Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
M CL C
M
U ........................................................................................................... 3
N I DUNG........................................................................................................ 5
Ch
1.1.
ng 1: T NG QUAN TÀI LI U ............................................................. 5
IC
NG V VITAMIN C .................................................................. 5
1.1.1. Công th c vƠ nh n đ nh ........................................................................... 5
1.1.2. Tính ch t hóa h c ..................................................................................... 6
1.1.3. Tính ch t sinh hóa .................................................................................... 9
1.1.4. Các ngu n cung c p Vit.C ..................................................................... 10
1.2. CÁC PH
1.2.1. Ph
NG PHÁP XÁC
ng pháp hóa h c ............................................................................. 11
1.2.2. Các ph
1.2.2.1. Các ph
ng pháp phơn tích công c ...................................................... 13
ng pháp phơn tích quang h c ............................................... 13
1.2.2.2. Nhóm các ph
Ch
NH VITAMIN C ................................... 11
ng pháp phơn tích đi n hóa ........................................ 15
ng 2: TH C NGHI M ........................................................................ 23
2.1. D NG C VÀ HịA CH T .................................................................... 23
2.1.1. D ng c .................................................................................................. 23
2.1.2. Thi t b , máy móc .................................................................................. 23
2.1.3. Hóa ch t.................................................................................................. 23
2.2. CÁC V N
NGHIÊN C U ................................................................ 24
2.2.1.Nghiên c u c b n .................................................................................. 24
2.2.1.1. Kh o sát tính ch t c c ph c a Vit.C trong m t s n n ..................... 25
2.2.1.2. Kh o sát nh h
ng c a oxi hòa tan ................................................... 27
2.2.1.3. Kh o sát pH c a n n axetat ................................................................. 27
2.2.1.4. Kh o sát n ng đ n n axetat ............................................................... 27
2.2.1.5. Kh o sát kho ng n ng đ tuy n tính ................................................... 28
2.2.1.6. Kh o sát các ch t nh h
Nguy n Thu Trang
ng............................................................... 31
1
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
2.2.1.7. Kh o sát đ b n c a Vit.C theo th i gian ........................................... 32
2.2.2.
ng d ng xác đ nh Vit.C trong m u th c t .......................................... 33
2.2.2.1. X lý m u ............................................................................................ 33
2.2.2.2. Ph
Ch
3.1.
ng pháp x lý k t qu ................................................................. 33
ng 3: K T QU VÀ TH O LU N .................................................... 35
I U KI N T I
U XÁC
NH VIT.C B NG PH
NG PHÁP
C C PH (VÔN-AMPE)................................................................................ 35
3.1.1. Ch n n n ................................................................................................ 35
3.1.2. nh h
ng c a oxi hòa tan .................................................................... 37
3.1.3. pH c a n n axetat ................................................................................... 38
3.1.4. N ng đ dung d ch đ m axetat .............................................................. 41
3.1.5. Kho ng n ng đ t i u ........................................................................... 42
3.1.5.1. Xơy d ng đ
ng chu n ....................................................................... 42
3.1.5.2. Ki m tra đ
ng chu n ......................................................................... 44
3.1.5.3. Gi i h n phát hi n c a ph
3.1.6. Kh o sát các ch t nh h
ng pháp .................................................. 46
ng.................................................................. 46
3.1.6.1. Kh o sát nh h
ng c a các axit h u c ............................................ 47
3.1.6.2. Kh o sát nh h
ng c a ion clorua ..................................................... 48
3.1.7.
b n c a Vit.C trong các môi tr
3.2. XÁC
ng khác nhau ............................... 50
NH VIT.C TRONG M U TH C T ......................................... 53
3.2.1. M u n
c trái cơy t
i: N
3.2.2. M u n
c đóng h p: N
c cam ép ................................................... 53
c cam ép Mrdink .......................................... 54
K T LU N ..................................................................................................... 58
TÀI LI U THAM KH O ............................................................................. 60
Nguy n Thu Trang
2
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
M
ng HSP Hà N i 2
U
VitaminC (Vit.C) hay còn đ
c g i lƠ axit L-ascobic lƠ m t trong
nh ng lo i h p ch t ph bi n vƠ có vai trò quan tr ng đ i v i s s ng c a con
ng
i.
Vit.C đóng vai trò thi t y u trong các quá trình sinh hóa x y ra trong c
th ng
i, nó tham gia vƠo quá trình trao đ i ch t, đi u ti t quá trình sinh t ng
h p hoormon, lƠ ch t đ kháng cho c th sinh v t, ch t ch ng lƣo hóa các t
bào...
N u thi u Vit.C có th gơy b nh Scrobut, bi u hi n ban đ u: m t m i,
đau c , x
d
ng kh p, chán n, da khô ráp, ch y máu chơn r ng, xu t huy t
i da, v t th
ng ch m li n s o, thi u máu… N u không đi u tr k p th i s
b phù ti u c u, th n kinh b kích thích, xu t huy t nƣo vƠ ch t.
Vit.C s d ng trong các ngƠnh công nghi p th c ph m v i vai trò lƠ
ch t ch ng oxi hóa. Nó giúp cho các s n ph m gi đ
quá trình b o qu n. Nhi u lo i hƠng hóa trên th tr
n
c ép trái cơy đóng h p, b t dinh d
ch t l
i ngon trong
ng nh n
c gi i khát,
ng tr em... ch a Vit.C nh m duy trì
ng s n ph m.
Các lo i hoa qu t
i nh n
nhiên, r t t t cho s c kh e con ng
con đ
cs t
ng nhơn t o nh n
Nguy n Thu Trang
c Cam ép lƠ ngu n cung c p Vit.C t
i. NgoƠi ra Vit.C còn đ
c u ng đóng h p. HƠm l
3
c t ng h p theo
ng Vit.C trong n
c
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
u ng đóng h p, đ c bi t lƠ trong n
SHIN Vi t Nam lƠ lo i n
ng
ng HSP Hà N i 2
c cam ép Mrdink c a công ty YNG
c u ng đáp ng nhu c u cao v vitamin c a c th
i c ng nh c a các ngƠnh công nghi p có liên quan.
Tuy nhiên Vit.C lƠ 1 ch t r t d b phơn h y trong đi u ki n nhi t đ vƠ
ánh sáng bình th
ng. Do đó, vi c xác đ nh nó trong các đ i t
cách chính xác, nhanh chóng lƠ m t yêu c u hƠng đ u đ
ng trên m t
c đ t ra.
Vi t
Nam, ph
ng pháp xác đ nh hƠm l
ng Vit.C trong các phòng thí nghi m ch
y u lƠ ph
ng pháp chu n đ th tích, có đ chính xác vƠ đ nh y không cao.
Theo nghiên c u Vit.C lƠ m t h p ch t có tính kh , có th phơn tích b ng các
ph
ng pháp đi n hóa, đ c bi t lƠ ph
m t trong nh ng ph
ng pháp c c ph (Vôn-ampe).
ơy lƠ
ng pháp phơn tích h p ch t h u c nhanh vƠ đ t đ
c
đ chính xác cao, h n n a chi phí cho máy móc vƠ hóa ch t r t phù h p v i
đi u ki n c a phòng thí nghi m
Vi t Nam. Vì v y em đƣ ch n đ tƠi nghiên
c u:
XÁC
N
NH HÀM L
NG VITAMIN C TRONG N
C MRDINK ÓNG H P B NG PH
C CAM ÉP VÀ
NG PHÁP VÔN-AMPE’’
Nhi m v chính đ t ra:
- Nghiên c u quy trình xác đ nh Vit.C b ng ph
ng pháp c c ph
(Vôn-ampe) m t cách nhanh chóng, đ chính xác cao, chi phí th p, d th c
thi trong các phòng thí nghi m
Vi t Nam.
- ánh giá đ tin c y c a quy trình phơn tích.
trái cây t
ng d ng xác đ nh Vit.C trong m t s đ i t
i, các s n ph m n
Nguy n Thu Trang
ng trên th tr
ng: n
c
c đóng h p…
4
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
N I DUNG
Ch
1.1.
IC
ng 1: T NG QUAN TÀI LI U
NG V VITAMIN C
1.1.1. Công th c vƠ nh n đ nh
Vitamin C lƠ tên th
ng g i c a axit L-ascobic, có tên qu c t lƠ:
2-oxo-L-threo-hexono-1,4-lactone-2,3-enediol
ho c: (R)-3,4-dyhydroxy-5-((S)-1,2-dyhydroxylethyl)furan-2-(5H)-one.
Công th c phơn t : C6H8O6
Kh i l
ng phơn t : 176,1
Nhi t đ nóng ch y: 193°C
Công th c c u t o:
6CH2OH
5
OH
O
1
4
3
HO
2
O
OH
(* )
pK1 (C3-OH): 4,2
pK2 (C2-OH): 11,6
Trong công th c c u t o c a axit ascobic, C4*,C5* lƠ Cacbon b t đ i, vì
v y t n t i 4 đ ng phơn quang h c: axit L-ascobic, axit izo L-ascobic, axit D-
Nguy n Thu Trang
5
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
ascobic, axit izo D-ascobic. Trong các đ ng phơn nƠy ch có axit L-ascobic và
axit izo L-ascobic lƠ có tác d ng ch a b nh, còn các đ ng phơn D vƠ izo D là
các antivitamin, t c lƠ ch t c ch tác d ng c a vitamin. Trong thiên nhiên
ch t n t i d ng axit L-ascobic, còn các đ ng phơn khác ch thu đ
con đ
c b ng
ng t ng h p.
Axit ascobic r n lƠ nh ng tinh th đ n tƠ, không mƠu, không mùi, có v
chua, nóng ch y
r
193°C. Axit ascobic d tan trong n
c, ít tan h n trong
u vƠ không tan trong các dung môi h u c không phơn c c.
Axit ascobic r t d b phơn h y d
i tác d ng c a ánh sáng, nhi t đ .
Vì v y c n b o qu n axit ascobic trong bóng t i vƠ nhi t đ th p.
1.1.2. Tính ch t hóa h c
a. Tính kh
Axit ascobic lƠ ch t kh m nh, có bán ph n ng nh sau:
CH2OH
CH2OH
OH
O
OH
O
O
O
+
HO
OH
O
Ax it L- ascobic
O
Ax it L- dehidr oascobic
Th kh c a nó ph thu c nhi u vƠo pH c a môi tr
Axit ascobic
2H + + 2e-
ng.
d ng khan, khá b n v ng, nh ng do trong phơn t có 2
nhóm OH đính vƠo C ch a no (C2,C3) nên khi b
m
t ho c
trong dung
d ch nó r t d b oxi hóa, ngay c b i oxi không khí, nh t lƠ khi có m t các
ion kim lo i: đ ng, s t, magiê,… theo ph n ng sau:
Nguy n Thu Trang
6
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
CH 2OH
CH2OH
OH
OH
O
O
O
HO
ng HSP Hà N i 2
O
1/2 O2
OH
H 2O
O
O
S n ph m t o ra lƠ axit L-đehiđroascobic, ch t nƠy c ng có ho t tính
sinh h c t
ng t nh axit L-ascobic, nh ng không b n, nó d b th y phơn
phá vòng t o axit 2,3-đixetogulonic CH2OH-(CHOH)2-CO-CO-COOH, là
ch t không có tác d ng sinh hóa.
C ch s phơn h y c a axit ascobic b i ch t oxi hóa có th đ
c bi u
di n theo s đ sau:
CH 2OH
CH 2OH
OH
OH
O
O
- 2e-
O
2H +
O
+2e +2H +
HO
OH
C HO
OH
HO
[ O]
CH 2OH
COOH
OH [ O]
CH 2OH
C O
OH
H 2O
O
HO
CH 2OH
Ax it 2,3- dix etogulonic
C HO
C OOH
[ O]
HO
C HO
OH
H 2O
CH 2OH
Ax it L- dehidr oascobic
HO
COOH
HO
O
Ax it L- ascobic
COOH
COOH
C O
[ O]
HO
CH 2OH
CH 2OH
CH 2OH
[ O]
C HO
[ O]
COOH
COOH
[ O]
[ O]
CH 2OH
HO
C O
[ O]
COOH
CH 2OH
C O
C O
CH 2OH
CH 2OH
HO
CH 2OH
Có th
COOH
[ O]
C O
CH 2OH
th y, axit L-ascobic đ u tiên b oxi hóa thƠnh axit L-
đehiđroascobic. D
i tác d ng c a n
c, axit L-đehiđroascobic b th y phơn
m vòng t o thƠnh axit 2,3-đixetogulonic không còn ho t tính vitamin n a.
Ph n ng nƠy không thu n ngh ch, t ng nhanh theo pH vƠ nhi t đ c a dung
Nguy n Thu Trang
7
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
d ch. Ti p theo, axit 2,3-đixetogulonic b phơn h y thƠnh m t lo t các s n
ph m trung gian khác, cu i cùng t o axit oxalic.
NgoƠi s phơn h y theo ki u oxi hóa, axit ascobic còn có xu h
phơn h y theo ki u th y phơn trong môi tr
ng
ng ki m ho c axit m nh thƠnh
fufurol vƠ các s n ph m khác qua ph n ng decacboxyl hóa vƠ dehydrat hóa
T
ng t nh v y,axit ascobic d dƠng nh
ng hiđro cho các peoxit, vì
v y ng n không cho các peoxit oxi hóa các h p ch t khác. Do đó, ng
i ta s
d ng axit ascobic lƠm ch t ch ng oxi hóa trong công nghi p ch bi n.
b. Tính axit
Trong dung d ch n
t
c axit ascobic lƠ m t axit y u
n c 1, pK a,1=4,2
ng ng v i quá trình phơn ly H+ c a nhóm OH đính vƠo C3(*) vƠ r t y u
n c 2, pKa,2=11,6 t
ng ng v i s phơn ly H+ c a nhóm OH đính vƠo C2(*).
Axit ascobic d dƠng ph n ng v i dung d ch baz m nh nh NaOH,
KOH, Ca(OH)2 t o mu i.
CH 2OH
CH2OH
OH
OH
O
O
HO
O
+
OH
NaO
Các mu i nƠy d tan trong n
ng
n
O
NaOH
+
H 2O
OH
c h n axit ascobic nên trong công nghi p
i ta s d ng d ng mu i c a axit ascobic lƠm ch t b o qu n các dung d ch
c qu .
Trong dung d ch ki m đ c, vòng -lacton b phá v t o mu i gluconat:
CH 2OH
OH
O
O
HO
+ NaOH
CH 2OH (CHOH)3 C COONa + H 2O
OH
Nguy n Thu Trang
O
8
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
Tuy nhiên, khi axit hóa và đun nh thì vòng lacton l i l p l i.
c. Tác d ng v i axit h u c t o este
Trong CTCT c a axit ascobic có nhi u nhóm OH nh nhóm ch c r
u,
có kh n ng t o este v i các axit h u c , đ c bi t lƠ các axit béo nh axit
panmitic, axit stearic. S n ph m t o este d ng 6-O-axyl L-ascobic (ascobyl
panmitat, ascobyl stearat), có m ch cacbon dƠi, d tan trong d u. Nh ng este
nƠy đ
c t ng h p dùng lƠm ch t b o qu n ch t béo trong công nghi p ch
bi n. M t s d n xu t khác c a axit ascobic c ng đ
CH2OH
CH2OH
OH
O
R
OH
O
O
OR
2- O- ankyl ax it ascobic
CH 2OCOR
RO
OH
5,6- O- ankyliden
ax it ascobic
CH 2OH
CH 2OH
OH
OH
O
O
6- O- ankanoyl ascobat
HO
OH
3- O- ankyl ax it ascobic
O
OH
O
O
OH
HO
O
O
O
HO
c s d ng lƠ:
O
O
HO
OCOR
2- O- ankanoyl ascobat
O
ROCO
OH
3- O- ankanoyl ascobat
Trong đó, R lƠ các g c hiđrocacbon m ch dƠi, có th no ho c không no,
giúp cho các d n xu t c a axit ascobic d tan trong d u béo h n.
1.1.3. Ho t tính sinh hóa
Vit.C có tác d ng t ng c
hi n t
ng s c đ kháng cho c th , ch ng l i các
ng choáng ho c ng đ c hóa ch t, đ c tính c a vi trùng do tính ch t
kh m nh c a Vit.C.
Nguy n Thu Trang
9
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
Vit.C tham gia vƠo quá trình oxi hóa kh khác nhau c a c th nh :
Chuy n hóa h p ch t th m thƠnh phenol; quá trình hyđroxyl hóa triptophan
thƠnh hyđroxyltritophan; đi u hòa s t o AND t ARN; chuy n procolagen
thƠnh colagen, nh có quá trình hyđroxyl hóa prolin thƠnh oxyprolin c n thi t
cho vi c t ng h p colagen, vì v y Vit.C lƠm cho v t th
ng mau lƠnh.
Vit.C có v trí quan tr ng trong quá trình hình thƠnh các hoormon c a
tuy n giáp tr ng vƠ tuy n trên th n.
Khi c th thi u Vit.C s xu t hi n các tri u ch ng b nh lí nh : ch y
máu
l i, r ng, l chơn lông ho c các c quan n i t ng, đó là do thành các
m ch máu b m ng.
C th bình th
ng có nhu c u Vit.C trong 24h là: 60÷80 mg
1.1.4. Các ngu n cung c p Vit.C
Trong t nhiên, th c v t t ng h p đ
c Vit.C, không th y xu t hi n
Vit.C trong các s n ph m t đ ng v t nh : th t, tr ng, s a…
M t s c th s ng có kh n ng t ng h p Vit.C t D-glucozo nh tác
d ng c a enzim theo s đ sau:
HOHC
H OH
HO
H
H OH
O
H
CH 2OH
HOHC
H OH
HO
H
H OH
O
H
COOH
[ O]
enzim
[ H]
enzim
CH 2OH
H OH
HO
H
H OH
H OH
COOH
D- glucozo
CH 2OH
OH O
CH 2OH
OH
O
enzim
OH
H
HO
O
O
[ O]
enzim
HO
H
OH
Ax it L- ascobic
Nguy n Thu Trang
10
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Ngoài ra con ng
ch ph m d
Tr
i t ng h p Vit.C nh m các m c đích khác nhau. Các
c ch ch a Vit.C, hay các viên vitamin t ng h p trong đó có
Vit.C dùng m c đích ch a b nh, t ng c
lo i n
ng HSP Hà N i 2
ng s c đ kháng cho ng
c hoa qu , gi i khát, b t dinh d
i m. Các
ng tr em, s a,… ch a m t l
nh Vit.C, lƠ m t tiêu trí qu ng cáo cho s n ph m. M t l
ng
ng l n Vit.C làm
ch t b o qu n th c ph m.
Trong công nghi p d
c ph m, Vit.C đ
c t ng h p qua các giai đo n sau:
CH O
CH 2OH
CH 2OH
CH 2OH
OH
H OH
C O
H 3C O C
H 2/Ni HO H
H
C
oxi hóa
HO H + 2CH 3COCH 3
O H
OH
H OH Acetobacter xylinum H OH
H 3C
H+
H
O
O
H
HO
H
H
HO
H
C
CH 2OH
CH 2OH
CH 2OH
CH 2 O
D- Sobozo
D- glucozo
D- Sobitol
H
HO
H
HO
CH 3
CH 3
[ O]
COOH
CO
CO
HO C
O
HO C
H
HO
H
H+
T automehóa
C O O
HO H
H
H
HO
+ 2H 2O, H +
- 2CH 3COCH 3
H 3C O C
C
O H
H 3C
O
H
O
H
CH 2OH
CH 2OH
CH 3
C
CH 2 O
CH 3
Vitamin C
1.2. CÁC PH
NG PHÁP XÁC
Có th chia các ph
NH VIT.C
ng pháp xác đ nh Vit.C thƠnh 2 nhóm l n:
- Nhóm các ph
ng pháp phơn tích hóa h c
- Nhóm các ph
ng pháp phơn tích công c
1.2.1. Ph
ng pháp phơn tích hóa h c
Trong các ph
hóa kh đ
ng pháp phơn tích hóa h c, ph
ng pháp chu n đ oxi
c s d ng nhi u nh t, d a vƠo tính ch t d b oxi hóa thƠnh axit
đehiđroascobic c a axit ascobic.
oxi hóa ng
i ta s d ng các thu c th
khác nhau nh : 2,6-điclophenoindophenol, brom, iot, thu c th Feling…
Nguy n Thu Trang
11
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
2,6-điclohenoindophenol đ
Tr
c coi nh
ng HSP Hà N i 2
lƠ thu c th
chu n dùng đ
chu n đ chính xác Vit.C m t cách tr c ti p. Nó lƠ m t ch t oxi hóa có mƠu
xanh đ m, có công th c phơn t lƠ: C12H6Cl2NO2, max trong dung d ch n
c
b ng 602nm. Khi ph n ng v i axit ascobic nó b kh thƠnh m t h p ch t
không màu.
C6H8O6 - 2H+ - 2e- C6H6O6
C12H7Cl2NO2 + 2H+ + 2e- C12H9Cl2NO2
Ng
i ta có th theo dõi quá trình chu n đ b ng m t, đo quang hay đo
đi n th .
Vi c chu n đ axit ascobic thông th
ng đ
c ti n hƠnh b ng cách nh
t t dung d ch thu c th t buret vƠo dung d ch nghiên c u ch a axit ascobic
trong môi tr
ng có pH thích h p.
i m cu i chu n đ đ
s xu t hi n mƠu c a gi t thu c th d đ u tiên. Ph
đ
c áp d ng tr c ti p đ xác đ nh Vit.C trong d
các đ i t
ng khác nh rau qu , l
ng pháp nƠy có th
c ph m. Tuy nhiên trong
ng th c, th c ph m th
kh khác n a vƠ dung d ch nghiên c u th
c nh n ra khi có
ng ch a các ch t
ng có mƠu vƠ đ c, gơy khó kh n
cho vi c xác đ nh đi m cu i chu n đ .
Ng
i ta c ng có th chu n đ axit ascobic b ng dung d ch iot, v i ch t
ch th h tinh b t đ xác đ nh Vit.C trong b p c i, ho c chu n đ gián ti p,
xác đ nh Vit.C trong m t ong, b ng cách thêm l
dung d ch m u đƣ đ
đ
ng d dung d ch KBr vào
c axit hóa b ng dung d ch H2SO4 1:1. H n h p nƠy
c chu n đ b ng dung d ch KBrO3 cho đ n khi xu t hi n mƠu vƠng c a
Br2 d . Th c ch t đƣ x y ra ph n ng:
5Br BrO3 6H 3Br2 3H 2O
C6 H8O6 Br2 C6 H 6O6 2Br 2H
Nguy n Thu Trang
12
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Khi h t axit ascobic l
Tr
ng HSP Hà N i 2
ng BrO3- cho vƠo s sinh ra Br2 không đ
ph n ng ti p. Sau đó xác đ nh l
ng Br2 d đó b ng ph
c
ng pháp chu n đ
iot b ng dung d ch natri thiosunfat chu n.
Tuy nhiên các ph
ng pháp chu n đ ti n hƠnh khá ph c t p, đ ng th i
có đ ch n l c, đ nh y vƠ đ chính xác không cao. Vì v y t khi các ph
pháp phơn tích công c ra đ i, ng
c a các ph
i ta kh c ph c đ
c r t nhi u nh
ng
c đi m
ng pháp phơn tích hóa h c.
1.2.2. Nhóm các ph
ng pháp phơn tích công c
Th i gian g n đơy, cùng v i s phát tri n nh v bƣo trong t t c các
l nh v c c a xƣ h i, nh ng yêu c u đ t ra cho ngƠnh phơn tích lƠ ph i nhanh,
chính xác, quy trình đ n gi n, l
ng m u tiêu th nh , không nh ng ti t ki m
ti n c a, công s c mƠ c th i gian cho xƣ h i. V i s h tr c a các ph
ng
pháp phơn tích công c vƠ nh ng thi t b hi n đ i, vi c xác đ nh Vit.C c ng
đƣ đ t đ
tr
c nh ng yêu c u đó.
c bi t, quy trình phơn tích nhanh vƠ đa s
ng h p không ph i x lý m u tr
trong quá trình đ nh l
Các ph
các ph
c khi gi m thi u đ
c s m t mát Vit.C
ng.
ng pháp phơn tích công c có th xác đ nh Vit.C g m nhóm
ng pháp phơn tích quang h c vƠ nhóm các ph
ng pháp phơn tích
đi n hóa.
Trong đó h u h t các ph
ng pháp đ u xác đ nh Vit.C m t cách gián
ti p. Nh đƣ trình bƠy, dung d ch Vit.C lƠ không mƠu, do đó không th cho tín
hi u đo quang
vùng kh ki n, vì v y ng
i ta th
ng dùng m t tính ch t
nƠo đó c a Vit.C mƠ s bi n đ i n ng đ Vit.C s gơy ra tín hi u quang bi n
đ i t
ng ng, cùng t ng ho c cùng gi m theo hƠm l
dùng ph
ng Vit.C. Hay khi
ng pháp h p th nguyên t , do Vit.C r t d b phơn h y
nhi t đ
cao nên không th cho tín hi u tr c ti p trên máy AAS.
Nguy n Thu Trang
13
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
h tr thêm cho các ph
c ng đ
ng HSP Hà N i 2
ng pháp phát hi n Vit.C, các k thu t tách
c k t h p đ t ng đ chính xác, đ nh y vƠ đ ch n l c c a ph
ng
pháp phơn tích. Có th k đ n các k thu t s c ký, g m s c ký khí (GC), s c
ký l ng cao áp (HPLC), k thu t tiêm m u phơn tích vƠo dòng ch y (FIA).
1.2.2.1. Ph
ng pháp phơn tích quang h c
Vit.C lƠ ch t r n d ng tinh th không mƠu, dung d ch Vit.C c ng trong
su t nh ng nó d b oxi hóa vƠ có tác d ng c ch hay xúc tác cho các ph n
ng phát quang, thông qua đó ng
i ta có th đ nh l
ng Vit.C
Các tác gi s d ng ch t oxi hóa khác nhau và thông qua nó gián ti p
xác đ nh hƠm l
ng Vit.C. Kali cromat đ
c s d ng lƠm ch t ôxi hóa axit
ascobic, kali cromat còn d s ph n ng v i điphenyl cacbazit (DPC) có m t
axit nitric t o ph c mƠu có
s t l thu n v i l
max
= 548nm. M t đ quang A đo
ng kali cromat d vƠ t l ngh ch v i l
max=
548nm
ng Vit.C trong
m u.
2CrO42 3C6 H8O6 10H Cr 3 3C6 H 6O6 8H 2O
CrO42 Sym DPC Cr DPC phúc (max 548nm)
Cr (III) t o ra trong ph n ng th nh t lƠ r t nh nên không đóng góp
đáng k vƠo m t đ quang A đo
max =
548nm.
u đi m c a ph
ng pháp lƠ
s d ng hóa ch t đ n gi n, d ki m, máy đo quang không đ t ti n, ph bi n
trong các phòng thí nghi m.
Trong đi u ki n thí nghi m đó, tác gi vƠ c ng s đƣ xơy d ng đ
đ
ng chu n tuy n tính hƠm l
ng Vit.C đ n 5µg/ml (t
ng
c
ng 5ppm,
kho ng 3.10-5 mol/l) vƠ gi i h n phát hi n t i 0,02µg/ml (20ppb, kho ng 10-7
mol/l).
n
ng d ng xác đ nh Vit.C trong thu c viên vƠ thu c n
c ép hoa qu , các lo i r
c ch a Vit.C,
u hoa qu cho k t qu t t.
Chen, Xu-wei vƠ các c ng s đƣ nghiên c u quy trình xác đ nh Vit.C
b ng ph
ng pháp tiêm m u vƠo dòng ch y k t n i v i detect đo quang.
Nguy n Thu Trang
14
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
Trên c s s d ng Fe(III) lƠm ch t ôxi hóa axit ascobic, s n ph m Fe(II) sinh
ra t o ph c mƠu v i 2,2’- đipiriđin trong môi tr
đo A
max=
c a ph
523nm s t l thu n v i l
ng axit y u (pH=5), k t qu
ng axit ascobic trong m u.
u đi m
ng pháp nƠy lƠ kh n ng t đ ng hóa, cho phép xác đ nh 60 m u
thu c/gi .
Trong khi đó, Yebra-Biurrun vƠ c ng s l i s d ng pemanganat làm
ch t oxi hóa axit ascobic, dùng k thu t FIA vƠ đ u ghi AAS đ xác đ nh hƠm
l
ng Mn(VII) còn d , Mn(II) t o ra s đ
amino photphoric) s không gơy nh h
c gi trên l p nh a poli (axit
ng đ n k t qu xác đ nh Mn(VII) d .
Vi c t ng đ nh y xác đ nh Vit.C đ t đ
c khi s d ng các ph n ng
quang hóa mƠ axit ascobic có tác d ng xúc tác cho quá trình chuy n m c
n ng l
ng. D a trên ph n ng quang hóa c a Rodamin B vƠ Ceri(IV) trong
môi tr
ng axit sunfuric, quy trình cho phép xác đ nh Vit.C t i 10-13 mol/l,
đ
ng chu n tuy n tính trong kho ng 3,8.10-13 ÷ 10-10 mol/l.
Vit.C có kh n ng ph n ng v i nhi u ch t oxi hóa khác nhau, do v y
các tƠi li u nghiên c u xác đ nh hƠm l
ng Vit.C b ng ph
ng pháp phơn tích
quang h c r t phong phú vƠ đa d ng. Tuy nhiên không tránh kh i m t ph n
Vit.C có th ph n ng v i oxi không khí hay các ch t kh khác c ng có th
ph n ng v i các ch t oxi hóa đó.
1.2.2.2. Nhóm các ph
1.2.2.2.1. S l
ng pháp phơn tích đi n hóa
c v các ph
ng pháp c c ph (Vôn-ampe)
Nguyên t c c a ph
Nhóm các ph
ng pháp
ng pháp phơn tích c c ph (Vôn-ampe) là ph
quan tr ng nh t trong s các ph
ng pháp
ng pháp phơn tích đi n hóa. Các ph
ng
pháp nƠy đ u d a trên lý thuy t v quá trình đi n c c, ph thu c ch y u vƠo
vi c đ a ch t đi n ho t t trong lòng dung d ch đ n b m t đi n c c lƠm vi c
Nguy n Thu Trang
15
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
vƠ ghi đ
ih c
ng Vôn-ampe (đ
Tr
ng bi u di n s
ng HSP Hà N i 2
ph thu c c
ng đ dòng
Faraday vƠo giá tr th c a đi n c c lƠm vi c so v i đi n c c so sánh).
Hình 1.1: S đ thi t b phơn tích Vôn-ampe
i n c c lƠm vi c
Trong các ph
ng pháp phân tích Vôn-ampe, đi n c c lƠm vi c th
ng
dùng là: đi n c c gi t Hg, đi n c c r n lƠm t Platin, vƠng, b c, ho c cacbon
kính.
Ph
ng pháp phơn tích c c ph s d ng đi n gi t Hg, hay dùng lƠ đi n
c c gi t treo (HMDE), đi n c c gi t r i (DME) vƠ đi n c c gi t t nh
(SMDE). i n c c lƠ gi t Hg l ng hình c u có đ
đ
ng kính khá nh (≤ 1 mm),
c r i ra t m t mao qu n có chi u dƠi kho ng 10÷15 cm, v i đ
trong kho ng 30÷50 µm, mao qu n đ
ng kính
c n i v i bình ch a Hg b ng m t ng
d n nh polietilen.
Trong đi n c c gi t r i, gi t Hg liên t c đ
mao qu n vƠ r i ra do l c h p d n, kích th
c a gi t Hg đ
c đi u khi n b i kích th
ch a Hg. T c đ đó đ
c quy
c hình thƠnh
c vƠ chu k (hay t c đ ch y)
c mao qu n vƠ chi u cao c a bình
c tính b ng kh i l
ng Hg r i ra kh i mao
qu n trong m t đ n v th i gian (theo mg/s). Thông th
Nguy n Thu Trang
16
đ u ng
ng ng
i ta ch n
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
kích th
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
c mao qu n vƠ chi u cao bình ch a sao cho t c đ ch y kho ng
1,5÷4,0 mg/s, chu k m i gi t kho ng 2÷6s.
Trong đi n c c gi t treo (th
vòng), gi t Hg có kích th
nghi m. Gi t đ
ng dùng trong phân tích Vôn-ampe
c nh , có th thay đ i đ
c hình thƠnh r t nhanh vƠ đ
c gi
c tùy theo yêu c u th c
đ u mao qu n trong
quá trình đo.
u đi m c a đi n c c gi t Hg:
- Kho ng th phơn tích r ng, quá th H2 trên đi n c c gi t Hg l n, vì
v y m r ng kho ng th phơn tích đ n -1V (so v i đi n c c calomen bƣo hòa)
trong môi tr
ng axit vƠ đ n -2V trong môi tr
ng baz . Tuy nhiên do có quá
trình oxi hóa c a Hg l ng nên đi n c c ch đ
c s d ng đ n -0,3V ho c 0,4V
(so v i đi n c c calomen bƣo hòa) tùy môi tr
ng.
- B m t gi t luôn đ
c đ i m i vƠ không b lƠm b n b i s n ph m c a
ph n ng đi n c c.
- V i các đi n c c hi n đ i, gi t Hg đ
c đi u khi n b i h th ng van
khí, do v y đ l p l i c a gi t cao, t ng đ l p, đ đúng vƠ đ chính xác khi
phân tích.
- Kích th
c gi t nh nên l
ng ch t tiêu t n khi phơn tích lƠ không
đáng k , do đó s gi m n ng đ trong quá trình phơn tích do s oxi hóa kh
trên đi n c c th c t lƠ không x y ra.
Th
i n c c so sánh
ng hay s d ng đi n c c Ag/AgCl hay đi n c c calomen bƣo hòa.
i n c c so sánh ph i có th
n đ nh.
Sóng c c ph khu ch tán
- Sóng c c ph c đi n có d ng b c thang, dòng c c đ i id t l tuy n
tính v i n ng đ ch t phơn tích trong dung d ch id=f(C), ng
ch t nƠy đ phơn tích đ nh l
Nguy n Thu Trang
i ta l i d ng tính
ng. Tuy nhiên sóng c c ph c đi n có đ phơn
17
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
gi i không cao c ng nh có dòng d l n. Do đó h n ch đ nh y c a ph
pháp ch xác đ nh đ
ng
c 10-5M vƠ kh n ng xác đ nh nhi u ch t cùng trong
m t h n h p lƠ khó kh n, đ ch n l c kém. (Hình 1.2)
- V i k thu t quét th , k thu t ghi dòng hi n đ i đƣ kh c ph c đ
nh
c
c đi m đó, đ ng ngh a v i t ng đ nh y lên r t nhi u. Có th k đ n
+ C c ph sóng vuông (SqW)
+ C c ph dòng xoay chi u hình sin (AC)
+ C c ph xung th
+ Các ph
ng vƠ xung vi phơn (NP vƠ DP)
ng pháp Vôn-ampe trên đi n c c đ a quay
+ Phơn tích đi n hóa hòa tan
V i đ nh y đ i v i
+ C c ph c đi n (DC)
10-4 ÷ 10-6M
+ C c ph sóng vuông vƠ xung vi phân
10-6 ÷ 10-8M
+ Vôn-ampe hòa tan anot đi n c c gi t Hg treo
10-6 ÷ 10-9M
+ Vôn-ampe hòa tan anot dùng c c mƠng Hg
10-8 ÷ 10-10M
trên c c r n đ a
Có th th y các ph
d ng. Ph m vi đ i t
ng pháp phơn tích đi n hóa r t phong phú vƠ đa
ng nghiên c u r ng, c h p ch t vô c vƠ hƠng nghìn
h p ch t h u c các lo i. Trong đó Vit.C lƠ m t trong nh ng h p ch t h u c
đ
ph
c nghiên c u ng d ng theo nhi u cách khác nhau d
i lý thuy t c a các
ng pháp phơn tích đi n hóa.
1.2.2.2.2.
Ph
ng d ng các ph
ng pháp phơn tích đi n hóa xác đ nh Vit.C
ng pháp phơn tích đi n hóa đ
c dùng ch y u lƠ các ph
ng
pháp phơn tích c c ph (Vôn-ampe). Trong đó vi c s d ng đi n c c Hg, đ c
bi t lƠ có s h tr c a thi t b đi n t , k t n i v i máy vi tính t ng đ nh y
vƠ đ chính xác c a phép phơn tích lên r t nhi u đ ng th i quy trình cho phép
Nguy n Thu Trang
18
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
phơn tích nhanh, không c n x lý m u ph c t p, tránh đ
c s m t mát Vit.C
do s oxi hóa không khí.
Tr
c n m 1950, ph
đ nh hƠm l
ng pháp c c ph c đi n đƣ đ
c áp d ng xác
ng Vit.C trong nhi u m u thu c, rau, qu ... Nhi u công trình
nghiên c u đƣ tìm đ
c đi u ki n thích h p cho phép xác đ nh Vit.C. Tuy
nhiên do gi i h n c a ph
ng pháp c c ph c đi n mƠ vi c đ nh l
ng Vit.C
v n b gơy c n tr b i m t s ch t có th kh g n v i th kh c a axit
ascobic. Các h p ch t sunfuhydryl th
m t trong s đó, vì v y đ i t
ng có m t trong các mô th c v t lƠ
ng phơn tích còn h n ch .
G n đơy, các k th t quét th vƠ ghi dòng đ
c h tr b i các thi t b
đi n t hi n đ i, nh ng máy đi n hóa đa ch c n ng ra đ i vƠ r t ph bi n
các phòng thí nghi m. Nh ng nh
c đi m đó đ
c kh c ph c, nh ng không
nhi u công trình nghiên c u xác đ nh xác đ nh Vit.C tr c ti p trên đi n c c
gi t Hg mƠ m t s nghiên c u đi theo h
ng ch t o đi n c c bi n tính, đi n
c c sinh h c, ch y u lƠ t o mƠng sinh h c hay mƠng polyme, các lo i mƠng
đ
c ch t o đ u có kh n ng ho t đ ng đi n hóa v i axit ascobic.
Kh n ng t đ ng hóa t ng lên, cho phép xác đ nh 120 m u/gi . Tuy
nhiên, tu i th c a các đi n c c nƠy ng n do trong quá trình phơn tích axit
ascobic đƣ kh các ion kim lo i trên b m t đi n c c.
ng
i ta th
duy trì đi n c c
ng cho thêm vƠo h n h p ph n ng m t ch t oxi hóa đ tái t o
các ion trên b m t, Julio Cesar đƣ dùng H2O2 lƠ ch t oxi hóa giúp tái t o ion
Cu2+ t ion Cu+, lƠ s n ph m c a ph n ng đi n c c v i axit ascobic.
Quay tr l i đi n c c gi t Hg, ngoƠi nh
c a Hg thì nó v n lƠ đi n c c t i u trong ph
c đi m duy nh t lƠ tính đ c
ng pháp c c ph xác đ nh các
ch t h u c . Tuy nhiên các hƣng s n xu t c ng đƣ kh c ph c t i đa nh
đi m nƠy, kích th
kh i l
c h t nh (đ
ng kính < 1mm), n u s d ng gi t treo thì
ng Hg cho phép đo lƠ không đáng k , có th thu h i đ
Nguy n Thu Trang
c
19
c, ví d : m t
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
gi t Hg
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
thi t b phơn tích đi n hóa đa n ng VA757 c a Metrohm có di n
tích b m t t 0,15÷0,60 mm2. Quy trình nhanh, chính xác, kh n ng phơn
tích hƠng lo t lƠ có th đ t đ
c. Vì v y em ch n s d ng đi n c c gi t Hg
treo trong phân tích Vit.C.
1.2.2.2.3. Ph
Ph
ng pháp c c ph xung vi phơn lƠ ph
hi n đ i, đ
đ
ng pháp c c ph xung vi phân
c c i ti n c v k thu t quét th vƠ k thu t ghi dòng, kh c ph c
c đa s nh
xung th
ng pháp phơn tích đi n hóa
c đi m c a ph
ng pháp c c ph c đi n vƠ ph
ng pháp
ng.
Trong ph
ng pháp xung vi phơn, đi n c c đ
c phơn c c b ng m t
đi n áp m t chi u bi n thiên tuy n tính v i t c đ ch m. Ghi dòng t i hai th i
đi m tr
c khi n p xung vƠ tr
c khi ng t xung.
ng bi u di n s khác
nhau gi a hai dòng nƠy vƠo th đi n c c có d ng pic, r t d xác đ nh, có đ
phơn gi i cao. Do v y mƠ ph
ng pháp xung vi phơn gi m t i đa dòng d ,
m t h n ch c a c c ph c đi n (hình 1.2).
S ph thu c dòng c c đ i trong c c ph xung vi phơn vƠo các thông
s c a quá trình đo c c ph đ
1/ 2
D
i nFSC
tx
c tính toán lý thuy t cho h th c sau:
P ( 2 1)
P 1 P
(1.1)
Trong đó:
n: s e- trao đ i trong ph n ng đi n c c
F: h ng s Faraday
S: di n tích b m t đi n c c
C: n ng đ ch t đi n ho t
D: h s khu ch tán
tx: th i gian m t xung
= exp(nFẤE/(2RT))
Nguy n Thu Trang
(1.2)
20
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
P = exp[(nF/(RT))(E-E1/2+ẤE/2)]
(1.3)
ẤE: biên đ xung
R: h ng s khí
T: nhi t đ Kelvin
E1/2: th bán sóng
T i th đ nh pic, P=1 thì ph
1/ 2
D
i nFSC
.t x
ng trình (1.1) còn l i lƠ
1
1
(1.4)
EP = E1/2 - ẤE/2
(1.5)
Bán chi u r ng c a pic đ
c xác đ nh b i công th c:
W1/2 = 2RT/(nF)cosh-1[2 + cosh(nFẤE/(2RT))]
Do v y khi t ng biên đ xung thì theo ph
theo (1.6), do đó gi m đ phơn gi i c a ph
ng trình (1.4) dòng i t ng
ng pháp. Trong tr
đ xung đ nh (|ẤE| < 20/n mV) thì bán chi u r ng đ
W1/2 = 3,52RT/(nF) = 90/n mV
Vì v y đ đ t đ
(1.6)
ng h p biên
c tính b i công th c:
25oC
(1.7)
c giá tr dòng l n đ ng th i W1/2 đ nh , th
ng đ t
biên đ xung kho ng t 10÷100 mV.
Hình 1.2 so sánh s gi ng vƠ khác nhau v k thu t bi n đ i th vƠ k
thu t ghi dòng gi a các ph
th
ng pháp c c ph c đi n (DC), c c ph xung
ng (NP) vƠ c c ph xung vi phơn (DP). Th y rõ u đi m c a ph
ng
pháp c c ph xung vi phơn t vi c phơn tích sóng c c ph có d ng pic lƠ t ng
đ nh y, t ng đ phơn gi i, đ ch n l c. Vì v y em ch n ph
tích c c ph xung vi phơn đ xác đ nh hƠm l
ng pháp phơn
ng Vit.C trong các đ i t
ng
th c t .
Nguy n Thu Trang
21
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
Hình 1.2: S đ bi u di n s bi n thiên theo th i gian vƠ d ng sóng
c c ph trong m t s ph
ng pháp
(a): Th bi n thiên trong th i gian đo c c ph
(b): Th bi n thiên trong 1 chu kì gi t, ( : th i đi m ghi dòng)
(c): Sóng c c ph
DC: C c ph c đi n NP: C c ph xung th
ng
DP: C c ph xung vi phơn.
Nguy n Thu Trang
22
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Ch
Tr
ng HSP Hà N i 2
ng 2: TH C NGHI M
2.1. D NG C VÀ HịA CH T
2.1.1. D ng c
Các d ng c th y tinh: buret, pipet, bình đ nh m c c a
xác cao đ
c ngơm r a th
c có đ chính
ng xuyên b ng h n h p kali đicromat vƠ axit
sunfuric đ c 98%.
2.1.2. Thi t b , máy móc
Máy phơn tích đi n hóa đa ch c n ng 757VA Computrace, Metrohm
- i n c c lƠm vi c: đi n c c gi t Hg
- i n c c so sánh: đi n c c Ag/AgCl
- i n c c phù tr : đi n c c Pt
Máy pH meter Precisa 900, Th y S
C n phơn tích STARTORIUS (đ chính xác ± 0,2 mg)
X lý s li u trên máy tính, dùng ch
ng trình Excel.
2.1.3. Hóa ch t
Axit ascobic (North general pharmaceutical factory China)
Axit axetic b ng
Natri axetat, natri clorua, NaH2PO4.2H2O, K2HPO4.3H2O
Axit pecloric, axit oxalic, axit tactric, axit citric
Các hóa ch t đ u thu c lo i tinh khi t phơn tích (PA).
Các dung d ch nghiên c u đ u đ
ch t chu n b ng bình đ nh m c đƣ đ
Nguy n Thu Trang
c pha t l
ng cơn chính xác hóa
c ki m tra đ chính xác th tích.
23
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
2.2. CÁC V N
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
NGHIÊN C U
2.2.1. Nghiên c u c b n
Trong b n khóa lu n nƠy, em t p trung nghiên c u đi u ki n t i u xác
đ nh Vit.C trên c s thi t b , máy móc, hóa ch t, môi tr
nghi m
ng phòng thí
Vi t Nam. M c đích lƠ xác đ nh Vit.C trong các đ i t
ng th c t
m t cách nhanh chóng, chính xác vƠ hi u qu .
B ng 2.1: Ch
ng trình ghi sóng c c ph xung vi phơn c a Vit.C
Ch đ đo
DP
Dòng
100 nA/10 mA
i nc c
Kích th
HMDE
c gi t
4
T c đ khu y (rpm)
2000
Th i gian đu i khí ban đ u
90 s
Th i gian khu y sau khi cho m u
3s
Th i gian cơn b ng tr
10 s
c khi quét th
Th b t đ u
-0,25 V
Th k t thúc
+0,1 V
B
6 mV
c nh y th
Biên đ xung
50 mV
Th i gian 1 xung
0,04 s
T c đ quét
15 mV/s
Giá tr pic
Tính theo đ cao
Nguy n Thu Trang
24
L p K32C - Hóa h c
Khóa lu n t t nghi p
ih c
Tr
ng HSP Hà N i 2
2.2.1.1. Kh o sát tính ch t c c ph c a Vit.C trong m t s n n
Xét ph
ng trình cho e- c a axit ascobic:
CH2OH
CH2OH
OH
O
OH
O
O
O
+
HO
OH
O
Ax it ascobic
Trong ph
h
2H + + 2e-
O
Ax it dehidr oascobic
ng trình trên, có s góp m t c a H+, vì v y n ng đ H+ nh
ng nhi u đ n ho t tính c c ph c a axit ascobic. Em ch n đi u ki n ghi
tín hi u c c ph c a axit ascobic trong các n n đ m, nh m duy trì pH n đ nh
trong su t quá trình đo. Theo tƠi li u nghiên c u, ba lo i đ m hay đ
trong phơn tích các ch t h u c b ng ph
c dùng
ng pháp c c ph lƠ đ m xitrat +
hidrophotphat, đ m axetat vƠ đ m photphat. Em ti n hƠnh ghi sóng c c ph
c a axit ascobic trong ba n n nh trên.
Ch n b dung d ch n n
N n đ m xitrat + hidrophotphat
- Pha dung d ch axit xitric 0,1M (cân 10,500g axit xitric, hòa tan b ng
n
c thành 500ml dung d ch).
- Pha dung d ch hidrophotphat 0,2M (cân 22,822g mu i K2HPO4.3H2O,
hòa tan b ng n
c thành 500ml dung d ch)
- Tr n hai dung d ch trên đ đ
c các dung d ch đ m có pH khác nhau
pH
V dd Axit xitric 0,1M(ml)
V dd Hiđrophotphat 0,2M (ml)
3
20,55
79,45
5
51,5
48,5
7
82,35
17,65
Nguy n Thu Trang
25
L p K32C - Hóa h c