Nghiên cứu xây dựng thang alen chỉ thị huỳnh quang cho 05 locus penta e, d18s51, d21s11, TH01 và d3s1358 phục vụ giám định

ng thang alen ch th hunh
quang cho 05 locus penta E, D18S51,
c v
nh


i


i hc Khoa hc T 
LuDi truyn hc: 60 42 70
ng dn:  
o v: 2012


Abstract.  d th 
v c s dng trong nhn d 
hiu ch to thang alen ch th hunh qu

u kt qu t AND, kt qu kim tra sn ph
agrose, kt qu n di kht qu la chn mu
tinh sch sn phi.

Keywords. Di truyn hnh; M


Content

MỞ ĐẦU

Nhi th k ng kin s a k thut di

truyn k t n ra ci xo
i ADN t mng ADN rt
nh u trong ng nghi    c ng
dng ru v y, sinh h s nhm m
 i.
 k n nhng ng d  c tii Anh
u cng s 
i. H t
 bao gm nhc lp li mt s ln lp
   n lc
m quan tr bit s .
Vi s n ca k thut gen, nhin lp l
hi vi lp li b dng
enzyme gii hn lp li ngu
  lp l lp li ngn, ch t
2-t hp k thun d
th t tm cao m  
c phc nhng hn ch ct thanh h
 c quan h huyt thng
cha-con, m-con,  d lii phm.
   ng thi
u ch t KIT phc v cho mc nhi sinh
h i ting dng ln. Ngay t gia nha th k 
sn xu phm sinh hng nhiu
b  t ra
i. Mi b  n, mn quan
tr thiu.
t hn hp bao gm tt c  xut hin trong mt qun
th i nhnh. S t cnu gen
ca mt k m u cn s

d  
t cao, th tc nhp khi th tr ngi cho ving r
Vit Nam.
 ch ng v ng thi phc v 
i Vic khoa h n t trin
khai r  t
 Nghiên cứu xây dựng thang alen chỉ thị huỳnh quang cho 05 locus Penta
E, D18S51, D21S11, TH01 và D3S1358 phục vụ giám định.
M h tc thang alen ch th gn hunh quang cho 05
 d  dng phc h  s d
t b scan gel hunh quang phc v .


CHƢƠNG 1
TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1. Phƣơng pháp xác định cá thể dựa trên chỉ thị ADN

1.1.1. Cơ sở khoa học của phân tích ADN xác định cá thể
Vi s u cn ra bn cht di truyn
n t chui nucleotide gm 4
loi bp xp k tip nhau, s
 ca 4 lo ADN cm sc th 
trong mi t a m   .

u v cn thy nhiu gen ca
sinh v   t s sinh v         n phm
(protein) xen gic gi
 lp l c
i:
-  lp li nhiu ln chim 10-15% b ng vng
 lp li khong 10-ng tp trung  ng
hoc  u nhim sc th.
-   ln lp lm khong 25-40% b 
c l- lp li nhiu ln,
  h gen.
1.1.2. Các kỹ thuật xác định tính đa hình của ADN
1.1.2.1. K thut RFLP
 thut dn ng chup (PCR)
1.2. Đại cƣơng về các locus STR đƣợc sử dụng trong nhận dạng cá thể ngƣời
Nhc lp l dng
rc khoa h u sau:
  d hp t cao, n
 D i h ng thi (multiplex PCR)
 t bin gen thp.
 c ng y b
c t nhng m y mt phn.
1.2.1. Các locus STR ứng dụng trong phân tích cá thể người

Hình 1. Cu trc phn t ADN

1.2.2. Các locus sử dụng trong nghiên cứu
Bảng 1.  u

TT

Locus
Vị trí
Đơn vị lặp
Số đoạn lặp
Kích thƣớc
sản phẩm
PCR
1
Penta E

NST s 15
[AAAGA]
5 - 26
379  484 bp
2
D18S51

NST s 18
[AGAA]
7 - 27
286 - 373 bp
3
D21S11

NST s 21
[TCTA],
[TCTG]
12, 24 - 41.2
203 - 273 bp
4

TH01
n
NST s 11
[AATG]
3 - 14
152 - 196 bp
5
D3S1358
n
NST s 3
[TCTG],
[TCTA]
8 - 20
115 - 147bp


1.3. Các phƣơng pháp phát hiện ADN
1.3.1. Phương pháp nhuộm Ethidum bromide
1.3.2. Phương pháp đánh dấu phóng xạ
1.3.3. Phương pháp nhuộm bạc
1.3.4. Phương pháp đánh dấu huỳnh quang
Đánh dấu huỳnh quang sản phẩm PCR  thc hin b

 Kt hp mt thuc nhum hun phi bng mc
u hunh quang.
 S du hunh quang khi thc hin PCR.
 S dng thuc nhum hu g
S dng mu hunh quang s khc ph
 mt sa sn ph n
c x  liu, mu hui nhing

tht phn t qu vc lp. Tuy vic gn xen hunh
n ca sn phm PCR trong gel hoc mao
qun, v  khc phc bn ma kiu gen ca m
n b thang alen ch th  i vi thit
k c hi ng bng ca vic gn thuc
nhu ADN.
Sự phát hiện huỳnh quang: Nguc chic nhum hunh quang
c gn  cu  p th ng t ngun laser
ng thc s
d ghi nhi m th hoc m
ng quang t hoc mt thit b n s thu thu t 
n t. Nhu hin m
nh cn di mao qun
hon di.
1.4. Đại cƣơng các về chất huỳnh quang và ứng dụng trong phân tích ADN
1.4.1. Khái niệm về chất huỳnh quang
1.4.2. Ứng dụng chất huỳnh quang trong phân tích ADN
Hin nay, ht c  u  dng mu
hunh quang. Bng 5 tng kt mt s thuc nhum huc s d
u sn phi vi thuc nhuc sp x
 c

Bảng 3. a mt s thuc nhum hunh quang s dng trong
 i

Thuốc nhuộm
Tên hóa học
Ánh sáng kích
thích cực đại
(nm)

Ánh sáng phát
ra cực đại
(nm)
5-FAM
5- carboxy fluorescein
493
522
JOE
6- carboxy--dim eoxy--
dichl orofluor escein
528
554
VIC
Độc quyền của Applied Biosystems
538
554
NED
Độc quyền của Applied Biosystems
546
575
PET
Độc quyền của Applied Biosystems
558
595
LIZ
Độc quyền của Applied Biosystems
638
655
ROX (CXR)
6-carboxy-X-rhodamine

587
607
Fluorescein (FL)
Fluorescein
490
520
TMR (TAMRA)
-tetramethyl-6
carboxyfluorescein
560
583
TET
-hexachloro-6-
carboxyfluorescein
522
538
HEX
-hexachloro-6-
carboxyfluorescein
535
553
Rhodamine Red
-X
(Molecular Probes)
580
590
Texas Red
-X (Molecular Probes)
595
615

SYBR Green
(intercalator)
Độc quyền của Molecular Probes
497
520

Mi b thuc nhum huc s dng php vt b quang
hc, nguy, khm b
 dng mi gn huu cht ch v t b s dng

1.5. Tình hình nghiên cứu chế tạo thang alen chỉ thị huỳnh quang
1.5.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới
1.5.2. Tình hình nghiên cứu trong nước
 Vit Nam, trong kho lc ng d thu
ch th  t th
tu.
         dp mi hunh
quang trong ch to thang alen ch th ti Vi n
 ng thang alen ch th hunh quang
vi mm  
cu. Nu g
u.
m tra sn ph thu nhn mu s dng cho ch to thang
alen
3. Ch ti locus Penta E, D18S51, D21S11, TH01, D3S1358
4. Ch to thang alen phc ht phn ng PCR.


CHƢƠNG 2
NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1. Nguyên liệu
2.1.1. Đối tượng nghiên cứu
u s d  gng 50 mu),
05 locus Penta E, D18S51, D21S11, TH01, D3S1358.
Mn K562 c
2.1.2. Thiết bị, vật tư nghiên cứu
2.1.3. Mồi cho ca
́
c locus nghiên cư
́
u
Bảng 4. u
TT
Primer
Trình tự mồi
1
D3-1
5'- ACT GCA GTC CAA TCT GGG T -3'
2
D3-2
5'-[FL]-ATG AAA TCA ACA GAG GCT TGC -3'
3
TH-1
5'-[FL]-GTG ATT CCC ATT GGC CTG TTC -3'
4
TH-2
5'- ATT CCT GTG GGC TGA AAA GCT C -3'
5
D21-1

5'- ATA TGT GAG TCA ATT CCC CAA G-3'
6
D21-2
5'-[FL]-TGT ATT AGT CAA TGT TCT CCA GAG AC -3'
7
D18-1
5'-[FL]-TTC TTG AGC CCA GAA GGT TA -3'
8
D18-2
5'-ATT CTA CCA GCA ACA ACA CAA ATA AAC -3'
9
Penta E-1
5'-ATT ACC AAC ATG AAA GGG TAC CAA TA -3'
10
Penta E-2
5'-[FL]-TGGGTTATTAATTGAGAAAACTC CTTACAA TTT-3'


2.1.4. Hoá chất
 Hóa chất tách chiết ADN
 
 n di
2.2. Phƣơng pháp nghiên cứu
Chn mu th FTA  c lu gi
v bo qun
Mồi huỳnh quang đã được
lựa chọn
Tch chit mu bng Chelex
PCR
Định lượng các mẫu khuôn ADN

in di acrylamide
Điện di Agarose
kiểm tra sản phẩm PCR
Chn sn phm PCR
mang alen
Tinh sch sn phm PCR
Phi trn to thang alen n
Phi trn to
thang alen phc
Nhn bi thang alen
nhiu cp
Kiểm tra tỷ lệ phối trộn
Kiểm tra tỷ lệ phối trộn
Định lượng sản phẩm PCR
Hình 3. M hnh th nghim
2.2.1. Phương pháp tách chiết ADN
2.2.2. Phương pháp định lượng ADN
2.2.3. Phương pháp nhân bội ADN
2.2.4. Kỹ thuật điện di ADN
Điện di trên gel agarose
Điện di trên gel Poly acrylamide
2.2.5. Phương pháp phát hiện ADN sau điện di
ng Ethidium bromide
ng k thut soi gel hunh quang
2.2.6. Phương pháp chế tạo thang alen chỉ thị huỳnh quang
 Chế tạo thang alen đơn
 Chế tạo thang alen phức
2.2.7. Thu thập và xử lý dữ liệu

CHƢƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1. Kết quả tách chiết ADN
Kt qu kim tra b         m Ethidium
c th hin  .






















Kt qu n di cho thy mc ADN tng s. Mu
 chu tip theo. Kt qu u

t cho thng t 20 ng/ tinh sch OD t 1,4 tr
u t y m  tinh sch cn thi
s dng cho k thut PCR.


Hình 4. Kt qu n di agarose mt s mng s
Ging 1  u ADN tng s

1 2 3 4
ADN
tổng số
3.2. Kết quả kiểm tra sản phẩm nhân bội trên gel agarose
Locus Penta E

n di cho thn phm c t
chng t   u su   c sn phm nm trong khong 400 
p v khi s dng cp mi cho locus Penta E.
Locus D18S51

500bp
250bp
Hình 5. Kt qu in di sn phm PCR locus Penta E ca mt s mu kho st
Ging 1-6: Cc mu nhn bi locus Penta E
(+): mu i chng dng, (-): Mu i chng m
M50: Marker 50 - Thang kch thc ADN 50bp
1 2 3 4 5 M50 6 (+) (-)

500bp
250bp
Hình 6. Kt qu in di sn phm PCR locus D18S51 ca mt s mu kho st
Ging 7-11: Cc mu nhn bi locus D18S51
(+): Mu i chng dng
M50: Marker 50 - Thang kch thc ADN 50bp

7 8 9 10 11 M50 (+)
n di, sn phm PCR cc nm khong
g.
Locus D21S11

D thc sn ph
c nm trong khong 250  300bp.
Locus TH01

500bp
250bp
Hình 8. Kt qu in di sn phm PCR locus TH01 ca mt s mu kho st
Ging 2,3,7,9: Cc mu nhn bi locus TH01
(+): mu i chng dng, (-): Mu i chng m
M50: Marker 50 - Thang kch thc ADN 50bp

2 3 7 9 (-) (+) M50

500bp
250bp
Hình 7. Kt qu in di sn phm PCR locus D21S11 ca mt s mu kho st
Ging 1-6: Cc mu nhn bi locus D21S11
(+): mu i chng dng, (-): Mu i chng m
M50: Marker 50 - Thang kch thc ADN 50bp

1 2 3 4 5 6 M50 (+) (-)
Sn phi ca locus TH01 so vi marker cho thc nm trong
khong 200  250bp
Locus D3S1358

u khc nm trong khong 100  150bp.
y, tt c n phc t
y hiu sui Marker 50bp cho thy
sn phc hiu khi thit k mi.
3.3. Kết quả điện di khảo sát mẫu trên gel poly acrylamide
Locus Penta E

500bp
250bp
Hình 9. Kt qu in di sn phm PCR locus D3S1358 ca mt s mu kho st
Ging 1-7: Cc mu nhn bi locus D3S1358
(+): Mu i chng dng
M50: Marker 50 - Thang kch thc ADN 50bp

1 2 3 4 M50 5 6 7 (+)

Hình 10. Kt qu in di sn phm PCR locus Penta E
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 1-10: Cc mu nhn bi locus Penta E
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m

1 (+) 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (-)

11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 (+) (-)

Hình 11. Kt qu in di sn phm PCR locus Penta E
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 11-22: Cc mu nhn bi locus Penta E
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m
Kt qu c hiu khu gen
 hin s  u ki s dng cho ch to
thang alen.

Locus D18S51

t i s dng mi cho locus D18S51 cho
kt qu t s dng ch to thang alen.








Hình 12. Kt qu in di sn phm PCR locus D18S51
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 1-13: Cc mu nhn bi locus D18S51
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m

(-) 1 2 3 4 5 6 (+) 7 8 9 10 11 12 13

Hình 13. Kt qu in di sn phm PCR locus D18S51
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 11-22: Cc mu nhn bi locus D18S51
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m


11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 (+) (-)
Locus D21S11

Kt qu u khho th
 m t qu i vc
hi  ki s d ch to thang alen.

Hình 14. Kt qu in di sn phm PCR locus D21S11
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 1-9: Cc mu nhn bi locus D21S11
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m


1 (+) 3 4 5 6 7 8 9 (-)

Hình 15. Kt qu in di sn phm PCR locus D21S11
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 11-21: Cc mu nhn bi locus D21S11
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m

(+) 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 (-)
Locus TH01

t trong nh hit qu n
di. Di vu kh nh tm thi locus
ng ca sn phu kh hin  
c hi u kh  s d ch to thang alen locus

TH01.





Hình 16. Kt qu in di sn phm PCR locus TH01
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 1-14: Cc mu nhn bi locus TH01
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m


1 3 4 5 6 7 (+) 8 9 10 11 12 13 14

Hình 17. Kt qu in di sn phm PCR locus TH01
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 2, 15-28: Cc mu nhn bi locus TH01
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m


2 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 (+)
Locus D3S1358

Kt qu n di kim tra sn phu khy: Sn phm
c hi. S  alen cho thy s a
a locus D3S1358. Dt qu  
u kh  la chn cho ch to thang alen.
Vi kt qu a chn phm PCR mang alen cn
thi s dng cho ch to thang alen tng locus.
3.4. Kết quả lựa chọn mẫu và tinh sạch sản phẩm nhân bội
Dt qu  a chn
mt s ma mi locus nhm phc v ch to than 

Hình 18. Kt qu in di sn phm PCR locus D3S1358
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 4-15: Cc mu nhn bi locus D3S1358
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m


(+) 4 5 6 7 8 11 12 13 14 15 (-)

Hình 19. Kt qu in di sn phm PCR locus D3S1358
mt s mu kho st trn gel poly acrylamide
Ging 1, 2, 16-25: Cc mu nhn bi locus D3S1358
(+): Mu i chng dng; (-): Mu i chng m


1 2 16 17 18 19 20 21 22 23 24 (+) 25 (-)
a chc alen ca tng mm du chui vi
mi locus, m t ki  dng mi
cht mc la ch ch to thang.

Mc la chi vi t

Bảng 9. u la chn cho ch t
Locus
Tên mẫu
Alen
Penta E
K562
5-14
1
16-17
7
9-11
10
10-10
12
15-18
16
19-20
22
12-13
D18S51
K562
15-16
4
14-21
9
15-20
11
15-19

12
17-18
17
13-17
25
12-12
D21S11
K562
29-30-31
1
29-32.2
3
32-34
7
30.2-33.2
9
29.2-30
14
29.2-30.2
21
31.2-33
TH01
K562
9.3-9.3
3
9-11
7
6-8
15
5-5

22
7-10
D3S1358
K562
16-16
4
16-19
6
14-14
12
13-15
18
17-18


 s d tch sn
phi vi mi b n tp nhia, mi tha
c tinh sch bng b -up System c
Promega. Kt qu 

Bảng 10.  tinh su sn phm PCR
s dng cho ch t




Locus
Tên mẫu
Hàm lƣợng
(ng/l)

OD
(A260/A280)
Penta E
K562
133,4
1,72
1
155,2
1,79
7
160,3
1,65
10
159,1
1,69
12
145,7
1,76
16
142,1
1,69
22
134,8
1,70
D18S51
K562
187,2
1,75
4
199,1

1,76
9
250,5
1,82
11
123,9
1,79
12
260,7
1,71
17
165,3
1,75
25
143,8
1,77
D21S11
K562
156,2
1,75
1
201,4
1,75
3
144,7
1,81
7
149,3
1,78
9

130,1
1,83
14
133,2
1,80
21
179,3
1,72
TH01
K562
154,3
1,69
3
110,1
1,76
7
155,2
1,79
15
122,1
1,71
22
218,3
1,72
D3S1358
K562
162,2
1,72
4
145,3

1,69
6
166,1
1,75
12
150,8
1,74
18
178,6
1,69

Kt qu tinh sch cho thu sn phi ca m tinh sch
 OD t 1,65 tr ng ADN t 1
tinh s s dc ch to thang alen.
3.5. Kết quả chế tạo thang alen dạng đơn lẻ
Locus Penta E

Kt qu cho thy, thang alen ch to t c la ch 
 c khu ch
i cho kt qu i nhiu
c s dn mu bao g
alen 5-9-10-11-12-13-14-15-16-17-18-19-20.
Locus D18S51

Hình 20. Kt qu ch to thang alen locus Penta E
LD: Thang alen n c ch to hon chnh
K562: Mu chun; Ging 7,10,22,1,12,16: Cc mu la chn cho ch to thang
5, 9-20: Cc alen thu c sau kho st
K562 7 10 22 1 LD 12 16

5
14
9
11
10
12
13
16
17
15
18
19
20

Hình 21. Kt qu ch to thang alen locus D18S51
LD: Thang alen n c ch to hon chnh
K562: Mu chun; Ging 25,17,12,11,9,4: Cc mu la chn cho ch to thang
12-21: Cc alen thu c sau kho st


25 17 12 11 9 LD 4 K562

12

13
17
17
18
15
19
15
20
21
14
16
15
c bao gc
 l p, th hin  
Locus D21S11

S da ch ch tc
thang alen bao g   n 34. Kt qu cho th t
ng t ch t l.
Locus TH01




















Thang c bao g n 11, bao gm mt alen l
a thang sau ch t ng cao cho thy t l trn

mp.


Hình 22. Kt qu ch to thang alen locus D21S11
LD: Thang alen n c ch to hon chnh
K562: Mu chun; Ging 9,11,4,21,7,3: Cc mu la chn cho ch to thang
29-34: Cc alen thu c sau kho st

9 11 4 LD 21 7 3 K562

29
30
31
29
32.2
29.2
30
29.2
30.2
31.2
33
30.2
33.2
32
34

Hình 23. Kt qu ch to thang alen locus TH01
LD: Thang alen n c ch to hon chnh
K562: Mu chun; Ging 3,22,7,15: Cc mu la chn cho ch to thang
5-11: Cc alen thu c sau kho st

K562 3 LD 22 7 15

6
9.3
9
11
10
7
8
5
Locus D3S1358

c bao g t n 19. T l trn mu
 tng
 s du tip theo.
3.6. Kết quả chế tạo thang alen dạng phức hợp 05 locus
Kt qu ch to thang alen ph

Hình 24. Kt qu ch to thang alen locus D3S1358
LD: Thang alen n c ch to hon chnh
K562: Mu chun; Ging 6,12,18,4: Cc mu la chn cho ch to thang
13-19: Cc alen thu c sau kho st

6 12 18 LD 4 K562

16
14
13
15
17
18
19
16

Hình 25. Kt qu ch to thang alen phc 05 locus
LD: Thang alen phc hp 05 locus hon chnh
K562: Mu chun
Penta E
D18S51
D21S11
TH01
D3S1358
LD LD
K562
Thang alen phc hu sn phi s
dt s mt qu cho th

th s d    c kiu gen c        l trn mu
n th
 nh cho thm nht, sau
n t        
nh m i.
u chnh t l tr
u t 1: 1: 1: 1:  dng cho phn ng
c kt qu 

u chnh li t l tri to thang alen
phc thang alen ph ng gi
 s dnh kiu gen ca m
Tii thang alen nhiu c
c kt qu 

Hình 26. Kt qu iu chnh t l trn khun ch to thang alen phc 05 locus
LD: Thang alen phc ch to c sau khi iu chnh t l trn khun
K562: Mu chun

Penta E
D18S51
D21S11
TH01
D3S1358
LD LD
K562

T kt qu i s d 
 ti h u cho kt qu ging
  n  tip t i
ng hp thang alen trong thi gian bo qun cht
ng, s dng b -up System c tinh
sch li sn ph di tip.
Th nghi t   u gen mt s m  










Hình 27. Kt qu ch to thang alen phc 05 locus cc th h
LD: Thang alen phc th h I
LD 1/1000, 1/5000, 1/10000: Thang alen phc cc th h I, II, III

D18S51
D21S11
TH01
D3S1358
LD LD LD LD

1/1000 1/5000 1/10000
K562
Penta E

Hình 28. Kt qu th nghim s dng thang alen phc cho phn tch
LD: Thang alen phc c ch to trong nghin cu
K562: Mu chun - Ging 101-116: Cc mu nhn bi 05 locus
D18S51
D21S11
TH01

D3S1358
LD LD LD LD LD LD

Penta E
101 103 105 107 109 111 113 115 K562
102 104 106 108 110 112 114 116

Vi kt qu kh   nghi   c 05 locus D3S1358  TH01 
D21S11  D1851  c ch t s d nh
c kiu gen c  s d
cng d c khoa h i quyt nhu
cnh huyt thng.







Hình 29. Kt qu th nghim s dng thang alen phc cho phn tch
LD: Thang alen phc c ch to trong nghin cu
K562: Mu chun - Ging 117-126: Cc mu nhn bi 05 locus

D18S51
D21S11
TH01
D3S1358
Penta E
LD LD LD LD

117 118 120 122 124 126 K562
119 121 123 125
CHƢƠNG 4
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

1.1. Kết luận
 t th hunh quang cho mi locus Penta E, D18S51,
D21S11, TH01, D3S1358 s d thng scan hunh quang.
 Thang alen locus Penta E gm 13 alen: alen s 5, t alen s n alen s 20.
 Thang alen locus D18S51 gm 10 alen: t alen s n alen s 21.
 Thang alen locus D21S11 gm 11 alen: t alen s n alen s 34.
 Thang alen locus TH01 gm 8 alen: t alen s n alen s  9.3).
 Thang alen locus D18S51 gm 7 alen: t alen s n alen s 19.
    t      th hu



 05 locus Penta E,
D18S51, D21S11, TH01, D3S1358 s d thng scan hunh quang. So vi
 , thang alen phc hc kiu gen c
u qu nh.

1.2. Kiến nghị
 nhng kt qu i quyt
n ngh:
1. 

















.
2. Tip t





 : T 10 locus tr 
, 








.



References
TIẾNG VIỆT
1. u s dng k thut ADN trong nhn d
th i, Báo cáo tổng kết đề tài khoa học kỹ thuật cấp Nhà nước, KC 04.05.
2. u ng dn k thu
ADN phc v chu, Báo cáo tổng kết đề tài khoa học kỹ thuật cấp Nhà
nước, KC 04.31.
3. n Th 
Th Yn, Trc, Trn Th Qunh Hoa, Phm Th  Nguyn Th
Li, Nguyn Th Hng Hnh, (2000), T hai allen d hp t 
Hội nghị sinh học Quốc gia, trang 35-38.
4.  Y Kim,
Quy Tuyt, (2003),  i
qua locus PENTA E, D18S51 bng k thuTạp chí Di truyền và ứng dụng số
2, trang 25-29.
5.  Yn, (2003), u khn
s  alen c Tạp chí nghiên cứu Y học S 3, trang 81-85.
6.  Y
cu s d u gen h 

Tạp chí nghiên cứu Y học. Tp 23, S 3, trang 74-80.
7.  Y Ti
u kin PCR s dng phc hp mi c
Báo cáo Khoa học Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, trang 1173-1176.
8. ng, Tr Y ng
dng k thut PCR kh tn su a locus D18S51  i
ViTạp chí Di truyền học và ứng dụng, S 1, trang 41-45.