Bài 41. Sinh sản vô tính ở thực vật

Tạo AND tái tổ hợp

** Nguyên
Nguyên liệu:
liệu:
++ ADN
ADN chứa
chứa gen
gen cần
cần chuyển.
chuyển.
++ Thể
Thể truyền
truyền :: Plasmit
Plasmit (là
(là ADN
ADN dạng
dạng vòng
vòng nằm
nằm trong
trong tế
tế bào
bào chất
chất của
của vi
vi
khuẩn
khuẩn và
và có
có khả

khả năng
năng tự
tự nhân
nhân đôi
đôi độc
độc lập
lập với
với ADN
ADN vi
vi khuẩn)
khuẩn) hoặc
hoặc thể
thể thực
thực
khuẩn
khuẩn (là
(là virut
virut chỉ
chỉ ký
ký sinh
sinh trong
trong vi
vi khuẩn).
khuẩn).
++ Enzim
Enzim cắt
cắt (restrictaza)
(restrictaza) và
và enzim
enzim nối

nối (ligaza).
(ligaza).

*Một
*Một số
số khái
khái niệm:
niệm:

- Kỹ
Kỹ thuật
thuật tạo
tạo AND
AND tái
tái tổ
tổ hợp
hợp là
là kỹ
kỹ thuật
thuật gắn
gắn gen
gen cần
cần chuyển
chuyển vào
vào thể
thể
truyền
truyền

- ADN

ADN tái
tái tổ
tổ hợp
hợp là
là một
một phân
phân tử
tử ADN
ADN nhỏ
nhỏ được
được lắp
lắp ráp
ráp từ
từ các
các đoạn
đoạn ADN
ADN
lấy
lấy từ
từ các
các tế
tế bào
bào khác
khác nhau
nhau

- Thể
Thể truyền
truyền là
là một

một phân
phân tử
tử AND
AND nhỏ
nhỏ có
có khả
khả năng
năng nhân
nhân đôi
đôi một
một cách
cách độc
độc
lập
lập với
với hệ
hệ gen
gen của
của tế
tế bào
bào cũng
cũng như
như có
có thể
thể gắn
gắn vào
vào hệ
hệ gen
gen của
của tế

tế bào.
bào.

** Cách
Cách tiến
tiến hành:
hành:
–– Tách
Tách chiết
chiết thể
thể truyền
truyền và
và gen
gen cần
cần chuyển
chuyển ra
ra khỏi
khỏi tế
tế bào
bào
–– Xử
Xử lí
lí bằng
bằng một
một loại
loại enzim
enzim giới
giới hạn
hạn (restrictaza)
(restrictaza) để

để tạo
tạo ra
ra cùng
cùng 1
1 loại
loại đầu
đầu
dính
dính
–– Dùng
Dùng enzim
enzim nối
nối để
để gắn
gắn chúng
chúng tạo
tạo ADN
ADN tái
tái tổ
tổ hợp
hợp

Kỹ thuật chuyển gen

Đưa ADN tái tổ hợp vào tế bào nhận

– Dùng muối CaCl2 hoặc xung điện làm
dãn màng sinh chất của tế bào để ADN
tái tổ hợp dễ dàng đi qua màng.

Phân lập dòng tế bào chứa AND tái tổ hợp

– Chọn thể truyền có gen đánh dấu
– Bằng các kỹ thuật nhất định nhận biết được
sản phẩm đánh dấu.
– Phân lập dòng tế bào chứa gen đánh dấu.