TÌM HIỂU VỀ NUCLEOTIT VÀ CÁC DẪN XUẤT CỦA NÓ.

KÍNH CHÀO QUÝ THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN!

CHỦ ĐỀ: TÌM HIỂU VỀ NUCLEOTIT VÀ CÁC DẪN
XUẤT CỦA NÓ.

NHÓM 3:
1.TRÀ THỊ MINH HẠNH.
2.TRẦN THỊ BÍCH HÀ.
3. LƯƠNG THỊ THU HiỀN.
4. NGUYỄN THỊ HiỀN.
5. NGUYỄN NGỌC HIÊN.


Mục lục


A. Giới thiệu:
Sự suy giảm Adenosine triphosphate (ATP) là nguyên nhân thực sự của sự khởi
đầu tê cứng ở động vật.


•
•

Sau khi gia súc chết, có sự phân giải của ATP dưới tác động của Actomyosin:
ATP (+Actomyosin)⇒ ADP + H3PO4 + Q
ADP ⇒ AMP + H3PO4 + Q
i

Tỷ lệ ATP mất đi phụ thuộc vào một số yếu tố trong quá trình sau khi chết , tình trạng trao đổi chất của cơ
bắp là quan trọng nhất.

Việc tách chiết và phân tích các nucleotide và nucleoside trong thịt có thể giúp cho sự phân loại thịt tốt
hơn.


B.Sự phá vỡ Nucleotide trong cơ sau khi chết
1/ Khái niệm ATP: ATP là tên viết tắt từ Ađênôsin triphôtphát, có bản chất là
nucleotide.

Ribose
3 Nhóm

Adenin

photphat

ATP


2/ Vai trò của ATP

•

lớp màng

1.

•
2.

Cung cấp năng lượng cần thiết để vận hành bơm Na / K của các

Vận hành bơm canxi vào lưới tạo cơ, và để cung cấp năng lượng
cho sự co cơ và duỗi cơ.


3/ Sự thay đổi hàm lượng ATP ở động vật sau khi chết.
Ngay sau khi chết: Hàm lượng ATP ổn định.

•

Nhờ sự hình thành của nó từ muối photphat của axit hữu cơ thông qua axit hữu cơ kinaza.

•

sự thủy phân đường kỵ khí nhưng hiệu quả không cao so với hiếu khí.

Kỵ khí

2ATP

1 glucose
Hiếu khí

12ATP

Khi muối photphat và glycogen cạn kiệt , hoặc sự tham gia của enzim bị bất hoạt : ATP nhanh chóng giảm
trong vòng vài giờ do thực hiện hàng loạt chuyển đổi.


Cơ chế chuyển đổi của ATP.

Các yếu tố ảnh hưởng đến sự phân hủy ATP
•

Phụ thuộc vào trạng thái trao đổi chất của động vật trước khi giết mổ( gia súc bị stress, bị bỏ đói,….) và
trong điều kiện sau khi chết ( pH và nhiệt độ, màu sắc,... của thịt)


C. Phân tích nucleotide và nucleoside.

Phân tích (phân
tích sắc ký)
Tách nucleotide
và nucleoside

Chuẩn bị mẫu


1/ Chuẩn bị mẫu
i

Tách mẫu nhỏ ra khỏi cơ

Đem đi làm lạnh nhanh

thể động vật càng nhanh

bằng N2 lỏng.

Đem đồng hóa bằng máy dập
đồng hóa.

càng tốt.

Dịch chiết.


2.Thu Nucleotide và Nucleoside

Dịch chiết

Được ly tâm 15.000 g trong 20 phút ở 4 ° C

Dịch nổi.
Được lọc qua bông thuỷ tinh và vô hiệu hóa bằng cách thêm kali carbonate rắn vào .

Chiết xuất bị vô hiệu hóa
Giữ trong bể băng trong 5 phút và ly tâm một lần nữa, cứ 15.000g trong 10 phút.

Dịch nổi được lọc qua màng lọc 0,2 μm và được lưu trữ trong kho đông lạnh ( ở
nhiệt độ dưới -25 ° C ; nếu có thể -80°C ) cho đến khi phân tích .


Phương pháp phân tích sắc ký.

Xác định bằng phương pháp sắc ký trao đổi ion cổ điển.

•

HPLC (sắc kí lỏng cao áp) .
Gần đây, các phương pháp khác dựa
trên việc đảo pha HPLC cùng với thêm
vào tùy chọn các cặp ion đã nhận được
sự phân tách và phục hồi tốt.


a. Sắc ký pha đảo
•

Thay đổi độ pH của

Sử dụng gradient pha động giữa hai dung môi : đệm
phosphate ở pH 7 và methanol.

pha động.

•

Xác định các đỉnh sắc
ký

Thực hiện bằng cách so sánh thời gian duy trì mức
cao nhất và các đặc điểm quang phổ với những tiêu
chuẩn của chúng .


Biểu đồ sắc ký minh họa:

Hình 16.1 suy thoái ATP và các hợp chất có nguồn gốc của nó trong cơ sau khi chết.

Hình 16.3-Sắc ký pha đảo của ATP và các hợp chất suy thoái của nó trong thịt lợn sau khi chết, lấy mẫu tại 2 h (a) và 8 h (b) sau khi chết.


Nhận xét

•

Mức cao nhất tương ứng với ATP giảm đáng kể trong khi mức cao nhất tương
ứng với Inosine và IMP tăng đáng kể.