i
VI N HÀN LÂM KHOA H C VÀ CỌNG NGH VI T NAM
VI N SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH V T
PH M TH MAI
NGHIÊN C U CH N T O GI NG HOA Đ NG TI N (GERBERA
JAMESONII) B NG PH
NG PHÁP Đ T BI N K T H P V I
NUÔI C Y MÔ T BÀO
Chuyên ngƠnh: Sinh h c th c nghi m
Mƣ s
: 60.42.01.14
LU N VĂN TH C S SINH H C
NG
IH
NG D N KHOA H C
TS. LÊ
HƠ N i, 12/2015
S
T
H c li u ĐHTN
C TH O
ii
L i cam đoan
Tôi xin cam đoan đư tr c ti p th c hi n các nghiên c u trong lu n v n này. M i
k t qu thu đ
c nguyên b n, không ch nh s a ho c sao chép t các nghiên c u khác.
Các s li u ch a t ng đ
c công b trong lu n án, lu n v n nào tr
M i d li u trích d n tham kh o trong lu n v n đ u đ
c đây.
c thu th p và s d ng t
ngu n d li u m ho c v i s đ ng ý c a tác gi .
Tôi xin hoàn toàn ch u trách nhi m v i nh ng l i cam đoan trên!
Tác gi
Ph m Th Mai
S
T
H c li u ĐHTN
iii
L i c m n!
Tôi xin chân thành c m n t p th các th y cô và các cán b công tác t i Vi n
Sinh thái và Tài nguyên Sinh v t đư gi ng d y và t o đi u ki n thu n l i cho tôi trong
su t quá trình h c t p t i Vi n.
c bi t, tôi xin g i l i c m n chân thành và sâu s c t i TS. Lê
ng
i đư t n tình h
c Th o,
ng d n, giúp đ cho tôi trong quá trình công tác c ng nh trong
th i gian h c t p, nghiên c u và th c hi n lu n v n này.
Tôi c ng xin g i l i c m n chân thành t i t p th các cán b , anh ch em, b n
bè, đ ng nghi p trong B môn
t Bi n và
u th lai, Tr i thí nghi m V n Giang -
H ng Yên thu c Vi n Di truy n Nông nghi p đư giúp đ và đóng góp nh ng ý ki n
quý báu đ tôi hoàn thành lu n v n này.
Lu n v n này đ
B môn
t bi n &
c th c hi n b i s cho phép c a Vi n Di truy n Nông nghi p,
u th lai và đ
c th c hi n t ngu n kinh phí đ tài “Nghiên c u
ng d ng công ngh b c x k t h p v i công ngh sinh h c đ t o v t li u kh i đ u
cho ch n t o gi ng hoa và gi ng đ u t
ng”, mư s KC.05.08/11-15 thu c ch
trình “Nghiên c u ng d ng và phát tri n công ngh n ng l
ng
ng” c a B Khoa h c và
Công ngh .
Lu n v n có s đ ng viên và giúp đ c a gia đình tôi.
Tôi xin chân thành c m n!
Hà N i, ngày 15 tháng 12 n m 2015
Tác gi
Ph m Th Mai
S
T
H c li u ĐHTN
iv
M CL C
DANH M C Kụ HI U VÀ CH
VI T T T........................................................... vi
DANH M C B NG .................................................................................................... vii
DANH M C B NG .................................................................................................... vii
DANH M C HỊNH .................................................................................................... viii
M
U ......................................................................................................................... 1
1.1. Tính c p thi t c a đ tài ........................................................................................ 1
1.2. M c tiêu c a đ tài ................................................................................................ 2
1.3. Yêu c u c a đ tài ................................................................................................. 3
1.4. Ý ngh a c a đ tài .................................................................................................. 3
Ch
ng 1. T NG QUAN TÀI LI U ........................................................................... 4
1.1. Ngu n g c, phân lo i và đ c đi m th c v t h c c a cây hoa đ ng ti n ............... 4
1.2. Yêu c u sinh thái c a cây hoa đ ng ti n ............................................................... 6
1.3. Tình hình s n xu t hoa đ ng ti n trên th gi i và
1.4. T ng quan v ph
Vi t Nam. ............................ 8
ng pháp chi u x gây đ t bi n t o v t li u kh i đ u trong
ch n gi ng cây tr ng .................................................................................................. 11
Ch
ng 2. V T LI U VÀ PH
it
2.1.
NG PHÁP NGHIÊN C U ................................ 20
ng nghiên c u ......................................................................................... 20
2.2. V t li u nghiên c u ............................................................................................. 20
2.3.
a đi m và th i gian nghiên c u ....................................................................... 21
2.4. N i dung nghiên c u ........................................................................................... 21
2.5. Ph
ng pháp nghiên c u..................................................................................... 21
2.6. Các ch tiêu theo dõi và ph
2.7. Ph
Ch
ng pháp theo dõi ................................................... 25
ng pháp x lý s li u................................................................................... 25
ng 3. K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N........................................ 26
S
T
H c li u ĐHTN
v
3.1. Nghiên c u gây đ t bi n b ng chi u x tia Gamma trên mô s o gi ng hoa đ ng
ti n in vitro ................................................................................................................. 26
3.2. Nghiên c u nh h
ng c a các li u chi u x đ n kh n ng tái sinh c a cây hoa
đ ng ti n in vitro qua 5 th h (M1V5) ..................................................................... 29
3.3. Nghiên c u đánh giá nh h
c a cây con ngoài v
n
ng c a li u chi u x đ n sinh tr
ng, phát tri n
m ..................................................................................... 34
3.4. Nghiên c u đánh giá nh h
ng c a li u chi u x đ n sinh tr
ng, phát tri n
c a các gi ng đ ng ti n ngoài đ ng ru ng ................................................................ 36
3.5. ánh giá các đ c tính nông sinh h c c a các gi ng hoa đ ng ti n đ t bi n ngoài
đ ng ru ng. ................................................................................................................ 40
Ch
ng 4. K T LU N VÀ KI N NGH .................................................................. 52
4.1. K t lu n ............................................................................................................... 52
4.2. Ki n ngh ............................................................................................................. 52
TÀI LI U THAM KH O........................................................................................... 54
PH L C ..................................................................................................................... 61
S
T
H c li u ĐHTN
vi
DANH M C Kụ HI U VÀ CH
VI T T T
-NAA
: - Naphtylaxetic acid
2,4 - D
: 2,4 -Dichlorophenoxyacetic acid
Agar
: Th ch
BAP
: 6 - Benzyl Amino Purin
CT
: Công th c
CS
: C ng s
DT1
: Gi ng đ ng ti n màu vàng (Gerbera Cabana)
DT2
: Gi ng đ ng ti n tím h ng (Gerbera Banesa)
DT3
: Gi ng đ ng ti n màu da cam (Gerbera Cherokee)
DT4
: Gi ng hoa đ ng ti n màu h ng (Gerbera Rosalin)
/C
:
i ch ng
H2 O2
: Hydro peroxide (n
Gy
: Gray
MS
: Murashige and Skoogs, 1962
S
T
H c li u ĐHTN
c ôxi già)
vii
DANH M C B NG
B ng 2.1. Tình hình s n xu t và tiêu th hoa đ ng ti n ..................................................9
B ng 3.1. nh h
ng c a ch t 2,4-D t l t o mô s o c a các gi ng hoa đ ng ti n (Sau
4 tu n nuôi c y) .............................................................................................................26
B ng 3.2.
nh h
ng c a li u l
ng chi u x tia
ngu n Co60 đ n t l s ng và hình
thái c a mô s o đ ng ti n in vitro (Sau 4 tu n chi u x ) ..............................................27
B ng 3.3. nh h
ng c a li u chi u x đ n kh n ng tái sinh ch i t mô s o các gi ng
đ ng ti n sau 2 tháng nuôi c y ......................................................................................29
B ng 3.4.
nh h
ng c a li u chi u x tia
ngu n Co60 đ n h s nhân ch i và hình
thái ch i đ ng ti n in vitro.............................................................................................30
B ng 3.5.
nh h
ng c a li u l
ng chi u x tia
ngu n Co60 t i kh n ng ra r c a
ch i đ ng ti n in vitro (Sau 2 tu n nuôi c y) ................................................................32
B ng 3.6.
nh h
ng c a các li u chi u x tia
giai đo n v
n
B ng 3.7.
ng thái t ng tr
ngu n Co60 t i cây con đ ng ti n
m .......................................................................................................34
ng chi u cao c a các gi ng đ ng ti n ngoài đ ng ru ng
.......................................................................................................................................36
B ng 3.8.
ng thái ra lá c a các gi ng đ ng ti n ngoài đ ng ru ng ..........................38
B ng 3.9. Kh n ng đ nhánh c a các gi ng đ ng ti n ngoài đ ng ru ng ...................39
B ng 3.10. M t s đ c đi m sinh tr
ng, phát tri n c a gi ng đ ng ti n đ t bi n ngoài
đ ng ru ng .....................................................................................................................40
B ng 3.11. M t s ch tiêu n ng su t, ch t l
ng c a các gi ng hoa đ ng ti n chi u x
ngoài đ ng ru ng ...........................................................................................................42
B ng 3.12.
nh h
ng c a li u chi u x đ nkh n ng xu t hi n bi n d c a các gi ng
đ ng ti n ngoài đ ng ru ng ...........................................................................................45
B ng 3.13. Các dòng bi n d có tri n v ng thu đ
c t các gi ng đ ng ti n nghiên c u
.......................................................................................................................................47
S
T
H c li u ĐHTN
viii
DANH M C HỊNH
Hình 3.1.Các mô s o đ ng ti n DT2 sau chi u x 20 ngày ..........................................28
Hình 3.2. Hình thái ch i c a gi ng đ ng ti n DT2 sau 2 tu n c y chuy n ..................31
Hình 3.3. Kh n ng ra r c a gi ng đ ng ti n DT3 sau 2 tu n nuôi c y ......................33
Hình 3.4. Cây con nuôi c y mô hoàn ch nh (gi ng đ ng ti n DT3) .............................33
Hình 3.5.Cây hoa đ ng ti n ngoài v
n
m ...............................................................35
Hình 3.6. Bi n d trên gi ng đ ng ti n DT1 ..................................................................50
Hình 3.7. Bi n d trên gi ng đ ng ti n DT2 ..................................................................50
Hình 3.8. Bi n d trên gi ng đ ng ti n DT3 ..................................................................51
Hình 3.9. Bi n d trên gi ng đ ng ti n DT4 ..................................................................51
S
T
H c li u ĐHTN
1
M
U
1.1. Tính c p thi t c a đ tƠi
Hoa đ ng ti n (Gerbera jamesonii) là lo i hoa x p v trí th 5 trong công nghi p
hoa c t cành.
ây là m t lo i hoa đ p, hình dáng, màu s c phong phú đa d ng, hoa có
đ b n lâu và đ c bi t là kh n ng ra hoa quanh n m, t l hoa th
ng ph m cao, k
thu t tr ng tr t, ch m sóc đ n gi n, ít t n công. Vì th di n tích tr ng hoa đ ng ti n
ngày càng đ
c m r ng, l
ng tiêu th và giá c ngày m t t ng(Nguy n V n H ng,
2009) [9].
Nh đ c đi m u vi t đó, m c dù m i du nh p vào n
đư đ
c ng
N mb tđ
i tiêu dùng r t a chu ng và hi n đang là lo i hoa có giá tr kinh t cao.
c th c tr ng đó r t nhi u ng
i làm v
ti n và mang l i hi u qu kinh t cao cho ng
Tr
c ta song hoa đ ng ti n
c đây, hoa đ ng ti n ch y u đ
và cs, 2012) [7]. Ph
cây gi ng ban đ u th
n đư chuy n sang tr ng hoa đ ng
i s n xu t.
c nhân gi ng b ng tách ch i(Lê Huy Hàm
ng pháp này th c hi n khá đ n gi n, ít t n kém song ch t l
ng
ng th p, nhanh b thoái hóa do n m b nh và virut. Trong nhi u
n m tr l i đây, cùng v i s phát tri n c a công ngh t bào th c v t, v i u đi m h
s nhân gi ng cao, ch t l
ng đ
c đ m b o nên cây gi ng in vitrođ ng ti n đư d n
thay th cây gi ng tách ch i.
Trong ch n gi ng, lai gi ng nhân t o dù có ti m n ng vô h n trong vi c t o ra các
t h p có đ c tính m i mà có th đ
c ch n l c trong qu n th phân ly nh ng nó ch là
s phân b l i và tái t h p ngu n gen s n có(Nguy n Minh Công, 2005) [4]. V n đ
là s gi i h n ngu n gen trong t nhiên và t l đ t bi n t nhiên r t th p, ch kho ng
10-7. Ng
c l i, ph
ng pháp đ t bi n có th c i ti n tính tr ng đ n mà không gây ra
s t n th
ng sâu trong b gen, đ ng th i làm t ng ngu n tài nguyên di truy n cho lai
gi ng nhân t o và các bi n d di truy n m i có kh n ng thích ng t t. Vi c s d ng k
thu t đ t bi n trong c i ti n gi ng cây tr ng trong nh ng th p k qua cho th y nó là
ph
ng pháp ch n gi ng hi u qu nh m c i ti n n ng su t, ch t l
ch ng ch u v i các y u t sinh h c và phi sinh h c. B i v y ph
đang đ
ng và kh n ng
ng pháp đ t bi n
c s d ng m t cách hi u qu trong c i ti n gi ng cây tr ng (Tr n Duy Quý,
1997) [13].
S
T
H c li u ĐHTN
2
i v i cây hoa, vi c x lý đ t bi n có nhi u thu n l i h n so v i các lo i cây
l
ng
ng th c do tính ch t s d ng c a nó ít d n đ n s lo ng i v s c kho c a con
i(Nguy n Th Kim Lý, Lê
c Th o, 2007) [11]. Ngoài ra, các m c tiêu c a vi c
x lý đ t bi n trên cây hoa th
ng liên quan đ n m t s ch tiêu chính nh màu s c
hoa, kích th
c hoa, tính ch ng ch u,… Khi xu t hi n bi n d , nhà ch n gi ng có th
ch n l c cá th , nhân vô tính đ đánh giá các dòng thu đ
ch n gi ng th
ph
c. Do đó, th i gian cho
ng ng n h n so v i các cây tr ng khác. Vì v y, có th nói r ng,
ng pháp ch n gi ng hoa b ng x lý đ t bi n là m t ph
trong công tác ch n t o gi ng hoa m i cho s n xu t(Lê
ng pháp đ y tri n v ng
c Th o, 2009) [15].
Công ngh x lý đ t bi n in vitro b ng các tác nhân v t lý đư tr thành công c
h u hi u trong ch n t o gi ng cây tr ng(Nguy n Th Lý Anh và cs, 2015) [1]. Ph
ng
pháp này t o ra ngu n bi n d di truy n phong phúvà h tr đ c l c cho công tác ch n
gi ng. Trong s các tác nhân v t lý đ
th
ng đ
c s d ng hi n nay thì tia Gamma là tác nhân
c s d ng r ng rưi nh t. M t s đ c đi m th
ng đ
c quan tâm khi ch n
gi ng hoa, cây c nh đ t bi n là: thay đ i màu s c hoa, đ c đi m hình thái hoa, màu s c
lá, gi m th i gian sinh tr
nh ng nh
ng, t ng c
ng kh n ng ch ng ch u sâu b nh, kh c ph c
c đi m c a gi ng c …(Nguy n Th Kim Lý, Lê
c Th o, 2007) [11]. K
thu t ch n gi ng v i s h tr c a đ t bi n cùng v i công ngh sinh h c, đ c bi t là
công ngh nuôi c y mô t bào đư có đóng góp đáng k nâng cao ch t l
ng gi ng hoa.
Xu t phát t th c ti n đó, chúng tôi ti n hành th c hi n đ tài: “Nghiên c u
ch n t o gi ng hoa đ ng ti n (Gerbera jamesonii) b ng ph
ng pháp đ t bi n k t h p
v i nuôi c y mô t bào”.
1.2. M c tiêu c a đ tƠi
- Nghiên c u nh h
ng c a x lý đ t bi n b ng tia Gamma đ n sinh tr
ng,
phát tri n c a m t s gi ng hoa đ ng ti ntrong in vitro.
- Nghiên c u nh h
ng c a x lý đ t bi n b ng tia Gamma đ n sinh tr
phát tri n c a m t s gi ng hoa đ ng ti n giai đo n v
S
T
H c li u ĐHTN
n
ng,
m và ngoài đ ng ru ng.
3
- Theo dõi đánh giá kh n ng xu t hi n bi n d ngoài đ ng ru ng và xác đ nh
nh ng dòng bi n d có tri n v ng ph c v cho công vi c ch n t o gi ng hoa đ ng ti n
m i.
1.3. Yêu c u c a đ tƠi
- Xác đ nh đ
c nh h
ng c a li u chi u x đ n t l s ng, kh n ng tái sinh
ch i, h s nhân, kh n ng sinh tr
ng, phát tri n và kh n ng xu t hi n bi n d c a
cây hoa đ ng ti nin vitro sau chi u x .
-
ánh giá đ
c nh h
ng c a li u l
và phát tri n c a cây con nuôi c y mô
-
ánh giá đ
c nh h
ng chi u x đ n kh n ng sinh tr
giai đo n v
n
ng
m.
ng c a li u chi u x đ n kh n ng sinh tr
ng, phát
tri n, các tính tr ng nông sinh h c và kh n ng xu t hi n bi n d c a các gi ng đ ng
ti n nghiên c u ngoài đ ng ru ng t đó ch n l c đ
c nh ng dòng bi n d tri n v ng.
1.4. ụ ngh a c a đ tƠi
1.4.1. Ý ngh a khoa h c
-
tài cung c p các d n li u khoa h c b
cđ uv
ng d ng c a ph
ng pháp
chi u x tia Gamma ngu n Co60 trong ch n gi ng hoa đ ng ti n.
- Các k t qu nghiên c u c a đ tài c ng là tài li u tham kh o trong vi c nghiên
c u, gi ng d y có giá tr cho l nh v c công ngh sinh h c và ch n t o gi ng cây tr ng.
1.4.2. Ý ngh a th c ti n
tài đư t o ra các dòng hoa đ ng ti n đ t bi n có tri n v ng, là c s cho ch n
gi ng hoa đ ng ti n m i b ng ph
S
T
ng pháp chi u x .
H c li u ĐHTN
4
Ch
ng1. T NG QUAN TÀI LI U
1.1. Ngu n g c, phơn lo i vƠ đ c đi m th c v t h c c a cơy hoa đ ng ti n
1.1.1. Ngu n g c, v trí, phân lo i
Cây hoa đ ng ti n có tên khoa h c là Gerbera jamesonii, có ngu n g c t Nam
Phi ( Theo h th ng h c th c v t m i nh t,
cây hoa đ ng ti n đ
c phân lo i nh sau:
Gi i: Plantae
Ngành: Magnoliophyta
L p: Magnoliopsida (l p hai lá m m)
Phân l p: Asteridae
B : Asterales
H : Asteraceae(h cúc)
Chi: Gerbera (Tr n H p, 1999) [8]
Chi đ ng ti n Gerbera có kho ng 40 loài, đư đ
Gronovius và đ t tên theo nhà th c v t h c ng
loài jamesonii đ
c, Traugott Gerber [64] và các
c đ t theo tên c a Robert Jameson (Shankar Paudel, 2014) [52].
N m 1889, đ ng ti n đ
Curtis d
i
c phân lo i vào n m 1737 b i
c Hooker miêu t l n đ u tiên trong t p chí t v n
i tên g i cúc Transrace hay cúc Barbetan (Shankar Paudel, 2014) [52].
Hi n nay trên th gi i có hàng tr m gi ng khác nhau v i các hình d ng và kích
th
c hoa, màu s c hoa và nh hoa r t đa d ng.
1.1.2.
c đi m th c v t h c c a cây hoađ ng ti n
Cây hoa đ ng ti n thu c cây thân th o, nhi u n m(Lê Huy Hàm và cs, 2012)
[7], có nh ng đ c đi m th c v t sau:
- R : R đ ng ti n thu c d ng r chùm, phát tri n kho , r hình ng, n ngang
và n i phía trên m t lu ng, r th
ng v
n dài t
ng ng v i di n tích lá to ra.
- Thân: Thân ng m, có lông, không phân cành mà ch đ nhánh. Lá và hoa phát
tri n t thân, chi u dài thân t 25 - 40 cm, m t s gi ng t 60 - 65 cm.
S
T
H c li u ĐHTN
5
- Lá: Lá m c ch ch so v i m t đ t m t góc 15 - 450, hình d ng lá thay đ i theo
gi ng và s sinh tr
ng t d ng tr ng thuôn đ n thuôn dài, lá dài t 15- 25 cm, r ng 5-
8 cm hình x thùy r ng và sâu, m t d
và r ng h n
i lá có l p lông nhung, đôi khi h p h n
g c
đ nh.
- Hoa: Hoa đ ng ti n có d ng c m, hoa đ u l n, c m hoa d ng đ u, b ngoài là
m t bông hoa nh ng trên th c t là m t t p h p nhi u bông hoa nh riêng bi t. Phía
ngoài hoa hình l
it
ng đ i l n m c x p thành m t ho c vài vòng. Do s thay đ i
hình thái và màu s c nên tâm hoa r t đ
c chú ý trong ch n t o gi ng m i. Hoa đ ng
ti n n theo th t t ngoài vào trong, hoa hình l
t ng vòng m t, kích th
i n tr
c, hoa hình tia n sau theo
c t 5 - 12 cm.
- Qu : Qu đ ng ti n thu c d ng qu b có lông, không có n i nh , h t nh ,
m t gam h t có kho ng 280 - 300 h t. Do v y s c s ng và đi u ki n n y m m là khó
kh n. Tuy nhiên cây có kh n ng đ nhánh r t cao.
Hoa đ ng ti n có kho ng 40 loài thu c lo i hoa l u niên ra hoa quanh n m, đ
b n hoa c t cao, đ
ng
c coi là 1 loài hoa đ p trong th gi i hoa. D a vào hình thái hoa,
i ta chia thành 3 nhóm: Hoa kép, hoa đ n và hoa đ n nh kép (
ng V n
ông
và inh Th L c, 2003) [5]
Nhóm 1 -
ng ti n đ n: Hoa ch có m t ho c 2 t ng cánh, x p xen k nhau
t o vòng tròn. Hoa m ng và y u h n hoa kép, màu s c hoa ít h n, đi n hình là tr ng,
đ , tím, h ng.
Nhóm 2 - Hoa đ ng ti n kép: Cánh hoa to g m h n 2 t ng, bông to, đ
có th đ t t i 12 - 15 cm, cánh hoa t l i thành bông n m
ng kính
đ u tr c chính, cu ng dài
40 - 60 cm. Màu s c đa d ng nh tr ng, đ , vàng, h ng, g ch cua.
Nhóm 3 - Hoa đ n nh kép: Bên ngoài cùng cánh đ n, bên trong cánh kép dày
đ c, th
ng màu tr ng trong l p cánh kép màu cánh sen nh ng nhóm này không đ p
b ng hoa kép.
Nh v y, trong ba nhóm hoa trên, đ ng ti n kép là nhóm hoa có giá tr cao,
đ
c a chu ng h n c và c ng là đ i t
S
T
ng lý t
H c li u ĐHTN
ng c a nuôi c y mô t bào th c v t.
6
1.2. Yêu c u sinh thái c a cơy hoa đ ng ti n
1.2.1. Nhi t đ
Nhi t đ là m t trong nh ng y u t quan tr ng quy t đ nh s sinh tr
tri n, n hoa và ch t l
ng hoa đ ng ti n.
ng, phát
a s các gi ng đ ng ti n hi n nay đ u a
khí h u mát m (Lê Huy Hàm và cs, 2012) [7], t t nh t t 18-25oC, nhi t đ lý t
đ cây ra hoa là 22oC. Cây có th ch u đ
c nhi t đ t 13-32oC, d
ng
i 12oC ho c trên
35oC, cây s phát tri n kém, hoa nh , màu s c hoa nh t nh t d n đ n ch t l
ng hoa
kém.
1.2.2. Ánh sáng
Hoa đ ng ti n yêu c u ánh sáng cao cho sinh tr
ng, phát tri n và phát tri n
m m hoa, chúng có th ra hoa c mùa hè và mùa đông, nh ng s l
trung vào mùa xuân. Mùa hè n ng nóng th
ng dùng l
ánh sáng và b c x m t tr i. Mùa đông ph i đ m b o c
c n thi t giúp cho cây sinh tr
ng l n nh t t p
i đen đ đi u khi n c
ng đ
ng đ ánh sáng 40 W/m2 là
ng t t (Lê Huy Hàm và cs, 2012) [7].
ng ti n ch
ph n ng r t nh v i quang chu k , ngày ng n ra hoa nhanh, ngày dài ra hoa ch m
(
ng V n ông và inh Th L c, 2003) [5].
1.2.3.
m
ng ti n là cây tr ng c n, không ch u đ
l n, b lá to, tiêu hao n
c nhi u, do v y c ng kém ch u h n (Lê Huy Hàm và cs,
2012, Nguy n Th Kim Lý và cs, 2007) [7] [11].
khí 55- 65% thu n l i cho đ ng ti n sinh tr
ho ch c n đ
m v a ph i đ tránh n
b nh phát sinh, phát tri n, ch t l
i nh gi t ho c b m t
1.2.4.
m đ t t 60 -70%, đ
ng, phát tri n.
m không
c bi t vào th i gian thu
c đ ng trên các v t c t, gây th i hoa và sâu
ng hoa gi m sút. Trong quá trình sinh tr
theo th i ti t mà luôn ph i cung c p đ l
t
c úng nh ng đ ng th i có sinh kh i
ng n
ng, tùy
c cho đ ng ti n b ng các bi n pháp
i cho cây.
t
Hoa đ ng ti n không đòi h i kh t khe v đ t, chúng thích h p v i đ t t i x p,
nhi u mùn, đ pH t 6 - 6,5.
t th t pha cát,
vùng đ t ki m c n bón phân mang tính
chua đ c i t o. C ng có th bón phân ch a l u hu nh đ gi m đ pH.
S
T
H c li u ĐHTN
vùng đ t
7
chua có th bón thêm vôi đ đi u ti t đ chua,
m c, v tr u, bư r
u đ t ng đ t i x p.
t tr ng hoa đ ng ti n c n thoát n
M cn
c ng m cao th
th ng thoát n
n i đ t th t n ng nên bón thêm lá cây
ng đ ng n
c t t, m c n
c ng m th p và n đ nh.
c, r cây d b th i và b b nh nên ph i có h
c t t, xung quanh ph i đào rưnh thoát n
c sâu t 0,7 - 1,0 m và lên
lu ng cao, h t s c tránh tr ng đ ng ti n n i đ t tr ng (
ng V n
ông và
inh Th
L c, 2003; Lê Huy Hàm và cs, 2012) [5] [7].
1.2.5. Dinh d
ng
Các lo i phân h u c , phân vô c , phân vi l
đ i v i sinh tr
ng, có ý ngh a h t s c quan tr ng
ng, phát tri n, n ng su t, ph m ch t c a hoa đ ng ti n.
- Phân h u c ch a h u h t các nguyên t đư l
không làm m t cân đ i dinh d
ng và vi l
ng trong cây, giúp cây sinh tr
ng cây c n, do đó
ng t t, b n, kh e, hoa
đ p. Tuy nhiên lo i phân này có tác d ng ch m đ i v i cây và gây ô nhi m môi
tr
ng, do v y c n ph i
bón thúc thì dùng n
- Phân vô c :
hoai m c. N u dùng bón lót, thì tr n
c phân đư ngâm hòa v i m t l
v i lân vi sinh, n u
ng đ m nh đ t
i.
m, lân, kali, canxi là nh ng y u t không th thi u đ i v i cây
đ ng ti n.
+
m có tác d ng thúc đ y quá trình sinh tr
c n nhi u đ m vào giai đo n sinh tr
ng sinh d
ng, phát tri n c a cây.
ng, l
ng ti n
ng đ m nguyên ch t s d ng
cho 1 ha đ ng ti n t 140 - 160 kg/n m.
+ Lân giúp cho b r sinh tr
ng, phát tri n m nh, cây con kh e, t l s ng cao,
thân c ng, hoa b n, màu s c đ p. Trong quá trình sinh tr
l n nhi u h n vào giai đo n sinh tr
ng c a cây, đ ng ti n c n
ng sinh th c, nh ng do lân phân gi i ch m nên
ch y u dùng đ bón lót 3/4 còn 1/4 bón thúc cùng đ m, kali ho c ngâm v i phân h u
c .L
ng lân nguyên ch t dùng cho 1 ha t 300 - 350 kg/n m. Tùy t ng lo i đ t mà
s d ng các lo i lân khác nhau: v i đ t trung tính nhi u mùn thì dùng supe lân, đ t
chua nên dùng phân lân nung ch y, đ t chua m n dùng apatit.
+ Kali r t c n thi t vào th i k k t n và n hoa. N u thi u kali đ u chóp lá già,
b t đ u vàng ch t khô, sau đó c ph n th t lá gi a các gân lá c ng v y, đ ng th i xu t
S
T
H c li u ĐHTN
8
hi n các đ m b lu c, cu ng hoa m m ra không đ ng lên đ
cánh m m, hoa chóng tàn. Kali giúp cây t ng c
kh c nghi t và sâu b nh. L
c, màu s c hoa nh t nh t,
ng tính ch ng ch u v i đi u ki n
ng kali nguyên ch t cho 1 ha t 120 - 140 kg/n m, trong
đó bón lót 2/3 còn l i 1/3 dùng đ bón thúc cùng đ m và lân.
+ Canxi giúp đ ng ti n t ng kh n ng ch u nhi t, h n ch đ
c tác d ng đ c
c a axit h u c . Ngoài ra canxi còn có tác d ng gi m chua, t ng đ phì c a đ t t o
đi u ki n cho đ ng ti n phát tri n t t h n. Canxi đ
t ng lo i đ t mà s d ng li u l
c dùng
ng khác nhau. Thông th
ng, l
d ng vôi b t, tùy theo
ng vôi b t c n cho 1
ha là 250 - 300 kg.
Ngoài các y u t đa l
ng trên, m t s nguyên t vi l
Na,… c ng r t c n cho đ ng ti n, chúng đ
sinh có ch a vi l
ng nh : Mg, Fe, Cu,
c b sung b ng phân h u c ho c phân vi
ng.
1.3. Tình hình s n xu t hoa đ ng ti n trên th gi i vƠ
Vi t Nam.
1.3.1. Tình hình s n xu t hoa đ ng ti n trên th gi i
Hoa đ ng ti n là m t trong 10 lo i hoa quan tr ng nh t trên th gi i sau h ng,
cúc, lan, c m ch
ng, lay n...(Nazma Akter và cs, 2012) [46]. Các n
hoa l n là Hà Lan, Colombia, Pháp, Trung Qu c...
tr ng
nhà l
các n
c có s n l
c này đ ng ti n đ
ng
c
i có mái che, có trang b h th ng đi u ch nh nhi t đ , m đ , ánh sáng,
n
ct
i, bón phân b ng ch đ t đ ng ho c bán t đ ng. Do đó, n ng su t và ch t
l
ng hoa đ ng ti n c a n
c này r t cao, đ t 4,8 tri u bông/ha/n m ( ào Th Thanh
B ng và cs, 2007) [2].
Theo th ng kê n m 2009, di n tích tr ng hoa đ ng ti n
ha, đ t giá tr s n l
Hà Lan là h n 10.000
ngtrên5 tri u USD. H u h t các gi ng hoa đ ng ti n t i Hà Lan là
nh ng gi ng hoa lai, hoa to, đ
c nh ng nhà ch n t o gi ng c a Hà Lan t o ra, trong
đó công ty Florist c a Hà Lan là m t c s quan tr ng v nghiên c u, buôn bán và s n
xu t hoa đ ng ti n c a th gi i.
Di n tích tr ng hoađ ng ti n trên th gi i hi n nay là 305.105 ha, trong đó t ng
di n tích
châu Âu là 44.444 ha, B c M 22.388 ha, Châu Á và Thái Bình D
ng
215.386 ha, gi a ông và Phi 2.282 ha và mi n Trung và Nam châu Phi 17.605 ha, n
S
T
H c li u ĐHTN
9
có di n tích tr ng hoa l n nh t (88.600 ha) ti p theo là Trung Qu c (59.527 ha),
Indonesia (34.000 ha), Nh t B n (21.218 ha), Hoa K (16.400 ha), Brazil (10.285 ha),
ài Loan (9,661 ha), Hà Lan (8017 ha), Italy (7,654 ha), Anh (6.804 ha),
c (6621
ha) và Colombia (4757 ha) và di n tích đang t ng đ u đ n (Dr.S.Sudhagar M.Com và
cs, 2013) [53]. Vi c s n xu t các lo i hoa này t ng lên đáng k
do nhu c u r t l n đ i
v i các s n ph m hoa c t trên th gi i. Vi c tiêu th th gi i c a hoa c t cành và cây
tr ng ngày càng t ng và t ng n đ nh hàng n m t 10 đ n 15% trong t t c các n
c
nh p kh u (Nguy n V n H ng, 2009)[9].
T i Nepal, theo báo cáo c a FAN (Food and Agricuture in Nepal), di n tích
tr ng hoa đ ng ti n n m 2012 - 2013 là 87 ha, cao g n g p đôi so v i n m 2011 - 2012
(45 ha), trong khi đó ch có 15 ha trong n m 2005 - 2006 (B ng 2.1). S li u này cho
th y di n tích tr ng hoa đ ng ti n không ng ng t ng lên trong nh ng n m g n đây,
di n tích tr ng n m 2012 - 2013 g n g p đôi so v i di n tích tr ng hoa đ ng ti n n m
2011 - 2012 (Shankar Paudel, 2014) [52]
B ng 2.1. Tình hình s n xu t vƠ tiêu th hoa đ ng ti n
N m
2005/06 2006/07 2007/08 2008/09 2009/10 2010/11 2011/12 2012/13
Di n tích
15
15
20
30
35
41
45
87
Nhu c u
500-
800-
1500-
1500-
1500-
3000-
5000-
5000-
(cành/ngày)
1000
1500
2000
2500
2500
4000
7000
7000
(ha)
Ngu n: FAN, 2014
Nhu c u tiêu th hoa đ ng ti n c ng không ng ng t ng lên, n m 2005 - 2006
kho ng 500 - 1000 cành/ngày, nh ng đ n n m 2012 - 2013 đư t ng lên 5000 - 7000
cành/ngày (B ng 2.1).
1.3.2. Tình hình s n xu t hoa đ ng ti n
Vi t Nam
Hoa đ ng ti n là 1 trong 10 lo i hoa quan tr ng nh t trên th gi i, sau h ng,
cúc, lan, c m ch
S
ng, lay n.... Trong các lo i hoa đ ng ti n đư và đang đ
T
H c li u ĐHTN
c tr ng
10
Vi t Nam thì hoa đ ng ti n kép nh p n i là m t trong nh ng cây cho hi u qu kinh t
cao nh t. T m t sàu hoa đ ng ti n gi ng m i ch m sóc đúng k thu t có th cho thu
nh p g n 50 tri u/sào/n m (Nguy n V n H ng, 2009) [9].
Vi t Nam, gi ng hoa đ ng ti n đ n đ
nh ng n m 1940.
c nh p v tr ng đ u tiên kho ng t
c đi m c a gi ng này là cây sinh tr
đi u ki n t nhiên. Tuy nhiên có m t s nh
đ n đi u nên hi n nay chúng ít đ
ng kh e, thích nghi t t v i
c đi m là cánh đ n, hoa nh , màu s c
c tr ng. T nh ng n m 1990, m t vài công ty và
nh ng nhà tr ng hoa Vi t Nam b t đ u nh p các gi ng đ ng ti n lai (hoa kép) t m t
s n
c nh : Trung qu c,
ài Loan, Hà Lan ...
u đi m c a các hoa này là hoa to,
cánh dày, màu s c phong phú, hình dáng hoa cân đ i, và n ng su t cao. Vì v y, các
gi ng này đ
c ti p nh n nhanh chóng và phát tri n r ng rưi. Bên c nh đó c ng có
không ít gi ng hoa đ ng ti n do không thích h p v i đi u ki n khí h u Vi t Nam, cây
sinh tr
(
ng, phát tri n kém, sâu b nh phá h i n ng, gây thi t h i cho ng
i tr ng hoa
ng V n ông, inh Th L c, 2003) [Error! Unknown switch argument.].
Hoa đ ng ti n đ
c tr ng khá ph bi n t i
à L t tr
c nh ng n m 1975 v i
m c đích c t cành, có nhi u màu khác nhau (vàng, đ , cam...), đ n n m 1980 có nh p
thêm m t s gi ng kép
Qu c,
Hà N i. T 1997 đư nh p n i h n 20 gi ng c a Hà Lan, Hàn
ài Loan. Trong đó gi ng c a Hà Lan cho ch t l
ng cao nh t v i nhi u màu
s c khác nhau.
Lâm
ng, s n xu t m r ng nhanh chóng, gia t ng hàng ch c l n v quy
mô, ch trong vài n m do nhu c u gia t ng c a th tr
ng tiêu dùng. Di n tích hoa t ng
t kho ng 60 ha nh ng n m đ u 1990 lên 750 ha n m 2003 và trên 3.200 ha gieo tr ng
vào n m 2009, trong đó riêng thành ph
à L t đư chi m h n 60% di n tích gieo tr ng
c a c t nh. Trình đ s n xu t c ng không ng ng đ
n
c đ i m i, c i thi n nh s bùng
ng d ng gi ng m i, ti n b k thu t và công ngh s n xu t tiên ti n (Ph m Xuân
Tùng, 2009) [18] .
V i s gia t ng v s l
tr ng hoa đ ng ti n c a n
thích tr ng hoa c a c n
ng c a ch ng gi ng hoa đ ng ti n thì di n tích đ t
c ta c ng t ng r t nhanh. N m 2005, trong t ng s di n
c thì cây đ ng ti n chi m 9% t ng 1,8 l n so v i n m 1995
và t ng g p 1,3 l n so v i n m 2000 (Nguy n Th Kim Lý, Lê
S
T
H c li u ĐHTN
c Th o, 2007) [11].
11
Hi n nay
đ
Vi t Nam, có kho ng h n 30 gi ng hoa đ ng ti n khác nhau đang
c tr ng ngoài s n xu t [66], các gi ng này có ngu n g c t Hà Lan, Trung Qu c,
màu s c phong phú, đa d ng. Hoa đ
à L t và các n i có khí h u
c tr ng ch y u
mát m .
T i vùng Trung du và mi n núi phía B c di n tích hoa c a toàn vùng có 135,7
ha. Trong đó, cây đ ng ti n có 9,7 ha chi m kho ng 0,07% trong c c u t ng di n tích.
S nl
ng hoa c a vùng đ t 44,08 tri u bông, trong đó s n l
tri u bông(Nguy n Th Kim Lý, Lê
ng hoa đ ng ti n đ t 3,1
c Th o, 2007) [11].
Do tr ng hoa đ ng ti n mang l i thu nh p r t cao nên nhi u n m qua, nhi u đ a
ng, h gia đình đư t tìm hi u đ phát tri n, tr ng lo i hoa này.
i n hình các
vùng tr ng hoa đ ng ti n t p trung có quy mô l n t vài ch c ha là
à L t (Lâm
ph
ng), V nh Tuy (Hà N i), B c Ninh, B c Giang ....
1.4.T ng quan v ph
ng pháp chi u x gơy đ t bi n t o v t li u kh i đ u trong
ch n gi ng cơy tr ng
M i m t ki u gen nh t đ nh c a m t gi ng ch cho m t n ng su t nh t đ nh.
Trong đi u ki n nuôi tr ng t i u thì thì m i gi ng ch cho m t n ng su t t i đa nh t
đ nh (m c tr n v n ng su t c a gi ng).
thu đ
c n ng cao h n thì ph i thay đ i
v t ch t di truy n c a gi ng do đó ta s d ng các tác nhân v t lí, hóa h c tác đ ng vào
b máy di truy n đ gây đ t bi n (Nguy n Minh Công, 2005) [4].
1.4.1. Quy trình t o gi ng m i b ng ph
ng pháp gây đ t bi n
- X lí m u v t b ng tác nhân gây đ t bi n:
đ t bi n có hi u qu cao, c n
l a ch n tác nhân gây đ t bi n thích h p, tìm hi u th i gian và li u l
N u x lí không đúng tác nhân, li u l
ng phù h p.
ng ho c th i gian có th làm ch t sinh v t,
ho c gi m kh n ng sinh s n, gi m kh n ng s ng.
- Ch n l c th đ t bi n có ki u hình mong mu n: D a trên các đ c đi m ki u
hình đ
c bi u hi n đ l a ch n các d ng đ t bi n phù h p nhu c u c a con ng
- T o dòng thu n ch ng: Sau khi nh n đ
c các th đ t bi n mong mu n, cho
chúng sinh s n đ nhân lên thành dòng thu n ch ng theo đ t bi n đ
c t o ra.
Hi u qu gây đ t bi n b ng s d ng các tia phóng x ph thu c vào:
S
T
H c li u ĐHTN
i.
12
+ Lo i tác nhân
+ Li u l
ng x lý
+ Tính ch t sinh lý c a cây tr ng, tu i và b ph n c a cây tr ng
+ i u ki n ngo i c nh khi x lý
Trong công tác gi ng cây tr ng, các tia đ
c chi u x lên h t khô, h t ph n, h t
đang n y m m, ch i, cành, thân đ gây đ t bi n (Tamikazu Kume và cs, 2000) [56].
1.4.2. X lý đ t bi n trong nuôi c y invitro ph c v ch n t o gi ng
Thu t ng “Bi n d dòng soma” l n đ u tiên đ
c Larkin và Scowcroft (1981)
mô t (A.Hoque và cs, 1995) [39]. Bi n d này liên quan đ n nh ng thay đ i v m t di
cây đ
truy n x y ra
c tái t o thông qua nuôi c y mô t bào th c v t. Tuy nhiên, t n
s và ph bi n d t phát là r t th p, ch a k đ n m t s bi n d có l i l i liên k t v i
nh ng đ c tính gây h i cho cây. Trong nh ng n m g n đây, vi c phát tri n ph
ng
pháp m i - x lý đ t bi n trong nuôi c y in vitro đư m ra tri n v ng l n trong c i t o
gi ng cây tr ng. Nh đó, t n s và ph bi n d dòng soma đư đ
c t ng lên đáng k .
M t trong nh ng u đi m n a c a gây t o đ t bi n trong nuôi c y in vitro là kh n ng
t o đ t bi n
giai đo n s m c a quá trình hình thành và phát tri n cá th (phôi non
ho c mô s o). Nh v y, t n s đ t bi n cao và kh n ng thu nh n nh ng th đ t bi n
đ ng nh t v ki u gen tr nên d dàng h n. Nuôi c y in vitro không nh ng là công c
h u hi u đ l u gi , duy trì và nhân nh ng th đ t bi n l , quý hi m mà còn là ph
pháp phân l p và làm thu n nh ng dòng đ t bi n có hi u qu . Trong nhi u tr
ng
ng h p,
nuôi c y in vitro là cách có hi u qu nh t đ duy trì và b o qu n nh ng bi n d di
truy n, đ c bi t là nh ng th đ t bi n kh m, nh đó kh c ph c đ
c s đào th i c a
nh ng t bào quý hi m do tính c nh tranh trong mô.
1.4.3. M t s k t qu nghiên c u v s d ng chi u x gây đ t bi n t o v t li u kh i
đ u trong ch n gi ng hoa
1.4.3.1. Các k t qu nghiên c u trên th gi i
i v i ch n t o cây hoa, đ t bi n là bi n pháp có hi u qu cao đ t ng c
ng
ngu n bi n d di truy n và h tr đ c l c trong ch n gi ng. Cho đ n nay, có hàng nghìn
S
T
H c li u ĐHTN
13
gi ng hoa, cây c nh đ t bi n đ
th
ng đ
c chính th c công nh n trên th gi i. M t s đ c đi m
c quan tâm khi ch n gi ng hoa, cây c nh đ t bi n là: Thay đ i màu s c hoa, đ c
đi m hình thái hoa, màu s c lá, gi m th i gian sinh tr
bi n, tia Gamma th
ng đ
c s d ng và đ
ng,… Trong s các tác nhân đ t
c nghiên c u t r t s m.
Jerzy và cs (2000) đư thí nghi m chi u x tia Gamma trên gi ng C m ch
Mini Pinky nuôi c y mô trong môi tr
các c
ng
ng MS b sung 0,02mg BA/l + 1,75 mg IAA/l
ng đ chi u x t 0,5 - 3 krad cho th y kh n ng tái sinh ch i và ra r t 1-3
krad gi m theo c
ng đ chi u x , nh t là
3 krad[35].
Theo Datta (2001) ch i c a 9 gi ng hoa h ng đ
sau đó các ch i này đ
c x lý tia Gamma (3-4 krad),
c ghép lên g c ghép (gi ng Rosa indoca var. Odorata). Gi ng
Orange Sesnation là gi ng m n c m nh t v i tia Gamma, gi ng Kiss of Fire là gi ng ít
m n c m nh t. K t qu là đư quan sát th y s gi m chi u cao cây (trong đó gi ng Kiss
of Fire gi m ít nh t, gi ng Zambra gi m nhi u nh t) và đ t bi n soma v màu hoa
t t
c các gi ng (tr gi ng Happiness)[27].
Paramesh T. H. và cs (2005) chi u x ch i c m ch
l
ng nuôi c y mô
các li u
ng 2, 4, 6 và 8 krad. C t lá c a ch i theo chi u ngang và nuôi c y trong môi tr
ng
MS b sung (1) 1,0 mg thidiazuron (TDZ) + 0,1 mg/l NAA (M5) và (2) 0,3 mg TDZ +
1,0 mg BAP + 0,1 mg/l NAA (M6). Hàng tu n theo dõi t l s ng, hình thành mô s o,
tái sinh ch i, di n tích m u lá. K t qu cho th y
li u chi u 4 krad là li u t t nh t đ
xu t hi n các bi n d . T l s ng gi m d n khi li u chi u t ng lên. Môi tr
ng M6 cho
kh n ng tái sinh t t h n[50].
G n đây, công ngh chùm ion (Hib) đư thu hút s quan tâm ngày càng t ng
trong ch n gi ng hoa b ng đ t bi n. K thu t ch n gi ng đ t bi n đư đ
trên m t s cây hoa chính nh cúc, lan, h ng, c m ch
c ng d ng
ng. Ch n gi ng v i s h tr
c a đ t bi n cùng v i công ngh sinh h c (MAB) đư có đóng góp đáng k nâng cao
ch t l
ng gi ng hoa và mang l i nh ng l i ích kinh t -xư h i cho các n
c đang phát
tri n.
i n hình là thành công v đ t bi n trong ch n gi ng hoa cây c nh
các n
c
ng t ) đư thu đ
c
Thái Lan, Malaysia và Indonesia (Jain, 2006) [34].
Hi u qu c a vi c chi u x chùm ion (công ngh chùm l
các d ng đ t bi n hoa
S
cây c m ch
T
ng. Các m u lá c a gi ng Vital đ
H c li u ĐHTN
c chi u b ng
14
ngu n ion carbon và nuôi c y đ n khi ch i tái sinh xu t hi n. Ph đ t bi n thu đ
ct
chi u x ion carbon l n h n chi u x tia Gamma. N m 2002, m t s gi ng c m
ch
ng m i thu đ
c t chi u x ion đư đ
và Nh t B n. M t ph
T gi ng c m ch
c phát tri n và th
ng pháp khác c ng đ
ng Star, ng
ng m i hoá
châu Âu
c ng d ng là chi u x sâu tia Gamma.
i ta đư thu đ
c đ t bi n màu vàng qua vi c dùng c
chi u x chùm ion và chi u x sâu tia Gamma (Okamura và cs, 2006) [49].
Theo báo cáo c a H.Nakagawa (2008) Nh t B n đư t o ra t ng s 50 gi ng hoa
cúc, 10 gi ng hoa h ng m i b ng các tác nhân v t lý. Trong đó, chi u x b ng tia
Gamma là 32 gi ng hoa cúc và 7 gi ng hoa h ng. T l gi ng cây tr ng m i t o ra
b ng gây đ t bi n chi u x tia Gamma chi m 60,3% trên t ng s gi ng cây tr ng đ t
bi n[44].
Kelly Marie Oates và cs (2011) đư nghiên c u nh h
tia Gamma đ n s s ng sót và sinh tr
h
ng d
ng c a các li u chi u x
ng c a cây hoa Rudbeckia spp (thu c h hoa
ng)in vitro và ex vitro. Các mô s o đ
c chi u x
20 và 40 Gy. K t qu cho th y giai đo n đ u mô s o không b
các li u chi u 0, 5, 10,
nh h
ng b i các li u
chi u x , sau 2 tháng chi u x thì kh n ng s ng sót c a mô s o gi m đáng k khi t ng
li u chi u. Các ch tiêu theo dõi nh chi u cao cây, đ
đ
ng kính thân, s l
ng hoa,
ng kính hoa, t l s ng và kh n ng n hoa đ u gi m khi li u chi u t ng lên.
chi u 20 Gy quan sát th y có xu t hi n m t s tính tr ng khác nh thay đ i đ
li u
ng kính
nh , hình thái nh và màu s c c a nh hoa, cách s p x p các cánh hoa không đ u[36].
K t qu nghiên c u n i b t v ph
ng pháp chi u x trong t o gi ng hoa
c aWipaporn Sawangmee, Thunya Taychasinpitak (2011) là s k t h p gi a chi u x
tia Gamma ngu n Co60 v i tia Gamma ngu n Cs137 đư t o ra s đ t bi n màu s c hoa
t tím sang vàng trên cây Torenia lai (Linderniaceae). Tia Gamma ngu n Co60 đ
d ng
các li u chi u 0, 50, 70, 90, 110 Gy và tia Gamma ngu n Cs137 đ
c s d ng
cs
các
li u 0, 50, 100, 150 và 200 Gy[60].
S tác đ ng c a các li u chi u x trên đ i t
(2012)
ng cây hoa lily c a Xi M và c ng s
các li u chi u 0; 0,5; 1; 1,5; 2; 2,5 Gy đư cho th y các li u chi u t ng lên thì kh
n ng s ng và kh n ng ra hoa c a lily (Lilium longiflorum) gi m. Trong đó li u chi u 1,0
Gy làm gi m t l s ng xu ng còn 53,33% và t n s đ t bi n là 39,27%[61].
S
T
H c li u ĐHTN
15
M t nghiên c u g n đây gây đ t bi n b ng ph
ng pháp chi u x tia Gamma
k t h p v i hóa ch t EMS c ng tác đ ng gây bi n đ i màu s c hoa, hình thái hoa, qu ,
h t nh ng không ph i trên cây hoa mà
đ
cây đ u đ a (Vigna unguiculata L. Walp)
c th c hi n b i nhóm tác gi Girija M c a
(Girija M, 2013). Nghiên c u đ
i h c Annamalai, Tamil Nadu, n
c th c hi n chi u x tia Gamma
25, 30 krad và x lý hóa ch t ethyl methane sulphonate (EMS)
các li u l
ng 20,
các n ng đ 20, 25,
30 mM lên h t gi ng đ u đ a, so sánh v i đ i ch ng không x lý. Sau đó ti n hành
cho t th ph n qua 5 th h đ quan sát hình thái khác nhau
cô l p các đ t bi n thu nh n đ
màu và h t là
li u l
th h M6. Ti n hành
c. K t qu cho th y t n s đ t bi n cao nh t cho hoa
ng 25 krad và n ng đ 25mM EMS [33].
Qua nghiên c u phân tích m i liên h di truy n c a gi ng hoa cúc t o ra b ng
gây đ t bi n chi u x tia Gamma t gi ng hoa cúc g c ban đ u, nhóm nghiên c u t i
Hàn Qu c đ ng đ u là Eun-Jeong Kang và các c ng s (2013) đư s d ng ch th phân
t AFLP đ phân tích các đ t bi n t o ra t chi u x
Gy. K t qu đánh giá cho th y
các li u 0, 30, 50, 70 và 100
li u 30 Gy có nhi u ki u gen đa d ng và khác v i
gi ng g c nh t[32].
Các nghiên c u
cơy hoa đ ng ti n:
Tác gi KaushalK., Nath A.K. (1996) đư tìm ra li u chi u x gây đ t bi n mô
s o tái sinh t mô lá trên môi tr
krad. Còn
ng BAP 0,5 mg/l và NAA 0,75 mg/l là 0,5; 1; 3; 5
ch i đ ng ti n là 0,5 krad và k t qu đư tìm ra đ
c 7 d ng đ t bi n khác
nhau trong giai đo n in vitro v màu s c, thân, lá, hoa.
Tác gi LaneriU., FaconiR., Altavista P. (2000) đư nghiên c u x lí gây đ t
bi n ch i đ ng ti n (gi ng hoa đ ng ti n màu h ng)
li u x lí 2 krad (0,98 krad/h).
Sau đó nhân các cây s ng sót sau 2 l n c y chuy n. Sau khi hình thành r , cây con
đ
c tr ng trong nhà kính và đ
trong nhà kính v s l
c phân tích.
ư thu đ
ng hoa, chi u dài và chi u r ng cánh hoa.
Tác gi Xiao - Shan Shen và c ng s (2004) ng
nh h
c 15% s đa d ng sau tr ng
i Trung Qu c đư nghiên c u
ng c a li u chi u x đ n ch i đ ng ti ntrong các môi tr
M3 (là các môi tr
ng tái sinh mô s o, môi tr
ng nuôi c y M1, M2,
ng tái sinh ch i và môi tr
ng t o r )
trong in vitro. V t li u s d ng đ chi u x là mô s ođ ng ti n, k t qu đư tìm ra đ
S
T
H c li u ĐHTN
c
16
li u chi u x gây ch t mô s ođ ng ti n là t 8 - 9 krad và li u chi u x có hi u qu gây
đ t bi n là 5-6 krad.
N m 2011, Sanatsujat Singh và c ng s
Vi n Công ngh
Himalayan
Bioresource đư ti n hành nghiên c u s bi u hi n hình thái c a nh hoa đ ng ti n tr ng
b ng ph
ng pháp gây đ t bi n chi u x tia Gamma
K t qu cho th y có s gia t ng v s l
các li u l
ng t 1 - 5 krad.
ng và cách s p x p các bó m ch trong mô
phân sinh n hoa đ ng ti n gây lên s bi n d ng và b t đ i x ng
đ u hoa[51].
N m 2012, Nor A Hasbullah và các c ng s đư nghiên c u nh h
tia Gamma đ i v i s sinh tr
ng c a chi u x
ng c a cây hoa đ ng ti nGerbera jamesoniiin vitro
giai
đo n mô s o, s hình thành ch i và cây con. Các tác gi đư ti n hành vào m u h t cây hoa
đ ng ti n trên môi tr
ng MS + 30 g/l đ
ng sucrose + 8,0 g/l agar, pH môi tr
ng là 5,8.
H t gi ng n y m m trong ng nghi m sau 6 - 7 ngày nuôi c y và t o cây hoàn ch nh sau 6 8 tu n. Sau đó các cây in vitro đ
c chi u x
các li u chi u 10, 20, 30, 40, 50 và 60 Gy,
t c đ chi u x là 0,204 Gy/giây.Cây sau khi chi u x đ
c c y duy trì trong môi tr
MS có b sung 2,0 mg/l BAP và 0,5 mg/l NAA. K t qu thu đ
sinh
các cây chi u x gi m so v i cây đ i ch ng.
ng
c sau 8 tu n là s ch i tái
li u 20 Gy s ch i tái sinh gi m
xu ng t 7,5± 0,4 (đ i ch ng) xu ng còn 6,6 ± 0,9; chi u cao cây và tr ng l
ng t
mô s o c ng gi m xu ng ch còn 76,4 ± 2,2% so v i đ i ch ng là 89,7 ± 0,5%.
t 30, 40, 50 và 60 Gy đ u quan sát th y xu t hi n nh ng b t th
ic a
các li u
ng trong các ch i cây
đ c hình thành [47].
1.4.3.2. Các k t qu nghiên c u trong n
c
Vi t Nam, l nh v c ng d ng đ t bi n th c nghi m trong ch n t o gi ng cây
tr ng đư đ
c tác gi L
nh ng n m 1980, h
đ nh h
ng
ình C a kh i x
ng nghiên c u này m i đ
ng t nh ng n m 1960. Nh ng đ n
c phát tri n t
ng đ i có h th ng và
ng. Sau đó, là m t lo t nghiên c u c a các tác gi nh : Tr n Duy Quý,
Nguy n H u
ng, Tr n
ình Long, Nguy n Minh Công, Mai Quang Vinh, Tr n Tú
Ngà, Tr n Minh Nam, Lê Duy Thành,... trên nhi u đ i t
ng cây tr ng khác nhau nh :
lúa, ngô, đ u, l c, táo, cà chua, d a h u,...( ào Thanh B ng và cs, 2006) [2].
Trong nh ng n m qua, nh áp d ng các k thu t gây đ t bi n nhân t o nh :
chi u x h t gi ng tr
S
c khi gieo, chi u x h t, c , qu khi b o qu n,… các nhà ch n
T
H c li u ĐHTN
17
gi ng trong n
c đư thu đ
ngô, cà chua, đ u t
l
c nh ng thành t u đáng k , t o ra hàng ch c gi ng lúa,
ng…, góp ph n làm t ng n ng su t, ph m ch t và s n l
ng
ng th c hàng n m.
Cây hoa là đ i t
ng m i đ
c quan tâm nghiên c u trong th i gian g n đây,
ng d ng đ t bi n trong ch n t o gi ng còn r t m i m .
nh ng k t qu
N m 2002,
Quang Minh, Nguy n Xuân Linh đư b
c đ u t o ngu n v t li u
kh i đ u cho ch n t o gi ng cúc b ng vi c gây đ t bi n th c nghi m t vi c chi u x
tia Gamma (Co60) trên ch i in vitro. Tác gi cho r ng tia Gamma (Co60) đư gây nh
h
ng đ n kh n ng sinh tr
hình thái và gây hi n t
ng và phát tri n c a cây hoa cúc in vitro, nh h
ng đ n
ng b ch t ng, d d ng thân, lá [11].
N m 2005, ào Thanh B ng và các c ng s thu c Vi n Di truy n Nông nghi p
đư công b k t qu ch n gi ng hoa cúc b ng chi u x in vitro và đư thu đ
c nhi u
màu s c hoa khác nhau, d ng hoa khác nhau, d ng hoa khác nhau. V t li u đem chi u
x là kh i mô s o c a gi ng hoa cúc màu tr ng CN43, các tác gi đư s d ng d i li u
l
ng chi u x t 1,0 đ n 15 kard. K t qu thu đ
v kh n ng tái sinh ch i là t 5,0 krad và thu đ
c cho th y li u l
ng gây ch t 50%
c 3 th đ t bi n màu hoa (màu vàng,
màu h ng và màu chóp cánh hoa màu xanh) [3].
N m 2007, Nguy n Th Kim Lý, Lê
c Th o đư dùng ph
đ t bi n trên các gi ng hoa Cúc CN93, CN98, CN43 và thu đ
v ng.
ng pháp chi u x
c 4 dòng có tri n
ng th i, Vi n Di truy n Nông nghi p c ng đang ti n hành x lý chi u x
b ng tia X v i li u l
ng 2 - 10 krad cho các cành h ng giâm và hoa đ ng ti n đ
c
x lý b ng hóa ch t EMS n ng đ 0,25 - 0,5%, m t s dòng có tri n v ng đang đ
c
ti n hành theo dõi và nhân th nghi m[11].
N m 2008, Nguy n Mai Th m dùng ph
gi ng hoa h ng đ a ph
ng pháp chi u x gây đ t bi n trên 2
ng và 3 gi ng nh p n i, đư thu đ
c nh ng bi n d di truy n
n đ nh v hình thái hoa và đ xu t 2 m u gi ng có tri n v ng cho s n xu t[17].
N m 2009, Lê
ch
c Th o chi u x tia Gamma trên cành giâm và ch i c m
ng in vitro t 0,5 - 7,0 krad đư thu đ
dòng SP25-1 và m t s dòng c m ch
S
T
c nhi u bi n d có l i và ch n l c đ
ng có tri n v ng[15].
H c li u ĐHTN
c