ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------
LƯU THỊ NGỌC HÂN
NGHIÊN CỨU MỘT SỐ GEN LIÊN QUAN ĐẾN KHẢ NĂNG
KHÁNG CARBAPENEM CỦA CÁC CHỦNG Acinetobacter
baumannii PHÂN LẬP TẠI BỆNH VIỆN PHỔI TRUNG ƯƠNG
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
Hà Nội - 2019
download by :
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------
LƯU THỊ NGỌC HÂN
NGHIÊN CỨU MỘT SỐ GEN LIÊN QUAN ĐẾN KHẢ NĂNG
KHÁNG CARBAPENEM CỦA CÁC CHỦNG Acinetobacter
baumannii PHÂN LẬP TẠI BỆNH VIỆN PHỔI TRUNG ƯƠNG
Chuyên ngành: Vi sinh vật học
Mã số: 8420101.07.
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS. PHẠM BẢO YÊN
Hà Nội - 2019
download by :
LỜI CẢM ƠN
Đầu tiên tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành và bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Tiến sĩ
Phạm Bảo Yên, người đã trực tiếp giúp đỡ và hướng dẫn tơi trong suốt q trình thực
hiện luận văn cao học. Xin chân thành cám ơn cô vì đã ln tận tình hướng dẫn,
truyền đạt kiến thức để tơi có thể hồn thành luận văn tốt nghiệp này.
Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn đến Trường đại học khoa học tự nhiên, các cán bộ Phịng
Thí nghiệm Trọng điểm Công nghệ Enzyme và Protein, Khoa Vi sinh Bệnh viện Phổi
Trung Ương cùng các thành viên nhóm nghiên cứu của đề tài Q6.17.60 đã tạo điều
kiện và môi trường cho tôi thực hiện nghiên cứu. Xin cảm ơn các bạn sinh viên trong
Phịng Thí nghiệm Enzyme học và Phân tích hoạt tính sinh học đã giúp đỡ tơi rất
nhiều trong thời gian qua.
Tôi xin gửi lời cảm ơn đến các thầy cô Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự
nhiên đã truyền đạt những kiến thức quý báu và hỗ trợ cho tơi hồn thành chương
trình đào tạo thạc sĩ.
Cuối cùng tôi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè và đồng nghiệp tại Trung tâm
kiểm nghiệm Thuốc, mỹ phẩm, thực phẩm Hà Nội đã luôn tạo điều kiện, cổ vũ và
động viên tôi trong quá trình học tập và thực hiện luận văn.
Mặc dù đã cố gắng nỗ lực, nhưng luận văn không tránh khỏi những thiếu sót và hạn
chế. Rất mong nhận được những đóng góp từ thầy cơ, các nhà khoa học để tơi tiếp
tục hồn thiện cơng trình nghiên cứu.
Một lần nữa, tôi xin chân thành cảm ơn.
Hà Nội, ngày 09 tháng 12 năm 2019
Học viên
Lưu Thị Ngọc Hân
download by :
DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT
Viết đầy đủ
Chữ viết tắt, ký hiệu
A. baumannii
Acinetobacter baumannii
AMEs
Aminoglycoside-modifying enzymes
CDC
Centers for Disease Control and Prevention
CTX-M
Cefotaxime hydrolyzing capabilities
DMSO
Dimethyl sulfoxide
DNA
Deoxyribonucleic acid
dNTP
Deoxynucleotide triphosphate
ECDC
European Centre for Disease Prevention and Control
Fw
Forward
GES
Guiana extended spectrum
ICU
Intensive care unit
IMP
Imipenemase
KPC
Klebsiella pneumoniae carbapenemase
LAMP
Loop-mediated isothermal amplification
LPS
Lipopolysaccharide
MATE
Multidrug and toxic compound extrusion
MDR
Multidrug-resistant
MFS
Major facilitator superfamily
MIC
Minimum Inhibitory Concentration
OXA
Oxacillinase
PBP
Penicillin-Binding Protein
PCR
Polymerase Chain Reaction
PDR
Pandrug-resistant
RNA
Ribonucleic acid
RND
Resistance-nodulation-division
Rv
Reverse
SHV
Sulfhydryl Variable
download by :
SIM
Seoul Imipenemase
SMR
Small multidrug resistance
TEM
Temoneira
VAP
Ventilator Associated Pneumonia
VEB
Vietnam extended-spectrum β-lactamase
VIM
Verona Imipenemase
WHO
World Health Organization
XDR
Extensively drug-resistant
download by :
DANH MỤC HÌNH
Hình 1: Các vị trí tác dụng của kháng sinh …………………………………………4
Hình 2: Cấu trúc hóa học của carbapenem………………………………………….9
Hình 3: Hình ảnh tế bào vi khuẩn A. baumannii …………………………………..12
Hình 4: Hình thái khuẩn lạc trên các mơi trường thạch……………………………13
Hình 5: Các cơ chế kháng kháng sinh của A. baumannii…………………………..19
Hình 6: Nguyên tắc của kỹ thuật multiplex PCR…………………………………..25
Hình 7: Chu trình nhiệt đã được tối ưu của phản ứng multiplex PCR……………..31
Hình 8: Kết quả của phản ứng multiplex PCR……………………………………..33
Hình 9: Biểu đồ tỷ lệ % của các gen nghiên cứu…………………………………..34
Hình 10: Tỷ lệ % kháng carbapenem của các mẫu A. baumannii nghiên cứu…….40
Hình 11: Mức độ kháng của A. baumannii với các kháng sinh nhóm beta-lactam .42
Hình 12: Mức độ kháng của A. baumannii với một số kháng sinh khác…………..43
Hình 13: Kết quả giải trình tự gen OXA-51 với mồi xi và so sánh kết quả giải
trình tự với ngân hàng gen…………………………………………………...…….47
Hình 14: Mức độ tương đồng về nucleotide……………………………………….49
Hình 15: Mức độ tương đồng về acid amin………………………………………..50
download by :
DANH MỤC BẢNG
Bảng 1: Phân loại kháng sinh theo cấu trúc hóa học………………………………..3
Bảng 2: Tiêu chuẩn đánh giá mức độ kháng kháng sinh của A. baumannii…………19
Bảng 3: Bảng danh mục các kháng sinh được sử dụng làm kháng sinh đồ để đánh giá
mức độ nhạy cảm của Acinetobacter spp…………………………………………....29
Bảng 4: Trình tự các cặp mồi cho các gen OXA-23, OXA-51, VIM và IMP………..30
Bảng 5: Các thành phần tham gia phản ứng multiplex PCR………………………..31
Bảng 6: Thống kê tần suất xuất hiện gen OXA-51 trên thế giới và Việt Nam.……..34
Bảng 7: Thống kê tần suất xuất hiện gen OXA-23 trên thế giới và Việt Nam ……….36
Bảng 8: Tổng hợp các tổ hợp gen đích……………………………………………...39
Bảng 9: Kết quả PCR và kháng sinh đồ của các mẫu A. baumannii…….…………44
Bảng 10: Kết quả PCR và kháng sinh đồ một số chủng được giải trình tự………….48
Bảng 11: Sự thay đổi nucleotide và acid amin so với trình tự tham chiếu………….48
download by :
MỤC LỤC
MỞ ĐẦU………………………………………………………...………………….1
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
1.1
Kháng sinh …………………………………...……………………………...3
1.1.1. Định nghĩa kháng sinh và phân loại theo cấu trúc hóa học…………………..3
1.1.2. Cơ chế và vị trí tác dụng của kháng sinh……………………………………...4
1.1.2.1. Ức chế quá trình sinh tổng hợp protein…….……….…….…………………5
1.1.2.2. Ức chế quá trình sinh tổng hợp acid nucleic………………..………………..5
1.1.2.3. Kìm hãm các quá trình trao đổi chất……………………………………..…..6
1.1.2.4. Tác động lên thành tế bào vi khuẩn……………………………………..……6
1.1.2.5. Tác động lên màng tế bào vi khuẩn……………………………………….…7
1.1.3. Kháng sinh nhóm beta-lactam………………………………………………..7
1.1.3.1. Penicilin ………………………………………………………….………....8
1.1.3.2. Cephalosporin ..…………………………………………………………..…8
1.1.3.3. Monobactam……………………………………………………...………....9
1.1.3.4. Carbapenem …………………………………………………………...……9
1.1.3.5. Nhóm ức chế beta-lactamase…………………………………………….....10
1.1.4. Phối hợp kháng sinh trong điều trị ..…………………………………………10
1.2. Vi khuẩn Acinetobacter baumannii…………………………..…………….11
1.2.1. Giới thiệu chung và vị trí phân loại…………………………………………11
1.2.2. Đặc điểm hình thái, sinh lý - sinh hóa………………………………………12
1.2.3. Dịch tễ học……………………………………………………………..……13
1.2.4. Thực trạng kháng kháng sinh của A. baumannii………………………..…...15
1.2.4.1. Trên thế giới………………………………………………………………...15
1.2.4.2. Tại Việt Nam………………………………………………………………..16
1.2.4.3. Các cơ chế kháng kháng sinh của A. baumannii……………………………17
1.2.4.4. Tần suất xuất hiện các gen carbapenemase…………………………………19
1.2.4.5. Tiêu chuẩn đánh giá mức độ kháng kháng sinh của A. baumannii…………21
download by :
1.3. Các phương pháp nghiên cứu A. baumannii ………………………….…… 22
1.3.1. Phương pháp nuôi cấy………………………………………………………22
1.3.2. Phương pháp sinh học phân tử………………………………………………24
CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1.
Đối tượng nghiên cứu ……………………………………………………..27
2.2.
Phương pháp nghiên cứu ………………………………………………….27
2.2.1. Nuôi cấy và định danh A. baumannii từ mẫu bệnh phẩm …………..………27
2.2.1.1. Nguyên tắc……………………………………………………………..…..27
2.2.1.2. Hóa chất sinh phẩm………………………………………………………...27
2.2.1.3. Các bước tiến hành…………………………………………….…………...27
2.2.2. Tách DNA …………………………………………………………..………28
2.2.3. Kháng sinh đồ ………………………………………………………………28
2.2.4. Multiplex PCR ……………………………………………………………...30
2.2.4.1. Hóa chất, thiết bị …………………………………………………………...30
2.2.4.2. Tối ưu hóa phản ứng multiplex PCR……………………………………….30
2.2.4.3. Các cặp mồi sử dụng ……………………………………………………….29
2.2.4.4. Thành phần phản ứng………………………………………………………31
2.2.4.5. Chu trình nhiệt ……………………………………………………………..31
2.2.4.6. Điện di ……………………………………………………………………..31
2.2.5. Phân tích kết quả…...………………………………………………….…….32
2.2.5.1. Phân tích trình tự DNA ………………………………..…………………...32
2.2.5.2. Xử lý số liệu…….……………………………………………..………...…32
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Tần suất có mặt của các gen kháng kháng sinh của A. baumannii tại Bệnh viện
Phổi Trung ương ……….………………………………………….33
3.1.1 Tần suất xuất hiện các gen đơn……………………………………………….33
3.1.2 Sự có mặt của các tổ hợp gen …………………………………………………38
download by :
3.2. Phân tích mức độ kháng kháng sinh của các mẫu A. baumannii thu được…39
3.2.1. Khả năng kháng beta-lactam carbapenem …………………………………..39
3.2.2. Các nhóm beta-lactam khác ………………………………………………...41
3.2.3. Các kháng sinh khác………………………………………………………...42
3.2.4. Đánh giá chung……………………………………………………………...43
3.3. So sánh kết quả về sự có mặt của các gen và khả năng kháng kháng sinh dựa
trên kháng sinh đồ và xác định mối liên quan ……………………………..….44
3.4. Phân tích trình tự một số mẫu để khẳng định độ chính xác của phương pháp
và tìm hiểu sự khác biệt giữa các chủng thu được và một số chủng khác trên
thế giới………………………………………………………………………….47
3.4.1. Phân tích trình tự nhằm khẳng định độ chính xác của phương pháp……….47
3.4.2. Phân tích những biến đổi trong trình tự của các chủng thu được và một số
chủng khác trên thế giới……………………………………………………… 48
KẾT LUẬN…………………………………...…………………………………...51
KIẾN NGHỊ VÀ HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO………...…………….52
TÀI LIỆU THAM KHẢO……………………………………………………..…53
download by :
MỞ ĐẦU
Kháng sinh là một trong những phát hiện vĩ đại trong lịch sử lồi người. Với khả
năng kìm hãm và tiêu diệt tác nhân gây bệnh nguy hiểm nhất là vi khuẩn, kháng sinh
đã trở thành loại thuốc không thể thiếu trong công tác điều trị ở mọi nơi trên thế giới.
Việc sử dụng kháng sinh không chỉ cứu sống bệnh nhân mà còn giúp ngăn ngừa các
dịch bệnh bùng phát trên toàn cầu. Tuy nhiên, trong nhiều năm trở lại đây, tình hình
kháng kháng sinh đang ngày càng gia tăng với tốc độ nhanh chóng và biến đổi phức
tạp. Các vi khuẩn khơng ngừng biến đổi để thích nghi và đề kháng lại các loại kháng
sinh. Hiện nay trên thế giới đã xuất hiện rất nhiều chủng đa kháng thuốc thậm chí có
những chủng đã trở thành siêu kháng và toàn kháng. Điều này đã và đang trở thành
một thách thức lớn trong công tác điều trị bệnh ở các bệnh viện trên mọi châu lục.
Năm 2017, tổ chức Y tế thế giới WHO đưa ra danh sách 12 loài vi khuẩn nguy hiểm
nhất với khả năng kháng thuốc kháng sinh mạnh và cần phải nghiên cứu phát triển
một loại kháng sinh mới để đối phó với các tác nhân này. Trong đó ba loại vi khuẩn
có khả năng kháng carbapenem đứng đầu danh sách bao gồm: Acinetobacter
baumannii, Pseudomonas aeroginosa, Enterobacteriaceae . A. baumannii đang được
xếp ở vị trí số một với mức báo động cao tại nhiều nơi trên thế giới với khả năng
kháng với hầu hết kháng sinh kể cả những kháng sinh phổ rộng mạnh nhất. A.
baumannii có nhiều cơ chế kháng kháng sinh như tổng hợp beta-lactamase, bơm đẩy
ngược thuốc ra bên ngoài tế bào, chỉnh sửa cấu trúc aminoglycoside, thay đổi tính
thấm thành tế bào vi khuẩn, thay đổi vị trí đích của thuốc. Trong đó cơ chế kháng
beta-lactam dựa trên khả năng thủy phân và ức chế các kháng sinh của các betalactamase đóng vai trị quan trọng nhất đối với tính đa kháng sinh ở A. baumannii,
đặc biệt đối với carbapenem-liệu pháp cuối cùng trước khi phải chỉ định colistin.
Ở Việt Nam, hầu hết các nghiên cứu trước đây chỉ tập trung vào mức độ kháng của
A. baumannii đối với các kháng sinh thường được sử dụng trong điều trị dựa trên
kháng sinh đồ và thống kê tần suất của các chủng gây bệnh hoặc đưa ra tần suất xuất
hiện các gen mà chưa xem xét đối mối liên quan giữa các yếu tố này. Tuy nhiên, với
tình hình kháng kháng sinh mạnh của vi khuẩn do sự lan rộng của các gen mã hóa
carbapenemase, việc kết hợp phân tích giữa mối liên quan của kháng sinh đồ với sự
1
download by :
có mặt của các gen liên quan đến tính nhạy cảm với kháng sinh là rất cần thiết trong
hỗ trợ, chẩn đốn và điều trị bệnh. Vì vậy, chúng tơi đã thực hiện đề tài: “Nghiên cứu
một số gen liên quan đến khả năng kháng carbapenem của các chủng Acinetobacter
baumannnii phân lập tại Bệnh viện Phổi Trung ương” với các mục tiêu:
1. Thống kê tần suất có mặt của các gen kháng kháng sinh của A. baumannii tại
Bệnh viện Phổi Trung ương.
2. Phân tích mức độ kháng kháng sinh của các mẫu A. baumannii thu được.
3. Nghiên cứu mối liên quan giữa khả năng kháng carbapenem với sự có mặt bốn
gen đích mã hóa carbapenemase. So sánh kết quả về sự có mặt của các gen và
khả năng kháng kháng sinh dựa trên kháng sinh đồ.
4. Phân tích tính trình tự của một số mẫu để khẳng định độ chính xác của phương
pháp và tìm hiểu sự khác biệt giữa các chủng thu được với các chủng khác trên
thế giới.
2
download by :
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
1.1. Kháng sinh
1.1.1. Định nghĩa kháng sinh và phân loại theo cấu trúc hóa học
Kháng sinh (antibiotics) là những chất kháng khuẩn (antibacterial substances)
được tạo ra bởi các chủng vi sinh vật (vi khuẩn, nấm, Actinomycetes), có tác dụng ức
chế sự phát triển của các vi sinh vật khác [58].
Theo quan điểm hiện đại, kháng sinh được mở rộng đến cả những chất kháng
khuẩn có nguồn gốc tổng hợp như các sulfonamid và quinolon.
Hiện nay, có nhiều cách để phân loại kháng sinh nhưng cách phân loại phổ
biến nhất là dựa trên cấu trúc phân tử, cơ chế tác động và phổ hoạt động của từng
kháng sinh. Một vài cách phân loại khác trong đó có thể bao gồm đường đưa thuốc
(đường tiêm, đường uống hay đường đặt trực tràng…). Kháng sinh trong cùng một
nhóm cấu trúc sẽ thể hiện các đặc tính tương tự như nhau về hiệu quả tác dụng, độc
tính và cả tác dụng không mong muốn.
Bảng 1. Phân loại kháng sinh theo cấu trúc hóa học [58,20]
STT
1
Tên nhóm
Beta-lactam
Đại diện
Phân nhóm
Penicilin
penicilin
G-V,
amoxicilin,
ampicilin …
Cephalosporin
cephalexin, cefixim, cefepim,
ceftriaxon, …
Carbapenem
imipenem,
doripenem,
meropenem, ertapenem
Monobactam
aztreonam
Các chất ức chế beta- sulbactam, tazobactam,
acid clavulanic …
lactamase
2
Aminoglycosid
gentamycin,
tobramycin,
amikacin …
3
Macrolid
erythromycin,
spiramycin,
azithromycin …
4
Lincosamid
lincomycin, clidamycin…
5
Phenicol
chloramphenicol
3
download by :
6
Tetracyclin
tetracyclin,
doxycyclin,
mynocyclin
7
8
Peptid
Glycopeptid
vancomycin, teicoplanin
Polypeptid
polymyxin, colistin
Lipopeptid
daptomycin
Quinolon
ciprofloxacin,
ofloxacin,
levofloxacin…
9
Sulfamide
sulfamethoxazole,
sulfanilid
sulacetamide …
10
Các nhóm kháng
metronidazole,
sinh khác
griseofulvin …
nystatin,
1.1.2. Cơ chế và vị trí tác dụng của kháng sinh
Hoạt tính kháng khuẩn của hầu hết các nhóm kháng sinh đều liên quan trực
tiếp đến các đặc tính điển hình của cấu trúc vi khuẩn hoặc các quá trình trao đổi chất
của chúng. Để tìm hiểu vị trí tác dụng của một loại kháng sinh cụ thể trước hết phải
nắm được cấu trúc của kháng sinh và nơi nó có thể gắn kết (Hình 1). Hầu hết các đích
của kháng sinh thường liên quan trực tiếp đến tế bào vi khuẩn thông qua việc ức chế
quá trình sinh trưởng của tế bào hoặc ức chế hình thành vật liệu di truyền [16].
Hình 1. Các vị trí tác dụng của kháng sinh [16]
4
download by :
1.1.2.1. Ức chế quá trình sinh tổng hợp protein
Kháng sinh ngăn cản sự khởi đầu quá trình tổng hợp protein bằng cách gắn
vào tiểu đơn vị ribosom 30S và 50Svới các cơ chế bao gồm:
Liên kết không đảo ngược với ribosom 30Svà ngăn cản phức hệ khởi đầu 30S (30SmRNA-tRNA): Các aminoglycosid (diệt khuẩn).
Liên kết có thể đảo ngược với ribosom 30S và ức chế quá trình liên kết aminoacyl-tRNA với vị trí tiếp nhận trên ribosom 70S: Các tetracycline (kháng khuẩn).
Cản trở có thể đảo ngược q trình tương tác giữa mRNA và ribosom 30S mà khơng
gây sai sót trong dịch mã mRNA như các aminoglycoside: spectinomycin (kháng
khuẩn).
Liên kết với ribosom 50S ức chế hoạt tính của peptidyl transferase: lincomycin,
clindamycin, cloramphenicol (kháng khuẩn)
Ức chế q trình chuyển vị trí của peptidyl tRNA từ vị trí A đến P trên ribosom bằng
cách liên kết với ribosom 50S-23S RNA: các marcrolid (kháng khuẩn)
Ngồi cơ chế trên, các kháng sinh cịn có khả năng tác động lên quá trình kéo
dài chuỗi peptid nhờ vào liên kết với yếu tố kéo dài G (EF-G) và ức chế giải phóng
EF-G từ phức hệ EF-G/GDP: acid fusidic (kháng khuẩn)
1.1.2.2. Ức chế quá trình sinh tổng hợp acid nucleic
Kháng sinh có thể tác động q trình sinh tổng hợp acid nucleic bao gồm cả
sinh tổng hợp RNA và DNA.
Quá trình ức chế sinh tổng hợp RNA nhờ vào liên kết với các RNA polymerase
độc lập với DNA và ức chế sự khởi đầu tổng hợp RNA: rifampin, rifamycin,
rifampicin (diệt khuẩn).
Đối với sinh tổng hợp DNA, kháng sinh liên kết với tiểu đơn vị A của DNA
gyrase (topoisomerase) và ngăn cản quá trình siêu cuộn xoắn của DNA bởi vậy ức
chế quá trình tổng hợp DNA: quinolon, fluoroquinolone, acid oxolinic (diệt khuẩn).
Bên cạnh cơ chế ức chế q trình sinh tổng, một số kháng sinh cịn là các tác
nhân làm suy yếu chức năng của khuôn DNA. Về mặt lý thuyết khơng có loại nào
trong số các tác nhân trên được sử dụng trong trị liệu. Cơ chế của chloroquine và
miracil D (lucanthone) là ức chế plasmodia và schistosome tương ứng bằng cách xen
5
download by :
kẽ vào DNA và từ đó dẫn đến ức chế tổng hợp acid nucleic. Thuốc nhuộm acridine
như proflavine cũng hoạt động theo cơ chế xen kẽ, nhưng vì chúng có độc tính và gây
ung thư ở động vật có vú nên chúng cũng không được sử dụng làm chất kháng khuẩn.
1.1.2.3. Kìm hãm các quá trình trao đổi chất
Cơ chế này thơng qua q trình ức chế sinh tổng hợp acid folic. Đây là chất
rất quan trọng trong quá trình trao đổi chất của cả acid nucleic và acid amin. Một số
loại kháng sinh như sulphonamid và trimethoprim thể hiện tính chất như một cơ chất
giả cần thiết cho quá trình trao đổi chất ở tế bào vi khuẩn. Cơ chế này làm cho enzyme
của vi khuẩn gắn với kháng sinh thay vì gắn với cơ chế thơng thường. Cụ thế đối với
sulfonamid, đóng vai trị như tetrahydrofolate là một thành phần quan trọng trong
việc tổng hợp acid folic ở tế bào vi khuẩn.
Các chất tương tự acid para-aminobenzoic ức chế cạnh tranh đối với sự hình
thành acid folic: sulfonamid, sulfone, para-aminosalicylic, depsone (kháng khuẩn).
Liên kết với dihydrofolate reductase và ức chế sự hình thành acid tetrahydrofolic:
trimethoprim, methotrexate, pyrimethamine (kháng khuẩn).
1.1.2.4. Tác động lên thành tế bào vi khuẩn
Kháng sinh đại diện cho cơ chế ức chế sinh tổng hợp acid mycolic, một thành
phần của thành tế bào vi khuẩn, là isoniazid. Tuy nhiên cơ chế chính tác động lên
thành tế bào vi khuẩn của kháng sinh đó là quá trình ức chế tổng hợp thành tế bào vi
khuẩn. Quá trình tổng hợp peptidoglycan diễn ra theo ba bước, và mỗi bước đều có
thể trở thành đích tác động của kháng sinh. Trong đó giai đoạn thứ ba của quá trình
tổng hợp thành tế bào bao gồm quá trình polymer hóa và gắn peptidoglycan mới sinh
vào thành tế bào là giai đoạn tác động chủ yếu của kháng sinh. Giai đoạn này có sự
tham gia của các PBP đó là các enzyme thuộc họ transglycosylase và transpeptidase.
Hai loại enzyme này đóng vai trị then chốt trong việc hình thành peptidoglycan bằng
cách thêm các pentapeptide disaccarid để mở rộng chuỗi glycan của phân tử
peptidoglycan đã có và cả chuỗi liên kết ngang của các đơn vị peptidoglycan chưa
trưởng thành. Các loại thuốc thuộc nhóm beta-lactam như penicillin, carbapenem và
cephalosporin có thể ngăn chặn liên kết ngang của các đơn vị peptidoglycan bằng
cách ức chế sự hình thành liên kết peptide được xúc tác bởi các PBP.
6
download by :
1.1.2.5. Tác động lên màng tế bào vi khuẩn
Kháng sinh có thể thay đổi tính thấm của màng với các ion natri và kali.
Valinomycin thay đổi tính thấm của màng đối với ion K+ của cả tế bào nhân sơ và
nhân chuẩn bởi vậy nó khơng phải là chất kháng khuẩn được dùng trong hóa trị liệu.
Tuy nhiên monensin (ở gia súc) và salinomycin (ở heo) được sử dụng rộng rãi trong
thú y và có thể tức chế cả vi khuẩn, protozoa và metazoan ký sinh. Ngồi ra một số
nhóm kháng sinh có thể liên kết với màng tế bào chất và khử cực, ví dụ như
daptomycin khử cực màng phụ thuộc canxi, và điều đó dẫn đến sự ngừng tổng hợp
đại phân tử và phá vỡ màng tế bào ở vi khuẩn.
Một đích tác dụng quan trọng khác của kháng sinh trên màng tế bào đó là LPS.
Kháng sinh sẽ liên kết với LPS để phá hủy lớp màng ngồi. LPS có vài điểm tích điện
âm có khả năng tương tác với các kháng sinh cyclopeptid như polymyxin và colistin
tích điện dương, ngồi ra một vài phản ứng kỵ nước giữa hai phân tử cũng dẫn tới
làm phân ra lớp màng ngồi.
Các kháng sinh nhóm polyen tạo kênh ion giả gắn với màng sterol của màng
tế bào nấm tạo ra phức hệ màng-polyen có thể thay đổi tính thấm của màng, dẫn tới
làm thất thoát các thành phần của tế bào như ester phosphate, acid hữu cơ, nucleotide
và thậm chí cả các protein tế bào.
Cơ chế cuối cùng tác động lên màng tế bào là cản trở quá trình tổng hợp màng
lipid. Những kháng sinh này ức chế quá trình liên kết của các tiểu đơn vị tạo thành
ergosterol và có thể trực tiếp phả hủy màng tế bào nấm: các kháng sinh này thuộc
nhóm imidazoles: miconazole, ketoconazole, clotrimazole, và fluconazole.
1.1.3. Kháng sinh nhóm beta-lactam
Đây là nhóm kháng sinh lớn và được sử dụng rộng rãi trong công tác điều trị
tại nhiều nơi. Việc đặt tên là kháng sinh beta-lactam dựa trên cấu trúc phân tử có vịng
beta-lactam, một amid nội phân tử mà nhóm amin ở vị trí beta so với nhóm chức acid.
Các kháng sinh nhóm này gắn vào PBP và ngăn cản quá trình sinh tổng hợp
peptidoglycan ở thành tế bào làm cho tế bào vi khuẩn bị ly giải và chết. Nhóm kháng
sinh này bao gồm 5 phân nhóm là: penicillin, cephalosporin, monobactam,
carbapenem và nhóm chất ức chế beta-lactamase.
7
download by :
1.1.3.1. Penicillin [20,72]
Đây là nhóm được Alexander Fleming phân lập đầu tiên từ môi trường nuôi
cấy nấm Penicillium notatum. Dựa trên phổ tác dụng chúng được chia thành 4 loại:
Penicillin tự nhiên: Tác dụng mạnh trên các cầu khuẩn Gram (+) khơng sinh
penicillinase.
Penicillin kháng penicillinase: Có phổ hẹp, được nghiên cứu chỉ nhằm tiêu diệt các
tụ cầu sinh penicillinase mà loại penicillin tự nhiên khơng tác dụng.
Aminopenicillin: Có phổ mở rộng. Tác dụng tương tự như penicillin tự nhiên trên vi
khuẩn Gram (+) nhưng yếu hơn, tuy nhiên lại mở rộng tác dụng trên một số vi khuẩn
Gram (-) như Haemophilus influenza, Salmonella, Escherichia coli, …
Penicillin phổ rộng: loại này có tác dụng mạnh hơn các loại khác trên các vi khuẩn
Gram (-) (đặc biệt Pseudomonas và Proteus) do tăng tính thấm qua màng tế bào vi
khuẩn. Ưu điểm chủ yếu của nhóm này là có tác dụng lên Pseudomonas aeruginosa.
1.1.3.2. Cephalosporin
Năm 1948, Abraham và cộng sự đã phân lập được từ môi trường nuôi cấy nấm
Cephalosporium acremonium hợp chất đặt tên là cephalosporin C. Hợp chất này có
tác dụng kháng khuẩn nhưng rất yếu, tuy nhiên nó lại chính là tiền đề cho việc tổng
hợp ra các loại cephalosporin sau này. Hiện nay có bốn thế hệ cephalosporin được
phân loại dựa trên phổ tác dụng đối với vi khuẩn Gram (-) và độ bền của chúng đối
với các beta-lactamase [72].
Thế hệ I: Tác dụng mạnh nhất trên các vi khuẩn Gram (+) và yếu nhất trên vi khuẩn
Gram (-). Không bền và dễ bị beta-lactamase phá hủy.
Thế hệ II: Gồm các chất tác dụng mạnh hơn trên vi khuẩn Gram (-) và yếu hơn trên
vi khuẩn Gram (+) so với thế hệ I, trong đó đáng chú ý và tác dụng mạnh hơn trên H.
influenza. Giống như thế hệ I, các chất thuộc thế hệ II không tác dụng lên P.
aeruginosa. Tuy nhiên chúng tương đối bền với beta-lactamase.
Thế hệ III: Tác dụng trên vi khuẩn Gram (+), đặc biệt tụ cầu, tuy nhiên kém hơn
cephalosporin thế hệ I, nhưng có phổ rộng tác dụng mạnh trên vi khuẩn Gram (-).
Khả năng kháng beta-lactamase của vi khuẩn Gram (-) mạnh hơn so với thế hệ II.
8
download by :
Thế hệ IV: Đây là các cephalosporin phổ rộng. Trên vi khuẩn Gram (+) chúng có hoạt
tính tương tự cephalosporin thế hệ I. Trên vi khuẩn Gram (-), do các cephalosporin
thế hệ IV là các ion lưỡng cực nên có thể thấm qua màng ngoài của vi khuẩn Gram
(-) và có tác dụng kháng beta-lactamase mạnh hơn thế III.
1.1.3.3. Monobactam
Các kháng sinh này là một phần của nhóm beta-lactam nhưng lại khơng như
các loại beta-lactam khác, vịng beta-lactam của monobactam chỉ đứng đơn độc thay
vì liên kết với các vịng khác. Aztreonam là loại kháng sinh monobactam duy nhất
được bán trên thị trường và chỉ có hoạt tính đối với vi khuẩn Gram âm hiếu khí như
Nesseria và Pseudomonas. Kháng sinh này được sử dụng để điều trị viêm phổi, nhiễm
trùng máu và nhiễm trùng đường tiết niệu do các nhóm vi khuẩn trên gây ra.
Monobactam khơng có hiệu quả đối với vi khuẩn gram dương hoặc vi khuẩn kỵ khí
[72].
1.1.3.4. Carbapenem
Hình 2. Cấu trúc hóa học của carbapenem [20]
Nhóm kháng sinh này được tìm ra vào năm 1976, chúng đóng vai trị rất quan
trọng trong việc chống lại các bệnh nhiễm khuẩn. Nguyên nhân là do chúng có khả
năng kháng lại được sự thủy phân của các enzyme beta-lactamase. Trong số hàng
trăm loại kháng sinh beta-lactam đã biết, carbapenem có phổ rộng nhất và có hoạt
tính mạnh lên cả vi khuẩn Gram âm và Gram dương (Hình 2). Chính bởi vậy chúng
thường được gọi là “sự lựa chọn cuối cùng” và chỉ được chỉ định khi tình trạng của
bệnh nhân trở nên trầm trọng hoặc nghi ngờ có sự kháng kháng sinh. Một số đại diện
trong nhóm này bao gồm:
9
download by :
Imipenem: có phổ tác dụng hiệu quả đối với cả tác nhân hiếu khí và kị khí, thường
dùng đường uống, hoạt động với liều thấp và ít tác dụng khơng mong muốn.
Meropenem: có phổ tác dụng hiệu quả lên trực khuẩn Gram âm, đặc biệt có với các
bệnh nhiễm khuẩn cơ hội.
Doripenem: có phổ tác dụng hiệu quả đáng kể đối với Pseudomonas aeruginosa
Ertapenem: có phổ tác dụng giới hạn với các trực khuẩn Gram âm không lên men.
Tuy nhiên, hiện nay tình trạng báo động về các vi khuẩn kháng lại dòng kháng
sinh hiệu quả này đã được ghi nhận. Đáng lo ngại hơn nữa, các vi khuẩn có khả năng
kháng carbapenem đang ngày càng gia tăng trên toàn cầu và nhanh chóng trở thành
vấn đề đáng quan tâm của thế giới.
1.1.3.5. Nhóm ức chế beta-lactamase
Các chất này cũng có cấu trúc beta-lactam, nhưng khơng có hoạt tính kháng
khuẩn, mà chỉ có vai trị ức chế beta-lactamase của vi khuẩn bằng cách ức chế không
thuận nghịch nhiều beta-lactamase làm thay đổi enzyme, bất hoạt và khơng cho chúng
giải phóng trở lại. Các chất hiện hay được sử dụng trên lâm sàng là acid clavulanic,
sulbactam và tazobactam [72].
1.1.4. Phối hợp kháng sinh trong điều trị
Trên thực tế để nâng cao hiệu quả điều trị, việc phối hợp kháng sinh là rất cần
thiết nhằm mục đích [58]:
Làm giảm khả năng xuất hiện các chủng đề kháng.
Điều trị nhiễm khuẩn do nhiều chủng vi khuẩn gây ra.
Làm tăng khả năng diệt khuẩn.
Mỗi kháng sinh đều có ít nhiều tác dụng khơng mong muốn; khi phối hợp thì
những tác dụng phụ này cũng sẽ cộng lại hoặc tăng lên. Không nên hy vọng phối hợp
thì hạ được liều lượng từng thuốc vì có thể dẫn đến nguy cơ xuất hiện vi khuẩn kháng
kháng sinh. Phối hợp kháng sinh có thể dẫn đến tác dụng cộng (addition) hoặc hiệp
đồng
(synergism) hoặc đối kháng (antagonism) hay không thay đổi (indifference) so với
một thuốc đơn lẻ. Khi phối hợp, cần dùng đủ liều và nên lựa chọn những kháng sinh
có tính chất dược động học gần nhau hoặc có tác dụng hiệp đồng [58].
10
download by :
Việc phối hợp kháng sinh làm số kháng sinh cần sử dụng nhiều hơn dẫn đến
giá cả điều trị tăng cao và nhất là tỷ lệ bị tác dụng phụ do thuốc nhiều hơn nên cần
thận trọng và cân nhắc tối đa. Nên khu trú một số trường hợp cần phối hợp kháng
sinh, có thể kể như sau: Khi bị nhiễm nhiều loại vi khuẩn như bị áp-xe não, viêm
màng não có khi phải phối hợp 3 loại kháng sinh. Sốc nhiễm khuẩn hoặc nhiễm khuẩn
nặng trong khi chờ kết quả xét nghiệm cấy vi khuẩn, kháng sinh đồ (thường phối hợp
beta-lactam + aminosid). Nhiễm khuẩn giảm bạch cầu hoặc bị suy giảm miễn dịch
(có khi phải phối hợp tobramycin + ticarcillin). Nhiễm loại vi khuẩn đặc biệt:
Pseudomonas
aeruginosa,
Enterobacter,
Serratia,
Citrobacter,
Listeria,
Enterococcus do các loại vi khuẩn này rất dễ đột biến tạo chủng đề kháng nên cần
phối hợp nhiều kháng sinh vì nếu dùng một loại kháng sinh rất dễ bị đề kháng.
Một trường hợp điển hình khác của việc phối hợp kháng sinh là sử dụng các
chất ức chế beta-lactamase kết hợp với kháng sinh beta-lactam. Hiện tại đây được coi
là biện pháp hiệu quả chống lại cơ chế kháng thuốc đặc hiệu của vi khuẩn. Phổ kháng
khuẩn của kháng sinh được mở rộng trên các chủng vi khuẩn đề kháng do khả năng
ức chế dẫn đến bất hoạt đa số beta-lactamase tiết ra bởi vi khuẩn gram âm, gram
dương và vi khuẩn kỵ khí.
1.2. Vi khuẩn Acinetobacter baumannii
1.2.1. Giới thiệu chung và vị trí phân loại
A. baumannii được nhà vi sinh vật học Beijerinck người Hà Lan phân lập lần
đầu tiên vào năm 1911 và được đặt tên là Micrococcus calcoaceticus. Trong 50 năm
tiếp theo, loại vi khuẩn này cũng đã được phân lập nhiều lần và được báo cáo dưới
nhiều
tên
khác
nhau
như:
Moraxella
lwoffi,
Alcaligenes
hemolysans,
Mirococcuscalco-aceticus, và Herellea vaginicola. Vào năm 1968, Baumann và cộng
sự đã xếp tất cả vào cùng chi Acinetobacter và được hội đồng phân loại học chấp
nhận [8].
Hiện nay theo vị trí phân loại, A. baumannii được xếp vào chi Acinetobacter,
họ Moraxellaceae, bộ Pseudomonadales, lớp Gammaproteobacteria, ngành
Proteobacteria [8].
11
download by :
1.2.2. Đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa
A. baumannii là cầu trực khuẩn Gram âm có đường kính từ 1-1,5 µm khi quan
sát dưới kính hiển vi sau khi nhuộm Gram. Loại vi khuẩn này kháng hoàn toàn với
các thuốc tẩy màu và vì vậy có thể gây ra nhầm lẫn là cầu khuẩn Gram dương.
Hình 3: Hình ảnh tế bào vi khuẩn A. baumannii [79]
Về đặc điểm sinh lý, sinh hóa, đây là vi khuẩn hiếu khí tuyệt đối, khơng có
khả năng lên men và dễ ni cấy. A. baumannii khơng có khả năng di chuyển và
khơng sản xuất ra các loại enzyme như cytochrome oxidase, urease, citrate, và indole
tuy nhiên lại có khả năng sinh enzyme catalase. Chúng sinh trưởng tốt ở điều kiện
nhiệt độ từ 35oC đến 37oC. Ngoài ra, A. baumannii là loài duy nhất có thể sinh trưởng
ở 44oC trong chi Acinetobacter. Về khả năng sinh trưởng, lồi này phát triển tốt trong
các mơi trường ni cấy thường sử dụng trong phịng thí nghiệm như: môi trường
thạch máu, thạch chocolate và thạch MacConkey. Trên môi trường thạch máu, chúng
tạo thành các khuẩn lạc không màu, hơi nhày, không gây tán huyết hoặc ở dạng kết
cấu nhẵn với đường kính từ 1-2 mm sau 18-24 giờ ủ ở 37oC. Trên môi trường thạch
MacConkey, các khuẩn lạc khơng màu, hơi nhày (Hình 4A). Trên mơi trường thạch
chọn lọc Leeds Acinetobacter, khuẩn lạc có màu hồng nhạt (Hình 4B) [8].
12
download by :
A. Môi trường thạch máu [80]
B. Môi trường thạch chọn lọc Leeds A [81]
Hình 4: Hình thái khuẩn lạc trên các mơi trường thạch
A. baumannii nói riêng và các lồi thuộc chi Acinetobacter nói chung là các vi
khuẩn sống tự do và phân bố rộng trong các môi trường khác nhau như: nước, đất,
nước thải, các loại rau củ và cả trên da người và động vật. Trong môi trường bệnh
viện, A. baumannii có thể được tìm thấy trên giường, rèm, tường, các dụng cụ và thiết
bị y tế và cũng có thể bám trên các dụng cụ chăm sóc cá nhân và thậm chí cả máy vi
tính. Vi khuẩn này có thể tồn tại lâu dài và tích lũy các gen kháng kháng sinh ngay
trong bệnh viện nhờ vào việc tồn tại ở trạng thái không hoạt động và khả năng hình
thành biofilm. Việc hình thành biofilm giúp cho A. baumannii có thể bám vào bề mặt
các sinh vật sống và cả các bề mặt khác [21]. Một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng khả
năng hình thành biofilm của A. baumannii trên các bề mặt lỏng, rắn cao gấp 3 lần so
với các loài Acinetobacter khác, tạo thành một lớp màng dày rõ ràng ở phía trên canh
thang ni cấy. Đây chính là một trong những yếu tố quan trọng trong việc tồn tại và
gây bệnh của A. baumannii.
1.2.3. Dịch tễ học
A. baumannii là nhân tố gây bệnh có mặt khắp nơi và có khả năng gây ra cả
bệnh nhiễm khuẩn cộng đồng và nhiễm khuẩn bệnh viện, mặc dù nhiễm khuẩn bệnh
viện phổ biến hơn. Vi khuẩn này gần đây đã được cảnh báo là nguyên nhân chính gây
nhiễm khuẩn bệnh viện với mức độ kháng kháng sinh cao và xu hướng có thể gây ra
sự bùng phát lớn trong các bệnh viện. Khả năng tạo biofilm và kháng đa kháng sinh
đã giúp cho A. baumannii tồn tại lâu dài trong môi trường bệnh viện tạo điều kiện
cho việc gây nên dịch. Đã có các báo cáo về A. baumannii đa kháng thuốc từ các bệnh
13
download by :
viện ở Châu Âu, Bắc Mỹ, Argentina, Brazil, Trung Quốc, Đài Loan, Hồng Kông,
Nhật Bản và Hàn Quốc và từ các khu vực xa xôi như Tahiti ở Nam Thái Bình Dương
[42]. Các chủng đa kháng thuốc này thường lây lan để gây ra dịch bệnh trên toàn bộ
thành phố, quốc gia và lục địa. Việc lan tràn các chủng đa kháng thuốc từ các khu
vực có tỷ lệ kháng kháng sinh cao đến các khu vực có tỷ lệ thấp trong lịch sử, như từ
Tây Ban Nha đến Na Uy, đã được ghi nhận. Gần đây, các trường hợp nhân viên quân
sự và phi quân sự của Vương quốc Anh và Hoa Kỳ trở về từ các hoạt động ở Iraq và
Afghanistan và mắc các bệnh nhiễm khuẩn do A. baumannii gây ra đang ngày càng
được chú ý [42].
Ở hầu hết các trường hợp, phần lớn các chủng A. baumannii được phân lập từ
các bệnh nhân mắc viêm phổi bệnh viện. Trong nhiều trường hợp, rất khó để phân
biệt các chủng phân lập từ đường hô hấp trên với viêm phổi thực sự. Tuy nhiên, không
thể nghi ngờ về việc viêm phổi máy thở (VAP) thường do A. baumannii gây ra. Bên
cạnh đó, tỷ lệ viêm phổi mắc phải do nằm lâu tại phịng chăm sóc đặc biệt (ICU) do
A. baumannii gây ra cao hơn nhiều. Thông thường, bệnh nhân bị nhiễm A. baumannii
đã ở lại ICU trong một thời gian dài, tuy nhiên trong một số tình huống, việc nhiễm
khuẩn đã có thể xảy ra trước đó. Ngồi viêm phổi bệnh viện các ca viêm phổi cộng
đồng gây ra A. baumannii đã được mô tả cho các vùng nhiệt đới của Úc và Châu Á.
Bệnh thường xảy ra nhất trong mùa mưa ở những người có tiền sử lạm dụng rượu và
đơi khi có thể phải nhập viện tại phòng ICU với các biểu hiện lâm sàng nặng, nhiễm
trùng máu thứ phát và tỷ lệ tử vong từ 40 đến 60%. Nguồn lây nhiễm có thể xâm nhập
từ cổ họng, xảy ra ở 10% cư dân trong cộng đồng với mức tiêu thụ rượu quá mức [5].
Trong một nghiên cứu lớn về nhiễm trùng máu bệnh viện ở Hoa Kỳ (1995-2002), A.
baumannii là tác nhân gây bệnh phổ biến thứ 10, chịu trách nhiệm cho 1,3% các
trường hợp nhiễm trùng máu bệnh viện do đơn tác nhân. A. baumannii là nguyên
nhân phổ biến của nhiễm trùng máu tại ICU, tỷ lệ cao so với nhiễm trùng không nằm
tại ICU. Tỷ lệ tử vong từ nhiễm trùng máu do A. baumannii là 34,0% đến 43,4% trong
ICU và 16,3% bên ngồi ICU. Nhiễm trùng máu A. baumannii có tỷ lệ tử vong thô
cao thứ ba trong ICU, chỉ xếp sau qua P. aeruginosa và Candida spp. [5]
14
download by :
A. baumannii cịn có khả năng gây ra một số bệnh nguy hiểm khác như viêm
màng não, viêm nội tâm mạc, nhiễm khuẩn đường tiết niệu, viêm giác mạc … A.
baumannii khơng phải là một vi khuẩn có khả năng gây bệnh với độc tính cao, tuy
nhiên với khả năng kháng đa kháng sinh đứng đầu trong các vi khuẩn kháng thuốc
hiện nay đã biến A. baumannii đang trở thành mối đe dọa đối với mọi bệnh nhân trên
thế giới, đặc biệt là các bệnh nhân nằm trong ICU.
1.2.4. Thực trạng kháng kháng sinh của A. baumannii
1.2.4.1. Trên thế giới
Tình trạng kháng carbapenem ở A. baumannii hiện là một vấn đề ở nhiều nước
châu Âu. Thông tin về tỷ lệ kháng carbapenem ở nhiều nước châu Âu rất khó có được,
tuy nhiên thông tin từ các tài liệu về dịch bệnh cho thấy tỷ lệ kháng carbapenem cao
nhất ở Thổ Nhĩ Kỳ, Hy Lạp, Ý, Tây Ban Nha và Anh và vẫn còn khá thấp ở Đức và
Hà Lan. Trong một báo cáo giám sát từ 48 bệnh viện châu Âu trong giai đoạn 20022004, chỉ 73,1% các chủng phân lập nhạy cảm với meropenem và 69,8% nhạy cảm
với imipenem. Nhạy cảm với các kháng sinh khác cũng rất thấp, với 32,4%, 34,0%
và 47,6% mẫn cảm tương ứng với ceftazidime, ciprofloxacin và gentamicin. A.
baumannii phân lập được kháng với các polymyxin đã được phát hiện ở châu Âu,
mặc dù hiện tại chúng vẫn còn hiếm [5].
Trong một nghiên cứu giám sát gần đây bao gồm các chủng Acinetobacter
spp. được thu thập từ năm 2004 đến 2005 từ 76 trung tâm trên khắp Hoa Kỳ, chỉ có
60,2% dễ bị tác động bởi imipenem. Một nghiên cứu khác từ 15 trung tâm trên khắp
Hoa Kỳ đã báo cáo mức độ nhạy cảm với carbapenem và aminoglycoside được cải
thiện trong năm 2005 so với những năm 2004. Tuy nhiên, tỷ lệ không nhạy cảm vẫn
còn đáng kể, như sau: 10% đến 15% đối với carbapenem, 35% đến 40% đối với
ceftazidime /cefepime, 10% đến 30% đối với aminoglycoside và 35% đến 40% đối
với ciprofloxacin/levofloxacin [5]
Dữ liệu về mức độ kháng kháng sinh ở A. baumannii ở Châu Phi phần lớn giới
hạn ở Nam Phi vào thời điểm hiện tại, mặc dù có những báo cáo rải rác từ các quốc
gia khác. Một nghiên cứu đã đã chỉ ra rằng khoảng 30% A. baumannii gây ra các ca
nhiễm khuẩn huyết ở Nam Phi có khả năng kháng carbapenem, 40% kháng với
15
download by :