Nghiên cứu, thu nhận, tinh sạch urease từ đậu nành và xác định các thông số động học của enzym urease
Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (9.76 MB, 100 trang )
! "
$%&'
&+
-$
"$,
(
$
- ,
* / "
(
& 1%
234
5 6 7#
#
)
*
.
$ & .&
"
+
. 0
$ & .&
8 6
>$ - * ?
A
B
C
4 5 5 39 : ;
.@
, : D 5 EF
G= HEEI
<=
+
J
! "
$ 0
D K 9 ;LD 5 M N O
A
7 . >34
=
9 Q3D: 7 . >34 * G * 39:
D K 9
=
9 Q3D: H7 .
> 9 8 G :
.@
!
ST U;L K V 839 : 7
! "
B
C
PA D
D K 9
R
#
N
> =
-
B
#
H
0
! W *&- >$ - * ?
, 5 62XX: D 5XX G=XX
! "
A
#
-
.
/ g
- > -A f
-
$W
a f
@ * &A $"
, 5 62XX : D 5XX
&:34
8 34 7
5 62, : D 5,
5 3N
G= S
234
5 6 7#
&+
&B
5 34
;L 5
D :
V
# 3<= :R O V
%
S
R3 S3 :;6 U 9
6
V
"
R3 S3 U 9
R3 S3 8 6
V
6
6
8 6 Q D UP
8;6 :
S
=
U;L 7 Q D UP
N : 3< UL 8P, Q D UP
D : 4 5S
R3 S3
G 5 ;D 5 M
5
V
*$7
*$7
a ' 7
R3 S3 8;6 :
S
U;L
E [HEEI
*$7
. >34
EF[HEEI
PA D
a '
! -
9 M 5 8 6 U3 ;L 5 e 9 8 G :
ST U Z U;L
9 U
5
234
5 62
A
^ 5
: 8 6 5 * 39:
>
W
6
. *7 E E_YE_
39 c V R3 S3 :;6 U 9
&"
7 A
7
%
" ! -
<=
9 ,:
S
V
&-
" ! -
;Z
L S
;D , :
= 9: S U d :
U 9 5
*
A D7
4 5 5 39 : ;
- a$
4 :;V e;L 5
*
<= *
V 3 `2= R3 S3
*$ *
/ D UP
.@
HF[ E[ \]
8 6
7
b=
P
7
D : 4 5S U 9 5
&-
*$ >$ - * ?
G= HEEI
f.
Y
$%&+
5 6
: 4 5c
: D 5
W
#
+
G= HEEI
>
4 Q
4 : 6
8 6 5 D ULZ : 4 :R 5 S
4O
#
V= L
: : L6 5
8 6
Z 5Q
4
V= L
;D
39: :b
V =b
D :
h 5U Z
: ;
4 5 5 39 : ;
U Z5 V 5M 2
5 39= c 2D K D
4 >34
39: :b
V= L c 2D :
<= :R;L6 5
! D
6 : 6
4K 9= 4
;LD 5 M N
39 e 9 8 G
8 6 :R 23 U :
5 D : 4
2
P A D U Z : 9 :b
: :
2
#
;Z 5 O 3 : ;D , O
;L 5 :Rb
4 5 5 39 .
4
:R;L6 5
N :RL : 4 :R 5 c D :Rb
: ;
!
39 e 9
8 G
/
e
4 :
5LV eL6 K 3: L S 4 S h U3 K =3 ,
U 3 O 39 :
9 eL , e
Pf
;Z 5 5;L6
4 U 9 5 8 34 5 D ULZ : 4 :R 5 c D :Rb
: 9
6 5, : 4 Q
: 4=, 5 D ULZ : 4
6 : 6
V= L : :
VK
e 9 8 G
K36,
;Z 5 5;L6 U Z c
62
A
,
5 23N
_
D 5 F f HEEI
P
<= *
"
9
6
3: S;D U M
39 8LD
5
5
D:
U3 c
U Ze
K
U
M U3= :R
D :
O 3:
D
::
, O
4 5
6 e N
:
3 : 3
,:
U;L
6
R :3
S
U D
: V
U <
D
;Z 5
O V S D: ,
; S 7 K 9: U 9
K k 5l
9: a& &
5
<= 8 6 K39
U3<
4 U
:R34
* 39:
_mH.
3
D 5
6
_
LV
3ee ee S3 aP
#3: c V :
=M
D 5: 4 :
S
S
#3: c V O 3<= :R c
U Z
D 5 : 4 Q D UP
6
;D 5 =
U3
DU 9:
U 39 M :R34 53e
62
= 9: S U d :
V
R3 S3 U 9
6
U Z:
D O3: c V S 7
<= R3 S3 :
< U D 2
S
48 6K V c V
d :
4 :;V la m
N : 3< UL 8P la m
9
6
__E EEE
F EEE
iY
I FF
D:[ E$ S ==3Rm
5 : L6 , O3: c V O 3<= :R ;D 5 M
8 6
3:, :
R3 S3
:
39 = 9: 8
R 5 e;L 5
R 5 e;L 5
#= l= m
*= Q l= [
3
: ;
9 8 6:
U 4 5O
5
] __$ [=5
<= R3 S3 :;6 U 9
oQ
4 :
<= 3 `2=3 R3 S3 l:;6 #5 5 234 e 39 U 9
3
R2e = M
S
c
D U;L S;V M
U 42, 5;L6 : U Z ;D 5 M
5
2 S h O2D :R
3
G= 5
8 6 5 D :RP S;V M
MP , S
V
;D 3 `2=3 R3 S3 f 3 `2=3 U d
D : D
::
4 U
6
<=
e;L 5 R3 :R 5
;L 5
e2 :
U;L YI Ii5
m
;Z 5
D
;L 5
U;L LV = 9: S
6 5:
5
39 8 6 UP
5 U 9 Iin 8 6 iin,
:
6
R
O 3:
U;L
e
5U 9
: 4= e 6
<= 3 `2=3 :
: 4 U Z
6 R , :R
: e 6 R3
62 U3<
<= *
.@
e 6 = 9: 5 234 e 39 5 6 U =, S V
L
3 `2=3
j >$ - * ?
S
8LD U 9
: 3 c 2 :Rb
Q D
5
V
:
D 5 : 4 :R
8 6 O3: c V
i
2
9 R;
Y ]_
_ ]\
6 : 6
5
4 :
D 5
D : 3< S;V M
5
: ;
<=
$ >$
R 5
LV U
;L 5
< 5c
< 5c
Y
83 3 `2=3 R3 S3
.L e;L c D :Rb
5 34
Y
;D 83 3 `2=3 R3 S3
Y
H # D c D: 83 3 `2=3 R3 S3
i
H a
i
D
HH
:
8 6 :R
5 e;L 5
HY
U d
H_ L
3Q D : D
39
L
4 :;V
:
F
]
Hi
D :
:
D e2D
HI
D 23 :
V
;LV 5 U3
Y 5
_ " 5M
H
H
H
R3 S3
\
::
R3 S3
H
HI
V 3 `2=3 R3 S3
HF
LD : 39 83 U 9
6
H]
5 234 e 39 8 6
;L 5
D
5 34
;D
Y
5 234 8 9: e 39
Y
5 234 e 39 8 6
H Ha
5
D
D
5 34
H H .L U
5 34
;D
HHH
2 :Rb
D
: S;V M
8 6 : 3: KP S;V M
H H A ;L 5
HHY
V
4 K 3 `2=3 R3 S3
5
;L 5 H
I
:
H H Y / D UP
;D
D
U 9 <= U 9
e;L 5
YH
HHYY P
e;L 5 R :3
S
R3 S3
Y_
DS
_E
6
:L : < 5 K k 5
::
H
YH
HHYH P
H H Y _ / D UP
Y
5
9 8 6:
;L 5
5
K k 5
K k 5
;L 5
;L 5
D
;L 5
R3 S3 K k 5
D S 2O 4
f #p& a
D !R Mq RM
;L 5
I
D
3SSe3R
_E
>
_
_Y
_i
H H Y i / D UP
6= e;L 5 R3 K k 5
H H Y I A ;L 5
D U 39 M
iH
H H Y F A ;L 5
D S 2U 4 5O 4
ii
HHY]
D
;L 5
;L 5
D
R:
_\
D S h O2D
ii
;L 5 Y #3: c V 8 6 K 6 e 9
Y
5 34
;D :
Y
> 9 U;L6 5
S
R3 S3 :;6 U 9
<
R :3
Y H
S
Y Y
S
R3 S3 K k 5
Y _
S
R3 S3 K k 5
9: 3
S
Y I. S D
Y F
M3Q
3 :
:
S
U
Y H / D UP
;L 5
D : V
3:
;L 5
D : V
4 U
l
;L 5
D S h O2D R 42
;L 5
S
R3 S3 K k 5
= N
R3 S3 U Z c
II
_
4 :;V
D S 34 e
D
;L 5
: V
FE
D O D
4 U
FH
_ mH .
l
_
F_
3 `2=3 R3 S3 U 9
:R
5 e;L 5
4 :;V
V
Y H H / D UP
:R
5 e;L 5
4 :;V
V
6
R3 S3 U 9
D
4 5S U 9 5
V
F]
6
F]
N : 3< UL 8P
]
R3 S3 U 9 R; 8 6 U 9
6
]Y
5
]I
Y Y # V S D: ;D 5 M
YYH " 5M
Y_
_mH.
U <
Y H / D UP
YY " 5M
IY
I]
= 9: K k 5 S h O2D :R
D :
I
EE
= 9: S U d :
Y H Y / D UP
I
8 6 3 `2=
3 `2= R3 S3 K k 5
O3: c V :
LV 5
6
3 `2=3 R3 S3 K k 5
:R34
Y i
I
5
5 Q D UP
39 c V O
R3 S3 U3< O 3<= :R e;L 5 R3 :R
R3 :R
:3
;L 5 _ #3: e 9 8 6 O 3
5 ;LD
V c D :Rb
5
23: :
=, ;LD : 3< 8 6 = D
:
S
5 P
R3 S3 :;6 U 9
]I
9:
6
]F
\E
\
_ #3: e 9
\
_H#3
\H
5 P
6 e 39 : = O V
A
\Y
e
\I
F
a
! V 5
7
$
D= : h: U d :
D :RP #= 8 6 *=
! V 5 Y7
6= e;L 5 R3 S3 :R
V
Q
R3 S3 :R
5
! V 5 _7 #3: c V O V S D: UP
6
! V 5H 7
! V 5 Y 7 #3: c V :
:
S
:
:
R3 S3 O
39 S
D
! V 5 Y F7 #3: c V
8 6O
V
4 :
6
8 6 =;D U 9
D = N : V K k 5
4 U
K k 5l
U 9:
S
D
4 :
D
_ mH .
8 6
39 S
::
II
_
S 34 e
5 ;Z
D
;L 5
D :
:;L 5 c
5 ;Z
23<
;L 5
S
D :
R3 S3 FH
3 `2=3 R3 S3
F]
<
D 5 :R34 U 39 M U 53e F in
5 ;Z
4 :;V e;L 5 R :3
! V 5 Y ]7 # : c
Q D
8
:
:
4
R3 S3
! V 5 Y \7 # : c
Q D
8
:
:
4
R3 S3
! V 5 Y E7
4 5S U 9 5
V
S
4 :;V e;L 5 M Z2 R :3
V
:;L 5 c
F
23< :R34 U 39 M U 53e En
! V 5Y
I_
8 6
S
M
3:
S
V 5M
D :
HF
YE
: e; 3 `2=3, U 9 :
39 c V :
V 5
U 9
6
39 c V :
R3 S3 S
! V 5 Y I7 #3: c V
D e
V K 9: U 9
: e; ,
::
! V 5 Y i7 ! V 5 : < 5 O3:
5
Y
D
: V
! V 5 Y _7 . S D
HY
K3D
! V 5 Y Y7 #3: c V Q D UP
8 6O
:U 9
3 `2=3 R3 S3
! V 5 Y H7 #3: c V :
U39= O D
HI
R3 S3 :R
V
: D
D M 5 MP
U 9
6= e;L 5 R :3
:R;LD 8 6 S
H
5
D e
:
D
9 <= 8 6
! &)$
V 3 `2=3 R3 S3
! V 5 H7
! V 5 i7
" ! W
R3 :R
5
! V 5 Y H7 #3: c V Q D UP
R3 :R
5 = 9: S S V
! V 5 Y Y7 ! V 5 : < 5 O3:
:
23: :
S
R
]i
6
]i
6
]I
<
]F
<=
3 `2=3 R3 S3 U 9
]
<
]H
R3 S3 U 9 R; 8 6 U 9
7 #3: c V Q D UP
]E
]]
6
]\
a
b
7
b
H7
b
Y7
b
_7 R D 8 6
$
"
J
: 3< R3 S3
F
:R D
F
R3 S3
4 b
:R D O
:U 9
Hr
V
b
H H7 .L U c 2 :Rb
b
H Y7
b
H _7 b
=
c D :Rb
S h O2D R 42
b
H i7 b
=
c D :Rb
S h O2D :R
b
Y 7 ;L6 5
<
R :3
b
Y H7 ;L6 5
<
Y:
b
Y Y7
Y _7
3:
YY
:
9 8 6:
: V
4 U
3 LV
b
Y i7 . h O2D U MP
b
Y I7 #3: c V U 39 M
R3 S3
b
D = N :
_ Iin
Y \7 . h O2D U :R34 a& &
Y E7 #3: c V U 39 M
iI
i]
D !R Mq RM
IH
3SSe3R
IH
;L 5
D
D
; :
6
4 :;V :R34
S
,
IF
:R34
9: 3
K k 5
3ee ee S3
3
M3Q
D
V MP
M3Q
;L 5
: V
f EE
:R
I\
e2,
EE
FE
D O D
FY
4 U
8 6 iin
Fi
3ee ee S3 K 9: : V
8 6 iin U 4 5 O
R3 S3 c
S
8 6 H
D = N 7 R3 S3 p OK3 , MP
S h O2D R 42
_ Iin
Y]
4 :;V
K k 5
e2 R3 S3 U 9
Y ]7 . h O2D U :R34 a& &
_ mH .
8 6H
Ii
;L 5
_
b
l
D
U <
D
S
;L 5
5U 9O D
Y F7
b
: 3
Y_
R3 S37 R3 S3 p OK3 , = N
:R
_ mH .
_
;L 5
R3 S3 :
b
K k 5l
R3 S3
;L 5
D
_mH.
= N : V l
39 M U
: 3
3
S
_mH.
l
D = N
39 M U _ = N
R3 S3 S
F
;D
39 M U
: V
R3 S3
H]
H 7 .L U
2 :Rb
V
6
b
b
5 34
4 55
4
D 5
\
4 U
FI
U
:
S
FF
b
Y
7
b
Y H7
39 M
Y Y7
O
: P :;L 5 c
M
b
4 :
23<
e;L 5
5 ;Z
V
D 5O
39 M U Q D UP
4 :;V R3 S3 U 9
6
4 :;V e;L 5 R :3
U 39 M :R34 53e
4 :;V e;L 5
F\
< 8 6O
V 5
D
R2e = M3 F in
]E
N : 3< UL 8P
V 3 `2= R3 S3
b
: P :;L 5 c
Y _7
M
b
Y i7
23<
Y I7
5 ;Z
V
D 5O
4 :;V e;L 5 R :3
U 39 M :R34 53e
: P K 3N M 3N S; K 3 U < 8 9 :
U 9 R; O
b
]
: 2U <
5U 9 L
6
O
: 2U <
:
5U 9 L
2V
4
]H
V 3 `2=3 R3 S3
]_
2V
4
V
: R3
Y F7
:
K
M
S;
:
9 5 ;Z
[* 8 6 [s.t
b
Y ]7
:
K
M
S;
:
9 5 ;Z
[* 8 6 [s.t
6
D
R2e = M3 En
b
R3 S3
V 5
: R3
: P K 3N M 3N S; K 3 U < 8 9 :
R3 S3 U 9
:
8 6O
]_
R3 S3
R; ]I
]I
E
W
;6 U
U;L
: 3 O2V HE U3
D: :R 3< R : =
R : eLD
3
:R 5
:Rb
:
4 :
Q3D: 5 39=
D
3
<=
< U D
5 ;Z
:R;D 5 U;L S;V M
* 39:
U3 c
39
D
3
3
DR :
3
5 :R 5
* M
3: 3 `2=3
R;LD U 42, 5;L6 :
Q D UP
62 U 6
9
5
D c 2
, :R 5 O2Z
< U D 8 6 U 3 :RP
5 U3< S V Q
::
5
O 3:,
5
D
;D 8 6 ;D 5 M
62 U3< ;D 5 M
V M 6 5
5
;L 5
3 e
D
:,
D
D
5
::
D : D
8b
3: U3<
8 6 5 D :RP S;V M
<= 3 `2=3
D : 3<
5
W
Z 5 U 5 U;L U <2
V 3 `2=3
Z 5
39
D
:3
; KR =3e ,
6 R :
;L 5
3
D:
Z 5 U;L
<
5 234 e 39 8 6
3: 8 6 S;V M
D
D , e2S `2=3 :;6 e 6 5 :R h 5
V 3 `2=3 :R 5 2
<= 3 `2=3 :
5 34
:RL : 34
3N= O
G 5 ;D 5 M
R 5
:R 6 O 4 5 : 3<
R :3 S3 : ; 8 9:
D
6
D = 9: S
4 5 :Rb
R3 : ;
6= e;L 5 R3 :R 5 = D 8 6 ;LD : 3<
V
4 5
R 5 U 3 :RP, 3 `2=3
D
34 5 83 3 `2=3 R3 S3, :R 5 ;LD
: D
eL
4 5 5 39 , :R 5 2
< U D SLD=
: 4= e 6 5
=, 8 39 : D
,
5 3 `2=3
3 8 6 U;L ;D 5 M
9 e 4= S 6 5 8 6 e 4= S 6 5, 3 `2=3 U D 5 8
5 U3< U 3 :RP K39
D= e , O V
U;L
6 5
62 U Z e 6= : 2 U < 8 6
<=, :R 5
39 U3< e 6= :
X U;L S;V M
8 92 8
: 8 6 ;D 5 M
: 3 `2=3 U Z U3= e
<= 3 `2=3 5 62
, 3 `2=3 U;L ;D 5 M
: 3 :R 5 8 39 : ;
S;V M
;D , S V Q
8 6 K V 839 = 4 :R;L6 5
R 52
=
D S V
8;
5 34
4 5 5 39 S V Q
3 K 3 e;L 5 : ; : ;
9:
:
=3Z
;LD
3 e Z
2, 8 39
B$
5 34
<= 8 6 K39
lM 6 5 M
3:2e=
V
5;L6 K39
;D :
M3N S
;D
<=
Q 3m U3<
A ;L 5
S 8 6= :
D
3
: L6 5
, M U D 5 62
2
3:
D K39
8 39
5;L6 : U Z
23< S 5
;L 5
D M 6 5 3 `2=3 R3 S3
8b
u 5 34
;Z 5 S 2
;D , :
U 9 5
9 ,:
5 T :R34 ,
S
D 5 : 4 c 23: UP
R3 S3 :;6 U 9
V 3 `2= R3 S3v
S3v U3< O w 5 UP
;L 5
D
V
D 5: 4
6 : 6
<=, :R 5 = D 8 6 ;LD : 3<
R3
5
8 39
6
5 : L6 =LV R
< U D K39
39
8 6 Q D UP
R3 S3 : D
D : 3< ;D 5 M
: ;
U3 : 6
D : 4 5S 4
3: :;6 U 9
5 U3< Q D UP
;LD 5 5 34
6
: 3
R3 :R 5 : ;
;D :
O : Q D UP
:R 5 ;LD = 6 O 4 5
V
9
5
: 34
b= c 2 :Rb
* 39:
V U3 : 6
D 5: 4
;S 7
:
R3 S3
39 c V
S
:U
8LD
5 234 e 39 U 9
6
=
H / D UP
4 :;V e;L 5 8 6
D :
4 5S U 9 5
V
R3 S3 U 9
6
* 39:
=
Y
" 5M
5 R3 S3 8;6 :
S
U3< Q D UP
e;L 5 R3 :R 5 : ;
<=, :R 5
= D 8 6 ;LD : 3<
*b : L6 5
= 5
D
, c D :Rb
9 U;L S; U D 5 5 D
V c 2D :
5 34
2
H
;D O D :R D
48 6
D K
O V : 3 S D:
:
)
< 5c
83 3 `2=3 R3 S3
.L e;L c D :Rb
>
U 9
$
U
5 34
: 34 8 6
;D 83 3 `2=3 R3 S37s I, HE, HY, Hit
G= \E\,
O3
:b= :
2 3 `2=3 R3 S3 :R
5
:
6
G= \ , # 3S3e O 3<= :R 8 6
D:
39 3 `2=3 R3 S3 :R
5
:
V
D
42 K 9
G= \ _,
6
O D
,U
3:: O 3<= :R e;L 5 3 `2=3 R3 S3 :R
8 6:
5 : L6
4 5
2 e;L 5 3 `2=3 R3 S3 :R
5
D 5
Z 5 :b= R 3 `2=3 R3 S3 :R
5
5
D 5
5U 9
D
6
L :R
5U 9
:33R 8 6
2 R k 5 3 `2=3 R3 S3 :R
G= \HI, e
c V
62
V
D U d :
U
4 5U Z:
RS ee :
D U <2 S; 5 34
62
5 a& &
G= \F],
U;L
.a.[A
3: : D
&
:;6
:
3
L
: 34 . = 3R O3: :
V 3 `2=3
D S;V M
5 39= 8LD
5 U 9 R;
Z 5
G= \Ii, A .3 5 e 8 6 x
R3 S3
K k 5
9
; U 9 R; m
6
6
G= \ I,
:
5
: U 9 LV 8 6 5 0
+ 5 O3: e 9 7 e;L 5 3 `2=3 R3 S3 :R 5 U 9 O 3= lU;L K 3:
3
5 U 9
: 8 6 :;6
2 R3 S3
ie
2e R
8 6
5
3: : D
D
:;6
Y
V
6
8 6
D
;L 5
S
D
3: Q
:
6 5
6
4
:U 9
U 9 8 6
:R D , : 6
Z 5 U Z U; R
8RU Z:3
;L 5
42
: 3< 3 `2=3 R3 S3, O3:
;D S 4 R 9 5 83
; 8 39 ;D 5 M
:
S 8LD U 9
U;L :
3ee ee S3 LV K;LD :
A e
6 5e
S S D
R3 S3 U 9
6
2 = 4 #3: c V U 39 M :R34
6
5
KLV ! R 33 .33M
He
:R34 53e
O
7e
: ;D
: l:
R2e = M 8LD M
V 5 _]E EEE a , e
5 39= 8LD M
Q
: :;6
He
U39=
D
62 U3 Q
:
D
5
D :R
S3 S:3
O D
eLD m
5 e;L 5
:
D:
8 6 O V S D: 8
:3m
6
R3 S3
,
V
3:
; 5
V
:3m
ee3R U Z S S D
:R 6
4 :;V
V 5 H]E EEE a l:
S
= e:
5 e;L 5
39 U;L H e
l E=
8 6
D :R
S
Z 5
5 Kb
5 R S3 8 6 O 3<= :R
4 :;V O
7Y=
6
:R
9: :R34
D e;
2= 4U 9
39 LV e;
S h O2D
U39=
D e;
4
G= \] , p
9 :;6
5 MP
: ;D H
5 MP
;L 5
9 c
R3 S3 :
R3 S3 U
8LD
:U 9 5
8LD
39: U 9
lIE f
= 3N MP
G= \\E,
mO
FE
*
8 U Z O V S D: :
D
: < UP
: 34= 8 6
G= HEEY, R S:
U 9
S
lO V
D
4 :;V
D
e;LZ 5 83
S:3 R 83
V
D :
R3 S3 p OK3
N : 3< UL 8P
4 5S U 9 5
8 6 . 2K3
R3 S3 !
V
5, R3 S3 U Z U;L
;L 5
D e2D,
D
D
3: : D
DS
W ;LD : ,
K 83
D : D 5 V U Z O V S D: R3 S3 :;6 U 9 R; ,
8 6
;Z 5 U d :
D :R
ee S
&
:
5 e;L 5
S:3 R
2
4 :;V e 6
D :R
5 e;L 5
EEE a , Y EEE a 8 6 I EEE a
D
:
H
G 5 :R;6 S 4 , = 3N MP m #3: c V U 39 M :R34 .a.[A
N : 3< UL 8P
\E EEE a ,
:
ee S
U
; > 2S:3 , &a
y ee=3R 8 6
!R ` e 8 6 !
6
< UP
;L 5
d S;V M
5
: ;
<= 7
3
V
D
:
S
,
::
;LD
5 34
Q D : D
Z 5
;
D : 6 e 39
;D O D O2Z
;
D :
D
5 34
D
3 : D 5 V6 5 6
;D 83 R3 S3
3: : D
<= 3 `2=3 :
D
6 R : :,
5 34
4 U3< ;D 5 M
_
;D
o M;6 5 e
5 8 6 8 39
6
4 5
LV K;LD O V S D:
< U
D 8 6
4
6 5 O 3<= UP
•
3 `2=3
R3 S3 M;LD M
5 39= ;LD
\\
•
P 5
!b
\\\
.
8LD
2
O3: c V :
:
5
5 23N
4 :;6 M 9
D S;V M
6
5
U Z ;D 5 M
5 3 `2=3 R3 S3 :;6 U 9 R; U3<
6= e;L 5 R3 :R
U3< : D
;
5= D
3: R3 S3 :;6 U 9
5 34
S S D
V
S 2 : 9 M S : R3D: 8 6 MP
P * 39: ;L 5 U Z O V S D:
D : D 5 Ve
:,
,
3: :
4 = h K39
\I
34 ,
A S:3 R
5 MP
;D S; K 3 U 9 5
: ;L6 5 8 6 K39
•
* 39
U3< O 3<=
=
5 4
5 34
D
D
5;L6 Kb
: V
;L 5
D : V
6
;D : 3 = 9: ;LD 5 R 34 5 K 39:,
39 c V
V
D
;L 5
D
;
3: : D
D
8 6
S
H # D c D: 83 3 `2=3 R3 S3
H a
D 7 s_, ], _, H t
$R3 S3 e 6 3 `2=3 :
4
D=7 &S:3R S3,
D= = M S3
3 : M :R
5
C
3 K V 5
O
39 :
+
e 34 O3: 3 : M, S
V
c
R3 S3 :R
D=
4
4
DS
O
2MR e S3
h:
D=
i
+
4 5
D
9
4
V e 34 O3:
D
NH3
2
39
3 `2=3 : D M
D=
5
= M S3X $R3 S3 :
CO2
:3, R3 S3
K =: =M
o
D= eLD 5 =
S 7
urease
HO
42 e 6 = 9:
4 e 34 O3:
;L 5 :Rb
5 e 67
o
V2
1 2
4 e
f 2MR e S3, S i
o S : ;D :;
V ;D 5 :
4 :;V R3 : 3
H2N
34
D= 2MR e S3
RK 2MR S3, A3 : M S3,
DQ D : D
H2N
Yi i
9
4 e
R
c
:3 e 67 &
5 U D7 S Y
5 e34 e 34 O3:
=M: w 5l =M
o
D=
O D
2R e S3m, S i
HH
:
8 6 :R
W :R
c
O
5 e;L 5
4 :;V7 s_, HH, HYt
5 : D : ;L6 5, R3 S3 LV M
3< 8 ,
D U;L6 5 O
5:
M z _ ]µ=, : 62
$R3 S3 e 6 3 `2=3 = 9: : 6
:
V
D
:;V e;L 5
:R
o5 =: 6
: U 9 5,
:U 9 5
KP ;D
V
3O
D
M =
8 6:
D Hi
D=
R3 S3
IEF, U 42
c
:R
;D
S: M 3 :R
::
R3 S3 U 9 R; 8 6 U 9
e;
9: :R34
O D
:
D :R
U3< 5 34
M = m $R3 S3
:
N
D=
5 R S3 8 6 53e
5 e;L 5 O
D ] : 3< UL 8P,
D :;6 Y f _
V 5 _ EEE a
;D 5 e 6
4
::
R
5 : 4=
V
R3 S3
Hr
,
O3 :
::
e 34 O3: 8LD
3 `2=3 A 4 :;V
M =
:;6 _F\ U3
O3 8 6 2S f i\H
D8
:R 6
V 3 `2=3
V p S3
D :R
6
k= LV 8P :R
;D H 5 234 :;V
!R ` e
:
3: : D
4 :;V R3 S3
D e 6= : G 5
5U D Y
9: e
S h O2D
9: e
6
D
5S
Dv
Q D : D
;D
4 5 = 6 , :R
:R D K 9 K
D= f . , K k 5
M =
#3: c V 5 34
c
D
R K3 = d:
8LD
4 :;V O D
D
6 e 34 O3: 8LD H 5 234 :;V
Z 5e 68 6 5
5U
;L 5
V 5 \EFFE a
D= f . uKP O
A 4 :;V R3 S3
D
l]_E
O
4 :;V e;L 5 = N :R 5 : 4= O
R3 S3
D
,
M =
V = N : 3< UL 8P O
5 : 4=
: 3< ]
A e
:
2:
5 e;L 5 O
8 6 &83e2
: D
e
R3 S3
5 MP
U39=
V 5 H]E EEE a O
S;V M
5M
I
D :R
8LD
5 e;L 5
V 5 _]E EEE a U;L :
R2e = M3 8LD M
;D
8R U
D e;
5 MP
9
eLD
U39=
D
b
b
HY
7
: 3< R3 S3 sH t
Y7
Y
4 b
U d
$R3 S3
R3 : 6
4
39
D:
O
R3 e 6 ]FEE
:R D O
L
U d
RK
4 55
H7
:R D
Hr
;D H
V
R3 S3 sH t
R3 S3 sH]t
:7 s_, ]t
39
8 6 =
d
b
FEE
L
: : 239: U 7
G 5 e;L 5
e R 3S[5 = e3 LV Hi
F
o Q D : D c D :Rb
:
D
:
2V
V ;D 5 :
4
V2
S
2
34 , S
D
:R D 5
:
:
V L
62 5;L6 : :
5
2 R k 5 R3 S3
Z 5: D M
5 U;L 8LD = 9:
5 R3 7 2MR Q2 R3 8 6 M 2MR Q2 R3
; 5 8LD 8 9
HE e
H2N
C
NHOH
Hydroxyurea
NHOH
Dihydroxyurea
O
HOHN
C
O
H_ L
3 Q D : D 7 s_t
d U 3<=
U 9 5
V
5
D 5
V
V
D
3 `2=3 2MR e S3 : ;L6 5
V
D 5
2MR Q2e
: 6
S3R
a
V S3R
D
2MR e S3 e 6 O
D 5
M =
;D
:R D K 9 Y
; b
U d
D= = M ` e
8 68 6 5 =M ` e
e 34 O3: 2MR
4 5
V
D
39
D= 5
4=
V
:U 9 5
S: M 3 8 6
4 :;V 3 `2=3
V
34 : 4=
S: M 3 5
V
:
D=
D= 2MR Q2e
R :3
= 6
#
U D,
D
D=
D 5 b
83Z S 7
O
H
E
N
N
H
3
: 3
K;LD
R
8 6 !e O3e32, c D :Rb
Q D : D :
;S 7
]
2V
4
R3
V
R3 S3 Q V2 R
NH2
O
OH
+
C
O
HOH
+
C
NH2
:7
D=
f
H
L
: R3 :
D :
:
D e2D
V
S D 5 HF],i = e 6
3
a z E IE
=5 3 `2=3[ =e
z E FHH
3
a8 6
5M
62
9 :
: 6
;D
2
NH3
:
;
:
9 :R
5
V
R3 S3 :R
;D
L 3 `2=3
V ;D 5
23<
$R3 S3
;D 5 : V 39 S
:
V
U
9 8 6
8LD M
U39=
LV K;LD
5 MP
D
z H, : z HiE
a
M
R3 S3 : G 5 e34 O
5 MP
; U
a z E FYY { LV
:
:
:
62 U;L Q D UP
z F, : z HiE ,
W
D 39 S
5M
5 MP
5;L6 :
D = d: L
: R3
5 MP
k= :R
R3 S3 ;
M U Z Q D UP
5 O
V 5
U;L U 3<= U w 5 U 39 l S 3e3 :R
z iE i
U 3<= U w 5 U 39 , U 9
:m
6 :
V
V
V
6
i n{
+
: D LV HEE
RP S
2 39 S
. = 3R 8 6
R3 S3
H2CO3
R3 S3s_, H t7
S M = S eq :3 e 6 Y _I × E F =H S3
:R
HOH
NH2
f 3 `2=3, 8 6 ;LD e 6
3 . = 3R 39 S O
U
+
C
RK Q2e
Hi
;D
O
NH3
NH2
$R3 S3 O3: L 8LD
f L
ONH4+
8 6 :o e39
F, n{
$R3 S3
•
H
In{ .
Z 5= 5
:R
D
5 234 :
34
4 :;V R3 S3
;S 7
,Hn
;Z 5 U d :
5 ;LD 8 6 :R 5 M
R3 S3 U;L
:
2MR :3
5
5 MP
D
\
V
=
R :3
e Z 5
;7
W :R
5: D
6 : ,
• a
DO
: ;LD
4 :;V eLD
34 O
4 5U c
U;L = 6 5 : <=
:
O
•
D eLD
D
;LD , :
U 39
V O
= : eLD
D
;LD , :R
5
:
$R3 S3 KP K 3 :
;
8 6= :O V
M, O 3= U 9= U d ,
R3 S3
D
D U d :
O=e
•
::
•
:O V
G 5
•
:O V
G 5 O3: :
b
=
9
,
D :
:
D e2D O D
l ;U 9
A 4 :;V 3 `2=3
D : 3< :
5
,
: ;LD
R :3 S3
:R
=S
D : 3< KP : 2 U < O
D : 3< LV M
8 6
5 P
: ;Z
D
KP K 3 :
5 ;LD
58 6O
d = 9: S
:R;L6 5,
:R
V2 KLV
,X
O=e
6 :
M
4
:
:;V 3 `2=3
X#
D 23 :
G 5 K3 = d:X m
$R3 S3 KP : V
d =
39: U 9
V
Q D : D S
• !3 U <
• a3N KP
d 5,
5
S 7
LD:, S;D
3:
D
G 5 Q D : D M;LD : D M
5
D M
5 = 4
q :3, S M = e R
:
39 O D
:
D :R
LV
d :R
HE
:
5: D
5
L
:
O3: L 8LD = 9: S
LU d
;Z
6
; L
: 26 : 3
; 3:
D e2D
:,
V
e,
4
3 `2=3,
V = 4
! V 5
7
D= : h: U d :
V 3 `2=3 R3 S3 s t
d :
R
5 e;L 5
D :RP
4 :;V
H . :R 5 : 4=
_]Y EEE M e:
: U 9 5[
Y A 4 :;V e;L 5 = N :R
_
4 :;V
5 : 4=
Y _
:U 9 5
_ EEE M e:
I,_ f F,I
:
i
i f i,
I
:
F
Hr
D
_i iE
:
]
: Ob=
d 5 l 5r,
#=e
Z=
K R :,
\
L
:
E
$R3 , :
Q D : D
d
;Z 5 :
:
3: 8 6 5 34
HI
D = 9: O
_IEEEE l
;D
D 23 :
$R3 S3
YY5
Y
H,
H
;LV 5 U3
::
e;L 5 eLD
R :
L
$R3 S3 :;6 U 9
::
3 `2=3 :R 5
D 2D 5 T U d K 39: c
, 5Hrm,
M S RK X
R3 , 2MR Q2 R3
39
:R
L
: : 239: U
5 :R
5 c D :Rb
: D
R3 S3
V
D
62
Hr
::
,
R3 S37
S37 s_, ]t
o = 9: e;L 5
:7 5 R3 S3
6
4 :;V e 6 S
D
::
4 :;V L
V 3 `2=3
Z 5
D : 3<
4 5 V = 9: e;L 5 R3 5 V
4 :;V LV
: U;L
F,
23<
23<
D 5R
39: U 9 HEE
D KLV = 9:
e 6
4 :;V
D: m
D 5 : S3Z Q3= Q3D: V
;LV 5
V = 9: S 23 : e34
H
::
3 `2=3
m
39: U 97 s_, ]t
8LD
R3 S3
D 5
5
W
39: U 9 :
V 5 _i iEE
; 8 6 O
39: U 9 8;L: c D Ii
U : ]i
2
V ;D 5X
: < UP ,
:
:
6 LV M
W
:
Km
D
39:
V
: #
D : 3< = :
39: U 9
4 5
5 U 9 3 `2=3
9 K3
e
48 6
Z 5, O
D L
,
::
w O
UP , = 6
Z 5
;
R3 S3 : G 5 O
2
V= 8LD
4 5
D L
:
9 8 6
5U 9 L
D = d: L
:,
:
d
: : ;L6 5 O3D= K3
: : b O D K3 8LD
V
4 :;V 3 `2=3
5U 9 L
62
8 6
R3 S3 O
V 3 `2=3 e 6 eLD
R3 S3 5 V=
39:
39:
; 5O
4 5 KP K 3 :
7 s_, HE, HIt
: D
3
::
39: U 9 :
D
5 K 9: O
$R3 S3 R :
O
V
9 ,
5 MP
39: U 9 :
;
:
, : L6 5
; ,
D : D 5 V: b
R3 S3 KP 5 V= 8 6
39: U 9 :
;7 5
$R3 S3 LV M
:
9 8 6
3
V = 4 :R;L6 5, M
Z 5
: R3 e 6 ]n,
:
;
:, :
:
V M
5
;
V
:
2 5 D :RP
5U 9 L
:
O
::
34 ,
3 23 :
:;6 U 9 R; , : 3
L
D : D U 9 5 U3 :R
: $R3 S3
D
; K k 5 Fi O
V
R3 S3 O
5 MP
5 234 e 39 :
4 5
U39=,
5
:
; K k 5I
5U 9 L
:e 6 n
UP
= 6
39: U 9
D
:
9
V ;D 5,
Z 5
;
R3 S3
k= :R
5
9 3 `2=3
D : 6 e 39 : = O V U;L , 5 D :RP
:
;
V
V 5I_ FI
m
5U 9 L
:7 s_, Ht
U 9
V ;D 5 3 `2=3 :R
5U 9 L
:: b:
V
:
U 9
D :R
5 = 4 :R;L6 5
V ;D 5 8 N :2V e39 :
5 = 9: 5 LD
;6 5
9 8LD
HH
6 U D
6 3 `2=3
5U 9 L
; KP K Z
:
:
9 8 6
6 KLV
L
A V ;D 5 Q D : D KLV 3 `2=3 :
3 `2=3 L
R S V
: l&.m U;L K 3< M 3N : 3
3e S
& r . ↔ &.
* 9 :
V ;D 5 lK 9
m U;L :
*=
R
5 U D7 *=
8 9 :
Q
#=
<= :R 5 5
3 :3
↔ & r
: 3
e 6
;D
L
:
U 9
;S 7
A
4 5 : ;D S 7
*= Q s.t
# = + s.t
; U
k 5S
V
V ;D 5
3e S, e 6
V ;D 5 U : U3 = 9: ;V :
5U 9 L
: U V e 6=
U 9 ; U
k 5S
62 U d :R; 5
= N 3 `2=3
D : D 5 V U Z Q D UP
5
O D
,
! V 5 H7
a 5 MP
A
S
D 5 D :RP
U39=
:3
S eq :3
Mm
3 `2=3,
62 U;L K 3< M 3N :R
D :RP #= 8 6 *=
. eq :3
RS
U;L 5 D :RP #= 8 6 *=
e
5
Q
R3 S3 :R
5
R3 S3 :;6
D
5
5K V 5 H
D M 5 MP
U39= O D
39:U 9lE m #=l= e[e :m *=l= e[e :[Sm
5
9
6
FE
Hi
\ EY
E,i E I
9
6
FE
Hi
_FI E Y
YF E I
9
6
FE
Hi
iI E Y
F,H E I
F_
Hi
_ EY
X
9 R;
:
:
D7 s_, Ht
:
:
D e 6
d e 6=
V
V
:
3 `2=3
D O V
G 5 e 6= : G 5
23< :;6 M
HY
5O
4 5
: U 9 5 Q D : D
:U 9 5S 5
:U 9 5
V
::
;D 5 : V
R3 S3 KP ;D
D= f.
;Z 5
l
V
:
m
D: =5
D: D M
; e : :
;D
:R
:R 6
5 S; :
M
q : R
O
D
;Z 5
34 , S; Q2
= d:
L
;Z 5
55
: 3: L
V S; Q2
D :;
D :;
34 KLV
5M
D 3 `2=3
; 8 92 , K k 5
27
D
D
R3 S3 s Et
2MR2em
V
2S:3
39 LV
e 6
::
V
3 = d:
L
::
:8 6
Q D : D
R3 S3
D M;LD : D U 9 5
D
4 :;V
5 MP
;D
D
:U 9 5
D
V
o KP ;D
3
D v
V
Q2
62
R3 S3 a 8 92,
5 S; O3: L
o Q V2 R 8LD :
D= f.
5O
< UP
D
2
D
U3< O3:
V
R3 S3
5, : G 5 e34 R :
Z 5 e 6 = 9:
H
4 5O
M 6 5 &a
:
:U 9 5
f
3 23 : ,
U 9 U D 5 O3< O
5 #
: ;L6 5 e 6=
5 D : 3 , &a
V
4 :;V Q2 :R
Q D : D , U d K 39: e 6 S h: 8 6 U
:R
:
:R D = 5
P S; Q2
34
3
V :R 5 : 4=
lS eq
&., :R
:
D v
4 :;V 3 `2=3
5 S; M 2 :Rb
62
;Z 5 83: O = e
3
D= f.
V
4 :;V 3 `2=3 U;L : 3<
: :R
D= f.
:U 9 5
V
5
uKP O
U3 e 6=
5
:R
D= .
G 5 f.
27
V ;D 5 23 uKP O
O=e
D R 34 5 8 6
D = d: :R
;D
D= f.
5 U D O3< :LD
:
2 :R
;D
2 > 2S:3
;Z 5 L
5 34
;Z 5
:R
5 O ;V
D= f.
V 3 `2=3,
3 `2=3
5 : 4=
;D O D
V
: 6
8 6 :R
D=
G 5 : ;L6 5
*
;Z 5
5
;Z 5 5 34
D=
3O
:
:
D
3 `2=3
3m
Q D : D
3 R3 S37
S37 s_, it
: ;D
3e 6
V 3 `2=3
: ;D
3U d
5 V= :
K k 5
: ;D
U 9
D
: G 5
39 O
V ;D 5
;Z 5
8LD
4 5
:O
O3: L 8LD 3 `2=3 S3Z e 6= 5 V= O V
R3 S3 : b 2MR Q2 R3 8 6 M 2MR Q2 R3 e 6
:R
.;
D = d:
D : 3< e 6= 5 V= : D M
5U 9 L
: R3
H_
5
V
V
D 5 :R
;Z 5
5M
: ;D
5 MP
3e
G 5
;Z 5
e 6=
62
;Z 5
: ;Z
e R = 3
e,
L S
5 42 ;D
A 3 2e R3 ,
3
: :
R3 S37
e R=3R MR ,
2MR Q =
M,
2MR Q2e = 3,
R3 ,
Q2:3:R 2 e 3, a =3: 2e S eq Q M3 s ]t
$R3 S3 R :
D
:
62
O= e
: 3 :Rb
| 3Hr|
V :R
:; S 7
Hr
D : D
V= 8LD 83:
V
D : 3< e 6= K 3 :
Hr
KLV
2
#
4 8 9: e2D
5 : 4=
D
R :3
5r|
; 5r, 5r, AKHrX M
O=e
$R3 S3 KP O ;V =
5Hr|
Hr
Hr
| 1
: KLV
MHr|
|
:R D K 9 Y
2K 9 _
V
2
6 U D,
D 5 S3Z 5 42 : <
D
: U 9 5, 8 6 K k 5
D
R :3
Hr
62 e 6= 5 V=
D
| AKHr|
KP ;
2R
U3
d e 6= = :
Hr
|
e
:R D
w
::
V 3 `2=3
D
M
M :R e
U 9
2 O 3= U 9= U d
3: l
m
2:
Z 5 e 6 = 9: : D
qm
Z 5e 6
4 8 9: e2D 5 42 ;D
;
D : D
: ;D
3
4 5 42 : V
:U 9 5
V
R :3
;
R3 S3
39:
3 R3 S3
: U 9 5 = 3N MP 7 s_, Ft
* 39 : 34= R3 S3 8 6 :
R3 S3 8 6 O D 5 : 3<
V
:
:R34 O D 5
23: :
V
O D 5 5 234
D
3 `2=3
34 O D 5 : 3< 8 6 M
::
Q D : D
4 5 :R 6 5
5; 8 6 e
M 2
O3: L O D 5 5 234
VU Z:
D8 N
O D 5 5 234 8 6 8 6 5 Q D : D O
5
O D 5 : 3< O
62
;Z 5 5 34
6 5 d=
: :R
3
3
=
:
5 O3: L 5 ;Z
;D 5 : V 8 6 5
;D 5
2
o
U 42 L
D = 9: : 6
<= R3 S3, 8 6 O w 5 UP
4 5 : 3< Ob=
Z=
6 : 6
8 39
::
V
62
3
= D :
Z 5
R
: l \H msHH t, 3 : 34= O3: L
V : b R3 S3 S3Z
5 42 5 9 U 9
d
D 5:
2V
3:
Hi
4
R3 S3 8 6 R3
R3 :R 5 = D S V S
6 5e D 8 6
R
=
