Lựa chọn hệ biểu hiện để sản xuất protein ở vi khuẩn (Các chủng E. coli) pps

Lựa chọn hệ biểu hiện để
sản xuất protein ở vi khuẩn
(Các chủng E. coli )





Các chủng E. coli biểu hiện thịnh
hành
Một số chủng E. coli biểu hiện
thịnh hành
Chủng Đặc điểm nổi bật
AD494
đột biến trxB hỗ trợ
tạo cầu disulfide tại
vùng tế bào chất
BL21
bất hoạt
protease lon và ompT
BL21 trxB

đột biến trxB hỗ trợ
tạo cầu disulfide tại
vùng tế bào chất
bất hoạt
protease lon và ompT
BL21
CodonPlus-

RIL
hỗ trợ biểu hiện
protein eukaryote với
các codon hiếm như
AGG, AGA, AUA,
CUA
bất hoạt
protease lon và ompT
BL21 hỗ trợ biểu hiện
CodonPlus-
RP
protein eukaryote với
các codon hiếm như
AGG, AGA, CCC
bất hoạt
protease lon và ompT
BLR
đột biến recA làm ổn
định các vùng lặp
bất hoạt
protease lon và ompT
C41/ C43
đột biến dành cho biể
u
hiện protein màng
JM 83
tiết protein tái tổ hợp
ra vùng ngoại vi tế bào
chất
Origami B

đột biến trxB/gor hỗ
trợ cực tốt cho việc tạo
thành liên kết disulfide
ở tế bào chất
bất hoạt
protease lon và ompT
Rosetta-
gami
hỗ trợ biểu hiện
protein eukaryote với
các codon hiếm như
AUA, AGG, AGA,
CGG, CUA, CCC và
GGA
bất hoạt
protease lon và ompT
đột biến trxB/gor hỗ
trợ cực tốt cho việc tạo
thành liên kết disulfide
ở tế bào chất

Một số promoter biểu hiện
trong E. coli
Một số promoter biểu hiện trong
E. coli
Hệ biểu hiện
Mức độ biểu
hiện (chất cảm
ứng)

Đ
ặc điểm
nổi bật

lac promoter
từ thấp đến
trung bình
(IPTG)
bi
ểu hiện
y
ếu, có điều
khiển;
thư
ờng
thích h
ợp
đ
ể sản xuất
nh
ững sản
ph
ẩm có
n
ồng độ nội
bào r
ất thấp

chi phí
c

ảm ứng
khá cao
T7 RNA rất cao (IPTG) s
ử dụng T7
polymerase RNA
polymerase.
M
ức độ
bi
ểu hiện
rất cao
h
ệ thống
T7lac
có
th
ể kiểm
soát bi
ểu
hi
ện chặt
ch
ẽ trong
trư
ờng hợp
t
ạo chất có
tính đ
ộc tế
bào

chi phí
c
ảm ứng
khá cao, đ
bi
ểu hiện
nền thư
ờng
ph
ụ thuộc
cả vào
ch
ủng vi
khuẩn
Phage promoter
P
L

tương đối cao
(thay đổi nhiệt
độ)
c
ần chủng
vi khu
ẩn
riêng nh
nhiệt
đ
ộ biểu

hi
ện nền
cao
ở nhiệt
độ dư
ới
30°C

không c
ch
ất cảm
ứng
tetA promoter
từ trung bình
đến cao (an-
hydrotetracyclin)

đi
ều khiển
chặt.
Không ph
thu
ộc mức
đ
ộ trao đổi
chất v
à
chủng
E.
coli.

chi phí
c
ảm ứng
khá th
ấp.
Đ
ộ biểu
hi
ện nền
thấp
P
RBAD
promoter
từ thấp đến cao
(L-arabinose)
có th
ể vi
đi
ều chỉnh
m
ức độ
bi
ểu hiện.

chi phí
c
ảm ứng
th
ấp. Độ

bi
ểu hiện
n
ền thấp.
rha
PBAD
promoter

từ thấp đến cao
(L-rhamnose)
đi
ều khiển
ch
ặt. Độ
bi
ểu hiện
n
ền thấp

chi phí
c
ảm ứng
khá th
ấp