THIẾT KẾ MỒI PCR VÀ XÂY DỰNG VECTOR BIỂU HIỆN GEN SINH ENZYME β-LACTAMASE Ở TẾ BÀO VI KHUẨN BACILLUS SUBTILIS. (2)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI
THIẾT KẾ MỒI PCR VÀ XÂY DỰNG VECTOR BIỂU HIỆN GEN SINH ENZYME β-
LACTAMASE Ở TẾ BÀO VI KHUẨN BACILLUS SUBTILIS.
GVHD: TS.LÊ QUANG HÒA
SVTH : Nguyễn Thị Diệp 20112848
Trần Thị Linh 20113543
Bùi Trung Hiếu 20112988
Mục lục
I. Tổng quan
II. Thiết kế mồi PCR
III. Xây dựng vector biểu hiện
Tài liệu tham khảo
I. Tổng quan
β-lactamase
-β-lactamase là một enzyme được một số vi khuẩn sinh ra để kháng các kháng
sinh thuộc họ β-lactam.
- Một số chủng có khả năng sinh β-lactamase đã được phát hiện: E.cloacae,
S.marcescens, P.aeruginosa, B.subtilis,….
I. Tổng quan
Nguồn gen
-Vi khuẩn B.subtilis BEST7003 phân lập từ đất
-Vị trí gen: nucleotide thứ 2014727-2015647
II.Thiết kế mồi PCR
Xác định trình tự gen đích
Xác định trình tự gen mã hóa protein enzyme
Thiết kế mồi
Thiết kế mồi
Kiểm tra sự bắt cặp của mồi với genome
Kiểm tra sự bắt cặp của mồi với genome
III. Xây dựng vector biểu hiện
Vector sử dụng

Kiểm tra enzyme không cắt trình tự gen đích
Kiểm tra enzyme không cắt trình tự gen đích
Kiểm tra enzyme không cắt trình tự gen đích
Trình tự gen đầu vào

GATATC

ATGAAGTTGAAAACTAAAGCGTCAATAAAATTCGGAATATGTGTTGGGCTTTTATGTTTAAGCATTACTG

GTTTCACACCTTTTTTCAACTCAACACATGCCGAAGCAAAATCCATAGAAGACACAAACATGGCAAGCTG

TATAACGAATAAAAAATTTGTTCAACTTGAGAAAAAATTTGATGCCAGGCTTGGTGTTTATGCAATTGAT

ATAGGTTCAAACAAGACAATCGCCTATCGGCCGAATGAACGATTTGCTTACGCATCAACCTATAAAGTTC

TAGCCGCAGCTGCTGTCCTGAAGAAAAACTCAATTGAAAAACTTAATGAAGTCATCCACTACAGCAAGGA

CGATCTTGTTACATATTCTCCAATCACAGAGAAACACCTAGATACAGGCATGAGCCTAAAAGAAATCTCG

GAAGCGGCTATCCGTTACAGCGATAATACCGCTGGGAACATCTTGTTGCAACAGCTTGGCGGCCCTAAAG

GTTTTGAAAAGTCACTGAAACAGATTGGGGATCATGTAACGAAAGCTAAACGATTCGAGACGGATCTAAA

CTCTGCGATTCCTGGTGATATTCGTGACACCAGCACCGCAAAAGCACTGGCAACCGATCTTAAAGCCTTC

ACTTTAGATAACACTCTCACGACTGACAAACGCATGATCTTAACCGATTGGATGCGAGGCAATGCTACTG

GTGACGAACTGATTCGGGCAGGCGCTCCAATAGGATGGGAAGTCGGCGATAAATCCGGAGCCGGAAGTA


CGGGACACGAAACGACATTGCTATCGTTTGGCCGCCAAACAGAGCTCCTATTGTTGTGGCAATTCTGTCA

AACCGCTTTACGAAAGATGCTAATTATGATAATGCTCTTATCGCTGAGGCTGCAAAAGTCGTCCTTAACG

ATCTCAAATAA

CTCGAG
Tính lại mồi
Các công cụ sử dụng
/> /> /> /> /> />
THANH KIU !