TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ
KHOA THỦY SẢN
LÊ THỊ NHƢ NGỌC
NGHIÊN CỨU MỘT SỐ LOẠI THẢO DƢỢC PHÒNG
BỆNH VI KHUẨN Streptococcus sp. TRÊN CÁ RÔ
(Anabas testudineus)
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
NGÀNH BỆNH HỌC THỦY SẢN
2013
TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ
KHOA THỦY SẢN
LÊ THỊ NHƢ NGỌC
NGHIÊN CỨU MỘT SỐ LOẠI THẢO DƢỢC PHÒNG
BỆNH VI KHUẨN Streptococcus sp. TRÊN CÁ RÔ
(Anabas testudineus)
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
NGÀNH BỆNH HỌC THỦY SẢN
CÁN BỘ HƢỚNG DẪN
Ts. TỪ THANH DUNG
2013
i
LỜI CẢM TẠ
Để hoàn thành tốt đƣợc luận văn này tác giả xin bày tỏ lòng biết ơn sâu
sắc và chân thành nhất gửi đến:
Ts. T Thanh Dung - B môn Bnh Hc Thy Sn - Khoa Thy Sng
i hc C ng dn trong sut quá trình tri
n quý báu trong sut thi gian thc hi tài và hoàn thành tt
lu
Quí Thy, Cô và cán b Khoa Thy si hc C, o mi
u kin thun li cho tôi hoàn thành lu
Tp th các bn lp Bnh hc Thy sn - Khóa 36, anh Nguyn Bo Trung
(Bnh hc Thy sn - t nhiu trong quá trình thc hin
tài này.
Cui cùng, tôi xin bày t lòng bii tt c tm lòng kính trn anh
ch i thân ca tôi luôn quan tâm và ng viên tôi
trong sut thi gian qua.
ii
TÓM TẮT
c thc hin nhm so sánh tính nhy ca mt s loi thi
vi vi khun Streptococcus sp. và tìm hiu kh bnh do vi
khun trên cá rô (Anabas testudineus) ca mt s loi thc. Kt qu thu
c c l thch vi chit xut c mc và dip h châu có
tính kháng khun khá mnh i vi vi khun Streptococcus sp. (vòng tròn
kháng khung nhau). Tuy nhiên, dip h châu có tính nhy cao vi
lá i có tính kháng khun rt yu vi
chng vi khun thí nghim. P ch không
mang li kt qu. Thí nghim tìm hiu kh nh ca thi
vi b thân do vi khun Streptococcus c b trí vi 7
nghim thc (NT1 là nghim thi ch
sung thc), NT2 và NT3 b sung chit xut c mc nng
lt là 3 ml và 6 ml/kg thng t cho NT4 và NT5 b sung dip
h châu và NT6 và NT7 b sung lá i). Sau 3 tum tra các ch tiêu
huyt hc t 1 n dc hiu các
nghim thc, kt qu s ng t bào hng cu, tng t bào bch cu và t bào
bch c tt c nghim thi chng.
n hành cm nhim vi vi khun Streptococcus sp. m vi khun
10
5
CFU/ml (lp li 3 ln). S dng cá t thí nghi b trí
cho các nghim thc. Kt qu cho thy t l sng ca cá sau cm nhim vi vi
khun Streptococcus sp. cao nht NT4, NT5 và NT6. Còn NT2 có s cá cht
nhiu nht. Tin hành lc kt qu nghim th
chit xut dip h châu và c mc 6 ml có s ng t bào hng cu, tng t
bào bch cu và t bào bch c m thc còn li. Lá
i có tác dng thp nht trong 3 loi thc.
iii
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam kt lu c hoàn thành da trên các kt qu
nghiên cu ca tôi và các kt qu ca nghiên cc dùng cho bt
c lup nào khác.
Cgày
Ký tên
iv
MỤC LỤC
LỜI CẢM TẠ i
TÓM TẮT ii
MỤC LỤC iii
DANH SÁCH BẢNG vi
DANH SÁCH HÌNH vii
DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT viii
CHƢƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ 1
1.1 Gii thiu 1
1.2 Mc tiêu c tài 2
1.3 Ni dung c tài 2
CHƢƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3
2.1 m sinh hc cá rô 3
2.2 Mt s bnh trên cá rô 4
2.3 Tng quan bnh do vi khun Streptococcus sng vt thy sn 5
2.4 c b 6
2.5 Thí nghinh LD
50
ca vi khun Streptoccocus sp. gây b
thân trên cá rô (Anabas testudineus) 7
2.6 Tng quan v thc 8
2.6.1 c v thc 8
2.6.2 Tình hình nghiên cu thc trên th gii 8
2.6.3 Tình hình nghiên cu thc ti Vit Nam 9
2.7 Tng quan thc c nghiên cu 12
2.7.1 Lá i 12
2.7.2 C mc 13
2.7.3 Dip h châu 15
2.7.4 t tách thc c nghiên cu 16
CHƢƠNG 3: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18
3.1 m và thi gian thc hin 18
v
3.2 Vt liu nghiên cu 18
3.3 u 19
3.3.1 Phc hn 19
3.3.2 nh danh vi khun 18
3.3.3 B trí thí nghim 19
a.Thí nghim 1: Kim tra tính nhy ca thc (lá i, c mc và dip h
châu) trên vi khun Streptococcus sp. 19
b.Thí nghim 2: Tác dng ca thc phòng b
(Anabas testudineus) 20
3.4 nh mt s ch tiêu huyt hc 23
3.4.1 ng hng cu 24
3.4.2 nh loi các t bào bch cu 24
3.5 m tra bnh 24
3.6 Ph lý s liu 25
CHƢƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26
4.1 Kt qu thí nghim kim tra tính nhy ca th c trên vi khun
Streptococcus sp. 26
4.1.1 ch 26
4.1.2 c l thch 26
4.2 Kt qu thí nghim tìm hiu tác dng ca thc phòng b
thân trên cá rô (Anabas testudineus) 28
4.3 Kt qu ng ca chit xut thc lên các ch tiêu huyt hc
cc và sau cm nhim vi khun Streptococcus sp. 31
4.3.1c cm nhim 31
4.3.2 Sau cm nhim 34
4.4 Kt qu tái phân lnh danh vi khun 38
CHƢƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 40
5.1 Kt lun 40
xut 40
vi
TÀI LIỆU THAM KHẢO 41
PHỤ LỤC A 49
PHỤ LỤC B 52
PHỤ LỤC C 53
PHỤ LỤC D 54
PHỤ LỤC E 61
vii
DANH SÁCH BẢNG
Bng 2.1 m hình thái, sinh lý, sinh hóa vi khun gây bnh n
trên cá rô 7
Bng 4.1 ng ca n pha loãng dch chit lên kh
khun 26
Bng 4.2 S ng t bào hng cc và sau cm nhim 35
Bng 4.3 S ng tng t bào bch cu và t bào bch cc và
sau cm nhim 37
viii
DANH SÁCH HÌNH
ng 3
Hình 2.2 Cây i 12
Hình 2.3 Cây c mc 13
Hình 2.4 Cây dip h châu 15
Hình 2.5 tách chit thc bng h thng Soxhlet 17
Hình 3.1 b trí thí nghim 23
Hình 4.1 Kt qu th nghim tính kháng khun ca thc vi vi khun
Streptococcus các n khác nhau. A: Kt qu vòng kháng khun ca
dip h châu. B: Kt qu vòng kháng khun ca c mc. 27
Hình 4.2 Biu hin ca cá bc và sau khi gii phu. A: Cá xut hin các
; B: Ni tng bên trong b xut huyt 28
Hình 4.3 T l cá chm nhim vi khun Streptococcus
sp. 30
Hình 4.4 So sánh s ng t bào hng cu ca các nghim thc sau 3 tun. 31
Hình 4.5 So sánh s ng tng t bào bch cu ca các nghim thc sau 3
tun 33
Hình 4.6 S ng t bào bch ca các nghim thc sau 3 tun. 34
Hình 4.7 T bào bch cu trong mu máu cá bnh (A: T bào bch c
nhân; B: T bào lympho) (100X) 34
Hình 4.8 S ng t bào hng cu ca các nghim thc sau cm nhim. 36
Hình 4.9 S ng tng t bào bch cu ca các nghim thc sau cm nhim. 37
Hình 4.10 S ng t bào bch cu ca các nghim thc sau cm
nhim. 38
Hình 4.11 T bào máu ca cá b nhim bnh vi khun Streptococcus sp. vi
khun ri rác gia các t bào hng cu trong máu ca cá bnh (100X) 38
Hình 4.12 Kt qu phân lp vi khun t cá có du hiu b
khun Streptococcus c cm nhim; B: Vi khuc phân lp sau cm
nhim. 39
Hình 4.13 Kt qu nhum Gram (Vi khuu) (100X) 39
ix
DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT
BC: Bch cu
CM: C mc
DHC: Dip h châu
ng bng sông Cu Long
i chng
ng vt thy sn
HC: Hng cu
OI: i
NT: Nghim thc
TBC: Tng bch cu
Tb: T bào
1
CHƢƠNG 1
ĐẶT VẤN ĐỀ
1.1 Giới thiệu
Cá rô (Anabas testudineus) là loài cá bng bng sông Cu Long
có th sng các thy vc ngc l. Chúng phân
b nhiu quc gia trên th gi, Trung Quc, Philippin, Thái
Lan, Lào, Campuchia, Vit Nam và nhiu quc gia châu Á khác (Fishbase,
2010). Cá có th c nuôi theo nhiu hình thc khác nhau và quan trng là
có giá tr kinh t c nhing (Nguy
và ctv, 2005). Ti Vic nuôi ph bin các t
ng Tháp, C
t Long, 2003). Theo Tng cc Thy si vi các loài cá c
ngt trong khong 10 thá 2013, bnh xut hin ti 65 xã thuc
25 huyn ca 10 tnh. Tng din tích b bnh khong 326,5 ha trên các loài cá
cá trm, cá chép, cá mè, cá trôi, cá rô phi, cá ng, cá lóc. Trong s
nhng tác nhân gây bng vt thy sn thì bnh do vi khun chim t
l khá lnh do nhóm vi khun Streptococcus spp. hi
gây nguy him trên nhiu loài cá nuôi và
thit hi ln cho ngành nuôi trng thy sn, gây cn tr phát trin công nghip
sn xut gim (Evans et al., 2006). B
thân do vi khun Streptococcus gây ra là bnh truyn nhim nghiêm trng xut
hing nuôi thâm canh không mang tính cht mùa v ng
xy ra n cá nuôi t 2n 60 ngày tui, tt c các vùng nuôi cá rô
ng thâm canh bnh xut hin và din bin rt nhanh, cá cht bu t ngày
th 2 khi có du hiu cá gi gây thit hi t 40-70%, cá bit có nhng
ng hp lên ti 90-100% (Noga, 2010 và Nguyg Duy, 2011).
Hin nay, vic s dng thuc kháng sinh và hóa chc xem là bin pháp
ph bin u tr bnh vi khung nuôi thy sn. Tuy nhiên,
vic s dn hing kháng thuc ngày càng nghiêm
trng. Bên có, nó còn gây tác hi rt lng, tt,
thuc kháng sinh có trong các sn phm t thy sn n sc khe
i.
i phi có nhng gii pháp mu
tr bng vt thy sn nói chung và trên cá rô nói riêng. Nh
gng s dng tht gi bn
cao, rt cn thit nhm bo cho s phát trin bn vng ca ngh nuôi thy
2
sn (Ph2006). Vic nghiên cu v thc quan tâm
t rt sm, Hà Ký và ctv (1995) phi ch thành công thuc KN-04-12 mà
thành phn ch yu là các cây thuc và vitamin vi t l rt thp. Hay Bùi
Quang T (1998) nghiên cu dùng ht cau tr giun tròn ký sinh trong rut
cá trê (Clarias batrachus). Tuy vy, có nhiu loi thc nghiên
cu trong thy sn. Tng cá rô b bnh do vi khun
Streptococcus sp. gây ra, hi t công trình nghiên cu khoa hc
nào tìm hiu v kh bnh vi khun bng thi
ng này c thc hin và công b. Chính vì nh Nghiên
cứu một số loại thảo dƣợc phòng bệnh vi khuẩn Streptococcus sp. trên cá
rô (Anabas testudineus)c thc hin.
1.2 Mục tiêu của đề tài:
c thc hin nhm so sánh tính nhy ca mt s loi thi
vi vi khun Streptococcus sp. và tìm hiu kh bnh do vi
khun trên cá rô (Anabas testudineus) ca mt s loi thc.
1.3 Nội dung của đề tài:.
Kim tra tính nhy ca mt s thc lá i (Psidium guajava), c mc
(Eclipta prostrata L.) và dip h châu (Phyllanthus urinaria) trên vi khun
Streptococcus sp
Thí nghim kho sát tác dng ca thc phòng b
(Anabas testudineus).
3
CHƢƠNG 2
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1 Đặc điểm sinh học cá rô
Khoa và Trn Th ng thuc
Ngành: Chordata; Lp: Osteichthyes; B: Perciformes; H: Anabantidae;
Ging: Anabas; Loài: Anabas testudineus (Bloch, 1792).
ng (Nguồn: ngày truy cp
15/08/2013)
Cá rô là loài cá sc ngt vùng nhii. Cá hin
din trong các thy vm ly, mn và rung lúa Thái
Lan, Campuchia, Lào và Vi Khoa và Trn Th Thu
ng sng ca
cá rô rt tc bit cá có th hô hp bng khí tri nh p ph
(mê l), nên cá có th tn ti và phát triu king bt li
ngoài t Khoa và Trn Th
Hin nay cá rô là mt trong nhng thy sn quan tr
c nuôi ph bin các t ng bng sông Cu Long, g
phong trào nuôi cá rô ngày càng phát trin nhiu vùng mi.
Khu t nh nuôi cá rô thâm canh phát trin mnh
c sông La Ngà thuc tt nuôi có th t 80-100
tn/ha vi c cá thu hoch 10-12 con/kg. Cá có thân hình bu dc, dp bên,
cng chu ln, mõm ngn, còn có mt s nm ri rác trên
Khoa và Trn Th
t ng viun, tôm tép, cá con, ch, nòng nc, giáp
xác thThc vt thì gm lá rong bèo, ht c vng, ht lúa, các mùn bã hu
, 2002). Ngoài t nhiên cá có tính sinh sn
p tính gi t Long (2003)
sc sinh sn ct khon 700.000 trng/kg cá cái.
4
2.2 Một số bệnh trên cá rô
c nuôi nhinh tranh ca loài, m nuôi
m mt và li nhun v
hng loài thy sng nuôi x n
chng sng vì th tu kin thun li cho mm bnh
phát trin. Hin nay, bnh nh nm nht, bt
huyt do vi khuhiu thit hi cho các mô hình nuôi cá rô
thâm canh (Evans et al., 2006). T l cá cht dch bnh khá cao
trong c c bii vi b
thân. Cá trong ao có th hao hn 20% sau m t cá b bnh này.
Bnh nm nht xc báo cáo
xut hin ti Cn Ngc Tun, 2010). Bnh
do vi khung xut hi
t l cht cao gây thit hi nghiêm trng. Nhóm vi khun Aeromonas c
phân lp t ng bnh c Bangladesh (Rahman et al., 2001),
Nht, Malaysia, Phiplippines và Thái Lan (NACA, 2008) có du hiu bnh lý
m trùng máu, xut huyt và l esmin et al. (2007)
p Aeromonas hydrophila t th ng bnh và Afza et al.
p A. sobria t gan, thn, t tng và các vt loét trên cá rô.
Bên cn Streptococcus sp. gây ra các triu ch
c phát hin (Evans et al., 2006). Ngoài ra còn có vi khun Flavobacterium
columnare t (Sarker et al., 2002; Dash et al., 2009).
n Pseudomonas aeruginosa c phân lp t rut
ng b bnh vi nhng tg et al., c
bit, các nghiên cu gng minh s hin din ca Edwardsiella
tarda trên loài cá này cùng vi s suy gim chng hu
nuôi cao và nhi i (Mohanty et al., 2007). Mt s thí
nghiy Edwardsiella tarda có kh nh trên
ng, nhi 20-22
o
C cá mn cm vi mm bnh E. tarda m 10
7
và 10
8
t bào (Sahoo et al., 2000).
Mt thí nghim gây cm nhim ca Srivastava (1980) trên cá rng ca 3
ging nm Achlya, Aphanomyces và Saprolegnia phân lp t 21 loài cá, trong
vòng 3-7 ngày k t thi gian cm nhim cho thy các si nm phát trin
nhanh chóng và làm cá cht nhanh trong vòng 5-12 ngày. Bên c
m neo Lernaea lophiara (Hà Ký và Bùi Quang T, 2007), trùng bánh xe,
Henneguya, nhóm Trypanosoma, các loài ký sinh trùng khác c ghi
nhn gây bng (Vann et al., 2006).
5
2.3 Tổng quan bệnh do vi khuẩn Streptococcus sp. trên động vật thủy
sản
Theo h thng phân loi ca Bergey (1974) chng vi khun Streptococcus spp.
thuc phân loi Ngành: Bacteria; Lp: Mollieutes; B: Chlamydiales; H:
Streptococcaceae; Ging: Streptococcus.
Streptococcus spp. là nhóm vi khung hình cu hay hình
trng, kích tc nh ng gp 0,3-0,5 µm to thành dng chui
xon hay dng song cu khun, phân tích ca Quan Ngô Huy Tân (2010) và
Quách Th Tú Ly (2010). Phn ln chúng sng ym khí không bt buc, gây
bnh cho nhic ngt, l và mn (Woo et al., 1999; Noga, 2010).
Bc gây ra bi các loài Streptococcus Streptococcus iniae (Creeper
and Buller, 2006), S. agalactiae, S. dysgalactiae và S. ictaluri (Pasnik et al.,
2009). Theo mt s nghiên cu gy ít nht 27 loài cá nuôi và
t m bnh do vi khun S. iniae (Agnew and Barnes, 2007).
Nhóm Streptococcus c phân lp trên nhi
gây bnh trên các loài cá cnh (Ferguson et al., 1994), cá rô phi lai
(Oreochromis niloticus và O. aureus) (Al-harbi, 1996), Oncorhynchus mykiss
(Bachrach et al., 2001). Mt loài thuc Streptococcus spp. là vi khun S. iniae
c bit vi tên S. shiloi là nguyên nhân gây nhim trùng máu
trên cá vi kh ng thch máu cu (Eldar et al.,
1995) và là nguyên nhân gây dch bnh trên vùng nuôi cá chm Australia và
vùng nuôi thy sn ti vùng bin Caribbean (1999). Bnh do vi khun S.
agalactiae t tác nhân gây bnh nguy him trên nhic
bit là cá rô phi (Filho et al., 2009), cá chim trng (Pampus argenteus)
(Duremdez et al., 2004). Vi khun S. difficile bên cnh S. shiloi là nguyên
nhân ca b c ghi nhn (Eldar et al.,
S. agalactiae c phân lp t cá rô phi
(Oreochromis spp.) b nhim t nhiên (Zamri-Saad et al., 2010). Theo Hunh
Th Ngc Thanh (2012) lu tiên phân lc vi khun Streptococcus
spp. gây b ng ti tnh Hu Giang, Tin Giang, C
ng Nai ti Vit Nam.
Vi khun Streptococcus sp. gây bnh ch yu cho nhi
hStreptococcus t hi khong 60
tn cá ayu (Plecoglossus altivelis), gây tn tht ln cho ngh nuôi cá này
Nht (Austin and Austin, 2007). Nhóm vi khun này còn gây thit hi nghiêm
trng cho ngh nuôi cá rô phi (Oreochromis sp.) nhiu quc gia trên th gii
6
vi t l t vong cao trên 50% trog vòng 3-7 ngày (Francis-Floyd,1996).
Nh t nhi t dch bnh là do nhim S.
agalactiae c ghi nhn nhiu trang trc bit là các trang
tri châu Á (Musa et al., 2009). Trên 500 mu phân lp t cá rô phi thì có
82% bnh do Streptococcus nh là S. agalactiae và 18% là S.
iniae (Sheehan, 2009) vi các du hiu lâm sàng ni b cá bnh có
i bng xon, xut hin nhiu vùng b hoi t, t
t th tích, gan nht, xut huyt não (Wanman et al., 2005). Khi
quan sát tiêu bn, thn và tùy tng ca cá bnh s thy chúng nm
ri rác hay tp trung thành tt kính bên cnh các t
bào bin dng, cu trúc ri rc. Mô thn và tùy tng cá bu hiu
xung huyt, xut huyt và hoi t ng Th Hoàng Oanh, 2007) do vi khun
xâm nhp, ba cht dch có mùi bên trong (Conroy, 2009).
Quan sát mang cá rô b bnh thy có hing và dính li các
si mang th cp (Quan Ngô Huy Tân và Lê Th Kim Loan, 2010).
Nhóm vi khun Streptococcus spp. có th c phân lp t thn, não, tim và t
tng trên cá bnh s dng Todd-Hewitt (TH), Nutrient agar (NA)
b sung máu cu hoc dê, TSA hay Brain heart infusion agar (BHIA) có th
thêm hoc không 1,5-2% NaCl 20-30
o
C trong 24-48 gi. Chúng có th tn
ti NaCl=6,5% kt qu phân l ng b
2009), ngoài ra kh n ti ca nhóm Streptococcus c bin
có th phát trin khong nhi 10-45
o
không tn ti 60
o
C trong 30 phút. Ngoài ra, khi cá b nhim nng còn b các
vi khui khác tAeromonas c ngt hay Vibrio
c l làm cho dch bnh tr nên nghiêm trnh ch yu
c truyn ngang t cá bnh sang cá khe hay t môi
ng sang cá.
2.4 Sơ lƣợc bệnh đen thân do vi khuẩn trên cá rô
B ng hin nay gây thit hi li nuôi thy
sn c ta, vi t l hao ht khá cao và không th kim soát. Theo T
Thanh Dung và ctv (2013) nghiên cu mô t lu tiên phân lp thành công
vi khun Streptococcus iniae là tác nhân gây b ng
(Anabas testudineus).
7
Bm hình thái, sinh lý, sinh hóa vi khun gây bnh n
trên cá rô
Streptococcus
Gram
+
1 mm
24-
Catalase
-
Oxidase
-
ADH
+
O/F
-
NaCl 6,5%
-
pH 9,6
-
60°C
-
Biểu hiện: Cá bnh có biu hin gi trên m cá có
ng. Cá bnh nng có biu hin co gi i bt
ng trên mc. Mt cá lc, bng hp cá
bnh xut huyt hu môn, xung quanh mt và các gc vây (T Thanh Dung,
2013). Theo Nguyn Hu Thnh và ctv (2011) du hiu cho thy gan cá b
ng nht cùng vm màu là du
hiu ph bit kho sát cá b i An Giang.
2.5 Thí nghiệm xác định LD
50
của vi khuẩn Streptococcus sp. gây bệnh
đen thân trên cá rô (Anabas testudineus)
Theo Nguyã tin hành thí nghinh LD
50
trên
cá rô. Kt qu nh LD
50
ti 168 h iu kin 26-28
o
C ca 2 chng vi
khun Streptococcus sp.1 (R17) 8,7×10
4
CFU/ml và Streptococcus sp.2 (R47)
7,8×10
4
ng thi gian bnh ca hai chng vi
khun này li có s khác bit ln. Thi gian bnh ca Streptococcus sp.1 (5
n so vi Streptococcus sp.2 iu kió làm c lc
ca chng Streptococcus sp. ng lên rt nhiu ln và là mt trong nhng
nguyên nhân chính gây t l cht cao trong nhng ngày u tiên có cá cht.
Ði c Eldar et al. (1995) chng minh khi tin hành tiêm mm
bnh vi khun Streptococcus th cá m 10
7
và 10
8
CFU/ml. Khi
v th cá, m t ng lên gp 10
2
và 10
5
ng ng.
8
2.6 Tổng quan về thảo dƣợc
2.6.1 Sơ lƣợc về thảo dƣợc
Thc là nhng cây ng chi, lá, hoa, ht và r c
u, gia v hoc làm thuc theo tng mch (Eisenbrand et
al., 1992). Cây thc là mt cây mm, mc, hu ht phát trin t
ht, không phát trin t thân gng dai. Mt vài th
lic gii khát có th tìm thy trong t u ht thc
c trng và rt s c sy khô và d tr u cho
c làm thuc cha bnh c cây hoang dã lc tru
tc sy khô hoc ch bin k.
T n nay, trong thy s dng thuc t thc vt (Sivarajan et al.,
199 Ai Cp, Trung Quc, ,
Rn ng chng v s hiu bit tinh vi
và lý lun truyn thng vi vic trng nhng cây thc và cây gia v.
c bit là trong ch bin làm thng và có tính sát
khun tt cho sc khc và gia v c dùng làm
thuc và m phm, dùng trong git ra và tm gi, hun khói trong nhà và theo
mng (Eisenbrand et al., 1992).
2.6.2 Tình hình nghiên cứu thảo dƣợc trên thế giới
c công dng
dit khun ca ti. u nghiên cu tính kháng
khun ca lá h i ng là Bacillus anthracis.
c Cac hp cht allicin trong ti
có công dc kháng sinh. Thuc kháng sinh này mnh bng 1/5
penicillin, 1/10 tetracillin có tác dng trên nhiu loi vi khu i và
tiêu dit nhiu loi sâu b ký sinh trùng và nc. p
i thc ch yu phòng tr các bnh v vi khun, ký
sinh trùng, bng rut cho tôm cá và nhuyn th
a niên thi t, tin thTheo Kamei (1988) cho rng chit sut
thc t cây i (Psidium guajava) phòng tr c b
IPNV và OMV trên cá.
Ti Thái Lan, Direkbusarakom et al. nghim thành công kh
n ca các loài th O. sanctum, C. alata,
Tinospora Cordifolia, Eclipa alba, Tinospora Cripspai vi vi khun
Vibrio spp Crasta et al. (1997) ti min Nam t Aceton và
9
Ethanol t 5 loi rong bin gm: rong nho (Caulerpa taxifolia), rong si
(Chaetomorpha antennia), Cladophora fascicularis Ulva lactuca)
và rong râu (Gracilaria corticata). Kt qu C. taxifolia, C. antennina và G.
corticata có kh ng li vi khun Bacillus subtilis, Gracilaria
corticata còn có tác dng chng li nm Candida albicans
cht chit xut nào có th c ch vi khun Pseudomonas aeurginosa, nm
Aspergillus flavus và Fusarium oxysporum. Ti Th , Dugenci et al.
(2003) cho rng mt vài cây thung (Zingiber officinale), cây tm
ma (Viscum album), cây tm gi (Urtica dioica) khi b sung vào trong th
to cht kích thích min da mt s b
khun và nm.
Ti Bangladesh, Muniruzzaman và Chowdhury (2004) nghiên cu tác dng
ca chit xut 26 loi th c vi 3 vi khun Aeromonas hydrophila,
Edwardsiella tarda và Pseudomonas fluoescens gây bnh trên cá. Kt qu có
21 loài thc (80,76%) có tác dng vi A. hydrophila, 24 loài thc
(92,3%) có tác dng vi P. fluoescens tt nht và lá cây bng bng
(Calotropis gigantea) dit vi khun E. tarda tt nht. Theo kt qu nghiên cu
ca Mohan Thakase (2004) khi ông tin hành nghiên cu tính kháng khun
ca cây ngh, gng, h, cây qu, cây húng tây và cây vi
mt s loài vi khun c th E. coli, S. typhimurium, E. faecium, và E.
faecalis b . Kt qu ch rõ dch tách chit t
ngh có tính kháng E. coli, S. typhimurium, và E. faecalis vi n 130
mg/khoanh, cho thy húng tây có tính kháng
khun ti n t 30 hai loi tho mc này li
không có hiu qu i vi E. faecium, các tho mc còn li không có hot tính
kháng 4 loài vi khun c chn, khi cc tip theo
th tác dng trên nhiu lng vt thu sn thì kt qu cho th
g (Syzygium aromaticum) có ng l n s ng
(Direkbusarakom et al., 1995).
2.6.3 Tình hình nghiên cứu thảo dƣợc tại Việt Nam
Theo các s liu thng kê mi nht, thm thc vt Vit Nam - ngun tài
nguyên sinh hc quý giá, có trên 12.000 loài trong s
c s dng làm thuc hay thc phm ch
là mt li th to li vi ngành công nghic ta. Tuy nhiên,
c nuôi trng thy sn vic nghiên cu và s dng cây thuc nam
và các hp cht chit xut t thc còn rt mc nghiên cu có
h thng vic s dng cây thuc, v thuc trong phòng tr b
10
rt cn thit. Trong lch s y hc c truyn Vit Nam v nghiên cu v
cây thu tr bng v th k i y thin
i hai tác phc thn hi 580 v thuc trong
3.873 bài thu t v 680 v thuc.
Tt Li (1991) có trên 600 loài cây thuc Vit Nam, ông là tác gi
cu
cây thung vt và khoáng vt làm thuc Vit Nam.
min Bc, Hà Ký và ctv -u
mt s loi thu tr bc 9 loi cây
khác nhau có th s dng trong phòng và tr bng vt thy s:
rau ngh (Polygonum hydropiper), rau sam (Portulaca oleracea), cây c sa lá
to (Euphorbia hirta), cây c sa lá nh (Euphorbia thymifolis), nh ni
(Eclipta alba), b công anh (Lactuca indica), cây vòi voi (Heliotropium
indicum t (Wedelia calendulacea Phyllanthus
urinaria). Theo các tài li, cây dip h châu có tác dng bo v
gan trên mô hình gây nhic bng CCl4, chng viêm cp tính, ch
gan, chng oxy hóa và tác dng li tiu (Nguyctv, 2000).
Bch hoa xà cha táo bón, phong th dày và gh l Tt
Li, 2006), dch chit xut t cây bch hoa xà có th n s ng
ca chng E. coli và vi khun Shigella vi MIC: 0,64-10,24 ppm. Ngoài ra,
khi chit xut cây bch hoa xà bng Ethyl acetate, dch chic có tác
dng c ch vi khun Helicobacterpylori trong ng nghim (Abdul and
Rachender, 1995). Các loi thu ch thành mt s c
phi trên th ng.
min Nam, các cây c c dùng trong phòng và tr bnh cho vt nuôi thy
sn ch yu t kinh nghi t dùng cây c mc
(Eclipta alba), cây tru (Piper betel tr bng vt
thy sn, ngoài ra h còn bit dùng cây t phòng bnh. T Thanh Dung
(1996) m tra tính nhy ca 8 loi chit sut thc trên 6 chng vi
khun A. hydrophila gây bnh trên cá trê lai (Clarias batrachus x C.
gariepinus). Kt qu ch có 2 loi thc nhy: Phyllanthus debitis (PD) và
Eugenia caryophyllus ng thnh n c ch ti thiu
(MIC) ca cao bt PD là 10.000 µg/l, ca chit du EC là 1.000 µl/l.
Theo Nguyn Ngc Hnh và ctv u và th nghim thành
công các hp cht chit xut t thng h
tr tiêu hóa tt giúp tôm khe mng tt chc bc bit
là bnh v ato có công dng h tr u tr v
MBV và teo gan.
11
Nghiên cu khác c c cht 2-
hydroxy-6-pentan decatrienilbezoat có ngun gc t th c có tác dng
phòng tr các bnh vi khun và nm gây ra. Nhm mích s dng các hot
cht sinh hc thay th các cht hóa hc hi, kháng sinh b cm s dng
c nuôi trng thy sn.
Gu kh m ca dch chit lá tru, Nguyn
Ngc và ctv (2007) kt lun các dch chit t lá tru có kh
dit nm thuc h Lagenladium, chng nm này gây bnh ph bin trên tôm
c l và mn. Dch chit lá tru còn có kh c ch các loi vi khun
Aeromonas hydrophila và Vibrio sp
Thí nghim ca Nguyn Anh Tun (2007) tìm hiu kh n ca
dch chit ti vi vi khun Aeromonas gây b cá
Trm c ti Hu cho kt qu kh quan. Còn theo Nguyn Mnh Hùng (2008)
dch chit t cây Nemm (Azdirachta indica) có th thay th 50% kháng sinh
trong sn xut ging cua bin (Scylla paramamosain M Hnh
u kh bnh ca lá h i vi vi khun
Streptococcus spp. và cho kt qu sau 6 ngày thí nghim t l sng ca các
nghim tht 50%.
c nghiên cu này, Nguyn Hng kt qu nghiên
cu s dng cht chit xut t cây hoàng k (Astragalus membranaceus
ng kh kháng ca cá tra vi bnh m gan do nhim vi
khun E. ictaluri. Nghiên cu ca Hunh Kim Di dng 30 loi
th mc (Hemigraphis
glaucescens), bàng (Terminalia catappa), i (Psidium guajava), t bi (Pluchea
indica th hot tính kháng khun trên 3 loi vi khun E. ictaluri, E.
tarda và Aeromonas hydrophila cho thy các cây thuu có kh
kháng khun (MIC=16-2048 µg/ml). Hot ph mnh trên c 3 loi vi khun là
bàng, i, tru không, tràm (MIC=64-ng mnh nht trên E.
ictaluri i hành (MIC=16 µg/ml), E. tarda 32
µg/ml), Aeromonas hydrophila là Bàng (MIC=128 µg/ml).
Mt nghiên cu khác ca Trn Ngc Hùng (2012) cho kt qu th nghim
bin pháp tr bnh l loét do vi khun Streptococcus spp. bng hn hp dch
ép t c tg theo ông, khi th nghim
vi chit xut t cây c mc và lá i cho kt qu i vi nhóm vi khun
Streptococcus t kt qu kh y
mt công trình nghiên cu thc c th ng cá rô (Anabas
testudineus) b nhim vi khun Streptococcus sp. c ta.
12
2.7 Tổng quan thảo dƣợc đƣợc nghiên cứu
Mt s h nuôi cá rô hin nay vn còn s dng các loi thu
b cc bit, nhóm
vi khun Streptococcus i Gentamycin và Streptomycin
(Nguy
2.7.1 Lá ổi
Tên khoa hc ca i là Psidium guajava L., trong dân gian còn gi là phan
thch lu, thu qu, kê th qu, phan nhm, bt t, lãm bt, phan qu tc
h Sim Myrtaceae, chi Psidium.
Hình 2.2 Cây i
(Nguồn: />viem-hong-tieu-duong-bang-huyet_64.html ngày truy cp: 15/08/2013)
Nguồn gốc: Cây i có ngun gc t vùng nhii châu M. Hic
trng và mc hoang các vùng x nóng ca các c, i không ch phát trin
c nhic trng nhiu các vùng á nhii. i phát
trin nhanh, nhân ging d Tt Li, 2006).
Mô tả thực vật: Cây i cao chng 3-5 m, cành nh thì vuông cnh, lá mi
xng, có cun ngn hình bu dc, nhn h mt trên, mi
có lông mn, khi soi lên có thy túi tinh du trong. Hoa màu trng m
c k lá. Qu nhiu ht, hình th Tt Li, 2006). Có nhiu
ging i khác nhau: i trâu, i bo, i xá l có qu t; i
m, i ngh tuy qu nh t và r.
Thành phần hóa học: Qu u cha sitosterol, quereetin, guaijaverin,
leucocyanidin và avicularin, lá còn có volatile oil, eugenolc hc
c truyn, lá i v ng sáp, tính m, có công dc, thu sáp
ch huyt. Trong thân và lá còn có cht tritecpenic (Arthur et al., 1952). Trong
lá i có cha 7-10% tanin pyrogalic, axit psiditanic, khong 3% nha và
khong 0,36% tinh du (ch y-bisabolene, ngoài ra có
13
a -selinene, nerolidiol, oxit caryophyllene và eugenol), và
có tecpen (axit oleanolic, axit ursolic).
Bộ phận sử dụng: Qu, lá, búp non, v r và v thân.
Tác dụng dƣợc lý: Nghiên cc lý cho thy dch chit t các b phn ca
cây u có kh c và cng.
2.7.2 Cỏ mực
C mc hay c nh ni, hn liên tho tên khoa hc là Eclipta alba Hask.
(Eclipta erecta Lamk.) là mt loài thc vt có hoa thuc H Cúc Asteraceae
(Compositae). Tên ng là Eclipta prostrata.
Hình 2.3 Cây c mc
(Nguồn: />viet.html truy cp ngày 15/08/2013)
Nguồn gốc: C mc s dng các b phn khác nhau trong nhng vùng
nhii và vùng cn nhi, Châu Á và Châu Phi. Có 3 loi
c mc: C mc hoa trng, c mc hoa vàng và c mt c 3
lou hin din khm ly, ao h, sông rch
hay chân dãy Himalalaya (Nguyn Th .
Mô tả thực vật: Cây c, sng mt hay nhiu nng hay mc bò, cao
30-40 cm, có th n 80 cm. Thân màu lc ho tía, phình lên nhng
mu, có lông cng. Lá mi, gt nh,
hai mt lá có lông dài 2-8 cm, rng 5-12 mm. Hoa hìu, màu trng, mc
k lá hoc ngn thân, lá bc thon dài 5-6 gm hoa cái
ng tính gia. Qu b dài 3 mm, rng 1,5 u ct có 2-3
vy nh, có 3 ct Tt Li, 2006).
Bộ phận sử dụng: Toàn cây.
Thành phần hóa học và dƣợc chất: Theo các nghiên cu, trong cây
cha tinh du, tanin, ch ng, caroten và cht alcaloid gi là ecliptin hay
14
Tt Li, 2006) và coumarin lacton là wedelolacton (Govindachari
et al., Gm các hp ch -Sitosterol, Metyl gallat,
Eclalbasaponin I, Eclalbasaponin II, Norwedelolactone và Hesperidin.
Các Flavonoids và Isoflavonoidst lá cha Apigenin, Luteolin và các
glucosides. Toàn cây ch
wedelolactone, Isodemethyl wedelolac tone, Strychnolactone. Aldehyd loi
terthienyl: Ecliptal, L-terthienyl methanol, Wedelic acid. Sesquitepne lactone:
Columbin. Các sterols: Sitosterol, Stigmasterol. Các acid h
Oleanolic acid, Stearic acid, Lacceroic acid, 3,4-dihydroxy benzoic acid,
Tác dụng dƣợc lý:
c liu và B i hc Hà Ni
có nghiên cu tác dng cc ca cây c mc và có kt lun:
cây c mc có tác dng chng l ng
chy máu, cây c mc không có tác dt áp hay giãn mch.
Trong Y hc truyn thng c cho tui
th và tr trung hóa. S nghiên cu my cây c mc có mt hot
ng sâu rng chng nhic gan. Làm du hoàn toàn nhng triu chng
ng v, bun nôn và ói ma nhng bnh nhân b loét.
C mc có v ng c dùng cm máu bên trong và bên
ngoài, cha ho ra máu, lao phi l c dùng cha bng, chng
viêm nhing hp cm st, cúm, ban si, nhim khung
hô hp, tr mn nh ng u tr
nm da, eczema, vng lá c m
c u tr bnh nhân b o do tp khun, do nm và do
Trichomonas c tính rt thp, gii hn an toàn rng, cm
máu tng hp cá bit, tác dng này ca c mc th hin rõ rt
tác dng ca vitamin K (rõ rt ng hp suy gan).
2.7.3 Diệp hạ châu
Dip h châu hay còn gi là , dip hòe thái, lão nha châu,
Tt Li, 2006). Tên khoa hc là Phyllanthus
urinaria L. (Phyllanthus cantoniensis Hornem), thuc h thu du
Euphorbiaceae.