong bảng tuần hoàn thuộc
phân nhóm IIB.
Trạng thái tự nhiên: kẽm là nguyên tố tương đối phổ biến. Trong vỏ Trái Đất
kẽm chiếm khoảng 75ppm. Đất chứa 5 ÷ 77ppm kẽm với giá trị trung bình là
64ppm. Nước biển chứa 30ppb và trong khí quyển chứa 0,1 ÷ 4µg/m. Ngoài ra kẽm
có trong tất cả các loài vật sống, cơ thể con người chứa đến 0,001% kẽm ở răng và
hệ thần kinh và tuyến sinh dục.
Kẽm là kim loại có màu trắng bạc nhưng ở trong không khí ẩm nó dần bị
bao phủ bởi màng oxit nên mất ánh kim. Là kim loại mềm dễ nóng chảy, dễ bay hơi
tương đối cứng và giòn. Nhiệt độ nóng chảy của kẽm là 419,5 0C nhiệt độ sôi là
9060C. [7]
1.2.3.2. Tính chất hóa học
Zn là kim loại tương đối hoạt động. Trong không khí ẩm, kẽm bền ở nhiệt độ
thường do có màng oxit bảo vệ. Nhưng ở nhiệt độ cao, kẽm cháy mãnh liệt tạo
thành ngọn lửa màu lam và sáng chói.

Kẽm tác dụng với halogen, lưu huỳnh và các nguyên tố không kim loại khác
như photpho, selen…
Ở nhiệt độ thường, Zn bền với nước vì có màng oxit bảo vệ, ở nhiệt độ cao
khử hơi nước thành oxit:
Zn + H2O → ZnO + H2


Có thế điện cực âm, kẽm dễ dàng tác dụng với axit không phải là chất oxi
hoá giải phống khí hidro.
Kẽm có thể tan trong dung dịch kiềm giải phóng hidro giống như nhôm:
Zn + 2H2O + 2 OH-→[ Zn(OH)42-] + H2
[7].
1.2.3.3. Vai trò của kẽm đối với cơ thể người.
Kẽm tham gia hoạt hoá khoảng 70 enzym của nhiều hoạt đông sinh lý, sinh
hoá của cây. Nó là một nguyên tố có ảnh hưởng to lớn đối với năng suất cây trồng.
Thực vật hấp thụ kẽm ở dạng ion Zn2+. Tác dụng sinh lý của kẽm:
Zn cần cho sự hoạt động của nhiều enzym đường phân (hexokinase,
andolase…)
Zn hoạt hoá enzym hô hấp cacboanhydrase, xúc tác phản ứng loại nước của
hydrat oxit cacbon. Phản ứng này cung cấp CO2 cho quá trình quang hợp.
Zn xúc tác quá trình tổng hợp triptophan, protein, axit indolilaxetic và cần
cho quá trình sử dụng P vô cơ thành P hữu cơ trong thành phần của axit nucleic, các
nucleotit.
Mặc dù kẽm là vi chất cần thiết cho sức khỏe, tuy nhiên nếu hàm lượng kẽm
vượt quá mức cần thiết sẽ có hại cho sức khỏe. Hấp thụ quá nhiều kẽm làm ngăn
chặn sự hấp thu đồng và sắt. Ion kẽm tự do trong dung dịch là chất có độc tính cao
đối với thực vật, động vật và đặc biệt là đối với người. [3]
1.3. Một số phương pháp xác định canxi, sắt, kẽm
Hiện nay có rất nhiều phương pháp khác nhau để xác định canxi, sắt, kẽm
như phương pháp phân tích khối lượng, phân tích thể tích, điện hoá, phổ phân tử

UV - VIS, phổ phát xạ nguyên tử (AES), phổ hấp thụ nguyên tử ngọn lửa (F-AAS)
và không ngọn lửa (GF-AAS), phương pháp ICP - OES,.… Dưới đây là một số
phương pháp xác định canxi, sắt, kẽm.
1.3.1. Phương pháp phân tích khối lượng
Phương pháp phân tích khối lượng là phương pháp cổ điển, độ chính xác có
thể đạt tới 0,1%. Cơ sở của phương pháp là sự kết tủa định lượng của chất phân tích
với một thuốc thử thích hợp.


1.3.2. Phương pháp phân tích thể tích
Phương pháp phân tích thể tích dựa trên sự đo thể tích dung dịch thuốc thử
để biết nồng độ chính xác (dung dịch chuẩn) được thêm vào dung dịch chất định
phân để tác dụng đủ toàn bộ lượng chất định phân đó. Thời điểm thêm lượng thuốc
thử tác dụng với toàn bộ chất định phân gọi là điểm tương đương. Để nhận biết
điểm tương đương, người ta dùng các chất gây ra hiện tượng có thể quan sát bằng
mắt gọi là các chất chỉ thị.
1.3.3. Phương pháp phổ hấp thụ phân tử UV - VIS
Phương pháp này chính là phương pháp phổ hấp thụ phân tử trong vùng UV
- VIS. Ở điều kiện thường, các phân tử, nhóm phân tử của chất bền vững và nghèo
năng lượng. Đây là trạng thái cơ bản. Nhưng khi có một chùm sáng với năng lượng
thích hợp chiếu vào thì các điện tử hoá trị trong các liên kết (л, ∂ , n) sẽ hấp thụ
năng lượng chùm sáng, chuyển lên trạng thái kích thích với năng lượng cao hơn.
Hiệu số giữa hai mức năng lượng (cơ bản Eo và kích thích Em) chính là năng lượng
mà phân tử hấp thụ từ nguồn sáng để tạo ra phổ hấp thụ phân tử của chất.
Nguyên tắc: Phương pháp xác định dựa trên việc đo độ hấp thụ ánh sáng của
một dung dịch phức tạo thành giữa ion cần xác định với một thuốc thử vô cơ hay
hữu cơ trong môi trường thích hợp khi được chiếu bởi chùm sáng. Phương pháp
định lượng phép đo:
A = K.C
Trong đó:

A: độ hấp thụ quang
K: hằng số thực nghiệm
C: nồng độ nguyên tố phân tích
Phương pháp này cho phép xác định nồng độ chất ở khoảng 10-5 - 10-7M và
là một trong các phương pháp được sử dụng khá phổ biến.
Phương pháp trắc quang có độ nhạy, độ ổn định và độ chính xác khá cao,
được sử dụng nhiều trong phân tích vi lượng. Tuy nhiên với việc xác định Fe, Zn,


Pb thì lại gặp rất nhiều khó khăn do ảnh hưởng của một số ion kim loại tương tự.
Khi đó phải thực hiện các công đoạn che, tách phức tạp. [11]
1.3.4. Phương pháp cực phổ
Nguyên tắc: Người ta thay đổi liên tục và tuyến tính điện áp đặt vào 2 cực để
khử các ion kim loại, do mỗi kim loại có thế khử khác nhau. Thông qua chiều cao
của đường cong Von-Ampe có thể định lượng được ion kim loại trong dung dịch ghi
cực phổ. Vì dòng giới hạn Igh ở các điều kiện xác định tỉ lệ thuận với nồng độ ion
trong dung dịch ghi cực phổ theo phương trình:
I = k.C
Trong đó:

I: là cường độ giòng điện giới hạn.
k: Hằng số thực nghiệm
C: là nồng độ ion trong dung dịch.

Phương pháp này sử dụng điện cực giọt thuỷ ngân rơi làm cực làm việc,
trong đó thế được quét tuyến tính rất chậm theo thời gian (thường 1 - 5 mV/s) đồng
thời ghi dòng là hàm của thế trên cực giọt thuỷ ngân rơi. Sóng cực phổ thu được có
dạng bậc thang, dựa vào chiều cao có thể định lượng được chất phân tích.
Phương pháp này có khá nhiều ưu điểm: Nó cho phép xác định cả chất vô cơ
và hữu cơ với nồng độ 10 -5 ÷ 10-6M tuỳ thuộc vào cường độ và độ lặp lại của dòng

dư. Sai số của phương pháp thường là 2 ÷ 3% với nồng độ 10 -3 ÷ 10-4M, là 5% với
nồng độ 10-5 M (ở điều kiện nhiệt độ không đổi). Tuy nhiên phương pháp cực phổ
bị ảnh hưởng rất lớn của dòng tụ điện, dòng cực đại, lượng oxi hoà tan hay bề mặt
điện cực nên giới hạn phát hiện kém khoảng 10-5 - 10-6M.
Nhằm loại trừ ảnh hưởng trên đồng thời tăng độ nhạy, hiện nay đã có các
phương pháp cực phổ hiện đại: cực phổ xung vi phân (DPP), cực phổ sóng vuông
(SQWP)… chúng cho phép xác định lượng vết của nhiều nguyên tố. [10]
1.3.5. Phương pháp Von-Ampe hoà tan
Về bản chất, phương pháp Von-Ampe hoà tan cũng giống như phương pháp
cực phổ là dựa trên việc đo cường độ dòng để xác định nồng độ các chất trong dung
dịch. Nguyên tắc gồm hai bước:


Bước 1: Điện hoá làm giàu chất cần phân tích trên bề mặt điện cực làm việc
trong khoảng thời gian xác định, tại thế điện cực xác định.
Bước 2: Hoà tan kết tủa đã được làm giàu bằng cách phân cực ngược cực
làm việc, đo và ghi dòng hoà tan. Trên đường Von-Ampe hoà tan xuất hiện pic của
nguyên tố cần phân tích. Chiều cao pic tỉ lệ thuận với nồng độ. [9]
1.3.6. Phương pháp phổ phát xạ nguyên tử (ICP - OES)
Khi ở điều kiện thường, nguyên tử không thu hay phát ra năng lượng nhưng
nếu bị kích thích thì các điện tử hoá trị sẽ nhận năng lượng chuyển lên trạng thái có
năng lượng cao hơn (trạng thái kích thích). Trạng thái này không bền, chúng có xu
hướng giải phóng năng lượng để trở về trạng thái ban đầu bền vững dưới dạng các
bức xạ. Các bức xạ này được gọi là phổ phát xạ của nguyên tử.
Phương pháp ICP - OES dựa trên sự xuất hiện phổ phát xạ của nguyên tử tự
do của nguyên tố phân tích ở trạng thái khí khi có sự tương tác với nguồn năng
lượng phù hợp. Hiện nay, người ta dùng một số nguồn năng lượng để kích thích
phổ AES như ngọn lửa đèn khí, hồ quang điện, tia lửa điện, plasma cao tần cảm
ứng (ICP)…
Nhìn chung, phương pháp AES đạt độ nhạy rất cao (thường từ n.10 -3 đến

n.10-4%), lại tốn ít mẫu, có thể phân tích đồng thời nhiều nguyên tố trong cùng một
mẫu. Vì vậy, đây là phương pháp dùng để kiểm tra đánh giá hoá chất, nguyên liệu
tinh khiết, phân tích lượng vết ion kim loại độc trong nước, lương thực, thực phẩm.
Tuy nhiên, phương pháp này lại chỉ cho biết thành phần nguyên tố trong mẫu mà
không chỉ ra được trạng thái liên kết của nó trong mẫu. [5]
1.3.7. Phương pháp phổ hấp thụ nguyên tử
* Hệ thống máy đo phổ hấp thụ nguyên tử phải bao gồm các phần cơ bản sau:
Phần 1. Nguồn phát tia phát xạ cộng hưởng (vạch phổ phát xạ đặc trưng của
nguyên tố cần phân tích), để chiếu vào môi trường hấp thụ nguyên tử tự do của
nguyên tố:
+ Đèn catot rỗng (HCL).
+ Đèn phóng điện không điện cực (EDL)
+ Đèn phát xạ liên tục đã được biến điệu (D2).


Phần 2. Hệ thống nguyên tử hóa mẫu phân tích. Hệ thống này được chế tạo
theo 3 kỹ thuật nguyên tử hóa mẫu. Đó là kỹ thuật nguyên tử hóa bằng ngọn lửa
(lúc này ta có phép đo F- AAS) và kỹ thuật không ngọn lửa (lúc này ta có phép đo
GF- AAS) và kỹ thuật hoá hơi lạnh (MVU-AAS)
Phần 3. Máy quang phổ, nó thường là bộ đơn sắc, có nhiệm vụ thu, phân ly
và chọn tia sáng (vạch phổ) cần đo hướng vào nhân quang điện để phát tín hiệu hấp
thụ AAS của vạch phổ.
Phần 4. Hệ thống tín hiệu hấp thụ của vạch phổ (tức là cường độ của vạch
phổ hấp thụ hay nồng độ nguyên tố cần phân tích). Hệ thống này có thể là các
trang bị:
+ Điện kế chỉ tín hiệu AAS
+ Bộ tự ghi để chỉ các pic hấp thụ
+ Bộ chỉ hiện số.
+ Bộ máy in.
+ Máy tính với màn hình để hiển thị dữ liệu, phần mền xử lí số liệu và điều

khiển toàn bộ hệ thống máy đo. [5]
1

2

3

4

Hình 2.3. Nguyên tắc cấu tạo của máy đo AAS
1. Nguồn đơn sắc
2. Hệ nguyên tử hoá mẫu
3. Hệ thống đơn sắc và detector
4. Hệ điện tử
* Nguyên tắc: Khi nguyên tử tồn tại tự do ở thể khí và ở trạng thái năng lượng
cơ bản, thì nguyên tử không thu hay không phát ra năng lượng. Tức là nguyên tử ở
trạng thái cơ bản. Song, nếu chiếu vào đám hơi nguyên tử tự do một chùm tia sáng


đơn sắc có bước sóng phù hợp, trùng với bước sóng vạch phổ phát xạ đặc trưng
của nguyên tố phân tích, chúng sẽ hấp thụ tia sáng đó sinh ra một loại phổ của
nguyên tử. Phổ này được gọi là phổ hấp thụ của nguyên tử. Với hai kỹ thuật
nguyên tử hóa, nên chúng ta cũng có hai phép đo tương ứng. Đó là phép đo phổ
hấp thụ nguyên tử trong ngọn lửa (F- AAS có độ nhạy cỡ 0,1 ppm) và phép đo phổ
hấp thụ nguyên tử không ngọ n lửa (GF - AAS có độ nhạy cao hơn kỹ thuật ngọn
lửa 50- 1000 lần, cỡ 0,1- 1 ppb).
Cơ sở của phân tích định lượng theo AAS là dựa vào mối quan hệ giữa
cường độ vạch phổ và nồng độ nguyên tố cần phân tích theo biểu thức:
Aλ = a.Cx
Trong đó: Aλ: là cường độ của vạch phổ hấp thụ.

Cx: là nồng độ của nguyên tố cần phân tích
Thực tế cho thấy phương pháp phổ hấp thụ nguyên tử có nhiều ưu việt như:
Độ nhạy, độ chính xác cao, lượng mẫu tiêu thụ ít, tốc độ phân tích nhanh.
Với ưu điểm này, AAS được thế giới dùng làm phương pháp tiêu chuẩn để xác định
lượng nhỏ và lượng vết các kim loại trong nhiều đối tượng khác nhau.
Phép đo phổ AAS có thể phân tích được hàm lượng vết của hầu hết các kim
loại và cả những hợp chất hữu cơ hay anion không có phổ hấp thụ nguyên tử. Nó
được sử dụng rộng rãi trong các ngành: địa chất, công nghiệp hóa học, hóa dầu, y
học, sinh học, dược phẩm... [5]
Có hai kỹ thuật nguyên tử hoá mẫu là kĩ thuật ngọn lửa (F-AAS) và không
ngọn lửa (GF-AAS).
1.3.7.1. Kỹ thuật ngọn lửa
Theo kỹ thuật này mẫu ở trạng thái dung dịch được dẫn vào buồng để tạo sol
khí sau đó được trộn đều với khí (C2H2) và dẫn tới đèn nguyên tử hoá mẫu.
Cơ chế của quá trình nguyêntử hoá mẫu bằng ngọn lửa :
Nếu năng lượng hoá hơi Eh < năng lượng nguyên tử hoá E a thì các phần tử
mẫu sẽ hoá hơi, nguyên tử hoá sẽ hấp thụ bức xạ tạo phổ AAS .Tức là:
MenXm(1) → MenXm(K) → nMe(k) +
Mx nMe(k) + n(hv) → phổ F-AAS


Nếu năng lượng hoá hơi Eh> năng lượng nguyên tử hoá En thì các phân tử
mẫu sẽ phân ly thành nguyêntử sau đó hoá hơi và hấp thụ tia bức xạ để tạo ra
phổ AAS
MenXm(1) → nMen + mX → nMe(k)
nMe(k) + n(hv) → phổ F-AAS
Quá trình này có ưu điểm là kích thích êm dịu, an toàn, xác định phần lớn
kim loại. Tuy nhiên, trong ngọn lửa có nhiều cơ chế phụ đó là sự tạo thành các hợp
chất bền nhiệt ở vỏ ngọn lửa, làm giảm cường độ vạch phổ. Ngoài ra, đối với các
nguyên tử có năng lượng kích thích hấp thụ như kim loại kiềm, kiềm thổ tạo ra

nhiều ion, thay vì thu phổ nguyên tử ta thu phổ ion. Như vậy ta phải điều chỉnh
ngọn lửa ở nhiệt độ thấp hoặc thêm vào chất phân tích một số chất có năng lượng
ion hoá thấp hơn để thay vì ion hoá nguyên tố phan tích thì ion hoá chất thêm. [5]
1.3.7.2. Kỹ thuật nguyên tử hoá không ngọn lửa.
Về nguyên tắc, kĩ thuật nguyên tử hoá không ngọn lửa là quá trình nguyên tử
hoá tức khắc trong thời gian rất ngắn nhờ năng lượng của dòng điện công suất lớn
và trong môi trường khí trơ. Qúa trình nguyên tử hoá xảy ra theo ba giai đoạn kế
tiếp nhau: sấy khô, tro hoá luyện mẫu, nguyên tử hoá để đo phổ hấp thụ và cuối
cùng là làm sạch cuvet. Trong đó hai giai đoạn đầu là chuẩn bị cho giai đoạn
nguyên tử hoá để đạt kết quả tốt. Nhiệt độ trong cuvet graphit là yếu tố quyết định
mọi sự diễn biến của quá trình nguyên tử hoá mẫu. [5]
1.3.7.3. Các phương pháp định lượng theo phép đo AAS
Có 2 phương pháp định lượng theo phép đo AAS là : phương pháp đường
chuẩn và phương pháp thêm chuẩn.
a. Phương pháp đường chuẩn
Nguyên tắc của phương pháp này là dựa vào phương trình cơ bản của phép
đo A = K.C và một dãy mẫu đầu để dựng một đường chuẩn, sau đó nhờ đường
chuẩn này và giá trị Aλ để xác định nồng độ CX của nguyên tố cần phân tích trong
mẫu đo phổ, rồi từ đó tính được nồng độ của nó trong mẫu phân tích.
Trước hết phải chuẩn bị một dãy mẫu đầu, dãy mẫu chuẩn (thông thường là 5


mẫu) và các mẫu phân tích trong cùng điều kiện. Ví dụ các mẫu đầu có nồng độ của
nguyên tố X cần xác định C 1, C2, C3, C4, C5 và các mẫu phân tích là C X1, CX2…
Rồi sau đó chọn một quá trình phân tích phù hợp để rồi đo phổ. Đo các mẫu chuẩn
và các mẫu phân tích theo một vạch λ đã chọn. Ví dụ thu được các giá trị cường độ
tương ứng với các nồng độ là A 1, A2, A3, A4, A5, và AX1, AX2… Sau đó dựng
đường chuẩn theo hệ toạ độ Aλ - Cx.
Nhờ đường chuẩn và các giá trị AX ta sẽ dễ dàng xác định được nồng độ C X.
Công việc cụ thể là đem các giá trị A X đặt lên trục tung Aλ của hệ toạ độ, từ đó kẻ

đường song song với trục hoành C X. Đường này sẽ cắt đường chuẩn tại điểm M. Từ
điểm M hạ đường vuông góc với trục hoành cắt trục hoành tại C X. CX là nồng độ
cần tìm. [5]

Αλ

Ax

0

C(mg/mL)

Hình 1.4. Đồ thị của phương pháp đường chuẩn
b. Phương pháp thêm chuẩn.
Nguyên tắc của phương pháp này là người ta dùng ngay một mẫu phân tích
làm nền để chuẩn bị một dãy mẫu đầu bằng cách lấy một lượng mẫu phân tích nhất
định và thêm vào đó những lượng nhất định của nguyên tố cần xác định theo từng
bậc nồng độ (theo cấp số cộng). Ví dụ lượng thêm vào là ∆C1, ∆C2, ∆C3, ∆C4, như
thế chúng ta sẽ có một dãy mẫu chuẩn là:


C0 = Cx
C1 = (Cx +
∆C1) C2 = (Cx
+ ∆C2) C3 =
(Cx + ∆C3) C4
= (Cx + ∆C4)
Trong đó Cx là nồng độ của nguyên tố cần xác định trong mẫu phân tích đã
chọn. Các mẫu phân tích còn lại giả sử kí hiệu Cx1, Cx2, Cx3, …
Tiếp đó chọn các điều kiện thí nghiệm phù hợp và một vạch phổ của nguyên

tố phân tích, tiến hành ghi cường độ hấp thụ của vạch phổ đó theo tất cả dãy mẫu
đầu và các mẫu phân tích. Kết quả thu được như bảng sau:
Mẫu

C0

C1

C2

C3

C4

Aλ

A0

A1

A2

A3

A4

A

.

A0

.

.

Cx
1
Ax
1

Cx2

Cx3

Ax2

Ax3

.

M

C0
C0
O

C1C2

C3C4C (g/ml)

Hình 1.5. Đồ thị của phương pháp thêm chuẩn
Từ các giá trị cường độ này ứng với các nồng độ thêm vào của các nguyên tố
phân tích chúng ta dựng được một đường chuẩn theo hệ toạ độ Aλ - ∆Cx. Đường
này cắt trục tung tại điểm có toạ độ (A 0, 0). Sau đó để xác định được nồng độ C x
chưa biết chúng ta làm như sau:


C1 C2

C3 C4

Cx

C5 C6 C7

C (mg/ml)

Cách 1: Kéo dài đường chuẩn về phía trái, nó cắt trục hoành tại điểm C0.


Chính đoạn OC0 bằng giá trị nồng độ Cx cần tìm.
Cách 2: Cũng có thể xác định Cx bằng cách từ gốc toạ độ kẻ một đường
song song với đường chuẩn và từ điểm A 0 kẻ đường song song với trục hoành hai
điểm này cắt nhau tại điểm M. Từ điểm M hạ đường vuông góc với trục hoành.
Đường này cắt trục hoành tại điểm ∆C0. Chính đoạn ∆C0 là giá trị Cx cần tìm. [5]
1.4. Tình hình nghiên cứu trong nước và trên thế giới về cây bụp giấm
1.4.1. Tình hình nghiên cứu trong nước
Năm 1993, Sở Khoa Học Công Nghệ và Môi Trường tỉnh Hà Tây đã triển
khai đề tài “Chiết xuất chất màu tự nhiên từ đài hoa Hibiscus sabdariffa để dùng

trong y học, thực phẩm và mỹ phẩm” và đề tài “Chiết xuất chất kháng sinh dược
học trong Hibiscus sabdariffa để làm thuốc chữa bệnh”. Sau một vài năm thực
hiện, đề tài kết thúc nhưng kết quả đạt được chưa đủ để đưa cây Bụp giấm trồng ở
những vùng đồi núi lên vị trí quan trọng. Một số nhà khoa học của trung tâm công
nghệ thực vật - viện di truyền nông nghiệp của khoa sinh học trường Đại học Tự
nhiên cũng đã nghiên cứu và khẳng định được tác dụng dược học cao của đài hoa
Bụp giấm.
Năm 1998-1999, Trần Thúy, viện trưởng viện y học dân tộc cổ truyền đã
nghiên cứu các chế phẩm từ đài hoa Bụp giấm để điều trị cho các bệnh nhân.
Nhưng với điều kiện khó khăn và thiếu thốn về trang thiết bị, việc tách các hoạt
chất trong Bụp giấm để sử dụng trong công nghiệp sản xuất mỹ phẩm hoặc dược
phẩm khó có thể thành công. Một số nhà nghiên cứu đã tìm tòi một hướng đi khác,
chế biến đài hoa Bụp giấm thành những sản phẩm thực phẩm thông thường, dễ
được người tiêu dùng chấp nhận.
Năm 2003, Đỗ Thị Thu Thủy có báo cáo nghiên cứu “Chất màu đỏ
anthocyanin trích từ đài hoa Bụp giấm”.
Năm 2012, Nguyễn Thị Huệ, Nguyễn Thị Kim Pha, Nguyễn Bình Kha,
Trịnh Thanh Tâm, khoa Công Nghệ - Thực Phẩm, Trường Đại học Lạc Hồng đã
nghiên cứu “Nghiên cứu sản xuất nước giải khát từ đài hoa Bụp giấm”
1.4.2. Tình hình nghiên cứu trên thế giới