File tnvs bài 5

Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội

Họ và tên: Nguyễn Thị Hương
MSSV: 20180465
Lớp : KTTP02 -K63

BÁO CÁO THÍ NGHIỆM VI SINH VẬT THỰC
PHẨM
BÀI 5: Kính hiển vi,
Quan sát và đánh giá chỉ tiêu canh trường nấm
men
1. Mục đích thí nghiệm
-

Biết cách sử dụng kính hiển vi.
Làm tiêu bản ép.
Nhuộm màu vi sinh vật.
Quan sát và đánh giá một số chỉ tiêu của canh trường vi sinh
vật ( nấm men).
Chỉ tiêu: tỷ lệ tế bào số trên tổng số tế bào
Tỷ lệ tế bào nảy chồi trên tổng số tế bào.

2.Chuẩn bị dụng cụ:
-

Kính hiển vi
Lá kính
Phiến kính
2 ống nghiệm đựng 2 mẫu nấm men :R5, R7
Que cấy móc
Dung dịch xanh metylen

Dung dịch axit H2SO4 10%
1


- Bơng
- Đèn cồn, cồn
3.Tiến hành thí nghiệm
- Đốt đèn cồn lên.
- Dùng một chút bông đã tẩm cồn lau sạch lá kính và phiến
kính. Sau đó hơ nóng trên ngọn lửa đèn cồn để vô trùng và làm
khô lá kính và phiến kính. Rồi đặt lên giá.
- Lắc đều ống nghiệm để vi sinh vật được phân bố đều trong
canh trường mẫu.
- Tay trái cầm ống nghiệm có chứa canh trường vi sinh vật.
Dùng tay phải xoay nhẹ nút một vòng để dễ rút ra.
- Tay phải cầm que cấy hơ nóng trên ngọn lửa đèn cồn
- Kẹp nút bơng giữa ngón út và ngón đeo nhẫn của bàn tay ph ải,
nhẹ nhàng rút ra và giữ nguyên trong suốt q trình lấy
mẫu( tuyệt đối để nút bơng lên bất kì vật nào khác).
- Đốt miệng ống trên ngọn lửa đèn cồn.
- Đưa đầu que cấy ( đã nguội) vào ống giống để lấy canh trường
đưa lên phiến kính trên giá.
Lưu ý: Lấy giọt canh trường vừa phải, không q nhiều cũng khơng q ít.
Nhiều q canh trường sẽ bị trào ra ngồi. Nếu ít q tiêu bản mau khơ và
tạo thành bọt khí, rất khó qua sát.
- Đốt miệng ống nghiệm một lần nữa rồi nút bông lại.
+ đánh giá tỷ lệ tế bào sống trên tổng tế bào chết
-Nhỏ 1 giọt thuốc nhuộm xanh metylen (đã pha lỗng 10 lần )
lên phiến kính, nhẹ nhàng trộn đều, đậy lá kính lại, đ ể yên 2-3
phút, đem quan sát bằng kính hiển vi.

-tế bào chết bắt màu xanh, cịn tế bào sống khơng màu.
+ Tỷ lệ tế bào nảy chồi trên tổng số tế bào
-mục đích đánh giá chất lượng canh trường nấm men giống để
cho vào thùng lên men.
-cho 1 giọt H2SO4 10% lên phiến kính, trộn đều.
Đậy lá kính lại, đặt lên khay kính hiến vi quan sát.
Tế bào nảy chồi là tế bào có tế bào con bé hơn hoặc b ằng ½ tế
bào mẹ.
2


Lưu ý: Tránh đặt lá kính nhanh, mạnh quá làm giọt canh trường bắn ra
ngồi hoặc lớp khơng khí giữa lá kính và phiến kính khơng k ịp thốt ra sẽ
tạo thành bọt khí.
Quan sát bằng kính hiển vi:

- Đặt tiêu bản lên khay kính.
- sử dụng vật kính có độ phóng đại là 40 ( vật kính khơ)
- Dùng ốc chỉnh thơ nâng khay kính lên sao cho vật kính tiếp xúc
với tiêu bản.
- Dùng ống chỉnh thơ và chỉnh tinh từ từ chậm chậm chỉnh sao
cho nét nhất.
- Dùng ống chỉnh thước đo để đưa đến vị trí dễ quan sát và
đếm nhất.
- Quan sát và đếm tổng số tế bào, số tế bào nảy chồi, số tế bào
chết.
4. kết quả và nhận xét
R5 đánh giá tỷ lệ tế bào sống trên tổng số tế bào

3

R5. Tỷ lệ tế bào nảy chồi trên tổng số tế bào

R7. Tỷ lệ tế bào sống trên tổng số tế bào chết.

R7. Tỷ lệ nảy chồi trên tổng số tế bào
4


-kết quả
R5:
Tỷ lệ tế bào chết trên tổng số tế bào là 15/113 , 13/120 , 10/125
Tỷ lệ tế bào nảy chồi trên tổng số tế bào : 26/110, 30/120, 24/126
R7
Tỷ lệ tế bào chết trên tổng số tế bào là 8/ 146, 14/160, 10/176
Tỷ lệ tế bào nảy chồi trên tổng số tế bào là : 40/150, 52/230, 38/ 250

- Nhận xét
Hình dạng tế bào nấm men: chủ yếu là hình ovan , hình quả chanh n,
hình cầu, có một vài chum khuẩn ty giả
.Tính trung bình
Tỷ lệ tế bào sống trên tổng số tế bào là
Mẫu R5

15+13+ 10

100%- 113+120+125 .100 %=89.4%
8+14+10

Mẫu R7 100%- 146+160+176 .100 % =93.4%
5


Tỷ lệ tế bào nảy chồi trên tổng số tế bào là
26+30+ 24

Mẫu R5 110+120+126 .100 %=22,5%
40+52+38

Mẫu R7 150+230+250 .100 % =20,6%
- mẫu R5, R7 đạt chất lượng để là canh trường nấm men đem lên men..
Canh trường không ở giai đoạn sinh trưởng mạnh, nhưng vẫn còn trẻ đang
ở cuối giai đoạn sinh trưởng ( pha log).

6