Bai Thuc hanh

<span class='text_page_counter'>(1)</span>Bài : ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN HOẠT TÍNH CỦA ENZYME. I) Nguyên tắc:  . Nhiệt độ có ảnh hưởng quan trọng đến tốc độ phản ứng của enzyme. Sự tăng tốc độ phản ứng của enzyme bằng cách nân nhiệt độ chỉ có hiệu quả trong một khoảng nhiệt độ tương đối hẹp Nhiệt độ tối thích của phần lớn các enzyme là trong khoảng 40-600C. Ở nhiệt độ trên 800C hầu hết các enzyme bị biến tính không thuận nghịch. II) Cách tiến hành & kết quả:.   . Chuẩn bị 4 ống nghiệm, cho vào mỗi ống 2ml dd tinh bột 1%  Ống 1 : gia nhiệt ở 85-900C  Ống 2 : cho vào nước đá  Ống 3 : để ở tủ ấm 45-500C  Ống 4 : để ở nhiệt độ phòng Giữ các ống trong 15 phút để dd trong ống đạt đến các nhiệt độ tương ứng Tiếp tục cho vào mỗi ống 0,5ml dd amylase cũng đã đạt các nhiệt độ trên và đặt các ống nghiệm ở các nhiệt độ cũ Sau 1, 2, 4, 6, 8 và 12 phút lấy từ mỗi ống 1 giọt, nhỏ vào các giọt thuốc thử Lugol đã chuẩn bị sẵn trên bản kính. Quan sát màu tạo thành. 1 phút 2 phút 4 phút 6 phút 8 phút 12 phút. Ống 1. Ống 2. Ống 3. Ống 4. Xanh đen Xanh đen Xanh đen Xanh đen Xanh đen Xanh đen. Tím đen Đen nhạt Nâu đen Nâu đen Nâu đất Nâu đen. Đen Tím đen Nâu nhạt Nâu nhạt nhạt Nâu nhạt hơn Nâu rất nhạt. Đen đậm Nâu đất Nâu đất nhạt Nâu đất nhạt Nâu đất nhạt hơn Màu của lugol. Qua bảng trên ta thấy : trong ống 1 và ống 2 thì màu dd tinh bột thay đổi không đáng kể, trong ống 3 và ống 4 màu của dd tinh bột thay đổi nhờ enzyme đã thủy phân  Giải thích : Nhiệt độ có ảnh hưởng quan trọng đến tốc độ phản ứng của enzyme. Nhiệt độ tối thích của phản ứng enzyme nằm trong phạm vi 40-50 0C và có thể biển đổi phụ thuộc vào nhiều yếu tố như độ sạch của enzyme, thời gian phản ứng…Nhiệt độ mà enzyme bị mất hoàn toàn hoạt tính xúc tác gọi là nhiệt độ tới hạn, thường vào khoảng trên 70 0C. Ở nhiệt độ tới hạn, enzyme bị biến tính, ít khi có khả năng được hồi phục lại hoạt độ. Ngược lại, dưới 0 0C, hoạt độ enzyme tuy bị giảm nhưng lại có thể tăng lên khi đưa về nhiệt độ bình thường. Bài : PHẢN ỨNG VỚI THUỐC THỬ FEHLING I) Nguyên tắc: . . Do có chứa chức aldehyde hoặc ceton cho nên các monosaccharide có tính khử và được gọi là đường khử. Nếu 2 monosaccharid kết hợp với nhau bằng 2 hydroxyl glucoside thì disacccharide tạo thành bị mất tính khử. Còn nếu nhóm OH glucoside của nhóm này liên kết với nhóm OH alcol của monosaccharid kia thì disaccharid tạo thành vẫn còn tính khử Khi đun đường khử với dd thuốc thử Fehling thì kết tủa đỏ của Cu 2O hình thành ( do đường khử đã khử Cu(OH)2 có trong Fehling thành CuO2). II) Nguyên liệu và hóa chất: . Dung dịch Glucose 1%.

<span class='text_page_counter'>(2)</span>    . Dung dịch Mantose 1% Dung dịch Saccharide 1% Thuốc thử Fehling A (CuSO4) Thuốc thử Fehling B (Seignet + NaOH). III) Cách tiến hành & kết quả: . Lấy 3 ống nghiệm, đánh số từ 1-3 như sau : Ống 1 : cho 2ml glucose 1% + 1ml Fehling A + 1ml Fehling B + đun trong 5 phút - Kết quả: có kết tủa đỏ gạch tươi ( Cu2O ) - PTPỨ:. . Ống 2 : cho 2ml maltose 1% + 1ml Fehling A + 1ml Fehling B + đun trong 5 phút - Kết quả: có kết tủa đỏ gạch tươi ( Cu2O ) - PTPỨ:. . Ống 3 : cho 2ml saccharide 1% + 1ml Fehling A + 1ml Fehling B + đun trong 5 phút - Kết quả: không hiện tượng - PTPỨ:. 1. 2. 3. C 2 u O.  Giải thích: + Thuốc thử Fehling là hỗn hợp 2dd : * dd CuSO4 * và dd muối Seignet với NaOH. Khi trộn 2 dd trên với nhau thì xảy ra phản ứng: CuSO4 + 2 NaOH  Cu(OH)2 + Na2SO4  Sau đó dd CuSO4 tác dụng với muối seignet tạo muối phức hòa tan, dd có màu xanh thẫm  Muối phức trên là hợp chất không bền  Trong môi trường kiềm, các mono và 1 số dixacarit khử Cu 2+ dưới dạng alcolat đồng thành Cu2+, chức aldehit bị oxi hóa thành axit hoặc muối tương ứng  Do glucose và maltose có tính khử nên khi đun với dd thuốc thử Fehling thì kết tủa đỏ của Cu 2O hình thành (do đường đã khử Cu(OH)2 có trong Fehling thành Cu2O).

<span class='text_page_counter'>(3)</span>