xác ðịnh hàm lượng một số parabens trong thực phẩm và mỹ phẩm bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (hplc)

Báo cáo môn học
Phương pháp phân tích dư lượng độc tố trong sản phẩm nông nghiệp
Đề tài

XÁC ÐỊNH HÀM LƯỢNG MỘT SỐ PARABENS
TRONG THỰC PHẨM VÀ MỸ PHẨM BẰNG
SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC)


Đặt Vấn Đề
Parabens là gì?
Tính chất vật lý của parabens
Phương pháp nghiên cứu
Đại cương về sắc ký lỏng
Các bước tiến hành nghiên cứu
Khảo sát điều kiện chiết mẫu
Một số nghiên cứu khác về Parabens
Tài liệu tham khảo


ĐẶT VẤN ĐỀ
Chất bảo quản là những hóa chất tự nhiên hay tổng hợp được thêm vào thực
phẩm, dược phẩm, các mẫu phẩm sinh học, v.v. để ngăn ngừa hoặc làm chậm lại sự
thối rữa, hư hỏng gây ra bởi sự phát triển của các vi sinh vật, hay các thay đổi không
mong muốn về mặt hóa học của sản phẩm. Parabens là tên gọi chung của nhóm chất bảo quản hóa học như thế.

chất bảo quản hóa học

Có liên quan nhất định đến bệnh ung thu vú

sử dụng phổ biến và lâu đời

có thể gây dị ứng da

tính chất kháng khuẩn và kháng nấm

hạn chế sự phân hủy của các hoạt chất

Mặt tích cực

làm thúc đẩy quá trình lão hóa da

5 parabens đã bị cấm sử dụng ở Việt Nam

Mặt tiêu cực

Với yêu cầu thực tế hiện nay, việc kiểm soát các chất bảo quản parabens là rất cần thiết


Tiến hành khảo sát các điều kiện HPLC thích hợp để định tính, định lượng 7 chất parabens:

methylparaben

isobutylparaben

propylparaben

phenylparaben

pentylparaben

isopropylparaben

benzylparaben


Paraben là gì?
Về mặt hóa học, parabens là một loạt các este của axit parahydroxybenzoic hay còn được gọi là acid 4hydroxybenzoic

Este alkyl acid p-hydroxybenzoic còn được gọi là parabens được sử dụng rộng rãi làm chất bảo quản trong các duợc phẩm từ giữa những năm
1920 và được sử dụng rộng rãi trong thực phẩm và mỹ phẩm một thời gian ngắn sau đó .
Một số parabens được tìm thấy trong tự nhiên, Trong tự nhiên, Parabens có nguồn gốc từ thực vật. Nó được sản sinh từ p-hydroxybenzoic
acid lấy từ  quả mâm xôi (raspberry) và mâm xôi đen (blackberry). Tuy nhiên tất cả các parabens được sử dụng thương mại đều được sản xuất
tổng hợp. Chúng được sản xuất bằng phản ứng este hóa của para-hydroxybenzoic acid và rượu thích hợp


Tính chất vật lý của các parabens

•
•

Ở điều kiện bình thường, 7 parabens nghiên cứu đều là những tinh thể màu trắng
Methylparaben (MeP), propylparaben (PrP), isopropylparaben(Iso-PrP) tan tốt trong nước, các parabens còn lại khó tan trong nuớc, tan tốt
trong dung môi hữu cơ (methanol, ethanol). Nguyên nhân là do theo chiều khối lượng phân tử tăng lên, độ phân cực của các parabens giảm
xuống.

Phương pháp nghiên cứu

•

Xây dựng và chuẩn hóa phương pháp định lượng 7 parabens nêu trên bằng phương pháp sắc ký lỏng kết hợp đầu dò khối phổ. ( UPLCMS/MS )

•

Ứng dụng để xác định hàm lượng parabens trên các loại sản phẩm:

mỹ phẩm sử dụng ngoài da: sữa rửa mặt, kem dưỡng da, khăn ướt….

các mẫu thực phẩm chức năng dạng siro, viên nang cứng, viên nang mềm…


Ðại cương về phương pháp sắc ký lỏng

Sắc ký lỏng là quá trình tách xảy ra trên cột tách với pha tĩnh là chất rắn hoặc chất lỏng và pha động là chất lỏng (sắc ký lỏng - rắn, lỏng lỏng). Mẫu phân tích được chuyển lên cột tách duới dạng dung dịch. Khi tiến hành chạy sắc ký, các chất phân tích được phân bố liên tục
giữa pha động và pha tĩnh. Trong hỗn hợp các chất phân tích, do cấu trúc phân tử và tính chất lí hoá của các chất khác nhau, nên khả
năng tương tác của chúng với pha tĩnh và pha động khác nhau, chúng di chuyển với tốc độ khác nhau và tách ra khỏi nhau .


Các bước tến hành nghiên cứu

Các parabens được tách ra khỏi nền mẫu bằng
phương pháp chiết có hỗ trợ vi sóng

Pha dung dịch chuẩn 7 chất parabens trên và bảo quản lạnh

Các bước tến

cứu:

hành nghiên

ở 4 ˚C
Xác định các thông số cho detector khối phổ

Khảo sát điều kiện đo sắc ký

Tiến hành chạy sắc ký


Khảo sát điều kiện chiết mẫu:
Đối với các phương pháp sắc ký, nền mẫu và quy trình xử lý mẫu có ảnh hưởng lớn đến kết quả, các giá trị LOD, LOQ của phương pháp,
đặc biệt là với các đối tượng mẫu phức tạp như sữa tắm, sữa rửa mặt…. Cần xây dựng quy trình xử lý phù hợp:

1

2

Khảo sát loại dung môi chiết

Khảo sát thành phần dung môi chiết

3

Khảo sát thời gian rung siêu âm

4

Khảo sát nhiệt độ rung siêu âm


•

•

Một số nghiên cứu khác về Parabens
Các tác giả Usama A., Shu Ping Wang, Labat L. , Kreuz D.M và Saad B. , Chao Han, Ye X., Cristina Moreta , Nieto A , Alcudia Leon M.C đã khảo sát
các điều kiện thí nghiệm khác nhau để tiến hành các phương pháp khác nhau như : điện di mao quản (CE), sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)
ghép nối detector UV-VIS, sắc ký lỏng khối phổ (LC – MS/MS), sắc ký khí khối phổ (GC-MS) để phân tích định tính & định lượng các hợp
Parabens trong các đối tượng khác nhau như thực phẩm, mỹ phẩm, trong nước, trong dịch huyền phù….

CE

Parabens

GC-MS

HPLC ghép
nối detector
UV-VIS

LC-MS/MS


•

Tài liệu tham khảo: Luận văn : “ XÁC ÐỊNH HÀM LƯỢNG PARABENS TRONG THỰC PHẨM VÀ MỸ
PHẨM BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC)” của tác giả Lê Thị Xuân ( Đại học khoa học tự nhiên Hà
Nội)