Kỹ Thuật nhân giống lan vũ nữ pptx

Kỹ Thuật nhân giống
lan vũ nữ





Lan vũ nữ là một loài hoa đẹp, có thể nở quanh năm, một cành
hoa có thể chơi được rất lâu từ 25 đến 40 ngày. Nhưng để có lan
vũ nữ đẹp thì không phải dễ nếu không biết trồng đúng kỹ thuật.
Xin giới thiệu kỹ thuật nhân giống lan vũ nữ bằng phương pháp
nuôi cấy mô để bà con tham khảo.

- Phương pháp nuôi cấy mô: Là phương pháp nhân giống lan trên
qui mô công nghiệp, nó có những ưu điểm vượi trội như giữ lại được
các ưu điểm nổi trội của cây mẹ, cây con không bị nhiễm bệnh, mầm
cây con lúc nào cũng có sẵn, nhưng nó đòi hỏi kỹ thuật cao và môi
trường nuôi cấy vô trùng
- Điều kiện nuôi cấy :Có nhiều môi trường khác nhau được dùng
như Knudson 's C, yamada,Singapo Mỗi nhà vườn trồng lan có thể
dùng các môi trường khác nhau với kinh nghiệm riêng. Tuy nhiên
cũng có thể thay đổi thành phần chút ít như giảm nitrat canxi xuống
500mg mỗi lít và thêm 500mg sunfat môn, hay nitrat môn thêm vào
250mg KCL mỗi lít rất cần thiết cho sự tăng trưởng các cơ quan.
Việc sử dụng các chất điều hòa sinh trưởng, như ANA với nồng độ
phần triệu (ppm), hoặc 2,4D 1 - 2 ppm rất phổ biến ở nhiều tác giả
khác nhau. Nên giảm nồng độ các chất điều hòa sinh trưởng trong
những lần cấy chuyền. Các chất chiết trái cây như nước cốt cà chua,
nước chuối, nước khoai tây nhưng chúng chỉ có hiệu quả trong các
lần cấy chuyền hơn là lần cấy đầu tiên, và thể tích cũng không quá
10% môi trường cấy.

Xaccaroz gây ra sự kích thích mô cấy đối với một số loài lan, và
ngược lại cũng gây ra sự ức chế đối với một số loài khác Citokinin
có hiệu quả gây sự mọc chồi với đa số loài và với nhiều bộ phận của
cây lan. Nhưng những loài hoặc những bộ phận của cây không chịu
ảnh hưởng của citokinin, chúng được thay thế bằng axit tranh-
cinnamic.
Nhiệt độ lý tưởng cho việc nuôi cấy là 260C + 3 . Ánh sáng nhân tạo
được cung cấp bởi 2 loại đèn huỳnh quang và đèn nóng sáng. ánh
sáng phải được sử dụng liên tục với quang kỳ 16 giờ giờ cường độ
cũng thay đổi từ 1.000 đến 2.000ml/ m2 khi cây bắt đầu lớn, cường
độ ánh sáng có thể tăng lên đến 18.OO0ml/m2 và quang kỳ giảm
xuống.
Các đèn phải đặc cách môi trường cấy 0,4 - O,5m.
+ Cách thử PH môi trường cấy :
Độ PH của môi trường thích hợp cho mô phát triển, trong khoảng
4,8 - 5,5, thông thường biên độ pH trong khoảng 5 - 5,2 là tốt nhất.
pH của môi trường có thể thử bằng các chất chỉ thị màu như:
- Bromo cresol green (Tetrabromo-in-cresol-sun- fonphtalein) với
liều lượng O,10g trong 7,15ml dung dịch hidroxit natri (NAOH)
N/50 pha loãng nưước tới 250ml, có màu xanh khi dung dịch trung
tính, vàng cam khi ph=5,4. Ở thời điểm này nhỏ 1 - 2 giọt
axitphôtphoric đậm đặc để giảm độ pH, và pH = 5,2 không nên để
pH môi trường xuống quá thấp dưới 4,8, nếu có trường hợp này xảy
ra ta tăng thêm dung dịch hydroxit potat để tăng độ pH
Hidroxit natri sunfonat alizirin (1g/1.OOOml nước) : có màu tím
chuyển sang màu vàng khi ph=5,2. Cong red tetrazodi -
phenilaptionat natri (lg/1.OOOml nưước) : có màu xanh ở ph=5,2.
Máy lắc :
Các kết quả về cấy mô cho biết rằng, môi trường lỏng được xáo trộn
trên máy lắc có hiệu quả hơn môi trường đặc. Tốc độ quay của máy

lắc thay đổi tùy theo loài lan và giai đoạn cấy. Trong giai đoạn đầu,
nhờ bộ phận biến trở, ta điều chỉnh máy lắc với tốc dộ 1/4 - 1/5
vòng/phút, tốc độ này nhằm mục đích làm cho môi trường dinh
dưỡng hòa đều, sau đó tốc độ tăng dần 100 vòng/phút
Thời gian của mô quay trên máy lắc có thể từ 3 - 4 tuần.
Các cách khử trùng :
Môi trường cấy và nước cất phải được tiệt trùng ở nồi hấp ở áp suất
15 PSI trong 10 - 30 phút.
- Các dụng cụ dùng cho cấy mô sau khi tiệt trùng ở nồi hấp; đều phải
được tiệt trùng sau mỗi lần dùng đến bằng cách nhúng cồn 900 rồi
hơ trên ngọn lửa, hoặc nhúng vào dung dịch Clorox. 10%, rồi nhúng
vào nước cất khử trùng.
Tủ cấy được khử trùng bằng đèn cực tím.
- Phòng nuôi mô được khử trùng bằng fomon.
- Chồi cấy mới cắt khỏi giả hành được bóc vảy khử trùng trong dung
dịch Clorox 10% trong 5 phút, sau khi cắt hết lá khử trùng trong
dung dịch Clorox 5% trong 5 phút, và cuối cùng cắt thành mô cấy
được khử trùng lần cuối cùng trong Clorox 1% trong 3 phút. Cũng
có thể dùng xà phòng rửa bề mặt chồi cấy, sau đó bóc vảy và khử
trùng trong Hipoclorit canxi 7% trong 15 phút. có thể dùng HgCl2
với nồng độ 0,1% trong 7 phút rất phải lọc cho mỗi lần dùng và có
thể pha chế sẵn để dùng cho những lần kế tiếp.
+ Vật liệu cấy :
Nhờ tiến bộ về khoa học, ngày nay trên thế giới người ta có thể cấy
nhiều bộ phận khác nhau của cây lan để hình thành các thể giống
protocorm, viết tắt là plbs, nhưng thể tích của mô cấy chỉ biến đổi từ
1 - 3mm3 . Mô cấy có thể là:
+Phân sinh mô đỉnh và phân sinh mô bên
+Đáy lá
+Đỉnh lá

+Hoa tự
+Nốt