Bài giảng Ứng dụng kỹ thuật Elisa trong phân tích dịch sinh học

Ứng dụng kỹ thuật Elisa trong
phân tích dịch sinh học

Bộ môn Y Dược học cơ sở
Khoa Y Dược

Đại học Quốc Gia Hà Nội
BS Nguyễn Thị Thúy Mậu


Mục tiêu học tập
°© Giải thích ngun lý kĩ thuật Elisa
°Ư Trình bày các bước tiến hành kĩ thuật Elisa
trong phân tích dịch sinh học

°Ổ Thực hiện kĩ thuật Elisa để phân tích dịch sinh
học


Cơ chế của miễn dịch Elisa
°Ò Kết hợp đặc hiệu kháng nguyên kháng thể,
trong đó kháng thể được gắn với enzyme
¢ Thêm cơ chất, enzym thủy phân cơ chất thành
chất có màu
°© Dựa vào sự xuất hiện màu, đánh giá nông độ

của kháng nguyên/kháng thể cần phát hiện


Phản ứng trong Miễn Dịch Elisa
° 2 loại phản ứng xảy ra trong kĩ thuật Elisa

> Phản ứng Miễn Dịch học: là sự kết hợp kháng
nguyên -kháng thể
> Phản ứng hóa học:
Phản ứng peroxidase

Leek
Amino phthalat


Ung dung ki thuat elisa
Đo nồng độ kháng thể: vaccin, dị ứng...
Phát hiện vius: HIV, viễm gan B...

Thay đổi hormon: khi mang thai
Phát hiện ra các chất chỉ điểm ung thư: Kgan,

K tiên liệt tuyến, K vú....


Cac loai mién dich ELisa
“* Direct Elisa
“*Indirect Elisa
“*Elisa sandwich
“*Elisa canh tranh


Direct Elisa
Co chat
Liên kết với

kháng thê
sơ cấp

hs

Phân tích trực tiếp


Indirect Elisa

Co chat

e-

Khang the
so cap
Phân

tích gián

Liên kết với
kháng thê
thứ cấp

tiếp


Indirect Elisa

Gắn bản nhựa bằng kháng nguyên

Indirect Elisa

che chắn phần trống bằng protein


Indirect Elisa

Bổ sung kháng thể đặc hiệu


B6 sung cong hop enzyme

ay io

bag

oe:

Indirect Elisa


Indirect Elisa


Elisa sandwich
Co chat

o-

Bắt giữ
kháng

thê

Phân tích bắt giữ sandwich


Elisa sandwich

Gan ban bang khang thé |


Elisa sandwich

Che chan ban bang protein


Elisa sandwich

Bổ sung bệnh phẩm có chứa kháng nguyên


Elisa sandwich

B6 sung khang thể 2


ee

PSs

-@:

Elisa sandwich

Bổ sung cộng hợp kháng kháng thể 2 sắn enzyme


Elisa sandwich

Bổ sung cơ chất