Chuyển gen GmEXP1 vào cây thuốc lá Nicotinana tabacum

Chuyên đề:


1. Nghiên cứu thực nghiệm:
Hoạt động của gen GmEXP1 (xác định protein
expansin) liên quan đến sự kéo dài rễ cây đậu tương,
làm tăng cường khả năng chịu hạn của cây đậu tương.
Trong bài báo này, chúng tôi trình bày kết quả của
việc thiết kế vector mang cấu trúc gen GmEXP1 được
lai với 1 đoạn mã hoá peptide c-myc và KDEL, dưới
sự điều khiển của CaMV35S promoter; chuyển cấu
trúc trên cây thuốc lá mô hình (Nicotinana tabacum)
nhờ A.tumefaciens.


 Tên trình tự DNA: Glycine max
expansin (EXP1) mRNA, complete cds
 Accession: AF516879
 GI: 27464176
 Kích thước (bp): 1089 bp
 Sinh vật: Glycine max (soybean)


 Gene trên trình tự DNA:
Tên gene

Từ nu .. đến nu

Kích thước (bp)

EXP1

52…..819

768

 Thông tin cặp mồi thiết kế:
Mồi

Mồi xuôi

Trình tự mồi

Từ nu ..
đến nu

TCTCACCTTCTGGATGGACCA

71…92

Kích thước
Tm ( C) sản phẩm
(bp)
0

63.0°C

685bp
Mồi ngược

GGGCTAGAGAAAGTTTGGCCG

735…755

64.4°C



Phương pháp








Kết luận:
Thiết kế thành công vector tái tổ hợp pCB301 mang
promoter CaMV35S và cấu trúc chứa gen đích
(GmEXP1_cmyc_KDEL_polyA) xác định protein
expansin kéo giãn thành tế bào. Thực hiện chuyển
thành công cấu trúc trên vào mô thuốc lá N.tabacum
K326, tái sinh thành cây hoàn chỉnh. Kiểm tra sự có
mặt của gen chuyển trên cây thuốc lá tái sinh cho thấy
32/44 dòng mang gen GmEXP1. Qua đó có thể thấy,
gen GmEXP1 trong vector tái tổ hợp đã thiết kế có thể
được sử dụng để chuyển vào các cây trồng quan tâm
nhằm cải thiện khả năng chịu hạn bằng sự phát triển
mạnh của hệ rễ.