Tối ưu hóa chiết xuất chất chống oxy hóa phenolic từ vỏ nho (vitis vinifera l ) với sự hỗ trợ của sóng siêu âm bằng cách sử dụng phương pháp bề mặt đáp ứng

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM
KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM
Học phần:

THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM & XỬ LÝ SỐ LIỆU
Bài Báo Khoa Học:

Tối ưu hóa chiết xuất chất chống oxy hóa phenolic từ vỏ
nho (Vitis vinifera L.) với sự hỗ trợ của sóng siêu âm
bằng cách sử dụng phương pháp bề mặt đáp ứng
GVHD: Nguyễn Văn Anh
SVTH: Nhóm 1
Đinh Nguyễn Huỳnh Như
Đỗ Nguyễn Trúc An
Ngô Thị Hồng Đào
Trần Lê Thanh Ngân
Nguyễn Minh Tuấn

2005180166
2005180439
2028170212
2005190365
2022190306

09DHTP4
09DHTP4
08DHDD2
10DHTP4
10DHDB2

Nội dung chính
Cách thức tiến hành thí nghiệm
 Chiết suất bằng sóng siêu âm
 Đo TPC và TPC-280
 Khả năng quét gốc tự do DPPH
 Thử nghiệm ORAC
 Phân tích HPLC-DAD
 Thiết kế thử nghiệm RSM

Cách thức xử lý số liệu
 Thí nghiệm đơn yếu tố
 Tối ưu hóa bằng RSM
 Hệ số hồi quy và phân tích bề mặt đáp ứng
 Xác nhận thử nghiệm mơ hình


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Hóa chất













Axit clohydric
Ethanol RPE
Axit gallic
Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-axit tetramethylchroman-2-cacboxylic)
DPPH (2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl)
Đệm phốt phát
Fluorescein
AAPH (2,20-azobit (2-methylpropionamidine) dihydrochloride)
Thuốc thử folin – ciocalteu
Nước cấp HPLC
Axit formic
Axetonitril cho HPLC


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Chuẩn bị mẫu

Sấy nhiệt
trong bóng tối

Nghiền
thành bột

Sàng
bằng rây 1,5mm


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Chiết suất bằng sóng siêu âm

Được thực hiện trong một thiết bị siêu âm được điều khiển kỹ thuật số (3300EP SONICA, Ý) với tần
số cố định là 40 kHz và công suất siêu âm là 200W.


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Chiết suất bằng sóng siêu âm
Các biến: Nồng độ etanol, nhiệt độ và thời gian
Cách tiến hành:
- 0,2 g bột vỏ quả được chiết với 4 ml dung môi với hàm lượng
ethanol cần thiết (chứa 1% axit clohydric)
- Ba mẫu đã được chuẩn bị cho mỗi lần chạy
- Hỗn dịch chiết được ly tâm ở tốc độ 15.000 vịng/phút trong 5
phút
- Phần nổi phía trên được lọc qua một bộ lọc xenlulozơ 0,45µm
và ngay lập tức được phân tích


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Đo TPC và TPC-280
Tổng hàm lượng phenol được xác định bằng hai phương pháp
khác nhau:
Xét nghiệm Folin – Ciocalteu (FC)
Đọc trực tiếp độ hấp thu ở bước sóng 280nm.
1ml nước, 0,02ml mẫu chiết, 0,2ml thuốc
thử Folin và 0,8ml dung dịch natri
cacbonat 10% được trộn và định mức đến
3ml. Độ hấp thu được đo ở bước sóng
765nm sau 90 phút.

Mẫu được pha lỗng bằng dung dịch ethanol
60% chứa axit clohydric 1% và đo độ hấp thụ ở
bước sóng 280 nm.

Tổng số phenol được biểu thị bằng đương lượng axit gallic trên một gam vỏ nho tính theo
trọng lượng khô (mgGAE/gDW) bằng cách sử dụng đường chuẩn với axit gallic chuẩn.


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Đo TPC và TPC-280


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Đo lường khả năng quét gốc tự do DPPH


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Thử nghiệm ORAC


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Phân tích HPLC-DAD


Cách thức tiến hành thí nghiệm
Thiết kế thử nghiệm RSM


Cách thức xử lý số liệu
Thí nghiệm đơn yếu tố

Cách thức xử lý số liệu
Tối ưu hóa bằng RSM


Cách thức xử lý số liệu
Hệ số hồi quy và phân tích bề mặt đáp ứng


Cách thức xử lý số liệu
Xác nhận thử nghiệm mô hình