xác định ethanol methanol và acetaldehyde trong một số mẫu rượu địa phương bằng phương pháp gc ms

Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (40.82 MB, 140 trang )

Trang 1<div class="page_container" data-page="1">

GC-MS

Ngành: HĨA PHÂN TÍCH Mã ngành: 8440118

LUẬN VĂN THẠC SĨ

THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmhghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcm

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 2<div class="page_container" data-page="2">

Cơng trình được hồn thành tại Trường Đại học Cơng nghiệp TP. Hồ Chí Minh. Người hướng dẫn khoa học: TS. Nguyễn Quốc Thắng

Luận văn thạc sĩ được bảo vệ tại Hội đồng chấm bảo vệ Luận văn thạc sĩ Trường Đại học Cơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh ngày 25 tháng 06 năm 2022

Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm:

1. ... - Chủ tịch Hội đồng 2. ... - Phản biện 1

3. ... - Phản biện 2 4. ... - Ủy viên 5. ... - Thư ký

(Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị của Hội đồng chấm bảo vệ luận văn thạc sĩ)

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 3<div class="page_container" data-page="3">

NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ

Họ tên học viên: Phạm Thị Minh Trang MSHV: 19000271 Ngày, tháng, năm sinh: 27/07/1992 Nơi sinh: Long An

I. TÊN ĐỀ TÀI:

Xác định ethanol, methanol và acetaldehyde trong một số mẫu rượu địa phương bằng phương pháp GC-MS

NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG:

 Xây dựng quy trình xác định riêng lẻ ethanol, methanol và acetaldehyde sử dụng phương pháp UV-Vis và thiết bị GC-MS. So sánh giữa các phương pháp phân tích.

 Xây dựng và phát triển phương pháp xác định đồng thời hàm lượng ethanol, methanol và alcetaldehyde bằng thiết bị GC-MS và khảo sát các điều kiện phân tích trên thiết bị.

 Thẩm định quy trình phân tích

 Ứng dụng phương pháp trong phân tích mợt số mẫu rượu địa phương.

II. NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: 07/06/2021 III. NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ:

IV. NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS. Nguyễn Quốc Thắng

Tp. Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 20 …

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 4<div class="page_container" data-page="4">

LỜI CÁM ƠN

Trong q trình nghiên cứu và hồn thiện luận văn, tôi đã nhận được sự quan tâm, giúp đỡ từ Qúy Thầy, Cô, anh chị đồng nghiệp, gia đình và bạn bè. Để luận văn được hoàn thành như ngày hôm nay, tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến:

Thầy TS. Nguyễn Quốc Thắng là người định hướng và hướng dẫn khoa học. Thầy đã tận tình hướng dẫn và tạo mọi điều kiện giúp đỡ tôi trong suốt q trình nghiên cứu và hồn thành luận án.

Tôi xin được thể hiện lòng biết ơn trân trọng nhất tới GS.TS. Lê Văn Tán đã có những nhận định góp ý và những lời khuyên chân thành về chuyên môn để giúp tơi hồn thiện đề tài nghiên cứu.

Tơi xin chân thành cảm ơn dến thầy trưởng khoa PGS.TS Nguyễn Văn Cường cùng tồn thể q Thầy, Cơ tại Khoa Cơng Nghệ Hóa học đã tận tình dạy dỗ, hỗ trợ về điều kiện cơ sở vật chất trong suốt q trình thực hiện đề tài.

Tơi xin gửi lời cảm ơn đến ban lãnh đạo Chi cục Kiểm định Hải quan 3 cùng các anh, chị đồng nghiệp đã tạo điều kiện cho tơi trong suốt q trình học tập và nghiên cứu.

Cuối cùng, tôi xin cảm ơn gia đình, bạn bè đã ln đợng viên và tạo điều kiện tốt nhất để tơi có thể nỗ lực hồn thành tốt đề tài nghiên cứu của mình.

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 5<div class="page_container" data-page="5">

TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ

Trong nghiên cứu đã này, chúng tôi đã xây dựng được quy trình xác định các thành phần ethanol, methanol và acetaldehyde bằng phương pháp quang phổ UV-Vis. Kết quả thẩm định cho thấy phương pháp phân tích có đợ chính xác đạt u cầu với đợ thu hồi ethanol là 96 – 103%, methanol là 88 – 101% và acetaldehyde 97 – 104%; độ lặp lại cho giá trị RSD ≥ 3%; giới hạn phát hiện cũng ở mức thấp dưới 3 mg/L. So sánh với phương pháp GC-MS cho thấy cả hai phương pháp đều đạt yêu cầu tuy nhiên phương pháp GC-MS có thể thực hiện trong khoảng nồng độ 50-2400 mg/L đối với ethanol và 5-240 mg/L với các tác chất còn lại với hệ số tương quan 0,999. Đồng thời, chúng tôi cũng xây dựng được phương pháp xác định đồng thời ethanol, methanol, acetaldehdye và ethylacetate. Thiết lập các điều kiện phân tích GC-MS bao gồm: điều kiện headspace tại 70 oC trong thời gian10 phút; tốc độ gia nhiệt và tốc đợ dịng lần lượt là 3 oC/phút và 1,2 mL/phút. Tổng thời gian phân tích đồng thời cả 3 hợp chất ethanol, methanol và acetaldehyde của phương pháp là 8 phút. Kết quả thẩm định phương pháp cho thấy phương pháp phân tích đồng thời có đợ chính xác cao đạt u cầu cầu với đợ thu hồi 94 – 107%, độ lặp lại cho giá trị RSD <3%, giới hạn phát hiện của từng chất phân tích < 3 mg/L. Phương pháp đã được ứng dụng để phân tích mợt số mẫu đồ uống có cồn tại địa phương. Kết quả phân tích cho thấy hàm lượng ethanol trong sản phẩm phù hợp với công bố của đơn vị sản xuất. Dựa vào hàm lượng ethanol, methanol, acetaldehyde và ethylacetate trong cùng mợt mẫu có thể đánh giá sơ bộ và phân biệt một số sản phẩm đồ uống có cồn đặc biết là mẫu rượu chưng cất và rượu pha chế.

Từ khóa: ethanol, methanol, acetaldehyde, GC-MS, rượu, bia

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 6<div class="page_container" data-page="6">

ABSTRACT

This study has developed a procedure for the single determination of ethanol, methanol, and acetaldehyde components by a conventional method using UV-Vis instrument to measure optical absorbance. The validation results show that the analytical method has satisfactory accuracy with the recovery of ethanol of 96 - 103%, methanol of 88 - 101% and acetaldehyde 97 - 104% of repeatability for RSD values ≥ 3%, the detection limit is also low below 3 mg/L. In to the GC-MS method that both methods are satisfactory however the GC-MS method can perform in the concentration range of 50-2400 mg/L for ethanol and 5-240 mg/L for remaining substances with a determination coefficient of 0.994. This study also develops a method for the simultaneous determination of ethanol, methanol, and acetaldehyde. The setting of GC-MS analysis conditions included headspace temperature 70 oC for 10 min, temperature rate and flow rate was 3 oC/min and 1.2 mL/min, respectively. The total analysis time of the method was 8 min. The method validation results show that the analytical method has a satisfactory high accuracy with the recovery of 94 - 107%, the repeatability for the RSD value <3%, the detection limit of Analytical method <3mg/L. The method has been applied to the analysis of several local alcoholic beverage samples. The analysis results show that the ethanol concentration in the product is consistent with the announcement of the manufacturer. Based on the concentration of ethanol, methanol, acetaldehyde and ethylacetate in the same sample, it is possible to preliminarily evaluate and distinguish some alcoholic beverage products, especially distilled and mixed alcohol samples.

Key words: ethanol, methanol, acetaldehyde, GC-MS, wine, beer

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 7<div class="page_container" data-page="7">

LỜI CAM ĐOAN

Tôi tên Phạm Thị Minh Trang là học viên cao học ngành Hóa phân tích lớp CHHOPT9A của trường Đại học Cơng nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh.

Tơi xin cam đoan đề tài nghiên cứu được tiến hành công khai, minh bạch dựa trên sự sự hướng dẫn nhiệt tình của giảng viên TS. Nguyễn Quốc Thắng. Những kết quả nghiên cứu của các tác giả khác và các số liệu được sử dụng trong luận văn đều có trích dẫn và ghi nguồn tài liệu tham khảo đúng quy định.

Các số liệu và tài liệu sử dụng trong bài hồn tồn trung thực và khơng sao chép kết quả của bất kỳ cơng trình nghiên cứu nào. Nếu phát hiện có bất kỳ sự sao chép nào, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước bợ mơn, khoa và nhà trường.

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 8<div class="page_container" data-page="8">

1.2.2 Chuyển hóa methanol trong cơ thể ... 7

1.2.3 Cơ chế bệnh sinh ngộ độc methanol ... 8

1.2.4 Liều gây độc ... 10

1.2.5 Triệu chứng ngộ độc methanol ... 11

1.3 Acetaldehyde ... 12

1.4 Butanol ... 12

1.5 Sản phẩm đồ uống có cồn và yêu cầu quy chuẩn an toàn đối với sản phẩm đồ uống có cồn ... 13

1.5.1 Phân loại sản phẩm đồ uống cồn qua chưng cất ... 13

1.5.2 Phân loại đồ uống cồn không qua chưng cất ... 15

1.5.3 Yêu cầu quy chuẩn an toàn đối với sản phẩm đồ uống có cồn ... 17

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 9<div class="page_container" data-page="9">

1.6 Những tạp chất liên quan đến quá trình chưng cất ... 19

1.7.3 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) ... 23

1.7.4 Phương pháp điện hóa ... 24

1.7.5 Các phương pháp vật lý xác định hàm lượng ethanol ... 24

1.8 Kết luận về nghiên cứu tổng quan ... 24

1.8.1 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước về ... 24

2.3 Phương pháp nghiên cứu: ... 29

2.3.1 Phương pháp UV-Vis phân tích ethanol, methanol và acetaldehyde ... 29

2.3.2 Phân tích hàm lượng methanol, acetaldehyde và ethanol bằng GC-MS 33 2.3.3 Phân tích đồng thời hàm lượng ethanol, methanol, acetaldehyde bằng GC-MS ... 35

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 10<div class="page_container" data-page="10">

3.1 Phân tích hàm lượng acetaldehyde, ethylacetate, methanol và ethanol trong

rượu, bia ... 39

3.1.1 Phân tích hàm lượng acetaldehyde ... 39

3.1.2 Phân tích hàm lượng methanol ... 46

3.1.3 Phân tích hàm lượng ethanol ... 53

3.1.4 Kết luận ... 60

3.2 Phân tích đồng thời bằng thiết bị GC-MS ... 62

3.2.1 Nghiên cứu điều kiện phân tích đồng thời trên thiết bị GC-MS ... 62

3.2.2 Phân tích đồng thời hàm lượng hỗn hợp 2 chất trên thiết bị GC-MS .... 73

3.2.3 Phân tích đồng thời bằng thiết bị GC-MS ... 79

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 11<div class="page_container" data-page="11">

DANH MỤC HÌNH ẢNH

Hình 1.1 Sơ đồ chuyển hóa rượu ... 4

Hình 1.2 Quy trình chuyển hóa methanol trong cơ thể ... 8

Hình 2.1 Sơ đồ quá trình nghiên cứu ... 29

Hình 2.2 Quy trình xác định acetaldehyde ... 30

Hình 2.3 Quy trình xác định methanol ... 31

Hình 2.4 Quy trình xác định ethanol ... 32

Hình 3.1 Phổ hấp thụ của phức màu acetaldehyde ở các nồng độ khác nhau ... 39

Hình 3.2 Đường chuẩn phụ tḥc đợ hấp thụ quang vào nồng đợ acetaldehyde ... 40

Hình 3.3 Đường chuẩn phụ thuộc của nồng độ Acetaldehyde ... 43

Hình 3.4 Phổ hấp thụ của phức màu methanol ở các nồng đợ khác nhau ... 46

Hình 3.5 Đường chuẩn phụ thuộc độ hấp thụ quang vào nồng độ methanol ... 47

Hình 3.6 Đường chuẩn phụ tḥc của nồng đợ methanol ... 50

Hình 3.7 Phổ hấp thụ phức màu ethanol ở các nồng độ khác nhau ... 53

Hình 3.8 Đường chuẩn phụ tḥc đợ hấp thụ quang vào nồng đợ ethanol ... 54

Hình 3.9 Đường chuẩn phụ tḥc của nồng đợ ethanol ... 57

Hình 3.10 Ảnh hưởng nhiệt đợ Headspase đến diện tích pic của chất phân tích ... 63

Hình 3.11 Ảnh hưởng của thời gian ủ Heaspase ... 64

Hình 3.12 Ảnh hưởng của nhiệt đợ Detector ... 65

Hình 3.13 Ảnh hưởng của nhiệt đợ Inlet ... 66

Hình 3.14 Sắc ký đồ các chất phân tích và nợi chuẩn tại tốc đợ gia nhiệt 3 oC ... 67

Hình 3.15 Ảnh hưởng của tỉ lệ chia dịng ... 71

Hình 3.16 Đường chuẩn phụ tḥc của ethanol ... 74

Hình 3.17 Đường chuẩn phụ tḥc của acetaldehyde ... 74

Hình 3.18 Đường chuẩn phụ tḥc của ethanol ... 77

Hình 3.19 Đường chuẩn phụ tḥc của methanol ... 77

Hình 3.20 Đường chuẩn phụ tḥc nồng đợ và tỉ lệ diện tích pic của acetaldehyde và methanol ... 80

Hình 3.21 Đường chuẩn phụ tḥc nồng đợ và tỉ lệ diện tích pic của ethanol ... 80

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 12<div class="page_container" data-page="12">

DANH MỤC BẢNG BIỂU

Bảng 1.1 Chỉ tiêu mức hàm lượng methanol của mợt sản phầm đồ uống có cồn... 18

Bảng 1.2 Chỉ tiêu hóa học của sản phẩm rượu trắng ... 18

Bảng 2.1 Điều kiện thiết bị phân tích ... 33

Bảng 2.2 Chương trình nhiệt đợ tách cợt ... 35

Bảng 2.3 Nồng độ đường chuẩn của từng chất phân tích ... 36

Bảng 3.1 Sự phụ tḥc độ hấp thụ quang vào nồng độ acetaldehyde... 40

Bảng 3.2 Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp phân tích acetaldehyde bằng quang phổ UV-Vis ... 41

Bảng 3.3 Độ lặp lại của phương pháp xác định actadehyde ... 41

Bảng 3.4 Độ tái lặp của phương pháp xác định acetaldehyde ... 42

Bảng 3.5 Hiệu suất thu hồi của phương pháp xác định acetaldehyde... 42

Bảng 3.6 Sự phụ tḥc tỉ lệ diện tích pic chuẩn acetaldehyde/nội chuẩn vào nồng độ acetaldehyde ... 43

Bảng 3.7 Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp phân tích acetaldehyde bằng GC-MS ... 44

Bảng 3.8 Độ lặp lại của phương pháp xác định acetaldehyde bằng GC-MS ... 44

Bảng 3.9 Độ tái lặp của phương pháp xác định acetaldehyde bằng GC-MS ... 44

Bảng 3.10 Hiệu suất thu hồi của phương pháp xác định acetaldehyde bằng GC-MS ... 45

Bảng 3.11 So sánh phương pháp trong phân tích acetaldehyde ... 45

Bảng 3.12 Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang vào nồng độ methanol... 47

Bảng 3.13 Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp phân tích methanol bằng quang phổ UV-Vis ... 48

Bảng 3.14 Độ lặp lại của phương pháp xác định methanol ... 48

Bảng 3.15 Độ tái lặp của phương pháp xác định methanol ... 49

Bảng 3.16 Hiệu suất thu hồi của phương pháp xác định methanol... 49

Bảng 3.17 Sự phụ thuộc tỉ lệ diện tích pic chuẩn methanol/nợi chuẩn vào nồng độ methanol ... 50

Bảng 3.18 Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp GC-MS trong phân tích methanol ... 51

Bảng 3.19 Đợ lặp lại của phương pháp xác định methanol bằng GC-MS ... 51

Bảng 3.20 Độ tái lặp của phương pháp xác định methanol bằng GC-MS ... 51

Bảng 3.21 Hiệu suất thu hồi của phương pháp xác định methanol bằng GC-MS .... 52

Bảng 3.22 So sánh hai phương pháp trong phân tích methanol... 52

Bảng 3.24 Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp quang phổ UV-Vis trong phân tích ethanol ... 55

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 13<div class="page_container" data-page="13">

Bảng 3.25 Độ lặp lại của phương pháp xác định ethanol ... 55

Bảng 3.26 Độ tái lặp của phương pháp xác định ethanol ... 56

Bảng 3.27 Hiệu suất thu hồi của phương pháp xác định ethanol ... 56

Bảng 3.28 Sự phụ tḥc tỉ lệ diện tích pic chuẩn ethanol/nội chuẩn vào nồng độ ethanol ... 57

Bảng 3.29 Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp GC-MS trong phân tích ethanol ... 58

Bảng 3.30 Độ lặp lại của phương pháp xác định ethanol bằng GC-MS ... 58

Bảng 3.31 Độ tái lặp của phương pháp xác định ethanol bằng GC-MS ... 58

Bảng 3.32 Hiệu suất thu hồi của phương pháp xác định ethanol bằng GC-MS ... 59

Bảng 3.33 So sánh hai phương pháp trong phân tích ethanol ... 59

Bảng 3.34 Đại lượng cơ bản của sắc ký tại chương trình nhiệt ... 68

Bảng 3.35 Đại lượng cơ bản của sắc ký tại các tốc đợ dịng ... 70

Bảng 3.45 Đợ lặp lại của phương pháp phân tích bằng GC-MS... 82

Bảng 3.46 Độ tái lặp của phương pháp phân tích bằng GC-MS... 82

Bảng 3.47 Hiệu suất thu hồi của phương pháp phân tích bằng GC-MS ... 82

Bảng 3.48 Kết quả phân tích mẫu thực bằng phương pháp đo màu ... 84

Bảng 3.49 Kết quả phân tích mẫu thực bằng phương pháp GC-MS ... 85

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 14<div class="page_container" data-page="14">

DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT

Acetyl CoA Acetyl coenzyme A

FAD Flavin adenine dinucleotide

GC-MS Gas chromatography–mass spectrometry (Sắc ký khí ghép nối khối phổ)

NADH Nicotinamide adenine dinucleotide

NMR Nuclear magnetic resonance (Cộng hưởng từ hạt nhân)

LOD Limit of detection (Giới hạn phát hiện)

LOQ Limit of quantitation (Giới hạn định lượng)

S/N Signal to noise ratio (Tỉ lệ tín hiệu trên nhiễu nền)

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 15<div class="page_container" data-page="15">

MỞ ĐẦU

Về tính cấp thiết của đề tài : Rượu, bia là loại đồ uống có cồn quen tḥc trong thị

trường thức uống ở Việt Nam. Đồ uống có cồn là mợt phần quan trọng trong cuộc sống hàng ngày, mang lại lợi ích cho cả thể chất và tâm hồn với mức tiêu thụ vừa phải trong cơ thể. Trong quá trình sản x́t, tất cả các loại đồ uống có cồn đều trải qua quá trình lên men, đặc biệt là lên men rượu, theo đó đường được chuyển hóa thành ethanol và nhiều sản phẩm phụ khác. Hiện nay, có nhiều loại men khác nhau thúc đẩy chuyển đổi đường thành ethanol, vì vậy có thể tạo ra nhiều sản phẩm đồ uống với hương vị đặc trưng, do đó góp phần tạo nên sự đa dạng phong phú cho đồ uống có cồn. Chính vì sự đa dạng trong quy trình sản x́t đồ uống có cồn, do đó, ngồi thành phần chính là ethanol, trong đồ uống có cồn cịn hương liệu và những sản phẩm phụ khác khơng có lợi cho sức khoẻ. Do đó, việc kiểm tra hàm lượng các ethanol và các sản phẩm phụ đợc hại như methanol, acetaldehyde có trong đồ uống có cồn là quan trọng và cần thiết để đảm bảo sức khoẻ người tiêu dùng.

Tình hình nghiên cứu: Trong những năm gần đây, có nhiều nghiên cứu về xác định

đồng thời ethanol, methanol và acetaldehyde. J Chlatter và cộng sự (2014) thực hiện xác định đồng thời methanol, acetaldehyde, acetone và ethanol trong máu người bằng thiết bị GC-FID. Một phương pháp đơn giản để xác định đồng thời acetaldehyde, acetone, methanol và ethanol trong khí quyển bằng thiết bị GC-FID thực hiện bởi Fernanda F. Giubbina và cộng sự (2017).

Mục đích và nhiệm vụ nghiên cứu: Nghiên cứu mợt phương pháp phân tích nhanh chóng, chính xác, đơn giản xác định đồng thời hàm lượng ethanol, methanol và alcetaldehyde trong đồ uống có cồn và trở thành phương pháp kiểm tra chất lượng

tiêu chuẩn cho các cơ sở sản xuất.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 16<div class="page_container" data-page="16">

Mục tiêu nghiên cứu :

 Ứng dụng phương pháp xác định hàm lượng ethanol, methanol và acetaldehyde bằng thiết bị UV-Vis trong phân tích đồ uống có cồn, bước đầu thực hiện phân loại mẫu đồ uống có cồn.

 Xây dựng và phát triển phương pháp xác định đồng thời ethanol, methanol và alcetaldehyde trong đồ uống có cồn sử dụng thiết bị sắc ký ghép nối khối phổ (GC-MS), ứng dụng phương pháp cơ sở đánh giá nguồn gốc sản phẩm bia rượu.

Nội dung nghiên cứu :

1. Xây dựng quy trình xác định riêng lẻ ethanol, methanol và acetaldehyde sử dụng phương pháp UV-Vis và thiết bị GC-MS. So sánh giữa các phương pháp phân tích. 2. Xây dựng và phát triển phương pháp xác định đồng thời hàm lượng ethanol, methanol và alcetaldehyde bằng thiết bị GC-MS và khảo sát các điều kiện phân tích trên thiết bị.

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 17<div class="page_container" data-page="17">

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN VỀ LĨNH VỰC NGHIÊN CỨU

1.1 Tổng quan về ethanol

1.1.1 Tính chất ethanol

Ethanol cịn được gọi là rượu etylic, rượu ngũ cốc hay cồn, là một hợp chất hữu cơ. Ethanol là thành phần chính có trong hầu hết thức uống có cồn có nguồn gốc từ quá trình lên men carbohydrate với nấm men [1]. Ethanol tồn tại trong tự nhiên, là một sản phẩm phụ của q trình chuyển hóa đường nhờ men. Ethanol thường được tìm thấy trong quả chín. Nó cũng có thể tạo ra từ quá trình nẩy mầm của nhiều loại cây trồng.

Ethanol là chất lỏng không màu trong suốt, dễ bay hơi, dễ cháy, tan vơ hạn tron nước có mùi đặc trưng và vị cay [2]. Sở dĩ ethanol tan vô hạn trong nước và có nhiệt đợ sơi cao hơn nhiều so với este hay aldehyde là do sự tạo thành liên kết hydro giữa các phân tử rượu với nhau và với nước. Các đặc tính vật lý và hóa học của ethanol chủ yếu do nhóm hydroxyl. Ethanol mang tính chất của một alcohol đơn chức, tham gia các phản ứng như ete hóa, hay este hóa, phản ứng thế nhóm OH, phản ứng oxy hóa tạo aldehyde.

1.1.2 Chuyển hóa ethanol trong cơ thể

Khi uống vào cơ thể, khoảng 20% ethanol được hấp thụ ở dạ dày và 80% hấp thụ ở ruột non. Rượu được hấp thụ từ ruột sẽ theo tĩnh mạch cửa đến gan. Tại đây, 90% ethanol được chuyển hóa, mợt phần nhỏ được bài tiết nguyên dạng qua mồ hôi, hơi thở và nước tiểu.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 18<div class="page_container" data-page="18">

Hình 1.1 Sơ đồ chuyển hóa rượu

 Bước 1: Xúc tác bởi enzyme alcohol dehyrogenase, chủ yếu trong gan. Coenzyme là nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) có vài trị vận chuyển điện tử, ethanol được oxy hóa thành acetaldehyd và NAD+ chuyển thành NADH và H+.

 Bước 2: Xúc tác bởi enzym aldehyde dehydrogenase (ALDH), acetaldehyde được oxy hóa thành acid acetic; NAD+ tạo thành NADH. Phản ứng ALDH là phản ứng một chiều

 Bước 3: Phần lớn các acid acetic được sản xuất bởi quá trình oxy hóa acetaldehyde ở gan được vận chuyển đến các mơ ngoại vi, nơi nó được hoạt hóa để tạo acetyl CoA. Acetyl CoA cũng là chất chuyển hóa quan trong của tất cả các carbohydrate phân tử lớn, chất béo protein dư thừa. Như vậy, sản phẩm chuyển hóa từ alcohol cũng như các sản phẩm cùng loại được sản xuất từ quá trình oxy hóa carbohydrate, chất béo và protein, bao gồm carbon dioxide, các acid béo, các xetone và cholesterol; trong đó sản phẩm được hình thành phụ tḥc vào trạng thái năng lượng và các điều kiện dinh dưỡng và nội tiết. Khi uống mợt lượng rượu lớn ethanol sẽ chuyển hóa qua Cytochrome P450 2E1 (CYP2E1) ở gan để tạo thành các gốc tự do pha hủy gan hoặc enzyme catalase (chủ yếu ở não) gây rối loạn dẫn truyền thần kinh [3].

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 19<div class="page_container" data-page="19">

1.1.3 Độc tính ethanol

Ethanol gây độc trên hầu hết các hệ cơ quan, một số triệu chứng nhiễm đợc có liên quan đến tác dụng của chất chuyển hóa acetaldehyde. Ethanol tác đợng lên một số protein màng tham gia vào con đường truyền tín hiệu bao gồm các receptor dẫn truyền thần kinh. Tác động chính của ethanol liên quan đến sự gia tăng ức chế GABA tại receptor GABA và ức chế receptor NMDA (N–methyl–D-aspartate), receptor của glutamate. Uống rượu vừa phải (khoảng 10 - 20g ethanol nguyên chất mỗi ngày) có tác dụng tốt trên hệ tim mạch. Ngược lại, việc lạm dụng rượu có khả năng gây tổn thương các cơ quan trong cơ thể, đặc biệt là gan, dạ dày, thực quản, ruột, tuyến tụy và não bộ, làm tăng khả năng ung thư trên các bộ phận [4]

Ngộ độc rượu cấp gây ra nhiều rối loạn tâm thần và thể lực. Thường do uống quá nhiều rượu, liều gây độc thay đổi tuy thuộc mỗi cơ thể, thường rất cao ở người nghiện rượu. Trên lâm sàng thường có các triệu chứng qua các giai đoạn và tổn thương ở nhiều cơ quan khác nhau:

 Giai đoạn kích thích: sảng khối, hưng phấn thần kinh (vui vẻ, nói nhiều), giảm khả năng tự kiềm chế (mất điều hịa, kích thích, hung hãn). Vận đợng phối hợp bị rối loạn: đi đứng loạng choạng.

 Giai đoạn ức chế: tri thức giảm dần, giảm khả năng tập trung, lú lẫn. Phản xạ gân xương giảm, trương lực cơ giảm. Giãn mạch ngoại vi.

 Giai đoạn hôn mê: Hôn mê, thở yếu hoặc ngừng thở dẫn đến suy hô hấp, viêm phổi sặc. Giãn mạch, tụt huyết áp, rối loạn nhịp tim, tụy mạch, hạ thân nhiệt, hạ đường huyết. Co giật, tiêu cơ vân, rối loại điện giải, toan chuyển hóa. Những người uống rượu thường xuyên kể cả uống ít, cũng có thể dẫn tới xơ gan, tổn thương tim, tim to và gan nhiễm mỡ [5].

Các kết quả lâm sàng và nồng độ ethanol trong máu có thể được phân loại như sau (nồng đợ ước tính sơ bợ) [6]: Nhiễm đợc hoặc ói mửa: 0,125-0,2% (v/v) (100-150 mg/100mL); Mất cơ phối hợp: 0,2-0,25% (v/v) (150-200 mg/100mL); Giảm mức độ

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 20<div class="page_container" data-page="20">

ý thức: 0,25-0,4% (v/v) (200-300 mg/100mL); Tử vong: 0,4-0,6% (v/v) (300-500 mg/100mL).

1.1.4 Ứng dụng của ethanol

Với đặc tính hóa lý của nó nên ethanol được sử dụng rộng rãi trong nhiều ngành nghề. Trong cơng nghiệp hóa chất, ethanol được sử dụng làm ngun liệu đầu vào để tổng hợp nên các hợp chất khác. Nhờ khả năng tan vô hạn trong nước và có thể hịa tan được nhiều hợp chất hữu cơ có đợ phân cực thấp mà nó dùng như dung môi trong sơn, bút đánh dấu, bút mực, nước rửa răng hay chất khử mùi. Ethanol cũng được sử dụng trong các sản phẩm chống đơng lạnh vì điểm đóng băng thấp của nó. Ethanol dùng để điều chế một số hợp chất hữu cơ, dùng làm dung môi hoặc chất pha để pha vecni, dược phẩm, nước hoa. Ethanol cịn được dùng trong cơng nghiệp in, cơng nghiệp điện tử, dệt may, trong ngành điện tử.

Trong công nghiệp nhiên liệu, ethanol đã và đang được nghiên cứu như một loại nguyên liệu sinh học thay thế hoặc là phụ gia nhiên liệu cho các loại phương tiện giao thông. Ý nghĩa lớn nhất nhiên liệu sinh học là nó giúp giảm sự phụ tḥc vào nhiên liệu hóa thạch cũng như giảm tiêu thụ nhiên liệu hóa thạch. Ethanol được xem là nhiên liệu sinh học tái sinh, do nó có thể được sản xuất từ các nguồn thức ăn chăn nuôi, hay từ các loại cây như gai dầu, mía, sắn, ngô.

Trong ngành y tế, ethanol được sử dụng phổ biết như chất sát trùng, nó cịn được sử dụng như chất giải độc bằng cả đường tiêm và đường uống do ngợ đợc methanol và etylen glycol[6]. Ngồi ra, ethanol cịn dùng để hịa tan nhiều loại thuốc khơng tan trong nước, hơn 700 chất lỏng dùng trong y khoa có chưa ethanol bao gồm acetaminophen, mannitol, phenobarbital...

Đặc biệt, ethanol được con người sử dụng như một loại đồ uống. Từ thế kỷ thứ 9, con người đã biết chưng cất rượu. Đến nay, có hàng nghìn loại rượu được sản x́t trên thế giớ để phục vụ cho nhu cầu của con người.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 21<div class="page_container" data-page="21">

1.2 Methanol

1.2.1 Tính chất methanol

Methanol có cơng thức cấu tạo CH3OH được người Hi Lạp cổ tình cờ phát hiện khi tiến hành thủy phân gỗ, tuy nhiên sản phẩm methanol lúc đó tồn tại dưới dạng tạp chất, lẫn với các chất khác. Đến nay methanol được sản xuất trong cơng nghiệp bằng phản ứng hóa học với cơ chất sử dụng phổ biến là carbon monoxide (CO), cacbon dioxide (CO2) và khí hydro (H2)[7].

Methanol được sinh ra trong q trình chuyển hóa kỵ khí của mợt số loại vi khuẩn, tuy nhiên lượng này không nhiều do methanol phản ứng với oxy chuyển hóa thành khí CO2 và H2O. Methanol là hợp chất không màu, dễ bay hơi, dễ cháy và tan vơ hạn trong nước.

1.2.2 Chuyển hóa methanol trong cơ thể

Sau khi uống, methanol được hấp thụ nhanh qua đường tiêu hóa và chuyển hóa ở gan. Trong bước chuyển hóa đầu tiên, methanol được chuyển hóa thành formaldehyde nhờ xúc tác của men metalloezyme ancol dehydrogenase, thường gọi là ancol dehydrogenase (ADH). Phản ứng này là chậm hơn so với các bước chuyển hóa tiếp theo, sự chuyển đổi của formaldehyde thành acid formic qua enzyme aldehyde dehydrogenase. Điều này có thể giải thích lý do các triệu chứng ngộ độc methanol thường chậm giữa thời điểm uống và bắt đầu có hiệu lực. Formaldehyde chỉ tồn tại trong thời gian rất ngắn, được ước tính là 1-2 phút.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 22<div class="page_container" data-page="22">

Hình 1.2 Q trình chuyển hóa methanol trong cơ thể

Acid formic tiếp tục bị oxy hóa thành carbonic và nước khi có tetrahydrofolate hay cịn gọi là acid folinic. Chuyển hóa của acid formic là rất chậm. Do đó, acid formic thường tích tụ trong cơ thể gây nhiễm toan chuyển hóa.

1.2.3 Cơ chế bệnh sinh ngộ độc methanol

Bản thân methanol khơng có đợc tính, formaldehyde mặc dù độc với cơ thể nhưng chỉ tồn tại trong thời gian rất ngắn, đợc tính của methanol chủ yếu do sản phẩm chuyển hóa gần cuối cùng là acid formic.

Acid formic có thể gây toan chuyển hóa, làm pH của máu thấp hơn 7,35. Acid formic có tính chất acid yếu, kết hợp với acid lactic được hình thành từ pyruvate nhờ sự có mặt của NADH trong chu trình Kreb, gây tình trạng toan hóa máu. Theo Smith và cợng sự ước tính khoảng 50% mức đợ toan hóa máu trong ngộ độc methanol là do acid formic, còn lại hầu như là do acid lactic gây ra [4]. Tình trạng toan hóa máu dẫn đến hiện tượng acid formic chủ yếu tồn tại ở dạng không phân ly,

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 23<div class="page_container" data-page="23">

có thể dễ dàng ngấm vào mơ và cơ quan đích như võng mạc, ti thể và hàng rào máu não.

Acid formic có ái tính cao tại vị trí số 6 của phân tử sắt trong nhân hemoglobin của

phân tử cytochrom oxydase, đặc biệt là cytochrom aa3 mợt enzym có chức năng

oxy hóa khử trong chuỗi vận chuyển điện tử và ức chế hoạt động của enzyme này. Kết quả là làm gián đoạn q trình chuyển hóa trong hơ hấp tế bào, nói cách khác là ức chế hơ hấp tế bào và gây độc tế bào.

Khi pH máu càng giảm, acid formic càng tồn tại nhiều ở trạng thái khơng phân ly và càng có khả năng ngấm vào mơ đích. Thêm nữa, mặt trong của màng ty thể chỉ cho phép dạng không phân ly di chuyển qua do đó trong tình trạng toan hóa máu sự ức chế hô hấp diễn ra thuận lợi, càng toan sự ức chế càng mạnh và dẫn đến quá trình tổn thương tế bào do không sinh được ATP (Adenosine Triphosphate) cho tế bào.

Đối với thần kinh thị giác, acid formic có thể gây tổn thương bằng 2 con đường là trực tiếp từ máu có acid formic hoặc ngấm từ dịch não tủy có acid formic. Acid formic ức chế hô hấp tế bào thần kinh thị giác làm mất chức năng của các ty thể trong tế bào thần kinh thị giác và tế bào võng mạc làm giảm khả năng sinh ATP, hậu quả giảm hoạt động dẫn truyền của tế bào thần kinh thị. Hơn nữa, tế bào thần kinh thị giác bị ức chế hơ hấp dẫn đến thối hóa myelin. Khi các bao myelin bị tổn thương và thối hóa, tế bào thần kinh thị giác trở nên phù nề và càng chèn ép mạnh vào sợi thần kinh. Song song với quá trình nói trên, acid fomic ức chế dòng vận chuyển tự nhiên của các thành phần như ti thể, lipid, protein từ thân tế bào thị thần kinh đến sợi trục dẫn đến hiện tượng thiểu dưỡng và phù trong sợi trục và phù gai thị [8]. bệnh nhân có thể x́t hiện nhìn mờ 6 giờ sau khi uống. Nếu bệnh nhân có uống kèm ethanol thời gian xuất hiện toan chuyển hóa trì hỗn có thể đến 24 giờ do đó tổn thương thị giác cũng trì hỗn đến sau 24 giờ. Hậu quả có thể dẫn đến mất thị lực mợt phần cho đến hoàn toàn và vĩnh viễn. Nghiên cứu loạt bệnh cho thấy tỉ lệ di chứng về thị giác có thể lên tới 25-33% [9].

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 24<div class="page_container" data-page="24">

Ngồi ra, acid formic cịn gây ảnh hưởng tới hệ thần kinh trung ương. Cơ chế gây tổn thương của acid formic lên hệ thần kinh trung ương cũng tương tự đối với thần

kinh thị giác là do hiện tượng ức chế hoạt động cytochrom oxydase trong ty thể của

tế bào thần kinh dẫn đến ức chế hoạt động của hệ Na – K – ATPase. Khi có hiện tượng ức chế hơ hấp tế bào, đây sẽ là khu vực chịu ảnh hưởng nặng nề nhất [2]. Ở những bệnh nhân ngộ độc methanol, các tổn thương não ghi nhận được bao gồm ngoài phù não và hoại tử hạch nền chảy máu ở nhân bèo sẫm và tổn thương chất trắng dưới vỏ do ngộ độc với cơ chế tương tự tổn thương thần kinh thị giác. Tổn thương chất trắng dưới vỏ thường xảy ra ở những bệnh nhân đến muộn hoặc điều trị ban đầu không phù hợp [5].

1.2.4 Liều gây độc

Hầu hết các chuyên gia đều thống nhất bắt đầu điều trị giải độc khi nồng độ methanol máu từ 20 mg/dL vì đây là nồng đợ bắt đầu có tổn thương thị lực và toan chuyển hóa. Có thể tính tốn lượng methanol uống dẫn tới liều đợc căn cứ vào cơng thức tính tốn dược đợng học như sau:

Trong đó: [C] là nồng độ methanol trong trong máu, D là lượng methanol uống

F là sinh khả dụng đường uống (100%)

Vd là thể tích phân bố (của methanol là 0,6 L/Kg).

Từ đó có thể tính tốn rằng: nếu uống mợt thể tích tương đương 0,25 mL/kg dung dịch methanol nồng độ 100% về mặt lý thuyết có thể gây ra nồng độ 20 mg/dL trong máu và bắt đầu có thể gây đợc tính trên người. Theo hướng dẫn của Hội các nhà Chống độc Mỹ năm 2002, nồng đợ methanol máu có thể gây tử vong ở người nếu khơng được điều trị tích cực là trên 50 mg/dL [10]. Tuy nhiên với bệnh nhân

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 25<div class="page_container" data-page="25">

được giải độc và điều trị đúng cách có thể cứu sống ở nồng đợ cao hơn rất nhiều [11].

1.2.5 Triệu chứng ngộ độc methanol

Biểu hiện lâm sàng ngộ độc methanol là tổn thương đa cơ quan và đều do một nguyên nhân chung là acid formic được sinh ra mà khơng được chuyển hóa thành cacbonic và nước gây ra toan chuyển hóa và đợc tính trực tiếp trên mô [12].

Hai yếu tố ảnh hưởng nhiều nhất đến biểu hiện lâm sàng là thời gian từ khi ngợ đợc đến khi nhập viện và tình trạng uống kèm theo ethanol hay không [7]. Sau khi uống methanol từ 0,5 – 4 giờ là pha yên tĩnh của ngộ độc, một số trường hợp uống kèm ethanol triệu chứng thường chỉ xuất hiện sau 12 – 24 giờ. Bệnh nhân có thể lơ mơ như ngợ độc ethanol do vậy trong giai đoạn này bệnh nhân không biểu hiện triệu chứng cũng không thể loại trừ ngộ độc methanol.

Tổn thương thị giác có thể biểu hiện trên lâm sàng như nhìn mờ, ám điểm trung tâm, thị lực hình ống, nhìn đơi và sợ ánh sáng, đồng tử giãn và giảm hoặc mất phản xạ với ánh sáng, đôi khi thấy rung giật nhãn cầu tuy nhiên đây không phải triệu chứng phổ biến. Đáy mắt có hiện tượng phù nề võng mạc và phù gai thị, xung huyết đĩa thị cho đến viêm teo thị giác [13].

Những biểu hiện về thần kinh có thể là rối loạn ý thức từ mức nhẹ như rối loạn tập trung, sững sờ và hôn mê. Rối loạn vận động kiểu ngoại tháp với biểu hiện xoắn vặn, động tác chậm và cứng, cơ mặt cứng, hiện tượng co giật có thể xuất hiện trong các trường hợp nặng. Các di chứng thần kinh khác có thể gặp như: giảm nhận thức, viêm tủy cắt ngang, liệt kiểu hành não [4]. Suy tuần hoàn biểu hiện mạch ban đầu thường nhanh, huyết áp thấp. Nặng có thể thấy mạch chậm và huyết áp tụt không đáp ứng với vận mạch và nặng nhất là ngừng tuần hoàn. Nhiều trường hợp bệnh nhân ngừng tuần hoàn tại bệnh viện do trơ với thuốc vận mạch do toan chuyển hóa nặng khơng hồi phục.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 26<div class="page_container" data-page="26">

Đối với hệ tiêu hóa, bệnh nhân có thể x́t hiện các triệu chứng buồn nơn, nơn mửa, đau bụng. Trong một số trường hợp xuất huyết tiêu hóa với biểu hiện nơn ra máu, đi ngồi phân đen và viêm tụy cấp với bụng chướng và đau, xét nghiệm tăng men tụy như amylase, lipase. Biểu hiện ở tiêu hóa khơng phản ánh được mức đợ nặng của bệnh.

Thận – tiết niệu: có thể gặp suy thận với biểu hiện thiểu niệu, vô niệu, phù. Myoglobin niệu là một biến chứng hiếm gặp nhưng nếu có là dấu hiệu nặng của bệnh.

1.3 Acetaldehyde

Acetaldehyde là mợt chất tḥc aldehyde có mang nhóm chức –CHO liên kết trực tiếp với nguyên tử carbon hoặc hydrogen bằng liên kết cợng hóa trị. Trong rượu chưng cất, aldehyde tổng số được tính bằng tổng của aldehyde dạng tự do và aldehyde dạng bảo vệ (hemiacetal và acetal). Ở hầu hết các loại rượu chưng cất acetaldehyde chiếm hơn 90% tổng số aldehyde, ngoài ra, còn các aldehyde mạch hở khác từ C1 đến C12 (bão hịa hoặc khơng bão hịa) và các aldehyde thơm [14]. Các aldehyde được sinh ra trong quá trình lên men, bay hơi trước ethanol và nằm trong dịch cất đầu của quá trình chưng cất. Sự có mặt của aldehyde trong rượu sẽ làm tăng đợc tính cho sản phẩm. Khi vào cơ thể, aldehyde có khả năng gắn kết với các protein và DNA của tế bào gan gây tổn thương. Acetaldehyde cùng các cytokine và các gốc tự do kích thích q trình hoạt hóa các tế bào ở trạng thái không hoạt động. Các tế bào này sẽ biệt hóa thành các nguyên bào sợi cơ có khả năng sản xuất một lượng lớn collagen, proteoglycan và các glycoprotein như fibronectin và laminin lắng đọng bên ngoài tế bào làm tăng quá trình tạo xơ và dẫn tới xơ gan [15].

1.4 Butanol

N-Butanol là rượu cơ bản có cấu trúc 4-cacbon với công thức hóa học C4H9OH. Đồng phân của nó gồm isobutanol và 2-butanol cùng tert-butanol. Hợp chất này xuất hiện tự nhiên như là một sản phẩm phụ sau quá trình lên men của đường và

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 27<div class="page_container" data-page="27">

carbohydrate. Chúng có mặt trong nhiều loại thực phẩm cùng đồ uống, được dùng trong một loạt các sản phẩm tiêu dùng.

Butanol hay butyl alcohol là chất lỏng dễ cháy khơng màu, có mùi cồn mạnh. butyl alcohol là chất lỏng có chiết suất cao và cháy với ngọn lửa phát sáng mạnh. Nó khơng tương thích với acid mạnh, chất oxy hóa mạnh, nhôm, acid clorua, anhydrit acid, đồng và hợp kim của đồng.

n-N-butanol được sử dụng rộng rãi trong mợt số lượng lớn các ngành cơng nghiệp. Ví dụ, nó được sử dụng làm dung mơi trong các ngành công nghiệp liên quan đến sản xuất sơn, vecni, nhựa tổng hợp, gôm, dược phẩm, dầu thực vật, thuốc nhuộm và ancaloit. Rượu n-butyl được sử dụng trong sản xuất da nhân tạo, cao su và xi măng nhựa, shellac, áo mưa, nước hoa và phim ảnh. Nó là dung mơi, chất trung gian hóa học và phụ gia trong xăng khơng chì.

1.5 Sản phẩm đồ uống có cồn và yêu cầu quy chuẩn an tồn đối với sản phẩm đồ uống có cồn

Ở nhiều nơi trên thế giới, đồ uống có cồn là một phần quan trọng trong cuộc sống hàng ngày, mang lại lợi ích cho cả thể chất và tinh thần với hàm lượng tiêu thụ vừa phải trong cơ thể. Yếu tố quan trọng của tất cả sản phẩm đồ uống có cồn là quá trình lên men, đặc biệt là q trình lên men rượu, theo đó đường được chuyển hóa thành ethanol và nhiều sản phẩm phụ khác.

Nhiều loại nấm khác nhau có thể thúc đẩy ít nhất một số chuyển đổi đường thành ethanol, như vậy chúng có thể tạo ra nhiều sản phẩm đồ uống bằng cách tạo ra hương vị đặc trưng, do đó góp phần tạo nên sự đa dạng phong phú cho đồ uống có cồn [6]. Về cơ bản, rượu được chia thành các loại như sau: rượu lên men không qua chưng cất và rượu lên men qua chưng cất.

1.5.1 Phân loại sản phẩm đồ uống cồn qua chưng cất

Rượu trắng chưng cất là loại đồ uống có cồn được chưng cất từ dịch lên men có nguồn gốc tinh bợt hoặc các loại đường [2]. Đa số rượu chưng cất đều có đợ cồn từ

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 28<div class="page_container" data-page="28">

20% v/v trở lên (vodka (40-45% v/v), brandy (40-60% v/v), số ít rượu chưng cất được sản x́t ở Đức có đợ cồn thấp hơn 15% v/v.

1.5.2.1 Rượu chưng cất

Rượu chưng cất là rượu được chưng cất liên tục đến độ cồn bằng hoặc trên 95% v/v và được tinh chế lại nhằm loại bỏ mùi vị và màu sắc của rượu sau khi chưng cất. Rượu chưng cất được dùng để pha chế các loại rượu khác thấp độ cồn hơn như vodka, GNS…. Volka (40-45% v/v) là rượu tinh cất được chưng cất từ sản phẩm lên men của khoai tây, ngũ cốc rỉ mật,… và được xử lý sau chưng cất bằng than hoạt tính.

1.5.2.2 Whisky

Whisky được chưng cất từ dịch ngâm lên men của nhiều loại ngũ cốc khác nhau như ngô, lúa mạch, lúa mạch đen, lúa mì, … đến đợ cồn thấp hơn 95% v/v và đợ cồn đóng chai bằng hoặc trên 40% v/v. Có nhiều loại Whisky được sản xuất trên thế giới khác nhau chủ yếu ở nguyên liệu lên men và quá trình sản xuất. Bốn loại nguyên liệu lên men chính là mạch nha, lúa mạch, lúa mạch đen và ngô. Các loại ngũ cốc có thể sử dụng đơn lẻ hoặc phối hợp với nhau để lên men.

1.5.2.3 Brandy

Brandy được chưng cất từ các loại trái cây lên men (thường là nho) đến độ cồn thấp hơn 95% v/v, có mùi vị và tính chất đặc trưng, đợ cồn đóng chai bằng hoặc trên 40% v/v. Brandy gồm 3 loại chính là brandy, brandy táo và brandy trái cây.

1.5.2.4 Rum

Rum được chưng cất từ dịch lên men của nước mía, syro mía, mật mía hay các phụ phẩm của mía đến đợ cồn thấp hơn 95% v/v, có mùi vị và tính chất đặc trưng, đợ cồn đóng chai bằng hoặc trên 40% v/v.

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 29<div class="page_container" data-page="29">

deagave (100% đường sử dụng lên men từ agave) và mixto (51% đường sử lên men từ agave và 49% đường từ nguồn khác). Tequila có mùi vị và tính chất đặc trưng, đợ cồn đóng chai bằng hoặc trên 40% v/v.

1.5.2.6 Mescal

Mescal là loại rượu có nguồn gốc từ Mexico, được chưng cất từ dịch ngâm lên men

cây maguey (Agave americana L.), có mùi vị và tính chất đặc trưng, đợ cồn đóng

chai bằng hoặc trên 40% v/v.

1.5.2.7 Rượu mùi

Rượu mùi là đồ uống được pha chế từ rượu chưng cất với nước, có thể bổ sung đường, dịch chiết trái cây và phụ gia thực phẩm. Đợ cồn đóng chai khoảng 20-45% v/v. Có nhiều loại rượu mùi được sản xuất trên thế giới khác nhau chủ yếu bởi nguyên liệu sản xuất. Nguyên liệu sản xuất từ berry, từ chocolate, cà phê, kem, crème liquor, hoa, trái cây, thảo dược, mật ong, hạt, whisky và một số nguyên liệu khác như rum, brandy, lòng đỏ trứng, trà đen, …

1.5.2.8 Các loại rượu làm từ ngũ cốc khác

Hai trong số này, gin và vodka, có thị trường thế giới rợng lớn và cùng nhau chiếm hơn 30% lượng rượu chưng cất được tiêu thụ ở Hoa Kỳ. Gin được chưng cất từ các loại ngũ cốc lên men và có mùi thơm đặc trưng của quả bách xù hay mợt số loại thảo mợc khác, đợ cồn đóng chai bằng hoặc trên 40% v/v.

1.5.2 Phân loại đồ uống cồn không qua chưng cất

1.5.2.1 Bia

Ngày nay, thuật ngữ bia dùng để chỉ bất kỳ loại đồ uống nào được tạo ra bằng quá trình lên men đường có nguồn gốc chủ yếu hoặc hoàn toàn từ ngũ cốc đã xay nhuyễn và có hương vị hoa bia. Các hương liệu khác, chẳng hạn như anh đào, cam quýt, rau mùi, …được sử dụng cho một số kiểu bia nhất định.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 30<div class="page_container" data-page="30">

1.5.2.2 Rượu trái cây

Ở nhiều quốc gia, đồ uống có cồn được làm từ các loại trái cây khơng phải nho có vị thế kinh tế đáng kể. Đồ uống có cồn có thể được làm từ bất kỳ nguồn carbohydrate có thể lên men nào: trái cây, rau, ngũ cốc, rễ cây, mật ong, nhựa cây, lá và hoa, có hoặc khơng sử dụng các chất bổ trợ.

Rượu táo và rượu lê là nước ép lên men từ táo hoặc lê tươi nghiền và ép. Hầu hết mọi loại táo hoặc lê đều có thể được chế biến thành rượu táo hoặc rượu lê, tuy nhiên từ mỗi loại nguyên liệu tạo nên sản phẩm có đặc trưng riêng, được đánh giá dựa trên sự cân bằng của độ chua, vị ngọt, vị đắng, độ cồn, mùi thơm và hương vị.

1.5.2.3 Rượu vang

Rượu vang là một trong những đồ uống phổ biến và lâu đời nhất trên thế giới. Rượu vang là sản phẩm nước quả nho lên men. Hiện nay, các loại rượu vang phổ biến được ưa chuộng sử dụng nhiều nhất là rượu vang trắng, rượu vang đỏ, rượu vang hồng, và rượu vang sủi bọt. Chất lượng của rượu nằm phần lớn ở trái nho, vì vậy điều quan trọng là các thành phần chất hóa học của nho quyết định chất lượng của rượu vang và chúng phải được bảo quản trong suốt quá trình sản xuất rượu vang.

1.5.2.4 Rượu vang cường hóa và rượu mùi

Rượu vang cường hóa là loại rượu đã được thêm vào một loại rượu mạnh vào một thời điểm nào đó trong q trình sản xuất, để nồng độ cồn của nó khơng chỉ đạt được từ quá trình lên men. Nhiều loại rượu vang tăng cường, chẳng hạn như Port, rượu vang Bual, Malmsey Madeira và rượu mùi Muscat của Pháp, được sản xuất bởi cách thêm rượu mạnh vào q trình lên men, do đó làm tăng nồng độ cồn đồng thời để lại vị ngọt từ đường chưa lên men. Một số loại rượu vang cường hóa được tạo ra bằng cách thêm rượu sau khi quá trình lên men kết thúc.

1.5.2.5 Rượu vang thơm (Vermouth)

Rượu vang thơm là loại rượu đã được tạo hương vị bằng cách bổ sung các chất hydrocarbon thơm có nguồn gốc thực vật, các chất tạo hương được chiết xuất từ vỏ,

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 31<div class="page_container" data-page="31">

quả mọng, đầu hoa, lá hay hạt, đôi khi với sự hỗ trợ của nhiệt. Mục đích ban đầu để bảo quản rượu khỏi sự hư hỏng do vi sinh vật hoặc oxy hóa. Ngày nay, với kỹ thuật sản xuất rượu vang, vật liệu và thiết bị được cải tiến đáng kể, mục đích bảo quản ban đầu đã khơng cịn, nhưng hương vị của rượu vang thơm vẫn còn được ưa chuộng ở nhiều nơi trên thế giới.

1.5.2.6 Đồ uống từ ngũ cốc và các thức uống lên men khác của Châu Á, Châu Phi và Trung - Nam Mỹ

Những loại đồ uống này được làm từ các loại cây ngũ cốc, bao gồm lúa mạch, ngơ, lúa miến, gạo và lúa mì. Việc sản x́t loại đồ uống này là thơng qua q trình lên men tự nhiên và khơng qua q trình tinh chế, chỉ qua quá trình lọc đơn giản. Loại sản phẩm này chủ yếu được tiêu thụ ở dạng tươi (thường khi vẫn đang lên men) và có màu đục (đơi khi có đợ đặc của cháo) và do đó thường có hàm lượng tương đối cao của protein, carbohydrate, chất xơ và đường chưa lên men, cũng như nấm men và các vi sinh vật khác.

1.5.2.7 Các loại bia, rượu táo và rượu ít cồn và khơng cồn

Định nghĩa của thuật ngữ 'ít cồn' và 'khơng có cồn' là khác nhau trên khắp thế giới. Không cồn chỉ có thể được sử dụng để mơ tả đồ uống khơng có hàm lượng ethanol có thể phát hiện được ở Hoa Kỳ và ở Anh để chỉ đồ uống có hàm lượng ethanol có thể phát hiện được khơng quá 0,05%. Do đó, ở hai quốc gia này, hầu như tất cả các loại đồ uống này đều được coi là đồ uống có đợ cồn thấp. Ở Đức và các nước châu Âu khác, đồ uống có thể được coi là khơng có cồn nếu chúng có tối đa 0,5% ABV.

1.5.3 Yêu cầu quy chuẩn an toàn đối với sản phẩm đồ uống có cồn

Theo QCVN 6-3: 2010/BYT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia đối với các sản phẩm đồ uống có cồn, do Cục An toàn vệ sinh thực phẩm trình duyệt và ban hành theo Thông tư số 45/2010/TT-BYT ngày 22 tháng 12 năm 2010 của Bộ trưởng Bợ Y tế. Quy chuẩn có quy định các chỉ tiêu hóa lý về an tồn của các sản phẩm đồ uống có cồn. Hàm lượng methanol tối đa trong mợt số sản phẩm đồ uống có cồn được thể hiện bảng 1.1 [16].

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 32<div class="page_container" data-page="32">

Bảng 1.1 Chỉ tiêu mức hàm lượng methanol của một sản phầm đồ uống có cồn

Hầu hết sản phẩm rượu truyền thống tại Việt Nam là rượu trắng. Theo TCVN 7043:2013, rượu trắng được phân chia thành 02 nhóm gồm rượu trắng chưng cất và rượu trắng pha chế với các mức hàm lượng tối đa của các chỉ tiêu aldehyde (acetaldehyde), ester (ethyl acetate), methanol, rượu bậc cao (isobutyl alcohol, isoamyl alcohol) khác nhau giữa hai nhóm. Hàm lượng cho phép một số chỉ tiêu hóa học trong sản phẩm rượu trắng theo bảng 1.2 [17].

Bảng 1.2 Chỉ tiêu hóa học của sản phẩm rượu trắng

Rượu chưng cất Rượu pha chế

Hàm lượng aldehyde, tính theo acetaldehyde, mg/L ethanol ethanol 100%

tự công bố < 5

5 Hàm lượng este, tính theo etyl

acetate, mg/L ethanol ethanol 100% - < 13

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 33<div class="page_container" data-page="33">

1.6 Những tạp chất liên quan đến quá trình chưng cất

1.6.1 Hợp chất cacboxylic

Acid cacboxylic là những hợp chất hữu cơ trong phân tử chứa ít nhất mợt nhóm carboxyl liên kết trực tiếp với nguyên tử carbon hay hydrogen bằng liên kết cợng hóa trị.

Carboxylic acid trong rượu chưng cất có nguồn gốc từ q trình lên men chủ yếu là các acid đơn chức mạch hở từ C1 đến C18 (đa số là mạch nhánh) và một phần nhỏ là các acid thơm. Acid acetic chiếm phần lớn trong tổng số acid, theo sau là acdi decanoic acid octanoic và acid doecanoic.

Các acid được hình thành trong quá trình sinh tổng hợp hoặc quá trình phân hủy các acid béo và sự phân hủy các amino acid ở Saccharomyces trong điều kiện kỵ khí, số lượng tùy tḥc vào mỗi dịng nấm men. Điều kiện lên men không tối tưu cũng là nguyên nhân hình thành các acid, đặc biệt là acid acetic (do vi khuẩn acetic acid. Các acid thơm lẫn trong rượu có nguồn gogoc stuwf những thùng sồi dùng để bảo quản, chủ yếu là benzoic acid, o/p-hydrobenzoic acid, gallic acid, cinamic acid, ferulic acid, coumaric acid, syringic acid, vanillic acid,.. góp phần vào hương vị của rượu.

Trong rượu chưng cất, các acid có nhiệt đợ sơi cao hơn ethanol nên ra sau, quá trình chưng cất diễn ra càng dài tương ứng với hàm lượng acid càng cao. Hàm lượng acid cao trong rượu không đảm bảo chất lượng sản phẩm, acid acetic nhiều làm cho rượu có vị chua, sự hiện diện của các acid béo mạch ngắn tạo mùi vị khó chịu cho rượu, … TCVN 7043:2013 không quy định hàm lượng acid trong rượu chưng cất.

1.6.2 Este

Este là sản phẩm của phản ứng giữa acid (hữu cơ hoặc vô cơ) với alcohol. Este hữu cơ là dẫn xuất của carboxilic acid khi thay thế nhóm hydroxyl ở nhóm carboxyl bằng nhóm OR. Este trong rượu là sản phẩm của sự tổ hợp các acid carboxylic và alcohol, chủ yếu là các ethyl este.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 34<div class="page_container" data-page="34">

RCOOH + R’OH <-> RCOOR’ + H2O

Các este trong rượu chưng cất bao gồm este của carboxylic acid mạch hở từ C2 đến C18 và este của các acid thơm. Ethylacetate chiếm hơn 50% trong tổng số este. Ethyl formate tạo nên mùi thơm đặc trưng chi rum với hàm lượng dao động 5-35 mg/L. Este của acid thơm hiện diện ít nhất trong rượu chưng cất, chủ yếu là benzoate và ethyl phenylacetate.

Sự hình thành este giảm bớt mợt số đợc tính trong rượu gây nên bởi acid và alcohol độc hại. Este cũng được xem là nguồn dự trữ các acid và alcohol trong rượu. Sự có mặt của este tạo nên mùi hương đặc trưng cho các sản phẩm. TCVN 7043:2013 không quy định hàm lượng este trong rượu chưng cất.

1.6.3 Keton

Keton hay alkanone là những hợp chất hữu cơ có cấu trúc R(C=O)R’, với R và R’ là những nhóm thế chứa cacbon có thể giống hoặc khác nhau. Keton trong rượu chưng cất gồm các monoketon và diketon mạch hở từ C3 đến C14, đa ssoos là acetone. Ngoài ra, cị có các keton khác như butone, 2-pentanone, 3-penten-2-one, (E)-6-nonen-2-one, diacetyl, 2,3-pentanedione…

Các keton được hình thành chủ yếu do sự oxy hóa alcohol bậc hai được sinh ra trong quá tình lên men. Sự tạo thành keton làm giảm mợt số đọc tính cho rượu gây nên bởi các alcohol tương ứng.

1.6.4 Alcohol bậc cao

Alcohol bậc cao là những alcohol từ C3 trở lên lẫn tỏng thức uống có cồn. Rượu bậc cao trong rượu chưng cất thường là 1-propanol, 2-methylpropanol, 2-methylbutanol, 3-methylbutanol và phenethyl alcohol được sinh ra trong quá trình lên men bởi các phản ứng sinh hóa biến đổi carbohydrate và amino acid.

Khi vào cớ thể rượu bậc cao được chuyển hóa bởi ADH tạo thành các aldehyde và keton tương ứng, đợc tính (dựa trên giá trị LD50) tùy thuộc vào chất chuyển hóa.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 35<div class="page_container" data-page="35">

Chất chuyển hóa của isobutanol là 2-methyl propanal có giá tị LD50 nhỏ hơn (độ độc cao hơn) nên hàm lượng rượu bậc cao được tính theo isobutanol.

1.6.5 Furfural

Furfural là hợp chất hữu cơ có nguồn gốc từ phụ phẩm nơng nghiệp như bã mía, lõi ngơ, vỏ trấu, thân lau sậy, mùn cưa,… Furfural là một aldehyde dị vịng thơm, ở trạng thái lỏng dạng dầu, khơng màu, có mùi hạnh nhân. Furfural trong rượu được tạo ra từ quá tình dehydrate các pentose, chủ yếu là xylose khi lên men (xylose là sản phẩm phân hủy của hemicellulose, xylan,… và là sản phẩm chuyển hóa của glucose qua nhiều bước)

Nhiệt đợ sơi của furfural là 161,7 oC cao gấp đôi ethanol nên furfural ít gặp trong rượu chưng cất. Sự hiện diện furfural trong rượu chưng cất có thể do dịch lên men có hàm lượng cao furfural cao, q trình chưng cất diễn ra dài, nhiệt độ chưng cất cao,…

1.7.1.1 Phương pháp quang phổ Raman

Quang phổ Raman là một cơng cụ phân tích nhanh, khơng phá hủy mẫu, đáp ứng phân tích lượng lớn trong. Quang phổ Raman để xác định “dấu vân tay” dưới dạng phổ Raman của mỗi chất hóa học đơn lẻ, qua đó xác định các phân tử [18]. Quang phổ Raman được dựa trên sự dao động đặc trưng của các phân tử mẫu điều tra gây ra bỏi ánh sáng đơn sắc của laser. Sau khi bức xạ mẫu bằng ánh sáng đơn sắc chúng ta có thể quan sát ánh sáng phân tán, nhưng cũng có những bước sóng khác thay đổi nhỏ đặc trưng cho chất phân tích. Phương pháp quang phổ Raman được sử dụng để định lượng trực tiếp đồng thời ethanol và methanol trong mẫu rượu. Vạch phổ của mathanol, ethanol lần lượt xuất hiện tại 1019 cm-1 và 879 cm-1.

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 36<div class="page_container" data-page="36">

1.7.1.2 Phương pháp phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis)

Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UV-Vis) thường được sử dụng để định lượng methanol, ethanol và aldehyde. Nguyên tắc của phương pháp quang là sử dụng thuốc thử tác dụng với chất phân tích cho sản phẩm là dung dịch có màu, dung dịch này được đem đo đợ hấp thụ quang tại bước sóng thích hợp. Đợ hấp thụ quang của chất tỷ lệ thuận với nồng độ chất phân tích. Với acetaldehyde có thể tìm được thuốc thử để định lượng trực tiếp [15], với việc định lượng methanol và ethanol cần có bước oxy hóa trước có thể sử dụng các chất oxy hóa như KMnO4, Na2Cr2O7, KIO4, NaIO4 và các men sinh học, sau đó sử dụng thuốc thử để nhận biết các sản phẩm trung gian thu được.

1.7.2 Phương pháp sắc ký khí

Sắc ký khí (GC) là mợt q trình tách các chất trong mợt hỗn hợp ở trạng thái khí. Trong kỹ tht sắc ký khí, người ta có pha đợng được gọi là khí mang. Chất khí mang hay pha động để chạy sắc ký là một hỗn hợp của hai chất khí được trợn với nhau trong tỷ lệ thích hợp, cịn mẫu có thể ở trạng thái khí hay trạng thái lỏng hoặc rắn.

Phân tích khơng gian hơi (headspace analysis) là phương pháp lấy thành phần bay hơi tách ra từ mẫu rắn hoặc lỏng bằng cách đun nóng mẫu trong bình và hứng lấy chất bay hơi. Sau khi quá trình bay hơi cân bằng, tỷ lệ thành phần bay hơi ở bình chứa đại diện cho tỷ lệ ở trong mẫu. Người ta dùng xy lanh đưa thành phần bay hơi vào cợt sắc ký. Kỹ thuật này rất thích hợp để định lượng alcol hoặc dung môi trong mẫu máu, monomer trong sản phẩm polymer, hương liệu trong sản phẩm.

1.7.2.1 Phương pháp GC-FID

Phương pháp sắc ký khí (GC) kết hợp với detector ion hóa ngọn lửa FID cũng được sử dụng để phân tích đồng thời methanol và ethanol. Một nghiên cứu xác định và đánh giá methanol, ethanol và các chất có cồn cao hơn trong đồ uống có cồn. 96 mẫu rượu Raki của Thổ Nhĩ Kỳ, 8 mẫu bia, 1 mẫu rượu vang, 101 mẫu đồ uống mạnh khác và 2 mẫu ethanol công nghiệp đã được kiểm tra. Để phân tích định

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 37<div class="page_container" data-page="37">

lượng, 1 mL n-propanol (64 mg/dL) được chuyển vào lọ 22 mL-Headspace. Sau đó, 0,2 mL đồ uống có cồn được thêm vào. Lọ ngay lặp tức được đậy chặt nắp. Vì nồng đợ ethanol trong đồ uống có cồn rất cao, nên việc xác định ethanol trong dải hiệu chuẩn được tiến hành sau khi pha lỗng thích hợp với nước khử ion. Áp dụng phân tích trên hệ thống Headspace-GC-FID [19].

1.7.2.2 Phương pháp GC-MS

Phương pháp GC kết nối với detector khối phổ MS cũng hay được sử dụng trong phân tích methanol, ethanol và các sản phẩm chuyển hóa của chúng đối với mẫu trầm tích biển, có thể xác định methanol và ethanol bằng cách bơm trực tiếp vào hệ thống với giới hạn phát hiện lần lượt là 7,4 và 3,1 µM [20]. Trong mẫu rượu, Wang và các cộng sự đã sử dụng cột CP-Wax 58 CB, 30 m x 0.53 mm để định lượng methanol koảng tuyến tính rợng 0,002 mg/mL – 20 mg/mL. Savary và nhóm nghiên cứu của mình đã sử dụng kỹ thuật headspace vi chiết pha rắn, sợi chiết là Carboxen-PDMS để tách methanol và acid axetic ra khỏi nền mẫu. Mảnh ion được chọn để phân tích methanol là m/z 29 và acid acetic là m/z 43[21].

1.7.3 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)

Sắc ký lỏng là q trình xảy ra trên cợt tách với pha tĩnh là chất rắn và pha động là chất lỏng. Mẫu phân tích khơng được làm nóng tại cổng tiêm, được chuyển lên cợt tách dưới dạng dung dịch. Q trình tách dựa trên nguyên lý rửa giải hỗn hợp cần tách trong một cột chứa pha tĩnh là những tiểu phân nhỏ hơn 10 micromet bằng hệ dung mơi thích hợp dưới áp suất cao. Các cơ chế tách bao gồm: sắc ký hấp phụ, sắc ký phân tán, sắc ký trao đổi ion, sắc ký loại trừ kích thước.

Trong một nghiên cứu trước đây, Yarita và cộng sự đã xác định ethanol trong đồ uống có cồn bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao kết nối với detector FID, trong đó nước tinh khiết là pha động và pha tĩnh là (C30)- silica gel. Sử dụng cợt tách C30-UG-5 (150 mm  4,6 mm, kích thước hạt 5µ), ống mao quản (270mm 

40 µm). tốc đợ dịng chảy là 1mL/phút. Nhiệt đợ cợt và detector lần lượt là 35 0C và 350 0C[22].

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 38<div class="page_container" data-page="38">

1.7.4 Phương pháp điện hóa

Trong phương pháp vol-ampe vịng, thế điện cực làm tăng tuyến tính theo thời gian. Điện thế được đo giữa điện cực làm việc và điện cực so sánh, dòng điện được đo giữa điện cực làm việc và điện cực đối.

Sousa và cợng sự sử dụng phương pháp vol-ampe vịng với điện cực làm việc Pt-Au xác định đồng thời methanol và ethanol trong nhiên liệu ethanol. Ban đầu, khoảng tuyến tính được thực hiện bằng cách sử dụng các dung dịch chuẩn chỉ chứa ethanol hoặc methanol và ethanol cho thấy đợi tuyến tính tốt trong khoảng nồng đợ nghiên cứu (0,1%-0,5%). Các mẫu thực sau đó được phân tích sau khi pha lỗng dung dịch điện phân chứa 0,5 mol/L NaOH 0,1% (v/v) methanol. Ethanol được phát hiện ở điện thế (+1,20 V). Độ lệch chuẩn tương đối (n=8) là 0,9%, giới hạn phát hiện (LOD) của methanol là 0,045% (v/v)[23].

1.7.5 Các phương pháp vật lý xác định hàm lượng ethanol

1.7.5.1 Phương pháp đo tỷ trọng

Dựa trên nguyên lý tỷ trọng của dung dịch ethanol trong nước càng thấp khi hàm lượng ethanol trong nước càng cao, do đó đo tỉ trọng dung dịch sẽ suy ra được hàm lượng ethanol [24].

1.7.5.2 Phương pháp sử dụng cồn kế

Về bản chất đây là phương pháp đo tỉ trọng, đợ chìm của cồn kế trong dung dịch sẽ cho biết hàm lượng ethanol [24].

1.8 Kết luận về nghiên cứu tổng quan

1.8.1 Tình hình nghiên cứu trong và ngồi nước về

GC xác định acetone, acetaldehyde, athanol và methanol trong mẫu sinh học và tế bào nuôi cấy mô. Đạt được độ phân giải tốt, độ nhạy cao và mối tương quan tuyến tính giữa nồng đợ và diện tích pic của tất cả các hợp chất trong các nền mẫu. Tỷ lệ chọn trong ngày và trong ngày của phương pháp này ln dưới 15%. Đợ chính xác của phương pháp, được tính theo phần trăm của nồng đợ mục tiêu, nằm trong giới

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 39<div class="page_container" data-page="39">

hạn chấp nhận được. Giới hạn phát hiện thu được là dưới 0,85 mg/L đối với acetaldehyde và dưới 0,75 mg/L đối với các hợp chất khác. Phương pháp này dễ thực hiện, phù hợp với quy trình của các phịng thí nghiệm hóa sinh[22].

Một phương pháp đơn giản để xác định đồng thời acetaldehyde, acetone, methanol và ethanol trong khí quyển và nước tự nhiên. Phương pháp sử dụng kỹ thuật tiêm headspace và GC-FID đơn giản và chi phí thấp mẫu khí quyển và trong nhiều loại nước tự nhiên. Việc xử lý sơ bộ các mẫu nước là không cần thiết, giúp tiết kiệm chi phí và thời gian phân tích. Đợ thu hồi đạt u cầu (96-108%) và so sánh với phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng chứng thực đợ chính xác của phương pháp. Đợ chính xác tốt hơn 15% đối với mẫu kiểm soát chất lượng có nồng đợ thấp nhất được thử nghiệm và tốt hơn 8% đối với nồng độ cao hơn. Độ tuyến tính (r) tốt hơn 0,99 và giới hạn phát hiện đối với acetaldehyde, acetone, methanol và ethanol tương ứng là 0,20, 0,21, 1,45 và 0,41 µmol/L[25].

Phát hiện ethanol và acetaldehyde bằng phương pháp đơn giản và siêu nhạy huỳnh quang trong nền mẫu thực phẩm. Một thử nghiệm enzyme với chất mang màu huỳnh quang được trình bày. Việc phát hiện ethanol đã được cải thiện hơn nữa bằng cách thêm chất bán dẫn vào hỗn hợp phản ứng, chất này tương tác với AA và ngăn chặn tác dụng ức chế của nó đối với q trình oxy hóa ethanol. Các giới hạn phát hiện ethanol (0,5 mg/L) và acetaldehyde (0,9 mg/L)[26].

Nghiên cứu “Xác định hàm lượng ethanol, methanol, aldehyde trong một số mẫu rượu nếp chưng cất tại Kim Sơn, Ninh Bình” của tác giả Phan Thị Hương (2017). Nghiên cứu tiến hành theo một phương pháp là sử dụng cồn kế. Độ cồn xác định theo phương pháp sử dụng cồn kế có thể có sai số trong q trình đo do: khắc vạch trên cồn kế và nhiệt kế là 0,5; nhiệt độ trong bảng tra độ cồn là số ngun phải làm trịn số; nhiệt đợ khơng đảm bảo trong quá trình đo; sai số chủ quan khi đọc kết quả trên cồn kế và nhiệt kế,… nhưng có ưu điểm là thực hiện nhanh và đơn giản [24]. Nghiên cứu “Xác định methanol, ethanol và các sản phẩm chuyển hóa của chúng trong rượu và huyết tương người” của tác giả Nguyễn Thi Ngân (2018). Trong

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>Trang 40<div class="page_container" data-page="40">

nghiên cứu này 1H-NMR được sử dụng để phân tích đồng thời methanol, ethanol và các sản phẩm chuyển hóa của nó trong mẫu huyết tương. Sử dụng chất nội chuẩn IS là acid maleic. Đây là phương pháp nhanh, giới hạn định lượng có thể đạt được là 0,68 - 2.88 mg/L [27].

Xác định acetaldehyde, methanol và dầu fusel trong rượu chưng cất và rượu sake bằng kỹ thuật headspace kết hợp sắc ký khí. Cợt DB-Wax đã được sử dụng trong HS-GC, cho thấy độ tuyến tính tốt, đợ chính xác và đợ chính xác cao và LOQ và LOD thấp trên tất cả các hợp chất. Kết quả cho thấy rượu chưng cất chứa hàm lượng acetaldehyde cao hơn với giá trị 12,88–35,53 mg / L so với rượu sake (0,83–29,13 mg / L). Methanol chỉ được phát hiện trong một số loại rượu chưng cất với lượng nhỏ[28].

Nghiên cứu xác định ethanol trong đồ uống có cồn: Phân tích dịng chảy với đầu dị Amperometric so với máy đo phổ Raman cầm tay của nhóm tác giả Granit Jashari và cộng sự (2020). Một phép phân tích dịng chảy với cảm biến sinh học amperometric alcohol dehydrogenase và một máy quang phổ Mira-DS Raman cầm tay đã được so sánh để xác định ethanol trong các mẫu đồ uống có cồn khác nhau. Cảm biến sinh học được chế tạo từ điện cực carbon in màn hình làm đầu dị lưỡng tính và được phủ bởi một lớp mỏng gồm rượu dehydrogenase, graphene oxit một lớp khử, rhodium (IV) dioxide và glutaraldehyde. Cả hai tổ hợp đều được thử nghiệm trên phân tích rượu mạnh mận, rượu rum trắng, rượu vodka, rượu vang trắng và đỏ, bia đen mạnh và bia không cồn. Hai phương pháp phân tích cơ bản khác nhau đã được so sánh và một số hạn chế được tìm thấy, đặc biệt là trong trường hợp phân tích rượu vang đỏ và bia[29].

1.8.2 Nhiệm vụ đặt ra

Trong những năm gần đây, một số công trình nghiên cứu tập trung xác định ethanol, methanol và acetaldehyde. Các nghiên cứu trên sử dụng thiết bị GC với đầu dị FID cho phân tích đồng thời 2 hay nhiều chất trong nền mẫu rượu, nước, thực phẩm và nền mẫu sinh học. Tuy nhiên một số phương pháp phân tích cịn đơn giản và độ

1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM1402413069:17:52 PM9:17:52 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM140Thursday, June 13, 20249:17:53 PM9:17:53 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM140Thursday, June 13, 20249:17:54 PM9:17:54 PM

140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM140Thursday, June 13, 20249:17:59 PM9:17:59 PM

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

</div>

xác định ethanol methanol và acetaldehyde trong một số mẫu rượu địa phương bằng phương pháp gc ms

<b>GC-MS </b>

<b>LUẬN VĂN THẠC SĨ </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>LỜI CÁM ƠN </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>ABSTRACT </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>LỜI CAM ĐOAN </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>DANH MỤC HÌNH ẢNH </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>DANH MỤC BẢNG BIỂU </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>MỞ ĐẦU </b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

<b>CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN VỀ LĨNH VỰC NGHIÊN CỨU</b>

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

140hghieh euu eohg tae ke toah tau hou ehi uhi xah xuat va tihh gia thahh xah uham tai eohg ty eo uhah jueotee viet hcmThursday, June 13, 2024

Tài liệu liên quan

Tài liệu bạn tìm kiếm đã sẵn sàng tải về