SALMONELLA

Môn: Kỹ thuật phân tích Vi sinh – nấm thực phẩm II ATTP 4
SALMONELLA
ĐẶC ĐIỂM PHÂN BỐ
- Trực khuẩn Gram (+)
- Di động
- Không sinh nha bào
- Phân bố rộng rãi trong tự nhiên
- Nguồn lây nhiễm: động vật nuôi, đặc biệt gia cầm, đất nước
- Thực phẩm nguy cơ cao: thịt và sản phẩm từ thịt, sữa và sản phẩm từ
sữa, rau, quả bị ô nhiễm trong quá tình sản xuất, chế biến
KHẢ NĂNG GÂY BỆNH
- Là nguyên nhân gây nhiễm trùng máu, sốt thương hàn, viêm dạ dày ruột
- Triệu chứng: đau quặn bụng, ỉa chảy, sốt đau đầu, đôi khi viêm khớp sau 3-4
tuần
- Thời gian ủ bệnh: 6 - 48h
PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN SALMONELLA
NGUYÊN LÝ PHƯƠNG PHÁP
Phát hiện Sal trong mẫu thử bằng cách xác định các khuẩn lạc điển hình trên
môi trường chọn lọc và có các PƯSH và huyết thanh đặc trưng cho phép thử
khẳng định.
PHẠM VI ÁP DỤNG: Thực phẩm và thức ăn chăn nuôi
TÀI LIỆU TRÍCH DẪN
DỤNG CỤ - THIẾT BỊ
MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY, THUỐC THỬ VÀ HUYẾT THANH
- Nước đệm pepton
- Môi trường Magie clorua – lục malachit
- Môi trường Selenit – cystin
1
1
Môn: Kỹ thuật phân tích Vi sinh – nấm thực phẩm II ATTP 4
- Thạch đỏ phenol – lục sáng

- Thạc Hektoen enteric ( Hektoen Enteric Agar)
- Thạch dinh dưỡng ( Nutrient agar)
- Thạc 3 đường sắt ( TSI agar)
- Thạch Ure (Ure christensen Agar)
- Thạc dinh dưỡng bán đặc
- Môi trường L – Lysin decacboxyl
- Thuốc thử - Galactosidase
- Thuốc thử Voges – Proskauer ( VP )
- Thuốc thử Indol
- Thuốc thử Kovacs
Tiền tăng sinh trong môi trường lỏng không chọn lọc:
25g mẫu thử đã đồng nhất cấy vào 225ml nước đệm pepton, ủ ở 35-37
o
C/
16-20h.
Tăng sinh trong môi trường lỏng chọn lọc:
- Cấy chuyển 0,1ml dịch nuôi cấy trong môi trường lỏng không chọn lọc
vào ống nghiệm có sẵn 10ml môi trường Rappaport Vassiliadis (RV), ủ ở 42
o
C/
24h.
- Cấy chuyển 10ml dịch nuôi cấy trong môi trường lỏng không chọn lọc vào
bình có sẵn 100ml môi trường Selenit Cystin, ủ ở 35-37
o
C/ 24-48h.
Nhận dạng khuẩn lạc Sallmonella trên môi trường thạc chọn lọc:
- Trên thạch đỏ phenol lục sáng: khuẩn lạc đục, làm thay đổi màu môi
trường từ hồng sang đỏ.
- Trên thạch Nektoen Enter: khuẩn lạc Salmonella điển hình thường màu
xanh, có tâm đen hoặc không.

- Lưu ý: Nếu Salmonella mọc yếu hoặc không có khuẩn lạc điển hình thì
phải ủ tiếp ở 35-37
o
C/ 24h nữa và kiểm tra lại.
Thử phản ứng sinh hóa:
- Cấy chuyển từng khuẩn lạc đã chọn vào các môi trường TSI, thạch Ure ,
môi trường Lysin decacboxyl, môi trường VP, Trypton – Tryptonphan và NaCl
0,85%, ủ ở 37
o
C/ 24h để thử các tính chất sau:
2
2
Môn: Kỹ thuật phân tích Vi sinh – nấm thực phẩm II ATTP 4
+ Lên men đường glucose, saccarose, lactose
+ Khả năng sinh H
2
S
+ Khả năng phân giải Ure
+ Phát hiện – galactosidase
+ Phản ứng VP
+ Khả năng sinh Indol
Thử khẳng định với kháng huyết thanh đặc hiệu:
3
3