Thuc hanh Sinh hoa

<span class='text_page_counter'>(1)</span><div class='page_container' data-page=1></div>
<span class='text_page_counter'>(2)</span><div class='page_container' data-page=2>

<b>I.1. Cách làm:</b>

-Ống nghiệm 1: cho vài 1 ít tinh thể biure, đun nóng chảy
cho đến khi bắt đầu cứng lại thì ngừng đun. Để nguội,
thêm vào 1ml dd NaOH 10%, lắc tan, cho thêm vài giọt
CuSO₄ 1%.

- Ống nghiệm 2: cho vào 2ml dd protein trứng, thêm vào
1ml dd NaOH 10%, lắc tan, cho thêm vài giọt CuSO₄ 1%.

</div>
<span class='text_page_counter'>(3)</span><div class='page_container' data-page=3>

<b>I.2. Quan sát:</b>

-Ống nghiệm 1: dd có màu tím hồng

</div>
<span class='text_page_counter'>(4)</span><div class='page_container' data-page=4>

<b>I.3. Giải thích:</b>

-Ống nghiệm 1: Khi đun, 2 phân tử ure kết hợp lại tạo
thành biure, làm xuất hiện liên kết peptit: -CO-NH-.
Trong môi trường kiềm, biure kết hợp với CuSO₄ cho
phức hợp muối Cu có màu tím hồng.

-Sự tạo thành biure:

<b>--->t0</b>

<b>H₂N -CO-NH₂</b>

<b>+ H₂N -CO-NH₂</b> <b>_Biure</b>

<b>ure</b>

<b>+ NH₃</b>

<b>H₂N -CO-NH-CO-NH₂</b>

<b><---></b>

<b>H₂N -CO-NH-CO-NH₂</b> <b>_{HO -}_C-NH-CO-NH</b>

<b>2</b>
<b>Hỗ biến</b>

<b>=</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(5)</span><div class='page_container' data-page=5>

-Muối phức hợp của Cu với biure:

<b>+ NaOH</b>

<b>+ Cu(OH)2</b>

<b>Phức hợp muối Cu với biure </b>
<b>có mà tím hồng</b>

<b>+ Na+ + 4H</b>

<b>2O</b>

<b>HN Cu</b>
<b>2(HO -₌</b> <b>C-NH-CO-NH₂)</b>

<b>NH</b>

<b>NH</b>

<b>CO- =NH</b>

<b>CO-NH</b>

<b>NH-CO</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(6)</span><div class='page_container' data-page=6></div>
<span class='text_page_counter'>(7)</span><div class='page_container' data-page=7>

-Muối phức hợp của Cu với biure:

<b>+ NaOH</b> <b>+ Cu(OH</b>

<b>)₂</b>

<b>Phức hợp muối Cu với biure </b>
<b>có mà tím xanh</b>

<b>+ Na+ + 4H</b>

<b>2O</b>

<b>2(…HN-CH -CO-NH-CO-NH-CH-CO…)</b>

<b> </b>

<b> R₁</b>

<b>…HN-CH-CO- =N-CH-CO-N-CH-CO…</b>

<b> </b>

<b> R₂</b>

<b> </b>

<b> R₁</b> <b> R₂</b> <b> R₃</b>

<b> -</b> <b> </b>

<b>-…HN-CH-CO =N-CH-CO- =N-CH-CO…</b>

<b> </b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(8)</span><div class='page_container' data-page=8>

<b>I.4. Kết luận:</b>

-Phản ứng biure là phản ứng màu đặc trưng để phát hiện
liên kết peptit.

</div>
<span class='text_page_counter'>(9)</span><div class='page_container' data-page=9>

<b>II.1. Cách làm:</b>

Cho vào ống nghiệm 1ml dd protein trứng, thêm
vào 1ml dd ninhydrin 0,1%, đun sôi 1-2 phút. Để nguội.

<b>II.2. Quan sát:</b>

Dung dịch khi đun nóng và lúc để nguội có màu
tím đậm.

</div>
<span class='text_page_counter'>(10)</span><div class='page_container' data-page=10>

<b>II.3. Giải thích</b>

Các axit amin và các peptit khi phản ứng với ninhydrin sẽ
bị dezamin hóa, oxy hóa và decacboxy hóa tạo NH₃, CO₂,
và aldehyt tương ứng.

<b>= O</b>

<b>+</b>
<b>= O</b>

<b>=</b>

<b> O</b>

<b>H₂N-CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> R₁</b>

<b>+ H₂O</b>

<b> -OH</b>
<b>-OH</b>

<b>=</b>

<b> O</b>

<b>+ NH₃ + CO₂ + R-CHO</b>

<b>Ninhydrin </b>
<b>dạng oxi hóa</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(11)</span><div class='page_container' data-page=11>

<b>= O</b> <b>₊</b>
<b>= O</b>
<b>=</b>
<b> O</b>
<b> -OH</b>
<b>-OH</b>
<b>=</b>
<b> O</b>

<b>+ NH₃ </b>

<b>Ninhydrin </b>
<b>dạng oxi hóa</b>

<b>Ninhydrin </b>
<b>dạng khử</b>

<b> -OH</b>
<b> - N =</b>

<b>=</b>

<b> O</b>

<b>O =</b>

<b>=</b>

<b> O</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(12)</span><div class='page_container' data-page=12>

<b>II.4. Kết luận:</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(13)</span><div class='page_container' data-page=13>

<b>III.1. Cách làm:</b>

-Ống nghiệm 1: cho 2ml dd gelatin 1%, 1ml HNO3đđ đun

cẩn thận cho đến khi bọt tràn lên thành ống nghiệm. Để
nguội, rót theo thành ống nghiệm 1ml dd NaOH 10%.

- Ống nghiệm 2: cho vào 2ml dd protein trứng, 1ml
HNO_3đđ đun lên thấy xuất hiện kết tủa và khi kết tủa tràn
lên thành ống nghiệm thì dừng lại. Để nguội, rót theo
thành ống nghiệm 1ml dd NaOH 10%.

</div>
<span class='text_page_counter'>(14)</span><div class='page_container' data-page=14>

<b>III.2. Quan sát:</b>

-Ống nghiệm 1: không đổi màu chứng tỏ phản ứng không
xảy ra.

</div>
<span class='text_page_counter'>(15)</span><div class='page_container' data-page=15>

<b>III.3. Giải thích</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(16)</span><div class='page_container' data-page=16>

- Ống nghiệm 2: Khi cho HNO₃ vào protein trứng, các axit
amin nhân thơm có trong protein trứng sẽ bị nitro hóa
nhân thơm tạo dẫn xuất nitro có màu vàng.

<b> </b>

<b> NO₂</b>

<b> </b>

<b>-CH₂-CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b>NH₂</b>

<b>Tirozin</b>

<b>t0</b>

<b>+ 2HNO₃ </b>

<b> </b>

<b> OH</b>

<b> </b>

<b>-CH₂-CH -COOH</b>

<b> </b>

<b>NH -</b> <b>₂</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b> OH</b>

<b> O₂N</b>

<b>Dinitrotirozin </b>
<b>(màu vàng)</b>

<b>Hỗ biến</b>

<b> </b>

<b>-CH₂-CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b> O₂N</b>

<b> </b>

<b>NH₂</b>

<b>=</b>

<b> O</b>

<b>= N= O</b>

<b> - OH</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(17)</span><div class='page_container' data-page=17>

- Sản phẩm nitro hóa tác dụng với kiềm tạo muối có
màu vàng da cam đặc trưng.

<b> </b>

<b>-CH₂-CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b> O₂N</b>

<b> </b>

<b>NH₂</b>

<b>=</b>

<b> O</b>

<b>= N= O</b>

<b> - OH</b>

<b> </b>

<b>-CH₂-CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b> O₂N</b>

<b> </b>

<b>NH₂</b>

<b>=</b>

<b> O</b>

<b>= N= O</b>

<b> - ON</b>

<b>a</b>

<b>+ NaOH </b> <b>+ H₂O </b>

<b>Thể quinoit của </b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(18)</span><div class='page_container' data-page=18>

<b>III.4. Kết luận:</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(19)</span><div class='page_container' data-page=19>

<b>IV.1. Cách làm:</b>

- Ống nghiệm 1: cho 1ml dd protein trứng, 1ml axit axetic

đđ hơ nóng nhẹ thấy kết tủa, sau đó đun cho tan hết kết

tủa, làm lạnh. Cho từ từ theo thành ống nghiệm 2ml

H2SO4 đđ

- Ống nghiệm 2: cho1ml dd protein trứng, 2 giọt saccaroz
10%, lắc đều. Cho từ từ theo thành ống nghiệm 2ml
H₂SO₄ _đđ.

</div>
<span class='text_page_counter'>(20)</span><div class='page_container' data-page=20>

<b>IV.2. Quan sát:</b>

-Ống nghiệm 1: giữa 2 lớp chất lỏng xuất hiện 1 vịng
màu tím đỏ.

</div>
<span class='text_page_counter'>(21)</span><div class='page_container' data-page=21>

<b>IV.3. Giải thích</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(22)</span><div class='page_container' data-page=22>

<b>- H</b>

<b>Tryptophan</b>

<b> </b>

<b>-CH₂-CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b>NH₂</b>

<b> </b>
<b>NH</b>

<b>+ HOC-COOH </b>

<b>2</b>

<b>Axit glyoxylic</b>

<b>- CH - </b>

<b> </b>
<b>-C</b>
<b>H</b> <b>2</b>
<b>-C</b>
<b>H</b>
<b> </b>
<b>-C</b>
<b>O</b>
<b>O</b>
<b>H</b>
<b> -</b> <b> </b>
<b>NH₂</b>
<b> </b>

<b>NH</b>
<b> </b>
<b>-C</b>
<b>H</b> <b>2</b>
<b>-C</b>
<b>H</b>
<b> </b>
<b>-C</b>
<b>O</b>
<b>O</b>
<b>H</b>
<b> -</b> <b> </b>
<b>NH₂</b>
<b> </b>
<b>NH</b>
<b> -</b> <b> </b>
<b>COOH</b>

<b>Sản phẩm ngưng kết </b>
<b>giữatrytophan với axit </b>
<b>glyoxylic có màu tím đỏ</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(23)</span><div class='page_container' data-page=23>

- ống nghiệm 2: tryptophan có mặt trong lịng trắng trứng
sẽ tác dụng với oxymetyl furfurol (có trong fructoz của
saccaroz) tạo sản phẩm ngưng kết oxymetyl furfurol
tryptophan làm thành một vịng tím cam giữa 2 dung dịch
lỏng.

O

H
OH

H
OH

CH₂OH
CH₂OH

-3H₂O

O

-CH₂OH

HOC-H
H

</div>
<span class='text_page_counter'>(24)</span><div class='page_container' data-page=24>

<b>- H</b>

<b>Tryptophan</b>

<b> </b>

<b>-CH₂-CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b>NH₂</b>

<b> </b>

<b>NH</b> O

-CH₂OH

HOC-H
H
<b>Oxymetyl furfurol</b>
<b>+</b>
<b>2</b>

<b>- CH - </b>

<b> </b>
<b>-C</b>
<b>H</b> <b>2</b>
<b>-C</b>
<b>H</b>
<b> </b>
<b>-C</b>
<b>O</b>
<b>O</b>
<b>H</b>
<b> -</b> <b> </b>
<b>NH₂</b>
<b> </b>

<b>NH</b>
<b> </b>
<b>-C</b>
<b>H</b> <b>2</b>
<b>-C</b>
<b>H</b>
<b> </b>
<b>-C</b>
<b>O</b>
<b>O</b>
<b>H</b>
<b> -</b> <b> </b>
<b>NH₂</b>
<b> </b>
<b>NH</b>
<b> </b>

<b>-Sản phẩm ngưng kết giữ </b>
<b>oxymetyl furfurol với </b>

<b>trytophan có màu tím cam</b> O

</div>
<span class='text_page_counter'>(25)</span><div class='page_container' data-page=25>

<b>IV.4. Kết luận:</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(26)</span><div class='page_container' data-page=26>

<b>V.1. Cách làm:</b>

- Cho vào ống nghiệm 1ml dd protein trứng, 2ml dd
NaOH 10% dư. Đun sôi 3 phút, lắc đều. Thêm vài giọt

(CH₃COOH)₂Pb 5%, hơ nóng.

</div>
<span class='text_page_counter'>(27)</span><div class='page_container' data-page=27>

<b>V.2. Quan sát:</b>

-Trong ống nghiệm xuất hiện những hạt tủa màu xám, đen
lơ lững trong dung dịch.

<b>V.3. Giải thích:</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(28)</span><div class='page_container' data-page=28>

<b>HS- CH₂ -CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b>NH₂</b>

<b>+ 2 NaOH </b> <b>HO- CH₂ -CH -COOH</b>

<b> </b>

<b> </b>

<b>NH₂</b>

<b>+ Na₂S </b>

<b>+H₂O </b>

<b>+NaOH dư </b>

<b>+ 2 NaOH </b>

<b>(CH₃COOH)₂Pb </b> <b>2CH₃COONa </b> <b>+ Pb(OH)₂</b> <b>+ NaOH dư </b>

<b> </b>

<b> Pb(OH)₂</b> <b>+ 2 NaOH </b> <b>Na2PbO2</b> <b>+ 2 H2O </b>

<b> </b>

<b>+ NaOH dư </b>
<b> </b>

<b>Na₂S </b> <b>_{+ Na}</b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(29)</span><div class='page_container' data-page=29>

<b>V.4. Kết luận:</b>

</div>

<!--links-->