Nghiên cứu khả năng tạo chất diệt khuẩn Enterocin P tái tổ hợp nhằm ứng dụng trong bảo quản thực phẩm202238

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN




Phạm Thùy Linh




NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG
TẠO CHẤT DIỆT KHUẨN ENTEROCIN P TÁI TỔ HỢP
NHẰM ỨNG DỤNG TRONG BẢO QUẢN THỰC PHẨM







LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC

Hà Nội - 2011

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN


Phạm Thùy Linh




NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG
TẠO CHẤT DIỆT KHUẨN ENTEROCIN P TÁI TỔ HỢP
NHẰM ỨNG DỤNG TRONG BẢO QUẢN THỰC PHẨM


Chuyên ngành : Vi sinh vật học
Mã số : 62 42 40 01

LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC




NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC:

1. PGS.TS Trương Nam Hải
2. GS. TS Phạm Văn Ty





Hà Nội – 2011

1

MỞ ĐẦU
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botulinum, C. perfringens, Campylobacter jejuni, Listeria monocytogenes, Vibrio
parahaemolyticus, Bacillus cereus, Toxoplasma gondii  Escherichia coli
O157:H7 [53]. -6
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2

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 C. perfringens, C. botulinum, S. aureus và đặc biệt là L. monocytogenes.
EntP 
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cứu khả năng tạo chất diệt khuẩn enterocin P tái tổ hợp nhằm ứng dụng trong bảo
quản thực phẩm
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“Nghiên cứu công nghệ sản xuất và sử dụng chất diệt khuẩn sinh học (nisin và
enterocin) dùng trong bảo quản nông sản thực phẩm”.

3

CHƢƠNG 1
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. TỔNG QUAN VỀ BACTERIOCIN
1.1.1. 

  

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trong  
do 
[25, 34, 43]. Bacterio
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[17, 86, 87]
 . 
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
 th Lactobacillus [53].

[86]

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 
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[31]. T
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sackacin 674), trong plasmid (pediocin) [91]      

4

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So sánh bacteriocin và các kháng sinh dùng trong y tế [25]
Đặc tính
Bacteriocin
Kháng sinh
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5

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1.1.2.1. Bacteriocin của vi khuẩn Gram âm

V         bacteriocin     
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
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6

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M             
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, 1,177 kDa, [87].

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  cho

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,   [85,
87].
1.1.2.2. Bacteriocin của vi khuẩn Gram dƣơng
acteriocin do 
   vi         

[67]:




7

Bảng 1.1. Phân loại bacteriocin của vi khuẩn Gram dƣơng
Lớp
Đặc điểm
Phân lớp

Đại diện
L

-
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
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 2,1 kDa)
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Nisin Z
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Mersacidin
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Plantaricin EF

Plantaricin JK
Lactococcin 972




Helveticin J
Millericin B
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
lipoprotein

Lactocin 27
Lacstrepcin

Lớp I: Lantibiotic
amino
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- Phân lớp Ia
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- Phân lớp Ib
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8

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Lactococcus lactis subsp. lactis [50, 56] 
L. lactis  [21, 22], nisin

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  
 [33].
Lớp II
              
lanthionine (non-amino acid 
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 
:
- Phân lớp IIa
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48 amino acid     amino acid       
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[34]
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             B. cereus, C.

perfringens, S.

aureusL. monocytogenes [25, 34]. 

9

, sackacin P,
1.2 [37].
Bảng 1.2. Một số bacteriocin thuộc phân lớp IIa
Bacteriocin
Vi khuẩn sản xuất
Loài Chủng
Carnobacteriocin B2
Curvacin A
Divercin V41
Divergicin M35
Enterocin P
Enterocin A
Leucocin A
Leucocin C
Mundticin
Mesentericin Y105
Plantaricin 423
Pediocin PA-1
Pediocin AcH
Pediocin SJ-1
Piscicolin 126
Sakacin P
Sakacin A
Carnobacterium piscicola LV17

Lactobacillus curvatus LTH1174
Carnobacterium divergens V41
Carnobacterium divergens M35
Enterococcus faecium P13
Enterococcus faecium CTCA92/T136
Leuconostoc gelidum UAL 187
Leuconostoc mesenteroides TA33a
Enterococcus mundtii ATO6
Leuconostoc mesenteroides Y105
Lactobacillus plantarum 423
Pediococcus acidilactici PAC 1.0
Pediococcus acidilactici AcH
Pediococcus acidilactici SJ-1
Carnobacterium piscicola JG126
Lactobacillus sakei 674
Lactobacillus sakei 706

- Phân lớp IIb: 
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
[9, 23].


- Phân lớp IIc
              
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Lớp III


10


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hay lactacin B do L. acidophilus sinh ra
[17, 80].
Lớp IV
              
glycoprotein (lactocin 27) [94]  [69].  


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
[66]. C
AS-E. faecalisC. beijerinckii ATCC25752),
L. gasseri LA39)
1.1.3. 
Bacteriocin  
 
   
nucleic (DNA, rRNA RNA) [86].
Bac 
 Lactococcus 
LactobacillusLactococcus, ,
 : Actinomyces, Bacillus,
Clostridium, Corynebacterium, Enterococcus, Gardnerella, Lactococcus, Listeria,
Micrococcus, Mycobacterium, Propionibacterium, Streptococcus,    
       Campylobacter, Haemophilus, Helicobacter 
Neisseria [76, 86]. Klaenhammer  


11

[67]. Q
 : (i) 
h                

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
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B) bacteriocin 

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 L. monocytogenes, S. aureus, C. perfringens, C. botulinum.   

12


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1.1.4. 
 
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 [88].
1.1.4.1. Ứng dụng bacteriocin trong bảo quản thực phẩm
T 
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13

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 
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vitamin,    
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
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L. plantarum, L. pentosus, L. sake, L. curvatus,
L. pentosaceus, L. acidilactic 

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[17]:
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in situ). 
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14

Sử dụng chủng sinh bacteriocin làm giống khởi động
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AS-m 
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B. cereus [32, 53].
Sử dụng chủng sinh bacteriocin làm probiotic
            
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                 

        [40]         

p L. acidophilus 

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               
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              
 

15

Helicobacter pylori, E. coli Salmonella [44, 53].
1.1.4.2. Ứng dụng bacteriocin trong y tế và chăm sóc sức khỏe


 
  
          
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 .  
, bacteriocin 

[81, 86].
1.1.4.3. Ứng dụng bacteriocin trong nông nghiệp
-


 



 

 

 
              
Agrobacterium radiobacter K48 sinh ra,     Agrobacterium
tumifaciens [65].


16

Magnusson 

 Aspergillus fumigatus    
     [71]          
Pseudomonas syringae   V. inaequalis [27].

1.2. ENTEROCIN P
1.2.1. Enterococcus: VENTEROCIN
Enterococcus 
LAB. Enterococcus 


Enterococcus,  
E. faecalis E. faecium [38]. Enterococcus
, 
    [71].     
 Enterococcus       


  E. faecalis E. faecium.
Enterococcus 

 
[71]Enterococcus, E. faecium 
 [93].
Enterococcus  
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17

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
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amino acid 
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18

Bảng 1.3. Hoạt tính kháng khuẩn của enterocin P tinh sạch từ dịch nuôi chủng
E. faecium P13 [21]
Loài / Chủng
MIC
(ng/ml)
Loài / Chủng
MIC
(ng/ml)
Lactobacillus acidophilus ATCC 4356

-
E. faecalis TNO EF
238
L. bulgaricus ATCC 11842
-
S. carnosus TNO MC1
139
L. casei ATCC 334
-
Listeria innocua TNO BL86/26
395
L. curvatus NCFB 2739
17
B. cereus ATCC 9139
286
L. fermentum ATCC 9338
1
Clostridium sporogenes TNO C22/10
4
L. helveticus ATCC 15009
-
C. tyrobutyricum TNO 3,5CT
NCDO 1754
559
L. plantarum CNDO 1193
-
412
L. reuteri DSM 20016
-
Propionibacterium sp. TNO P4

NO P6
37
L. sake NCB 2714
ASC 148
144
26
-
C. perfringens CECT 376
4
L. salivarius NCFB2747
-
C. botulinum CECT 551
259
Pediococcus acidilactici ASCL50
ASC 347
69
L. monocytogenes NCTC 7973
FVM LI5sv1/2
NCTC5105
FVM LI1sv4
FVM Scott A
35
-
33
P. pentosaceus TNO FBB61
TNO FBB63
TNO PC1
136
18
18

39
-
125
Leuconostoc cremoris TNO DB1275
-
Staphylococcus aureus FRI137
FRI 196E
FRI 349
FRI 361
FRI 472
190
L. cremoris INRA CNRZ117
-
407
L. lactis INRA CNRZ148
-
221
L. lactis INRA CNRZ150
-
294
L. lactis ASC BB24
22
269
Enterococcus faecium ASC T136
2



 
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19

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
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  trong khi         -mimicking
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Hình 1.1. Cấu trúc không gian của bacteriocin phân lớp IIa



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20

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[60]. 
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[34
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1.2.4. 
B   
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 


97

permease annose (mannose permease) [19, 34, 80,
52]  




21

Hình 1.2. Cơ chế tác động hai bƣớc của bacteriocin phân lớp IIa
AB, C, D: Cc protein IIAB, IIC, IID 
nose phosphotransferase system - man-PTS).

t
 (man - PTS).
bacteriocin 
-
V() 

80].

E. faecium 
ntP, Herr



52]. NHerranz 
          EntP     



1. Bacteriocin t 
 
g

22

             









Hình 1.3. Cơ chế tác động của bacteriocin phân lớp IIa trên màng tế bào [80]

1.2.5. 
nh si
             
cho

 

 g
             
[15]
[60]
        
[19]. 
 



Bacteriocin




23


                  



[96]
[37]. 












Hình 1.4. Cơ chế bảo vệ của tế bào chủ [35]
- 
 



- 
 





T
