TR
NG
I H C C N TH
KHOA NÔNG NGHI P & SINH H C
NG D NG
PHAN THANH TRÚC
TH C HI N M T S TIÊU B N: H CH MÀNG
TREO RU T, BÀNG QUANG, D CH HOÀN,
MÀO TINH VÀ TUY N MANG TAI
TRÊN TH
Lu n v n t t nghi p
Ngành: BÁC S THÚ Y
n Th , 2010
TR
NG
I H C C N TH
KHOA NÔNG NGHI P VÀ SINH H C NG D NG
Lu n v n t t nghi p
Ngành: BÁC S THÚ Y
Tên
tài:
TH C HI N M T S TIÊU B N: H CH MÀNG
TREO RU T, BÀNG QUANG, D CH HOÀN,
MÀO TINH VÀ TUY N MANG TAI
TRÊN TH
:
Giáo viên h ng d n:
TS. Lê Hoàng S
Sinh viên th c hi n:
Phan Thanh Trúc
MSSV: 3064557
L p: Thú Y k32
n Th 2010
TR
NG
I H C C N TH
KHOA NÔNG NGHI P & SINH H C NG D NG
MÔN THÚ Y
tài: Th c hi n m t s tiêu b n mô
ng v t trên th do sinh viên PHAN
THANH TRÚC l p Thú Y Khóa 32 th c hi n t i phòng thí nghi m mô h c thu c
b môn Thú Y, Khoa Nông Nghi p & Sinh H c
Th t tháng 08 n m 2010
ng D ng, Tr
ng
ih cC n
n tháng 10 n m 2010
C n Th , ngày....tháng....n m......
C n Th , ngày....tháng....n m......
Duy t B môn
Cán b h
ng d n
Lê Hoàng S
C n Th , ngày....tháng....n m......
Duy t khoa Nông Nghi p & SH D
ii
IC M
Trong su t th i gian
gi ng
ng
N
i h c và ba tháng th c hi n lu n v n
t t nghi p c a mình, tuy tôi ã g p r t nhi u khó kh n và v
c nh tôi luôn có s
ng viên, ng h c a gia ình, luôn
ng m c nh ng bên
c s giúp
c a Th y
Cô, b n bè, tôi ã c g ng hoàn thành t t khóa h c và lu n v n t t nghi p c a mình.
Xin bày t lòng bi t n sâu s c
ã h t lòng h
ng d n, quan tâm,
n th y Lê Hoàng S và th y Tr n Hi n Nh n
ng viên em hoàn thành lu n v n t t nghi p.
V i t t c s kính tr ng em xin bày t lòng bi t n sâu s c
môn Thú Y, các th y cô c a tr
h c t p t i tr
ng
i h c C n Th
ã d y d trong su t th i gian
ng.
Xin chân thành bi t n và xin kính chúc quý Th y Cô, ng
c a tôi
n quý th y cô B
c d i dào s c kho , có th t nhi u ni m vui và
công trong cu c s ng.
iii
t
i thân và b n bè
c th t nhi u thành
CL C
Trang t a:.....................................................................................................................i
Trang duy t:................................................................................................................ii
L i c m n:.......................................................................................................... .....iii
M c l c:................................................................................................................ ....iv
Danh m c hình:..................................................................................................... .. vi
Tóm l
c: .............................................................................................................vii
Ch
ng 1:
tV n
Ch
ng 2: L
.......................................................................................... 01
c Kh o Tài Li u............................................................................. 02
2.1 T ng quan v ph
ng pháp th c hi n tiêu b n hi n vi ......................................
2.2. H ch lâm ba................................................................................................. 02
2.2.1. C u t o vi th ......................................................................................... 02
2.2.2. Phân lo i h ch........................................................................................ 03
2.2.3. Ch c n ng sinh lý .................................................................................. 03
2.3. Bàng quang.................................................................................................. 04
2.4. D ch hoàn .................................................................................................... 05
2.4.1.C u t o vi th ......................................................................................... 05
2.4.2. Ch c n ng sinh lý ................................................................................. 05
2.5. Mào tinh ...................................................................................................... 08
2.6. Tuy n n
Ch
ng 3: Ph
3.1. Ph
c b t............................................................................................ 08
ng Ti n và Ph
ng Pháp .............................................................. 13
ng ti n ................................................................................................. 13
3.1.1.
a
m th c hi n................................................................................ 13
3.1.2. D ng c , trang thi t b và hóa ch t ........................................................ 13
3.2. Ph
ng pháp ti n hành ................................................................................ 13
3.2.1. L y m u................................................................................................. 13
3.2.2 .C
nh m u........................................................................................... 14
3.2.3. L y m u nh .......................................................................................... 14
iv
3.2.4. R a n
c ............................................................................................... 14
3.2.5. Kh n
c............................................................................................... 14
3.2.6. T m dung môi trung gian....................................................................... 15
3.2.7. T m paraffin .......................................................................................... 15
3.2.8. úc khuôn ............................................................................................. 15
3.2.8.1. Chu n b ........................................................................................... 15
3.2.8.2. Ti n hành ......................................................................................... 15
3.2.9. C t m u ................................................................................................. 15
3.2.9.1. Chu n b ........................................................................................... 15
3.2.9.2. Ti n hành ........................................................................................ 15
3.2.10. T i - h p m u ....................................................................................... 16
3.2.10.1. Chu n b ........................................................................................ 16
3.2.10.2 Ti n hành ........................................................................................ 16
3.2.11. Nhu m m u ......................................................................................... 16
3.2.11.1. Chu n b ........................................................................................ 16
3.2.11.2. Ti n hành: ...................................................................................... 16
3.2.12. Dán lamelle - Dán nhãn........................................................................ 18
3.2.12.1. C
nh m u b ng Mount – quick................................................... 18
3.2.12.2. Dán nhãn....................................................................................... 18
Ch
ng 4: K t Qu và Th o Lu n ......................................................................... 19
4.1. H ch màng treo ru t .............................................................................. 20
4.2. Bàng quang............................................................................................ 22
4.3. D ch hoàn .............................................................................................. 24
4.4. Mào tinh ................................................................................................ 25
4.5. Tuy n mang tai ...................................................................................... 26
Ch
ng 5: K t lu n và
Ngh ............................................................................ 29
5.1. K t lu n ....................................................................................................... 29
5.2.
ngh ....................................................................................................... 29
v
DANH M C HÌNH
Hình 1: S
c u t o h ch lâm ba.......................................................................02
Hình 2: S
c u t o tuy n n
c b t..................................................................11
Hình 3: Máy c t vi m u .......................................................................................16
Hình 4: S
quy trình nhu m m u....................................................................17
Hình 5: C u t o vi th h ch lâm ba c t ngang (X100) ..........................................20
Hình 6: C u t o vi th mi n v h ch lâm ba c t ngang (X400) ...........................20
Hình 7: C u t o vi th mi n t y h ch lâm ba c t ngang (X400) ..........................20
Hình 8: C u t o vi th bàng quang c t ngang (X100)...........................................22
Hình 9: C u t o vi th bàng quang c t ngang (X400)...........................................23
Hình 10: C u t o vi th d ch hoàn c t ngang (X100)...........................................24
Hình 11: C u t o vi th d ch hoàn c t ngang (X400)...........................................25
Hình 12: C u t o vi th m ch máu d ch hoàn c t ngang (X400)..........................25
Hình 13: C u t o vi th mào tinh c t ngang (X100) ............................................25
Hình 14: C u t o vi th mào tinh c t ngang (X400) .............................................26
Hình 15: C u t o vi th tuy n mang tai c t ngang (X100)....................................26
Hình 16: C u t o vi th tuy n mang tai c t ngang (X400)....................................27
Hình 17: C u t o vi th
ng m ch c a tuy n mang tai c t ngang (X400) ...........23
Hình 18: C u t o vi th
ng m ch c a tuy n mang tai c t ngang (X400) ...........23
Hình 19: C u t o vi th d ch hoàn c t d y (X100) ...............................................27
Hình 20: Bàng quang rách và g p n p (v t kính X100)........................................28
vi
TÓM L
V i
C
tài “Th c hi n m t s tiêu b n: h ch màng treo ru t, bàng quang, d ch
hoàn, mào tinh và tuy n mang tai trên th ”. Nh m t o ra tiêu b n vi th
lo i t ch c c th nêu trên. Trong th i gian t tháng 08
i v i t ng
n tháng 10 n m 2010, t i
phòng thí nghi m mô h c - Khoa Nông nghi p & SH D -
i h c C n Th cùng
các trang thi t b và các hóa ch t c n thi t tôi ã th c hi n
c 190 tiêu b n trong
ó có 123 tiêu b n hoàn ch nh. Qua ó rút ra
m u so v i qui trình chung.
vii
cm ts
c
m riêng trên t ng
Ch
ng 1
TV N
th ng
i và ông v t là m t th th ng nh t, toàn v n và hoàn ch nh. B t
kì c u t o nào i u
c ng
m nh n ch c n ng nh t
u do m t ho c m t s c u t o th c hi n,
Trong ho t
th
nh, ng
ng th c ti n thú y,
c l i b t k ch c n ng nào
phù h p v i
tìm hi u v m c
u ki n s ng.
gây h i, các t n
ng khi m c ph i, c ch sinh b nh… c a m t lo i b nh nào ó trên c th v t
nuôi thì vi c kh o sát
cm c
m c
t bào là không th b qua. Nh ng ta mu n kh o sát
t bào c a mô b nh, thì tr
mô bình th
c h t ta ph i kh o sát
m c
t bào c a
ng.
Do v y, sinh viên ngành Thú y c n hi u bi t rõ v c u t o, t ch c c th
ng v t
c p
vi th . Nh vào các ki n th c vi th mà chúng ta có th gi i thích
c các quá trình sinh lý bình th
ng c a c th v t nuôi.
V i các l i ích thi t th c nêu trên tôi th c hi n
tài “ Th c hi n m t s
tiêu b n: h ch màng treo ru t, bàng quang, d ch hoàn, mào tinh và tuy n
mang tai trên th ”.
M c tiêu
-
tài:
c và mô t v m t t ch c h c các tiêu b n ã th c hi n bao g m: h ch
màng treo ru t, bàng quang, d ch hoàn, mào tinh và tuy n mang tai.
- Th c hi n nh ng tiêu b n có ch t l
nghiên c u.
1
ng ph c v cho h c t p, gi ng d y và
Ch
ng 2
C KH O TÀI LI U
2.1. T NG QUAN V PH
NG PHÁP TH C HI N TIÊU B N HI N VI
Mu n th c hi n nghiên c u t bào và mô, ph i dùng các lo i kính hi n vi. Vì
v y ph i th c hi n nh ng tiêu b n có
dày thích h p cho phép quan sát d
i kính
hi n vi.
Có nhi u ph
xét nghi m t
p
ng pháp làm tiêu b n
i; ph
ng pháp hóa t bào, hóa mô; p
ng pháp làm tiêu b n c
Trong các ph
nhu m màu là ph
nghiên c u bao g m: ph
ng pháp
ng pháp phóng x t ch p;
nh và nhu m màu.
ng pháp trên, ph
ng pháp làm tiêu b n hi n vi c
nh và
ng pháp ph bi n dùng trong xét nghi m m u b nh so v i m u
i ch ng.
Ph
ng pháp làm tiêu b n c
nh và nhu m màu
Th c hi n tiêu b n hi n vi c
nh b ng ph
ng pháp tiêu b n c t lát và
nhu m kép b ng Hematoxylin và Eosin Y. K thu t mô h c này nh m t o
c
nh ng m nh c t m ng, trong su t c a mô và c quan, cho phép quan sát
i
kính hi n vi. Thêm vào ó m nh c t s
cd
c nhu m b ng các thu c nhu m
c
hi u, các ph n c a m nh c t có màu khác nhau giúp cho vi c quan sát d dàng.
Tiêu b n hi n vi c
nh th c hi n theo ph
giai o n. Ph i th c hi n t t t t c các giai
ch t l
không
ng, n u m t giai
t ch t l
ng. Tóm l
ng pháp này ph i tr i qua nhi u
nm i
là
c tiêu b n có
n nào ó th c hi n không t t thì tiêu b n thu
c quy trình nh sau: l y m u - c
- nhu m kép b ng Hematoxylin - Eosin Y (Ph m Phan
Th
m b o thu
ng v t có vú nh
Lagomorpha, tu i th c a th t 4
cs
nh - c t lát m ng
ch và Tr nh Bình, 1998)
c x p vào h
Leporidae thu c b
n 10 n m, th i k mang thai kho ng 31 ngày.
2.2. H CH LÂM BA
H ch lâm ba là nh ng th nh hình c u ho c hình d a có màu h ng ho c
xám, n m trên
ng i c a các m ch b ch huy t, có
2
kh p m i n i trong c th
gia súc. M i h ch có c nh l i ti p nh n 3-7 m ch b ch huy t vào và 1-2 m ch i ra
t các c nh lõm hay r n h ch
.
Hình 1: S
c u t o h ch lâm ba
2.2.1. C u t o vi th
i t ngoài vào trong có c u t o
- Bên ngoài
c bao b c b i t ch c liên k t.
- V có l n c tr n.
- H ch lâm ba g m 2 mi n: Mi n v và mi n t y
+ Mi n v có nhi u h t lâm ba s p x p thành hàng to nh khác nhau.
+ Mi n t y: ch a nhi u th ng nang.
n v chính t o huy t là h t lâm ba có d ng hình tròn, có 2 vùng khác bi t
là vùng v tím (T bào s m màu h n và gi ng t bào lâm ba c a máu) và vùng t y
sáng còn g i là trung tâm sinh tr
lympho) gi ng nh b ch c u
H t lâm ba có th
ng có ch a t bào nguyên lâm ba (nguyên
n nhân, bào t
ng h i ki m.
riêng r ho c t thành ám.
Ph n lâm ba t t p th a ít xen v i t ch c l
xoang lâm ba. Có 2 lo i xoang:
i c a h ch có màu sáng g i là
mi n v g i là xoang mi n v và
mi n t y g i là
xoang mi n t y.
Trong xoang mi n t y có nh ng c t t bào g i là th ng nang và nh ng t bào
gi ng nh nh ng t bào
h t lâm ba. Các c t t bào y m t
3
u dính v i các h t
lâm ba, m t
u ch y vào mi n t y chia nhánh và ti p h p v i nhau. B ch huy t
ch y vào h ch lâm ba th m qua m ng l
i các c t t bào vào xoang các h t lâm ba,
t i ây nó l c h t các vi khu n và các v t l (Nguy n Xuân Ho t 1978)
2.2.2. Phân lo i h ch
Tùy theo vi trí ng
i ta chia ra: h ch vùng và h ch t ng.
- H ch vùng: là nh ng h ch l n n m riêng l
c , h ch
t ng vùng c th nh h ch
i nách.
- H ch t ng: là các h ch nh n m thành chu i dài d c theo các m ch máu l n
ho c
màng treo các t ng nh gan, ph i, ru t (Nguy n ình Nhung,2005)
2.2.3. Ch c n ng sinh lý
- H ch lâm ba là n i sinh ra t bào lympho và
a các t bào vào l u thông
trong h b ch huy t. H ch lâm ba và h b ch huy t nói chung có tác d ng nh máy
l c và là h th ng b o v c th . Nó thu hút nh ng ch t còn dùng
t bào
vào t nh m ch
các h ch lâm ba gi l i
và s bi n
c
k các mô
vào tim ti p t c i nuôi c th . V t l , ch t
c
kh
l n, c u t o
c ho c b tiêu d êt. Vì v y ki m tra
u
c
i c a các h ch có ý ngh a quan tr ng trong chu n oán b nh nh ng
b nh nhi m trùng, trong khám th t
lò sát sinh.
- H ch lâm ba là c quan sinh ra kháng th , ch c n ng này là nh t bào
lympho có
h ch lâm ba. Khi có protid xâm nhâp c th (xác vi khu n b tiêu di t
trung tâm sinh tr
ng). Nh ng t bào lympho
c a h t lâm ba i theo th ng nang và
trung tâm sinh tr
ng d n d n ra rìa
t i ây chúng sinh ra kháng th .
- Khi có kháng nguyên kích thích mi n v t ng s n
t o ra nhi u lympho B
và lympho T
- Mi n t y ch a lympho bào B và t
-
ng bào.
h ch b ch huy t, d ch b ch huy t s vào h ch b ng
ng b ch huy t
vào xoang mi n v , sau ó
ng chu vi và
vào xoang b ch huy t mi n t y.
- H ch lâm ba còn ch a m t s men nh thrombaza, lypaza, enterokinaza
- H ch lâm ba còn có th t ng thêm s l
s a, nhi m trùng.
4
ng trong nhi u tr
ng h p nh ti t
- Ngoài ra h ch còn có kh n ng tiêu h y h ng c u già khi lách không ho t
ng và c ng có th
nh t y x
m nh n ch c n ng t o máu (tr
ng (Lâm Th Thu H
ng h p ng a và heo) gi ng
ng, 2005).
2.3. BÀNG QUANG
Là m t túi tròn dài.
n i ti p v i ni u
u tr
c tròn to,
o qua c th t ni u
-
con
c bàng quang n m
-
con cái bàng quang n m d
u sau thon nh , c bàng quang
c
o – c bàng quang.
ph n tr
c c a xoang ch u, d
i t cung, âm
o trên x
i tr c tràng.
ng háng (Nguy n
ình Nhung,2005)
• C u t o vi th (t trong ra ngoài)
- L p niêm m c: có nhi u n p g p, c u t o bi u mô ph kép bi n d , phía
trên có l p t bào màng láng có ch c n ng không th m th u
c ti u tr l i, m i t bào th
ng có 2 nhân ph kín k c khi bàng quang c ng
c, k là l p t bào hinh thoi vuông góc l p trên, phía d
+L p
+D
ch ng l i s h p thu
i là l p t bào a giác.
m có nhi u s i keo, ít s i chun.
il p
m là t ng c niêm m ng.
+ H niêm m c là t ch c liên k t th a.
-
L p c : g m 3 l p c tr n: c d c trong, c vòng gi a và c d c ngoài.
L p gi a dày và liên t c. Gi a các l p không có t ch c liên k t, các s i c
i chéo nhau làm các l p n i ch t l i v i nhau.
C bàng quang có vòng c to t o thành vòng c co th t v ng ch c, luôn th t
ch t l i ch m ra khi n
c ti u ch a
y ( óng m theo ph n x ).
- L p ngoài: có c u t o là t ch c liên k t (Nguy n Xuân Ho t 1978)
2.4. D CH HOÀN
- Là tuy n sinh d c
c
m nhi m ch c n ng s n xu t giao t
tinh trùng và ti t vào máu kích thích t sinh d c
c. D ch hoàn có d ng hình tr ng
n m trong bìu (còn g i h nang, có ngu n g c t bi u bì)
2.4.1. C u t o vi th
i t ngoài vào trong có c u t o
5
c t c là
- Ngoài cùng là l p màng tr ng b ng t ch c s i liên k t dai ch c có nhi u
m ch máu và th n kinh i vào. Màng này phát ra nhi u vách ng n i vào trong chia
mô d ch hoàn thành nhi u ô, thùy.
- Trong là mô d ch hoàn, n m trong các thùy gi a các vách ng n. Mô d ch
hoàn ch a hai lo i: ng sinh tinh và t ch c liên k t
Các ng sinh tinh: là nh ng ng u n khúc, n m gi a 2 vách ng n. Khi
ng
v t còn trong bào thai, thành ng sinh tinh bao g m các t bào tinh và t bào th . V
sau, t bào tinh phân hóa thành bi u mô tinh và t bào th
dinh d
phân hóa thành h p bào
ng có nhân hình tam giác, còn g i là t bào Sertolie. T bào Sertolie thu c
th h p bào, trong bào t
ng có ch a t bào bi u mô tinh t nguyên th y cho
n
tinh trùng.
T ch c liên k t n m bao quanh các ng sinh tinh, ch a m ch máu, th n kinh
và nh ng t bào Leydig – ti t ra hocmon sinh d c Testosteron (Lâm Th Thu
ng, 2005).
2.4.2. Ch c n ng sinh lý
• D ch hoàn có hai ch c n ng
- Ch c n ng ngo i ti t là s n sinh ra tinh trùng theo ng d n tinh, ni u
ng v t
o,
vào âm v t sinh d c cái khi giao ph i.
- Ch c n ng n i ti t: do t
Testosteron , gây
bào Leydig ti t ra hocmon sinh d c
c tính sinh d c và t ng c
• S thành th c v tính c a con
- Con
c
ng trao
i ch t
con
c
c.
c
c coi là thành th c v tính khi nó s n sinh ra tinh trùng có kh
ng th tinh và ti t ra hocmon sinh d c
c Testosteron,
ng th i c ng có bi u
hi n ph n x tính d c.
- Con
vi c khai thác
c th
ng thành th c v tính tr
c gi ng quá s m s
nh h
c khi thành th c v th vóc. Vì v y,
ng tr c ti p
n con
c và t i th h
sau
- Các y u t
nh h
ng
n thành th c v tính
+ Gi ng, loài: loài gia súc khác nhau tu i thành th c v tính khác nhau.
Trong cùng loài, gi ng có n ng su t th p thành th c s m h n gi ng có n ng su t
cao
6
+ Dinh d
ng: ch
nuôi d
ng t t (
giúp gia súc thành th c úng tu i. Nuôi d
ng kém gia súc ch m thành th c.
+ Th i ti t, khí h u: gia súc nhi t
• T bào sinh d c
protein, vitamin A, D, E khoáng)
i thành th c s m h n gia súc ôn
i.
c
- Hình thái: tinh trùng
c sinh ra
bi u mô ng sinh tinh và th i vào lòng
ng. Tinh trùng có hình gi ng con nòng n c.
- C u t o thành 3 ph n:
u, c và uôi.
+
u: hình chóp ch a m t kh i nhân bao bên ngoài b i l p màng kép t o
thành th
nh gi ng cái m (acrosome) trong ch a men hyaluronidaza. Men này
có tác d ng phân h y axit hyaluronic là ch t liên k t các t bào vàng phóng x bao
quanh t bào tr ng.
+ C và thân: nh và ng n h n
cung c p n ng l
+
u, trong ch a các bao ti th hình lò xo
ng cho tinh trùng ho t
uôi: g m 2 s i trung tâm
ng.
c bao b i 9 ôi s i
v s i xo n. Nh có uôi tinh trùng di chuy n
tr ng
c, ngoài cùng là l p
c trong
ng sinh d c cái g p
th tinh.
Thành ph n: tinh trùng ch a 75% n
c, 25% v t ch t khô trong ó có 85%
protein, 13,2% lipit, 1,8% khoáng. Trong nhân (
u) ch a ch y u DNA.
• Sinh lý tinh trùng
-V n
ng ti n th ng.
ng t o chuy n
uôi là c quan v n
ng l c l , ti n th ng có
nh h
ng c a tinh trùng.
ng. T c
v n
uôi c
ng c a tinh
trùng ng a 5mm/phút; bò, dê: 4mm/phút; chó, th : 2mm/phút.
- S c s ng và v n
sáng, áp su t th m th u,
ng c a tinh trùng ch u nh h
pH c a môi tr
, ánh
ng pha ch b o t n.
- Tinh trùng ch t nhanh trong môi tr
hóa ch t, nhi t
ng c a nhi t
ng có nhi u n
c, có axit, thu c tê,
cao…
- Khi v n
ng nhi u tinh trùng tiêu hao nhi u n ng l
- Trong
ng sinh d c cái, tùy t ng v trí th i gian s ng c a tinh dài hay
ng n khác nhau:
âm
o 1 – 6 gi ,
ng nên nhanh ch t.
t cung 30 gi ( i v i bò).
• S sinh tinh
7
Tinh trùng
g m 4 giai
c sinh ra
ng sinh tinh c a d ch hoàn. Quá trình sinh tinh
n
- Giai o n sinh s n: tinh nguyên bào
bi u mô ng sinh tinh ( có s nhi m
s c th là 2n) liên t c phân chia nguyên nhi m làm cho qu n th tinh nguyên bào
ng lên v s l
ng.
- Giai o n sinh tr
ng: tinh nguyên bào ng ng phân chia, l n lên thành tinh
bào I nh ng s nhi m s c th gi nguyên (2n).
- Giai o n thành th c: tinh bào I phân chia gi m nhi m t o thành 2 tinh bào
II có s nhi m s c th
n b i (n) và m t nhi m s c th gi i tính X ho c Y. Tinh
bào II l i phân chia ngay thành 2 tinh t có nhi m s c th (n).
- Giai o n t o hình: tinh t hoàn ch nh c u trúc thành tinh trùng.
Có 2 lo i: tinh trùng mang nhi m s c th X và tinh trùng mang nhi m s c th
Y.
• Tinh d ch
- Tinh d ch g m 2 ph n: tinh trùng và tinh thanh (do các tuy n sinh d c ph
ti t ra).
- Tinh d ch là d ch l ng h i nhày, màu tr ng
c, có
pH ki m y u = 7,2 -
7,4 mùi tanh h i h c.
- Nh ng y u t
nh h
+ Tu i: gia súc tr
ng
nl
ng tinh d ch và n ng
ng thành cho l
t t nh t. Gia súc non ho c quá già thì l
+ Gi ng: gi ng cao s n cho l
tinh trùng
ng tinh nhi u nh t và kh n ng th tinh
ng tinh ít và ch t l
ng kém.
ng tinh nhi u và ch t
ng tinh t t h n
gi ng có n ng su t th p.
+ Tr ng thái
th : c th kh e s l
ng và ch t l
ng tinh t t h n c th
b b nh ho c g y y u.
+ Ch
cao. Nuôi d
ns l
dinh d
ng t t l
ng tinh nhi u kh n ng th tinh
ng kém (thi u protein, vitamin A, D, E, ch t khoáng) s
ng và ch t l
+ Nhi t
mùa ông l
ng: nuôi d
nh h
ng
ng tinh d ch.
: mùa nóng, nhi t
môi tr
ng cao l
ng tinh d ch sinh ra nhi u h n mùa hè.
8
ng tinh d ch sinh ra ít,
+ Ch
ch t l
s d ng: khai thác
c gi ng quá m c (không h p lý) s l
ng và
ng tinh d ch kém (Nguy n ình Nhung,2005)
2.5. MÀO TINH
Mào tinh là c quan hình ch C n m d c theo b sau c a tinh hoàn. Ph n
trên to g i là
u, n i nh n các ng c a tinh hoàn, thân là ph n gi a và uôi là ph n
nh nh t
i cùng ti p n i v i ng d n tinh. Mào tinh ch a ng mào tinh, ng
d
mào tinh là ng xo n. Sau khi sinh ra
m t th i gian
tinh hoàn, tinh trùng chuy n sang mào tinh
phát tri n hoàn thi n v c u trúc và ch c n ng. Mào tinh là kho
d tr tinh trùng ch d p ra ngoài.(Nguy n ình Nhung,2005)
C u t o vi th (t trong ra ngoài )
- L p bi u mô kép tr gi có lông rung: g m hai lo i t bào
T bào áy hình c u ho c tháp th p
T bào tr chính có lông gi . T bào tr chính ch ti t glycerophosphocholin
và glycopotein. Glycerophsphocholin có tác d ng c ch ho t hóa tinh trùng.
Bi u mô c a ng mào tinh c ng tham gia quá trình b t gi và tiêu hóa các
th d th a th i ra trong ng sinh tinh. T bào áy là lo i t bào ít bi t hóa, có ch c
n ng sinh s n t o t bào tr m i.
- L p c tr n vòng có ch a s i chun, có tác d ng co bóp theo ki u nhu
ng
y tinh trùng chuy n d ch ti p.
- L p t ch c liên k t m ng có nhi u m ch và th n kinh (Nguy n Xuân Ho t
1978)
2.6. TUY N N
CB T
Là nh ng tuy n ngo i ti t, n
tác d ng t m
tinh b t thàng
c b t ti t ra
t làm m m th c n. Ngoài ra, n
ng. N
th ng vào xoang mi ng, có
c b t còn ch a men tiêu hóa bi n
c b t có ch c n ng b o v , ch ng l i ho t
ng c a vi
sinh v t có nhi u trong xoang mi ng.
sinh v t h u nh có 3 ôi tuy n n
c b t l n, tùy v trí s p x p ng
i ta
chia ra
- Tuy n mang tai: khá to, có màu nâu
x ong hàm d
.N m
ngoài ph n
i. Tuy n mang tai có ng ti t là ng Stenon, xu t phát t
9
ng c a
ud
i
m t trong c a tuy n
vào xoang mi ng phía trong má, bên ngoài r ng hàm trên
th 4(chó), th 5(bò), th 3(heo)
- Tuy n d
i hàm: ph n trên b tuy n mang tai che ph .
sau vòng cung r ng c a hàm d
- Tuy n d
il
i, c nh dây hàm d
n i v i nhau b i eo h p. ng ti t i theo ng ti t d
c g m có 2 thùy
i hàm r i c ng
ra phía sau
i
Ngoài ra các tuy n n
n
vào
i
i: là m t tuy n m ng d p t sau ra tr
vòng cung r ng c a hàm d
ng ti t
c b t trên, trong xoang mi ng còn có nhi u tuy n
c b t nh khác n m rãi rác trong niêm m c c a môi, má, cái kh u, y t h u.
(L ng Ng c Qu nh, 2007).
• C u t o vi th c a tuy n n
Tuy n
cb t
c b c trong mô liên k t, mô này ch y vào trong chia tuy n thành
nh ng ti u thùy. Trong m i ti u thùy ch a m t s nang tuy n và nh ng nh ng ng
bài xu t trong ti u thùy. Nh ng ng lo i này c a ti u thùy g n nhau h p thàng
nh ng ng l n h n ch y trong vách liên k t và
c g i là ng bài xu t gian ti u
thùy. Nh ng ng gian ti u thùy t p trung thành ng bài xu t cái.
Nh ng m ch máu và dây th n kinh i theo ng bài xu t
t i các ti u thùy
Nang tuy n: có 3 lo i
- Nang n
c: là túi hình b u d c ng n. Khi c t ngang lòng nang h p có khi
không nhìn rõ, thành ph n c u t o b i hai t bào
+ T bào c bi u mô: d t, hình sao t o thành m ng l
quanh t bào nang tuy n. Khi nó co rút s
i hình cái gi bao
y s n ph m ch ti t trong t bào ch ti t
ra ng bài xu t
+ T bào ch ti t: hình kh i
n cao, ng n quay v h
tròn n m g n phía áy t bào, ph n bào t
ng
c c
ng lòng ng, nhân
nh ch a nhi u h t sinh men
a ph m base
- Nang nh n: là m t túi h i dài, lòng r ng th y rõ ràng, thành c ng có hai
lo i t bào nh ng t bào ch ti t có c u trúc khác, t bào hình
ch a nhi u h t sinh nhày c c
nh
n h p, bào t
ng
y nhân d t l i g n sát áy t bào
- Nang h n h p: là túi h i dài, th
ng chia nhánh, lòng r ng, c u t o b i
m t hàng t bào ti t nh n n m bên trong, m t vài t bào ti t n
10
c bao quanh l y t
bào ti t nh n theo d ng li m (li m Gianuzzi). Ngoài cùng
bi u mô.
c bao b i t bào c
c bi t bên c a t bào ti t nh n có nh ng vi qu n gian bào, ây là
d n d ch n
ng
c vào lòng nang tuy n
ng bài xu t: ng bài xu t trong ti u thùy có hai lo i
- ng Boll: là ng n i tr c ti p v i nang tuy n, ng ng n, lòng ng r t nh ,
tròn
u. Vách c u tao bi u mô
nh p
- ng khía: nh ng ng Boll t p h p t o thành ng Khía.
Lòng ng r ng, tròn
u, vách t o b i t bào hình tr , nhân hình tr ng, áy
t bào có h ti u v t phát tri n x p song song nhau,
ng khía c ng có th g p
vách liên k t gian ti u thùy.
ng bài xu t gian ti u thùy
- Nh ng ng này n m trong vách liên k t. Thành ng thu c lo i bi u mô
kép tr gi có lông rung, xen k có th có m t ít t bào hình ài. Bao ngoài là màng
áy, ngoài cùng là l p mô liên k t có s i àn h i ch a m ch máu th n kinh.
- Nh ng ng bài xu t
vào niêm m c mi ng g i là ng bài xu t cái, tùy v
trí c a ng ta có nh ng tên g i: ng Stenon c a tuy n mang tai, ng Wharton c a
tuy n d
i hàm và ng Bartolin c a tuy n d
il
i.
Tùy c u t o mô h c c a các nang tuy n ng
- Tuy n n
c: t t c các nang tuy n
i ta phân ra:
u ch a n
c. Thí d : tuy n
mang
u là nang nh n. Thí d : tuy n
kh u
tai.
- Tuy n nh n: t t c nang tuy n
cái, màng h u.
-Tuy n pha: có ba lo i nang
+ Lo i có nhi u nang n
c: tuy n d
i hàm.
+Lo i có nhi u nang nh n: tuy n d i l i (Lâm Th Thu H ng, 2005).
11
Hình 2: S
c u t o tuy n n
cb t
• Ch c n ng sinh lý
Tuy n n
c b t ti t ra n
cb t
i v i gia súc nhai l i, n
trình lên men sinh ra, nh
ó duy trì
c b t có tác dung trung hòa acid h u c do quá
c pH d c .
c b t hòa tan nh ng ch t trong th c n
Ngoài ra nó còn tham gia vào s
h in
c
làm h ng ph n v giác.
i u hòa h p thu thân nhi t b ng s b c
i v i thú ít ho c không có tuy n m hôi (Lâm Th Thu H
• Thành ph n c a n
ng, 2005).
cb t
c b t là m t ch t l ng, quánh, có nhi u b t, g m các thành ph n chính
sau ây:
- Amylase n
c b t: là enzym tiêu hóa glucid, ho t
ng trong môi tr
ng
trung tính, có kh n ng th y phân tinh b t thành dextrin r i thành maltose ( i v i
loài nhai l i và ng a có ít men,
chó không có men )
- Ch t nh y: có tác d ng làm các m nh th c n dính vào nhau, tr n và d
nu t,
ng th i b o v niêm m c mi ng ch ng l i các tác nhân có h i trong th c n.
12
- Các ion: có nhi u lo i Na+, K+, Ca2+, Cl-, HCO3-... Trong ó, ch có Cl- có
tác d ng tiêu hóa thông qua c ch làm t ng ho t tính c a amylase n
- M t vài thành ph n
c bi t: n
c b t.
c b t còn có các b ch c u và kháng th ,
vì v y nó có tác d ng ch ng nhi m trùng và kh n ng hòa tan vi khu n (Nguy n
Quang Mai,2004)
• Tuy n mang tai
C u t o vi th
Thu c lo i tuy n ng túi,
c bao b c bên ngoài là t ch c liên k t phát
vách ng n vào bên trong t o nhi u ti u thùy, to nh khác nhau.
ng d n Stenon là ng to nh t c u t o b i bi u mô kép tr gi ,
quanh b i t ch c liên k t dày
c bao
c. Vào trong, ng tuy n này phân nhánh nh
vào t ch c liên k t gian thùy và ch còn l i m t l p bi u mô
i
n tr . Càng vào g n
trong ti u thùy, ng tr nên nh d n bi u mô th p d n thành bi u mô
n h p, khi
vào trong ti u thùy nó tr thành ng khía.
Tiêu b n c t ngang i t ngoài vào trong là t ch c liên k t d y m ng không
bao quanh các nang n
u,
c là các ng bài xu t.
Ch c n ng sinh lý
ng bào trong tuy n mang tai t ng h p và ch ti t IgA vào n
cho n
c b t làm
c b t có kh n ng mi n d ch ch ng vi khu n l t vào khoang mi ng. IgA
không b phân gi i b i enzym tiêu hóa (Lê Hoàng S ,2000).
13
Ch
PH
3.1 PH
ng 3
NG TI N VÀ PH
NG PHÁP
NG TI N
3.1.1
a
m th c hi n
tài
Sinh H c
c th c hi n t i Phòng Mô h c (Histology) - Khoa Nông Nghi p và
ng D ng. Th i gian: t tháng 09
n tháng 11 n m 2010.
3.1.2 D ng c , trang thi t b và hóa ch t
• D ng c
- Th y tinh: chai, ph u, ng ong, lame và lamelle.
- D ng c gi i ph u: dao, kéo, k p.
- Các d ng c khác: èn c n, khay m , kim m i giáo, kim m i nh n, ng
nh gi t…
• D ng c riêng bi t
- Máy c t vi m u.
- Kính hi n vi quang h c
- Máy nh k thu t s
- T h p, t s y, b p t i.
- B n và thanh úc m u.
• Hóa ch t
- C n, xylen, formol, paraffin.
- Ph m nhu m: Hematoxylin, Eosin Y.
- Keo Mount – quick
- Acid: Acetic
-N
3.2. PH
m
c.
c c t.
NG PHÁP TI N HÀNH
3.2.1. L y m u
Ch n th tr
tiêm không khí
ng thành có tr ng l
ng 2 kg, kh e m nh, gi t th b ng cách
t nh m ch tai. Sau khi tách n i t ng ra kh i c th , dùng kéo gi i
ph u m l y các b ph n: h ch màng treo ru t, bàng quang, d ch hoàn, mào tinh, và
tuy n mang tai.
14
3.2.2. C
nh m u
C
nh m u b ng dung d ch Formol 10%, m u sau khi l y ph i
nh ngay
cc
tránh tình tr ng b thoái hóa, ho i t hay bi n d ng do m t s ph n
ng sinh hóa c a nh ng enzyme n i bào hay do i u ki n bên ngoài tác
sinh v t. Ng
ng nh vi
i ta s d ng formol là thông d ng nh t do formol có nh ng
V n t c xuyên th m, v n t c c
c tính:
nh m u nhanh.
Không làm co m u nh ng làm cho m u c ng l i.
B o qu n t t c u trúc t bào.
Làm t ng s ki m tính c a c u trúc khi nhu m.
M c ích giai
n này là gi t th t nhanh t ch c nh ng v n gi nguyên
hình d ng, c u trúc bên trong nh lúc t ch c còn s ng. Ban
ph n trên trong dung d ch formol 10% trong 15 phút
n
u ngâm nguyên các
nh t ch c cho d c t.
3.2.3. L y m u nh
C t nh m u v i kích th
c kho ng 0,5 cm x 0,5 cm x 1cm. Ti p t c c
m u trong formol 10%, th i gian c
tùy thu c n ng
nhi t
3.2.4. R a n
ng,
vào trong ch u n
3.2.5. Kh n
dày m ng c a m u và c u trúc c a t ng lo i m u...
cc
c
nh xong ph i
i vòi n
c s ch, ta
tm u
c ch y nh liên t c trong 2 gi .
t ng d n theo t 700, 800, 900, 1000, 1000
c, tránh t ch c b m t n
Mu n kh n
c
-M t
c
t ng t gây co rúm l i. Ngâm m i l trong 2 gi .
i cu i cùng c n
m b o n ng
.
m u trong l không nên nhi u tránh làm loãng n ng
ng s rút n
kh
t k t qu t t c n chú ý:
- Hai l c n tuy t
-
c r a l i b ng n
c
Dùng c n v i n ng
l ng xu ng
nh c a dung d ch,
c
M u sau khi
- Th
nh kho ng 24 gi nh ng th i gian này còn
dung d ch, v n t c xuyên th m, v n t c c
môi tr
nh
làm nh
c t m u ra ngoài.
ng xuyên l c
u l ngâm m u
tránh n
c thoát ra r trong m u
áy l .
rút ng n th i gian rút n
l ngâm h n t ng th tích c n tuy t
c nh ng v n
i.
15
mb o
t yêu c u nên t ng s
3.2.6. T m dung môi trung gian
Paraffin không tan trong c n,
d ng xylen làm dung d ch trung gian,
paraffin ng m vào t ch c hoàn toàn, ta s
ng th i xylen còn làm trong m u và tan
m . Nó có th làm c ng m u n u ngâm lâu. Chuy n m u qua 2 l xylen, m i l
ngâm trong 45 phút.
3.2.7. T m paraffin
Chuy n m u t l xylen cu i cùng vào các l có ch a paraffin ang l ng
trong t s y
nhi t
t
600C. Chuy n m u qua l paraffin khác nhau, m i l t m
trong 2 gi .
3.2.8. úc khuôn
3.2.8.1 Chu n b
- Chùi s ch thanh kim lo i và b n kim lo i.
- Dùng các thanh kim lo i gãy góc x p thành hình ch nh t có kích th
c
theo ý mu n.
- èn c n, k p g n m u
3.2.8.2 Ti n hành
- L y l paraffin ang l ng
c n, g p m u vào khuôn và
y khuôn. Dùng k p h nóng trên ng n èn
nh v c u trúc không gian c a m u. Sau 15 phút ta
tách kh i paraffin ra kh i thanh kim lo i và úc m u khác.
- Dán nhãn, ghi kí hi u m u vào kh i m u, sau 24 gi ti n hành c t m u.
3.2.9. C t m u
3.2.9.1. Chu n b
- Dao c t vi m u: ta nên chu n b dao m i.
3.2.9.2. Ti n hành
Tr
c khi c t m u c n ki m tra l i máy c t ch t ch .
- G n m u lên tr c mang m u, si t ch t c.
- G n dao nghiêng kho ng 15 0
-
nh h
n 200.
ng kh i và dao trên máy c t m ng cho thích h p. Chú ý n u mu n
các m nh c t thành dãy thì ph i làm cho hai m t trên và d
nhau
16
i c a m t c t song song
-
i u ch nh c vi c p c a máy c t, c t m u th
10 µm r i gi m
n
m ng trong kho ng 5-7 m
Hình 3 : Máy c t m u
3.2.10. T i, dán, h p m u
3.2.10.1. Chu n b
- B p t i và ch u n
c m.
- Lame s ch.
3.2.10.2. Ti n hành
- Dùng kim m i giáo
nguyên b ng m u cho vào ch u n
c m.
- Khi paraffin ã c ng, l y lame s ch, nghiêng nh trên m t n
nh ng m u ã ch n tr
cr iv t
c sao cho m u ã ch n dúng v trí gi a lame.
- Nghiên lame cho ráo n
c; cho vào t h p m u
600C trong 30 phút.
3.2.11. Nhu m m u
3.2.11.1. Chu n b
m l Xylen, n m l c n tuy t
i, hai l c n 900, hai l c n 800, m t l c n 700,
t l Hematoxylin, m t l Eosin nhu m, hai ch u n
3.2.11.2. Ti n hành
17
c s ch, gi y th m.