Nghiên cứu chủng xạ khuẩn VN08A12 - Streptomyces toxytricini có tiềm năng ứng dụng trong xử lý bệnh bạc lá lúa và thân thiện với môi trường

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ



NGUYỄN ĐÌNH HẢI



NGHIÊN CỨU CHỦNG XẠ KHUẨN VN08A12 - STREPTOMYCES
TOXYTRICINI CÓ TIỀM NĂNG ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ
BỆNH BẠC LÁ LÚA VÀ THÂN THIỆN VỚI MÔI TRƯỜNG






LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ
NANÔ SINH HỌC








Hà Nội – 2012

ii

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ




NGUYỄN ĐÌNH HẢI



NGHIÊN CỨU CHỦNG XẠ KHUẨN VN08A12 - STREPTOMYCES
TOXYTRICINI CÓ TIỀM NĂNG ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ
BỆNH BẠC LÁ LÚA VÀ THÂN THIỆN VỚI MÔI TRƯỜNG


Chuyên ngành : Công nghệ Nanô sinh học
Mã số : Chuyên ngành đào tạo thí điểm


LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ
NANÔ SINH HỌC

NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC
TS. NGUYÔN §øC QUANG

Hà Nội – 2012




iii

 1
1.1.  1
 2
 3
2. 3
2.1.1. P ca x khun trong t  3
 3
 4
 5
 6
 6
2.2.2. 





(Chemotaxonomy) 7
2.2.3. 

 8
 8

2.2.5. 







16s rRNA 9
 11
2.3.  12
 15
2.5.  16
 17
 17
VN08A12 n men 17
 17
3.1.3.  17
3.1.4. 





 18
 18
 19

iv
 20
 20
 20

VN08A12 27
 30
3.2.4.  30
 32
4.1. 

VN08A12 32
4.1.1.  32
4.1.2.  33
4.1.3. 16S-



08-A12 38
4.2. Kt qu chn lp cho VN08A12 42
4.3. Kt qu th nghim ng ca sn phng VN08A12 n s
n c xanh 44
4.4. Kt qu th nghim ng ca sn phng VN08A12 n s
n ca chut bch 45
5 47
 47
 47
 48

v
DANH  


APM
MAPM

Modified Antibiotic Producing Medium 







CT

DNA
Deoxyribonucleic acid
NA
Nutrient agar
Xoo
Xanthomonas oryzae pv. oryzae
YM
Yeast - extract Mannitol
YS

Yeast - extract Soluble starch



vi




NG

STT

Trang

 14
 19
VN08A12 27
 VN08A12 33
4.1.3. 





16s   40
VN08A12 Xoo (D-d, cm) 42
Bng 4.3. ng ca sn phng VN08A12 n s 
n c xanh 44
Bng 4.4. ng ca sn phng VN08A12 n s 

n ca chut bch 46




















vii






STT


Trang

X. oryzae pv. oryzae -  18
VN08A12 32
 35
 37
4.1.3. 16S-



VN08A12 38
4.1.4. 



08-A12 

 41
4.1.4. 



08-A12 

 41
ng YS 43
ng 43
VN08A12  43

1







1.1. 
vi khun Xanthomonas oryzae pv. oryzae t trong
nhng b Vi  gii. Bnh
o   i 60% t  [4,8].
t nhiu bi

 s  bnh : chn ln
nh,  dit tr vi khu
bnh, [17]. , 


.
X khu
khu khum n sn xut t
c [20]. Gi c
ng c 10000 ch t
c sn xut t x khuu cht trong s 
c ng dn xut ru ch ra rng: c 1000
chng x khu   p m     ng 10 chng s sinh
ng s sinh tetracycline [2,3]. B ng x khun

{nhng chp ng t ca Vit Nam [14]} ti Bo
ng chun Vit Nam (Vi sinh hHQGHN) ha hn
tic m
vic khng ch t X. oryzae pv. oryzae nh b Vit
Nam hin nay.
, vic s dng x khu
 khng ch sinh hc (s dn phm t a
 c ch vi sinh vn tt
nh bn vu qu 
thin v mng. 







 , 
: VN08A12  Streptomyces toxytricini 
.



2

  trong
 
  

   .

3










2.1. T quan chung   
2.1.1. P ca x khun trong t 
 


- - 

- 7,5. 


 60 - 


               
Micromonospora, Actinomadura, Actinoplanes, Streptoverticillium,
Streptosporangium 

rosamixi. 
             
 


 Khuẩn lạc

    
 
  -1 m mm,
         




4

- 50 m
 
 


 
 -          

 
     


 Khuẩn ty



 
 Sporichthya

mm/


- 
e 

].


- 
.




5


ha

- 400 A
0














- 
- 120A
0
-
200A
0

0

0

 ax
- - 
   -               
 

 
 


Nhóm I- 2,6 diaminopimelic (L - ADP)




6
Nhóm II- 2,6 - diaminopimelic (m -


Nhóm III- 2,6 - diaminopimelic.
Nhóm IV        - 2,6 - diaminopimelic,



 

               



 - 
                 
               



            
                


2.2. C      































       

          



7








 

      
 

2.2.2. 





 (Chemotaxonomy)
  20 
 . 


 

- 

-  
 
-              



-  

          - metylloctade canoit (axit

- 




8



2.2.3. 




        



        
 

- 







                  -
 [32].
- 
()
*100
AB
SS
SM
d
SS
NN
S
N N N






Trong đó:
()AB
SM
S

S
N



d
N
u



9
S
N

: 
- 
()
*100
AB
S
J
d
S
N
S
NN



Trong đó:
()AB
J

S
: M
S
N
 
d
N
 



Streptomyces 
.
2.2.5. 







 16s rRNA
, 
       DNA      
  
  
 
 
  
   

  :















 (G+C)
Chi


: DNA

 
 





10












RNA riboxom

, 


Lai DNA: RNA
Protein














thanh















Polysacharid
Axit teichoic









Axitmycolic
Isoprenoid quinonomes
  

 
 
 

  NA 
 rRNA 



DNA
 rR



11
DNA 



NA 
NA  
 rRNA  
  
rRNA  (3000) nucleotide 
           NA     
nucleotide  

n  
rRNA  
 
 rRNA.

Chi Streptomyces 

- 10
- 

 Streptomyces 







Streptomyces



12


Streptomyces 
Nh 30
0
C,
- 



  Streptomyces

2.3. 
 


 










Streptomyces 


chloramphenicol, beta-    [13]    

 

          




 

            
glycopeptides, beta-lactams, macrolides, nucleosides, peptides, polyenes, polyethers
               



13
        
 
 [10]. 2.1 























 



.



14
2.1.  



15
2.4. B         
Bvi khun Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) t
trong nhng b Vi  gii.
Do tn tht nng n ca bnh Xoo c kinh b
m s n ca vi khut
ch  thc hic qua s d
ng ch sinh hc.
 Kinh bc Bordaux
trn vng hon hc dit n
th-t s thut nm
c ch vi khun X. oryzae m
[8]. , 










nh Xoo m
hiu qu  n th vi khunh r

 
 


n tng X. ryzae pv. oryzae c.
 nh, 

  

 hi
ca bnh b   n nay, kho    nh b  
nh dng [17,23] trong s Xa4 và Xa5 và Xa7 
 Xoo 






 Xoo
  [25,28], d     
, 
[17]. , 
















 . 
 
 .  , 






 . 

       
 Xoo  

.



16
2.5.  

















 


, , 












.
              
Pseudomonas P. fluorescens Bacillus Bacillus
spp, B. lentus, B. cereus B. circulans
    X. ryzae pv. oryzae     c bi   chng
P.fluorescens    u      ,4-diacetylphloroglucinol,
 
-

c 
Bacillus009), Vasudevan (2002)
21-5
 Lysobacter antibioticus 13-

X. ryzae pv. oryzae. Ch 
n ca X. ryzae pv. oryzae hiu qu i 69.7%. Nhng th nghing
rung cho thy hiu qu m s t ca X. ryzae pv. oryzae  59.1-
73.5%. Hiu qu c ch X. ryzae pv. oryzae ca chng Lysobacter antibioticus 13-


X. ryzae pv. oryzae 
2009 S. 













 Streptomyces noursei 
 Bacillus sp.,
Staphylococcus aureus, E. coli, , Pseudomonas sp.Micrococcus 








Xanthomonas oryzae [12]. Nhng kt qu c

 ra rng: 

















 










.

17



VN08A12 
VN08A12 -
   . S  n men  VN08A12     
  MAPM       
C  (Hoa et al, 2012).
Xanthomonas oryze pv. oryzea 









 : Micrococcus luteus, Escherichia coli, Bacillus
cereus  Saccharomyces cerevisiae  2  : Azotobacter 
Pseudomonas puttida 

3.1.3. Xoo




,  10  Xoo 
 1 10 



 , 



 , 












 . 



























(Phan 







,
2003) [29].

18

 X. oryzae pv. oryzae - 

Xoo( 
 
Xoo .
3.1.4. 

 






  Fabaceae).     

VN08A12 


- 
 





 
nay.

3.1.5
.