TÌM HI U V
HPLC - MS
Giảng viên hướng dẫn
Nguyễn Thị Diệp Chi
Nhóm 3
Nội dung báo cáo
TỔNG QUAN VỀ HPLC
• Giới thiệu về HPLC
• Quá trình sắc ký trong cột HPLC
• Giới thiệu về UHPLC
KHỐI PHỔ
• Sự ion hóa
• Các bộ phân tích khối lượng
• Ứng dụng
• Ưu điểm và nhược điểm
HPLC MS
MS được sử dụng như một đầu dò của HPLC. Trong đó:
•
•
HPLC = tách
MS = nhận biết
Giới thiệu HPLC
• Được phát triển và cải tiến từ phương pháp sắc ký cột cổ điển.
Sắc ký cột
HPLC
Giới thiệu HPLC
Pha động là dung môi mang chất phân tích
Pha tĩnh là chất rắn dưới dạng tiểu phân hoặc một chất lỏng phủ lên một chất mang rắn, hay một chất mang liên kết hóa
học với các nhóm chức hữu cơ.
• Ngày càng được sử dụng rộng rãi và phổ biến vì: có độ nhạy cao, khả năng định lượng tốt, thích hợp tách các hợp chất
khó bay hơi hoặc dễ phân hủy nhiệt.
Injector
Chromatogram
Mixer
mAU
Quá trình sắc ký trong
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Chromatogram
Mixer
mAU
Quá trình sắc ký trong
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Chromatogram
Mixer
mAU
Quá trình sắc ký trong
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Chromatogram
Mixer
mAU
Quá trình sắc ký trong
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Mixer
Chromatogram
Quá trình sắc ký tron
mAU
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Mixer
Chromatogram
Quá trình sắc ký tr
mAU
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Chromatogram
Mixer
Quá trình sắc ký t
mAU
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Chromatogram
Mixer
Quá trình sắc ký
mAU
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Mixer
Chromatogram
Quá trình sắc ký
mAU
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Mixer
Chromatogram
Quá trình sắc k
mAU
cột HPLC
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Mixer
Chromatogram
Quá trình sắc
mAU
cột HP
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Chromatogram
Mixer
Quá trình
mAU
cột
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Mixer
Chromatogram
Quá t
mAU
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Chromatogram
Mixer
mAU
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Injector
Chromatogram
Mixer
mAU
Pumps
Start Injection
Column
Detector
Solvents
time
Giới thiệu UHPLC
• UHPLC (Ultra Performance Liquid Chromatography) là 1 tiến bộ đạt được trong kỹ thuật phân tích, là sự cải tiến của
HPLC.
Agilent
Waters
Thermo
So sánh giữa HPLC và UHPLC
HPLC
UHPLC
Kích thướt hạt
<4 µm
1.7 µm
Kích thướt cột
4.6 mm (đường kính) x 250 mm (chiều dài)
2.1 mm (đường kính) x 50 mm (chiều dài)
Tốc độ dòng
1 – 2 mm/phút
250 – 750 µL/phút
Thể tích tiêm mẫu
20 µL
3 – 5 µL
Áp suất vận hành
5000 – 6000 psi
15000 – 18000 psi
Thời gian phân tích
10 – 30 phút
<10 phút
Điểm ưu việt của UHPLC so với HPLC