Phân tích vitamin E trong một số loại dầu thực vật bằng phương pháp HPLC đảo pha

Phân tích vitamin E trong một số loại dầu thực vật bằng
phương pháp HPLC đảo pha

Trần Duy Anh
20140228
KTSH2-K59

Giảng viên hướng dẫn: PGS.TS Quản Lê Hà

Trần Duy Anh-20140228-KTSH2K59


Đặc điểm chất cần phân tích

Trần Duy Anh-20140228-KTSH2K59


Cách chuẩn bị mẫu

•
•

Dầu được pha với hexane (1:10).

•
•
•
•

Sau đó mẫu được trộn vortex và ly tâm (5000RPM,5mins).

Sau đó 200 μl được chuyển sang ống có chứa 600 μl methanol và 200 μl dung
dịch chuẩn (300 μg/ml α-tocopherol acetate trong ethanol)
Có thể lọc qua màng lọc 0,45 μm trước khi đưa mẫu vào.
50μl mẫu được nạp vào bộ nạp mẫu.
Mẫu có thể được giữ trong bình tối màu ở -20 °C trong khoảng 1 tuần.

Trần Duy Anh-20140228-KTSH2K59


Điều kiện chạy sắc kí

•
•

Pha động được sử dụng là Methanol-Nước (96:4)

•
•
•

Tốc độ dòng chảy: 2 ml/min.

Pha tĩnh là Silica gel được gắn với C18, kích thước cột 150x4,4 mm, kích thước
hạt 5μm ( />Nhiệt độ cột: 45°C
Sử dụng detector UV λ = 292 nm đo sau mỗi 6 phút chạy sắc kí.

Trần Duy Anh-20140228-KTSH2K59


Kết quả điện di

Trần Duy Anh-20140228-KTSH2K59


Nhận xét
Ưu điểm:

•
•
•
•

Chuẩn bị mẫu nhanh, đơn giản
Độ nhạy cao
Phương pháp có độ chính xác cao (RSD=2.69%) và lượng mẫu thu hồi được cao
(98,14%).
Mẫu dầu có thể được phân tích nhiều lần mà không làm ảnh hưởng đển chất
lượng của cột sắc kí.

Nhược điểm:

•

Cột C18 không phân tách được β- và γ- tocol.

Trần Duy Anh-20140228-KTSH2K59


Tài liệu tham khảo
•

Journal of Chromatography A: Volume 881 issue 1-2 2000 E Gimeno; A.I Castellote; R.M Lamuela-Raventós; M.C de la Torre -- Rapid
determination of vitamin E vegetable oils by RP HPLC.

•
•

Analysis of Tocopherols and Tocotrienols by HPLC />Differences Between Using Acetonitrile and Methanol for Reverse Phase Chromatography
/>
Trần Duy Anh-20140228-KTSH2K59