I H C THÁI NGUYÊN
I H C NÔNG LÂM
NGUY N TH
NGHIÊN C U
NG C A M T S CH T
U TI
N KH
VÀ BI N PHÁP K THU
N SINH
NG C A
GI NG LAN KIM TUY N (Anoectochilus roxburghii
(Wall.) Lindl.) T I THÁI NGUYÊN
LU
C CÂY TR NG
Thái Nguyên - 2017
I H C THÁI NGUYÊN
I H C NÔNG LÂM
NGUY N TH
NGHIÊN C U
NG C A M T S CH T
U TI
N KH
VÀ BI N PHÁP K THU
NG C A
GI NG LAN KIM TUY N (Anoectochilus roxburghii
(Wall.) Lindl.) T I THÁI NGUYÊN
Chuyên ngành: Khoa h c cây tr ng
Mã s ngành: 60.62.01.10
LU
C CÂY TR NG
1.
ng d n khoa h c:
I
2. ThS. LÊ TH H O
Thái Nguyên - 2017
i
L
k t qu th hi
k công trình nào.
nghiên c u c a riêng tôi. Các s li u,
c công b trong b t
Thái Nguyên, ngày 20 tháng 12
Tác gi lu
Nguy n Th
ii
L IC
c k t qu này, tôi xin trân tr ng c
L i và ThS. Lê Th H
ng d n và t o m
thành công trình nghiên c u này.
Tôi xin chân thành c
Vi n Khoa h c S s ng ki
n TS. Lê S
u ki
tôi hoàn
i h c,
u
ih
tôi hoàn thành lu
Tôi xin chân thành c
ng l c và t
và hoàn thành lu
c
ng nghi p
u ki n cho tôi trong quá trình h c t p, nghiên c u
Thái Nguyên, ngày 20 tháng 12
Tác gi lu
Nguy n Th
iii
M CL C
Trang
................................................................................................. i
L
..................................................................................................... ii
L IC
DANH M C B NG BI U................................................................................. iii
DANH M C HÌNH ......................................................................................... viii
DANH M C CÁC T
U............................................................................................................ 1
M
1.
VI T T T ..................................................................... vi
....................................................................................................... 1
tv
2. M
- yêu c u c
3.
tài ........................................................................... 2
c và th c ti n c
tài ........................................................... 2
. T NG QUAN TÀI LI U................................................................. 4
khoa h c c
tài ............................................................................... 4
y mô t bào th c v t và các v
c a vi
liên quan ................ 4
nh bi n pháp k thu t tr ng cây Lan Kim tuy n ............ 6
1.2.Gi i thi u chung v cây lan Kim tuy n ........................................................... 8
1.2.1.Phân lo i..................................................................................................... 8
1.2.2.V trí, phân b ............................................................................................. 8
m th c v t h c ................................................................................. 9
1.2.4.Yêu c
iv
u ki n ngo i c nh c a cây lan Kim tuy n ................ 11
1.2.5.Giá tr c a cây lan Kim tuy n .................................................................... 12
1.3.Nhân gi ng cây lan Kim tuy n ..................................................................... 14
1.3.1.Nhân gi ng b ng h t ................................................................................. 14
1.3.2. Nhân gi ng b ng cây con ........................................................................ 15
1.3.3.
............................................................................ 15
1.3.4. Nhân gi ng in vitro ................................................................................. 15
1.4.Tình hình nghiên c u cây lan Kim tuy n ....................................................... 19
1.4.1. Tình hình nghiên c u trên th gi i ........................................................... 19
iv
c ............................................................. 21
1.4.2. Tình hình nghiên c
. V T LI U, N
U .... 24
ng và v t li u nghiên c u .................................................................. 24
ng nghiên c u ................................................................................ 24
2.1.2.Hóa ch t và thi t b nghiên c u nuôi c y mô t bào ................................... 24
2.1.3.Thi t b , v t li u s d ng cho nghiên c u tr ng lan Kim tuy n .................... 24
m nghiên c u ................................................................. 25
2.2.Th
2.3.N i dung nghiên c u .................................................................................... 25
u .............................................................................. 25
2.4.
u
ch
u ti
ng:
ra r (in vitro) c a cây lan Kim tuy n . .................... 25
n kh
2.4.2.
m
ng c a n
u
ng c a m t s lo i giá th , phân bón lá và
ng cây lan Kim tuy n sau nuôi c y mô. ....................... 27
tr
............................................ 29
2.4.3.Các ch
lý s li u ............................................................ 30
. K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N ............................... 31
3.1.
ng c a m t s ch
u ti
n ra r t o cây hoàn
ch nh in vitro cây lan Kim tuy n A. roxburghii (Wall.) Lindl................................. 31
3.1.1.
ng c a n
-
n kh
c a ch i lan Kim tuy n A.
roxburghii (Wall.) Lindl. .................................................................................... 31
3.1.2.
ng c a t h
n kh
c a ch i lan Kim
tuy n A. roxburghii (Wall.) Lindl. ...................................................................... 34
3.2. Nghiên c u
ng c a m t s bi n pháp k thu t sau nuôi c y mô (in vitro)
i v i cây lan Kim tuy n A. roxburghii (Wall.) Lindl. ....................................... 37
3.2.1.
ng c a giá th tr
ng c a cây lan Kim tuy n A.
roxburghii (Wall.) Lindl. ................................................................................... 37
3.2.2.
ng c a m t s lo
ng c a cây lan Kim tuy n
A. roxburghii (Wall.) Lindl. ................................................................................ 44
v
3.2.3.
ng c a m
tr n
ng c a cây lan Kim tuy n A.
roxburghii (Wall.) Lindl. .................................................................................... 50
. K T LU N VÀ KI N NGH ........................................................ 56
4.1. K t lu n ...................................................................................................... 56
ngh ....................................................................................................... 57
TÀI LI U THAM KH O ............................................................................... 58
PH L C
vi
DANH M C CÁC T
A.roxburghii (Wall.) Lindl.
VI T T T
- Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl
CT
- Công th c
CTTN
- Công th c thí nghi m
IBA
- -indol butyric acid
-NAA
- -naphthalene acetic acid
CV
- Coefficient of variation
LSD
- Least Significant Difference
P
- Probability
vii
DANH M C B NG BI U
B ng 3.1.
ng c
-N
n kh
c a ch i lan Kim
tuy n in vitro ........................................................................... 32
B ng 3.2.
ng c
n kh
c a ch i lan Kim tuy n
................................................................................................. 35
B ng 3.3.
ng c a giá th tr
tuy
n t l s ng c a cây lan Kim
............................................................ 38
B ng 3.4.
ng c a giá th tr
ng chi u
cao c a cây lan Kim tuy
.......................... 39
ng c a giá th tr
ng thái ra lá c a cây lan Kim
B ng 3.5.
tuy
B ng 3.6.
............................................................ 42
ng c a giá th tr
n
Kim tuy
B ng 3.7.
ng thái ra nhánh c a cây lan
.................................................... 43
ng c
ng chi u cao
c a cây lan Kim tuy
B ng 3.8.
................................. 45
ng c
tuy
B ng 3.9.
ng thái ra lá c a cây lan Kim
n
............................................................ 47
ng c
ng thái ra nhánh c a cây lan
Kim tuy
.................................................... 49
B ng 3.10 cho th y
ng c a m
tr
u
cao c a cây lan Kim tuy n. ..................................................... 51
B ng 3.10.
ng c a m
tr
cao c a cây lan Kim tuy
B ng 3.11.
ng c a m
.......................... 51
tr
Kim tuy
B ng 3.12.
ng chi u
ng thái ra lá c a cây lan
.................................................... 53
ng c a m
lan Kim tuy
tr
ng thái ra nhánh c a cây
.............................................. 54
viii
DANH M C HÌNH
Hình 3.1. Bi
ng c a giá th tr
chi u cao c a cây lan Kim tuy
Hình 3.2. Bi
................ 41
ng c
ng
chi u cao c a cây lan Kim tuy
Hình 3.3. Bi
ng c a m
c a cây lan Kim tuy
ng
................ 46
tr
ng chi u cao
................................. 52
1
M
U
1.
tv
Lan Kim tuy n còn có tên g
m, Kim tuy
Gi i th y
C nhung,
t loài th c v t n hình c a chi cùng
tên (Anoectochilus) [8]. Lan Kim tuy n là cây th o, m c
t, có thân r m c
tm
c, mang các lá m
t.
Các loài lan Kim tuy n phân b trên m t khu v c khá r ng, t vùng
Himalaya n
, mi n Nam Trung Hoa, Úc, Papua New Guinea và
m ts h
o thu c qu
. Chúng sinh s ng trên các
tri
c theo khe su
i các tán cây to trong r ng m
cao
500-1.600 mét.
Vi t Nam, loài lan Kim tuy n Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.
c bi
n không nh ng b i giá tr làm c nh mà ch y u b i công d ng làm
thu c. Lan Kim tuy n là m t lo i th
c có giá tr và ti
t l n, có kh
a tr các b nh
t, kháng
khu n, làm thu c tr lao ph i, ho do ph nhi t, phong th
p,
viêm d dày mãn tính, viêm khí qu
c th
ng s c
kho ,..v.v [4].
Nh quý hi m và có tính
c li u quý nên giá cây lan Kim tuy n
c
bán trên th
ng th gi i t 200 - 300 USD/kg (thân, r , lá, hoa). Cây khô có
giá t 3.200 USD/kg, n u thu hái trong t nhiên giá cao g p 3 l n. Trung Qu c,
Ti
m c. Vi
ng và xu t kh u lan Kim tuy n mang l i ngu n thu l n.
n xu t và xu t kh u cây lan Kim tuy n r t l n n
y m t s loài lan Kim tuy n phân b r i rác t i Kon
Vì có nhi u tác d ng quý trong y h c nên lan Kim tuy
thu hái nhi u,
khai thác t n m c c n ki t ngoài t nhiên d
n ngu n nguyên li
tr nên c n ki t.
Do nhu c u s d
c li
nh c bi t s d ng lan Kim tuy n
u tr m t s b nh c p tính, nên loài lan Kim tuy
a
nghiêm tr ng, d
t ch ng ngoài t nhiên n u chúng ta không
2
có bi n pháp b o t n h u hi u. Hi n nay, lan Kim tuy n
c c p báo trong
Ngh
nh
-CP thu c nhóm IA, nghiêm c m khai thác s d ng vì
m
Vi t Nam (2007), phân h ng EN A1a,c,d
[1], [2].
Vì v y, nghiên c u k thu t nhân gi ng và nuôi tr ng lan Kim tuy n trong
Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl. là vi c h t s c c n thi t nh m
b o t n và phát tri n loài
c li u nguy c p, quý hi m này. Chính vì v y, chúng
tôi ti
tài: Nghiên c u
ng c a m t s ch
u ti t sinh
n kh
và bi n pháp k thu
ng c a gi ng
lan Kim tuy n (Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.) t i Thái N
nh m b o t n và phát tri
c li u quý hi m này.
2. M
- yêu c u c
M
tài
tài
nh
cn
ch t u ti t
n kh
c a
cây Lan Kim tuy n nhân gi ng b
y mô t bào.
nh
c giá th tr ng, lo i phân bón lá và m
thích h p cho
tr ng lan Kim tuy n sau nuôi c y mô.
Yêu c u c
- Nghiên c u
n kh
tài
ng c a n
ch
u ti
ng: IAA và
t o cây hoàn ch nh cho cây lan Kim tuy n .
r
- Nghiên c u
ng c a giá th tr ng, lo i phân bón qua lá và m
tr ng thích h p cho lan Kim tuy n sau nuôi c y mô.
3.
c và th c ti n c
tài
c
- K t qu nghiên c u c
tài góp ph n vào vi c xây d ng quy trình k
thu t nhân gi ng in vitro cây lan Kim tuy n.
- Góp ph n vào vi c nuôi tr ng và phát tri n cây lan Kim tuy n
c
khai thác trong t nhiên, t
o t n ngu n gen quý hi
tuy t ch ng.
d li u cho vi c xây d ng quy trình tr ng,
cây
- Cung c
lan Kim tuy n và các lo i cây khác.
3
c ti n
- T nh ng k t qu
tài góp ph n vào vi
k thu t nhân gi ng in vitro cây lan Kim tuy n nh m cung c p cây gi ng v i s
ng l n, có ch
ng th i gi
c tính di truy n c a cây.
Ch n l c và tr ng cây lan Kim tuy n theo quy mô s n xu t công nghi p nh m
ph c v nhu c
c li u tiêu th n
a và xu t kh
i v i loài cây này.
- Góp ph n b o t
c lo
c li
t ch ng.
- Góp ph n vào vi c
i dân.
4
T NG QUAN TÀI LI U
1.1.
khoa h c c a
tài
1.1.1.
y mô t bào th c v t và các v
liên quan
a) Khái ni m nuôi c y mô t bào th c v t
Nuôi c y mô t bào th c v t là ph m trù khái ni m chung cho t t c các
lo i nuôi c y nguyên li u th c v t hoàn toàn s ch các vi sinh v t trên môi
ng nhân t
u ki n vô trùng. Nhân gi
ti n hành trên nguyên t c c
c
n thân có mang ch i
hay m nh c
c nh phù h p v
ng
nr
u ki n vô trùng c a
ng nghi m [3].
ng in vitro
vô tính c
sung cho các k thu t nhân gi ng
t, ghép tách dòng m t k thu t ti n b v i nh ng
nhân gi ng cao g p nhi u l
vô tính khác; Ch
ng
ng s n xu t, không ph thu
v ; Có kh
p hóa cao do nuôi c
ng, nhi
u ki n th i ti t, mùa
u ki n
nh v
công nghi p hóa hoàn
toàn t khâu nhân cây gi ng v i s
ng l
n khi
i
[3].
khoa h c c
y mô t bào th c v t
a t bào (Totipotency)
Gottlibeb Haberlant (1902) - nhà th c v t h
u tiên cho nuôi c y mô t bào th c v
t n n móng
gi thuy t v tính toàn
a t bào trong cu n sách "Th c nghi m v nuôi c y tách r i". Theo ông:
bào b t k c
di truy n (DNA) c n thi
m it
sinh v
u mang toàn b
c a c sinh v
ng thông tin
u ki n thích h p,
u có th phát tri n thành m t cá th hoàn ch
c
nghi m tái sinh cây con t t bào lá, ch
a t bào.
5
o ra công ngh sinh h c ng d ng trong nhân gi ng vô tính,
t o gi ng cây tr ng và dòng ch ng ch u.
at
t bào th c v t. Hi
hoàn ch nh t m t t bào riêng r [6].
khoa h c c
c hi
c kh
y mô
o ra m
S phân hoá và ph n phân hoá
S phân hoá t bào là s chuy n hoá các t bào thành các mô chuyên hoá,
m nh n các ch
.
Trong nh
u ki
ng thích h p, chúng l i có th tr v d ng
t bào phôi sinh và phân chia m nh m
bào h p t
u cho ra các
t bào m i và có kh
cg i
là s ph n phân hoá t bào.
c bi u th b
sau:
Phân hoá t
bào
T bào phôi
sinh
T bào giãn
T bào
chuyên hoá
Ph n phân
hoá t bào
V b n ch t thì s phân hoá và ph n phân hoá là m
u hoà
ho t hoá gen. T i m t th
n c a cá th có
m ts
c ho t hoá (mà v
h n ch
t o ra tính tr ng
m i, m t s gen khác l i b
ho
u này x y ra theo m t
c mã hoá trong c u trúc c a phân t DNA m i t bào.
M t khác khi cho t bào n m trong m t kh i mô c
ng b c ch b i
các t bào xung quanh. Khi tách riêng t ng t bào ho c gi
c c a kh i
6
mô s t
hoá s
u ki n thu n l i cho s ho t hoá các gen c a t bào, quá trình ho t
c x y ra theo m t c u trúc nh
nh s n có trong b
S tr hoá
Kh
ch i, r các thành ph n khác nhau là r t khác nhau. Vì v y
ch n m u c y phù h p ph
vào tr ng thái sinh lý hay tu i m u. Trong
nuôi c y in vitro, các m u non tr có s ph n ng v
u ki n và môi
ng nuôi c y nhanh, d
c bi t trong nuôi c y mô s o, phôi. Ngoài
ra mô non tr m
ng m nh, m
nhi m m m
b
[14].
1.1.2.
tuy n
a)
khoa h c c a vi
khoa h c c a vi
c
Giá th
Kh
khe tr
c nhi
nhi u
nh bi n pháp k thu t tr ng cây lan Kim
nh giá th tr ng
ch y
c s d ng là cát ho c s i. Ngày nay giá th
i r t nhi u. Cây c n c
ng ti p xúc v i r cây.
ng là lo i có kh
thoáng khí.
c
thoáng khí c a giá th
c quy
nh b i nh ng
n có nh ng kho ng tr ng r t nh , không ch a
c l i, s i thô t o ra nh ng kho ng tr ng quá l n,
c nhanh.
Giá th
ng ph i có nh
m:
- Có kh
m
thoáng khí.
- Có pH trung tính và có kh
- Th
nh pH.
c d dàng.
- B n, có kh
tái s d ng ho c phân h
ng.
- Nh , r và thông d ng.
- Giá th có nhi u lo
a, tr u hun,
trâu,... Có th
ho c tr n l
t nd
b)
iv
m t ng lo i.
khoa h c c a vi c s d
Phân bón lá là m t trong 4 y u t quan tr
nghi p. Bón phân qua l
cs d
b
hoa m t cách k p th i các nguyên t
u trong s n xu t nông
ng cho cây
ng.
7
Phân bón lá có tác d
ng kh
sâu b nh cho cây, tính ch ng h n và c i thi
t, ch
ng s n ph m.
Phân bón lá giúp cây nhanh chóng ph c h i sau tr ng ho c sau khi tr i qua các
hi
ng th i ti t b t thu
ng, l nh, khô h n, ng p úng.
Các k t qu nghiên c
hòa
u kh
nh r ng khi bón phân qua lá d ng
ng phân phun lên lá s
phun 30 gi
ng hóa h
ng hóa h
iv
i v i lân, sau khi
m urê ch vài gi . Tuy nhiên hi u
qu c a phân bón lá ph thu c vào các gi ng cây tr ng,
ng c a cây, lo i phân, n
l i, s
phân, li
n sinh
ng và th i gian s d ng. Tóm
ic
c các b nh ngay
t, ch
c)
khoa h c c a vi c b trí m
M
tr ng h p lý
và kho ng cách gieo tr ng là hai y u t
su t thân lá lan Kim tuy n .
quan h gi
cm
ng nhi
n
tr ng s gi i quy t
cm i
ng và phát tri n c a các cá th làm cho qu n th cây lan
Kim tuy n khai thác t t nh t kho ng không gian và m
ng cao nh t trên m
M
ng s n ph m.
càng cao m
c nh tranh v
t nh
di n tích.
c nh tranh di n ra càng quy t li t.
ng và kho ng tr
không cung c
cs n
t cây
phát tri n.
t
nhu c u c a cây thì cây s phát tri n kém, thân lá nh . Trên
không gian, khi ph i c nh tranh ánh sáng v i các cây khác cây s ph
ng chi u cao t
y s làm cho cây y u, s c ch ng ch
c
u ki n ngo i c nh.
Tr ng cây v i m
v
th p cây s không ph i c nh tranh nhau nhi u do
u ki n phát tri n t
qu n th gi
ng th i, cây s b
t cá th
t
ng nhi u b
u ki n ngo i c nh
do tính qu n th b gi m.
M
ngo i c nh t
tr ng h p lý s giúp cho cây s d n
ct
u ki n c a
ng phát tri n t t, kh
a cây
ng
u qu kinh t .
8
cây phát huy h t ti
h p
n nghiên c u các bi n pháp k thu t phù
nh giá th tr ng, phân bón và m
ph
t, ch
1.2.
tr ng thích h p góp
ng lan Kim tuy n.
Gi i thi u chung v cây lan Kim tuy n
1.2.1. Phân lo i
Lan Kim tuy n (Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.) còn có tên g i
lan G m, lan Kim tuy n lông c ng, Kim tuy n, Kim tuy
,C
nhung,
là m t loài th c v t
, Gi i th y
n hình c a chi cùng
tên (Anoectochilus) [8].
Theo các tác gi : Nguy n Ti n Bân [1], Tr n H p [8], Nguy
nh [5], cây hoa lan Orchi thu c h
Orchidaceae, b
phong lan
Asparagales, l p m t lá m m Monocots. H lan
thu c ngành Ng c lan Magnoliophyta, phân l p hành Lilidae. H Lan là h có
s
ng th hai sau h Cúc, phân b t 680
ng loài l
y u là
Á. T i vùng nhi
c bi t là châu M
i, h Lan phân b r ng kh c t
núi th p lên c
so v i m
nhi
n 560
ml
các loài lan ch m c
c bi
ng là nh ng cây b i s ng trên m
a lan ho
i
i 2000 m
c g i là
c g i là Phong lan.
H Lan c a Vi
t phong phú, theo Tr n H p [8] thì Vi t Nam
có kho ng 137 - 140 chi g m trên 800 loài lan r ng.
Lan Kim tuy n (Anoectochilus
c Carlvon Blume mô t
1810 thu c phân h Orchidoideae. Tên "lan Kim tuy n " b t ngu n t nh ng
ng gân r
p trên phi n lá c a các loài lan này. Tên ti ng La tinh b t ngu n
t các t Hy L p aniktos (m ) và cheilos (môi). Trên th gi
51 loài.
c
Vi t Nam, gi ng lan Kim tuy n (Anoectochilus roxburghii (Wall.)
c bi
n ch y u v i công d ng làm thu c.
1.2.2. V trí, phân b
9
H Lan phân b ch y u t 680
nhi
n 560
y u là
c bi t là châu M
h Lan phân b r ng kh c t
i vùng nhi
ml
i núi th p lên c
i,
i núi
cao. Theo Briger (1971), vùng B c bán c u có 75 chi và 900 loài, vùng Nam
bán c u có 40 chi và 500 loài, toàn Châu Âu có 120 loài, B c M có 170 loài
[7].
Vi t Nam n m trong vùng có khí h u và v trí thu n l i cho s phát tri n
c a nhi u loài lan. Trong nh
c khá nhi u loài
t t trong các gi ng lan nhi
i và x
l nh: Phalaenopis, Cattleya,
Dendrobium, Vanda, Miltonia, Odontoglossum, Cymbidium. Trong s các
gi ng này, có nhi u loài r
c th gi
ng.
Các loài lan Kim tuy n phân b trên m t khu v c khá r ng, t vùng
Himalaya
m ts h
n
, mi n Nam Trung Hoa, Úc, Papua New Guinea và
o thu c qu
tri
. Chúng sinh s ng trên các
c theo khe su
i các tán cây to trong r ng m
500-
cao
ánh sáng, yêu c
nhi u mù
t
p, thoáng khí, v i b lá màu xanh l c ho c mang các màu s c
khác (tùy theo loài), có b m t m
tm
i gân lá
ph c t p.
1.2.3.
m th c v t h c
Lan Kim tuy n là cây th o, m c
m
c, mang các lá m
t, có thân r m
t
t.
a) Thân r
Thân r n m ngang sát m
r t 5-
u dài thân
ng kính thân r t 3-4 mm, trung bình
là 3,17 mm. S lóng trên thân r t 3-7 lóng, trung bình là 4,03 lóng. Chi u dài
c a lóng t 1-6 cm, trung bình là 1,99 cm. Thân r
ng có màu xanh tr ng,
ng nh n, không ph lông.[11]
b)Thân khí sinh
10
ng m c th
ng trên m
t, ít khi m c nghiêng.
Chi u dài thân khí sinh t 4ng kính thân khí sinh
t 3- 5 mm, trung bình là 3,08 cm. Thân khí sinh mang nhi u lóng, các lóng có
chi u dài khác nhau. S lóng trên thân khí sinh thay i t 2-4 lóng, trung bình
là 2,87. Chi u dài m i lóng t 1ng
m
c, nh n, không ph
ng có màu xanh tr
h ng nh t [11].
c) R
R
c m c ra t các m u trên thân r
c hình thành
t thân khí sinh. R
ng xu
ng m i m u ch
có m t r
c hình thành t m t m u trên thân r . S
cr
i tu theo cá th . S r trên m t cây
ng t 3-10, trung bình là 5,4. Chi u dài c a r
i t 0,5-8 cm, r dài
nh t trung bình là 6,07cm và ng n nh t trung bình là 1,22 cm, chi u dài trung
bình c a các r trên m t cây là 3,82 cm [11].
d) Lá
Lá m c cách xo n quanh thân, xoè trên m
t. Lá hình tr ng, g n tròn
g
ng dài t 3-5 cm, trung bình là 4,03
cm và r ng t 2m t trên và
ph lông m
gân lá m
ng có 5 gân g c.
Các
ng có màu h ng m t trên và n i r
gi a
có màu vàng nh t. M
nh t, nh n v i 5 gân g c n i rõ.
Các gân bên phía rìa lá n i rõ, gân gi a lá m
i không rõ. Cu ng lá
dài 0,6ng nh n và có màu tr
tía b lá.
B lá n i rõ và nh n. S lá trên m
i t 2ng có 4 lá.
cc
i, các lá trên m
c khác
nhau rõ r t [11].
e) Hoa, qu
C m hoa dài 10- 20 cm ng n thân, mang 4-10 hoa m
c
hình tr ng, dài 6-10 mm, màu h ng. Các m nh bao hoa dài kho ng 6 mm; cánh
11
môi màu tr
n 1,5 cm, m i bên g c mang 6-8 d i h
Mùa hoa tháng 10-12. Mùa qu chín tháng 1211].
1.2.4. Yêu c
iv
u ch
u ki n ngo i c nh c a cây lan Kim tuy n
a) Nhi
Nhi
là nhân t có tính ch t quy
n s phân b
phát tri n c a các loài lan trên th gi i. Nhi
loài, tùy thu
thích h p tùy thu c vào t ng
m phát sinh chúng. Nhi
ng thích h p t 13 - 160
ch
cho lan Kim tuy n sinh
- 300C vào ban ngày. Cây s
100C và lên t i 380C trong th i gian ng n,
c nhi
ng,
n t o s thông gió t t
nhi
cao
n.
b) Ánh sáng
S phát tri n c
chi
l v
nm
nh
ánh sáng và th i gian
tm
ng
ng. Vì v y, m t trong nh ng nguyên t c b n c a vi
th
cho cây nh
c nhi
Nó yêu c u có ánh n ng M t tr
ph
râm nh
i không th
ng g t,
nh. C n thi t ph i làm giàn che n ng cho cây, tùy thu c
vào t ng loài mà có ch
che n ng thích h p.
Ánh sáng cung c
Lan Kim tuy n phát tri n
c)
n cây.
ng cho cây thông qua quá trình quang h p.
nh
u.
m
m là m t trong nh ng y u t
phát tri n c
h
ng r t l
các loài lan
n lan s
c r t nhi
ns
ng và
m, vi c ch
m thích
ng và phát tri n t
ng th i gi m
ng lan c
mc
m sau:
m c a m t vùng sinh thái nh
u ki
nh. Ví d
vùng tr ng, nhi u gió.
qu , r
a
m
i tr c th
c
12
mc
c theo ý mu
l
m trong ch
nh.
mc
o ao, xây b , tr
m này có th c i t o
m c c b do c u t o c a giá th , th tích ch u, s
này ph thu c k thu t c
i tr ng lan.
M
u có m
m t i thi
tx c a
Vì v y khi tr ng lan ph i n
c xu t x , ph h c a nó và bi
t
m phù h p v i yêu c u sinh thái và quá trình phát tri n c a cây thì cây m i
ng phát tri n t
ng yêu c u c
i nuôi tr ng [7].
Cây lan Kim tuy n yêu c
m cao. N
m cao cây d b nhi m b nh, b úng.
m th
ng
d) Phân bón
Lan Kim tuy n không yêu c
mùa thu bón phân 10 - 15 ngày/l
ng phân bón nhi u. Vào mùa xuân và
bón phân
30 ngày/l
c s d ng b
c,
phun b ng bình có tia m
i phun cây vào bu i sáng,
tránh lúc chi u mu n. N u phun vào chi u mu n s làm cho cây b m cao d n
n cây d b n m và vi khu n xâm nh p gây th
1.2.5. Giá tr c a cây lan Kim tuy n
a) Giá tr y h c c a cây lan Kim tuy n
Trong y h c, cây lan Kim tuy n
c coi là v thu c quý, có tác d ng
ng s c kh e, làm khí huy t
thông. Cây thu c có tính kháng khu n, ch a
các b nh viêm khí qu n, viêm gan mãn
Shi-Chao Cui và c ng s (2012) [21]
u tác d ng h
ng
huy t và ch ng oxy hóa b ng ch
c chi t xu t t A. roxburghii
th nghi m trên nh ng con chu t m c b nh ti
ng. V i li u t 2g/kg trong
tr
ng trong máu, gi m cholesterol.
ng c a enzyme ch t ch ng oxy hóa và m
vitamin
E trong gan và th n c a chu t b ti
ng.
Yang LC và c ng s (2013) [23]
Modulatory và ho t ch t ch
u tác d ng mi n d ch c a
t d n xu t
13
có trong chi Anoectochilus. Các ph n ng mi n d ch b m sinh c a modulatory
nh trong ng nghi m s d
phân tích
microarray và in vivo trên chu t BALB/C administrated v i AG 5 và 15 mg/kg
trong 3 tu n. Các phân tích m
ng minh AG gây ra s bi u hi n
c a các cytokine, chemokine, ILcc a
AG chu
.
Vi c x
splenocyte ph bi
u
tr AG nhóm. Vi
u tr
c t bào ch ng l i
các t bào YACl ph
a CD3 (+) CD8 (+) các t bào T
c t bào trong th nghi m mi n d ch b m sinh. Thí nghi m cho th y r ng
AG gi m
c
c kh i u và tr
ng kh i u. Bên c
l ph
a DC, CD3 (+) CD8 (+) các t bào T, CD49b (+) CD3
(-) NK t bào trong splenocytes, và ho
c t bào chu t mang kh i u.
Ngoài ra, các mô mi n d ch c a kh i u
ng minh r
u
tr
i uc t bào T-cell. Nh ng k t qu này
ng minh r ng AG, m t polysaccharide có ngu n g c t m t ngu n th c
v t, có ti
m sinh mi n d ch modulatory và ho t tính kháng un
c s d ng cho li u pháp mi n d
Jian-Gang Zhang và c ng s (2015) [16]
nghi m trên chu t v i vi c
dùng ho t ch t Anoectochilus polysaccharose roxburghii (ARP) là thành ph n
chính trong cây lan Kim tuy n Anoectochilus roxburghii v i hai li u ARP (100
và 300 mg / kg) m i ngày m t l n trong 25 ngày v i nh ng con chu t m c b nh
ti
ng tr
ng c a ARP, m
ng
huy
otransferase
(ALT) và superoxide dismutase ho
ng (SOD), malondialdehyde (MDA)
n i dung, triglycerid (TG), cholesterol (TC), th p -density lipoprotein
cholesterol (LDLc ki
a, vi c ki m tra
mô h
c th c hi n trên các tuy n t y lách và gan c a chu t. K t qu
cho th y so v i nh ng con chu t m c b nh ti
u tr ,
ARP (100 ho c 300 mg/kg) gây ra s s t gi
n
glucose máu,
ho
ng c a AST và ALT, và n i dung MDA, và m t s
trong n i dung glycogen gan, ho
ng SOD, ch s tuy n c và ch s lách.
14
ng th i, nh
i trong chuy n hóa lipid b suy y u m t ph n b ng
ch ng là gi m TC huy t thanh, TG và n
LDL-C chu t m c b nh ti u
ng. Ngoài ra, ki m tra mô h c cho th y ho t ch t chính ARP (100 ho c 300
mg/kg) làm suy y
các t
nh lý tuy n t y và gan c a
chu t b ti
ng, và c i thi n tuy n t y và ch
y, các ho t
ng tr
ng c a ARP có th là do s c i thi n c a glucose và lipid
i ch
o v mi n d ch và gi m stress oxy hóa.
b) Giá tr kinh t c a cây lan Kim tuy n
Hi n nay lan Kim tuy n ngoài t
có r t nhi u tác d
n m c c n ki t [4] do
c li u và làm cây c nh. Giá bán trên th
c a lan Kim tuy n khô là 3.200USD/kg,
c thu hái trong t
3 ho c nhi u h
m
ng th gi i
300-320USD/kg, n u
c bi t có n m c ng sinh r thì giá này s cao g p
a. Cây gi ng lan Kim tuy n có th t o t nhân in vitro các
t thân, h t gi ng và các b ph
ng c a cây. Tuy nhiên s sinh
ng các c a cây lan Kim tuy n in vitro ch m, kéo dài th i gian nhân gi ng.
Hi n nay nhi
c ch y u s n xu t cây lan Kim tuy n t nuôi c y h t in vitro.
Trung Qu
tb
ng và xu t kh u lan Kim tuy n mang l i
ngu n thu l n.
1.3. Nhân gi ng cây lan Kim tuy n
1.3.1. Nhân gi ng b ng h t
Nhân gi ng b ng h t hay con g i là nhân gi ng h u tính, trong thiên nhiên
s th ph n c a Lan do côn trùng th c hi n, c u trúc hoa hoàn toàn thích ng
v i s th ph
hoa và s chín c
nh sâu b có tính b t bu
c
ng t
t lo
u trúc c a
uan sinh d
u nên s giao ph n
i v i t t c các loài Anoectochilus. S th ph n
c côn trùng th c hi
c a mùi
t, màu s c s c s và nh ng c u t o c a hoa là nh ng nhân t
thu hút các tác nhân th ph n t kho ng cách xa.
n nuôi tr
các gi ng lai theo ý mu
m b o k t qu c a s giao ph n cao và t o ra
i ph i ti n hành th ph n nhân t o. S th
15
ph n có th cùng cây, có th khác cây.
m: d làm, giá thành h
c nhi u
cây kho , không b b
m giao ph n chéo có th
c
nh ng dòng bi n d cho v t li u ch n t o gi ng. Tuy nhiên trong th c t h t lan
Kim tuy n r t hi m, s
ng h t r t nhi
l n ym
a th i
cây ra hoa có ch
ng t t.
1.3.2. Nhân gi ng b ng cây con
Khi r
i nhi u, cây có t 3-5 lá, cây c ng cáp có th tách
n và d làm nh t.
tr
1.3.3.
L y m t gi hành c t ra làm nhi
n, m
n có nhi u m
t các
n này vào m
m; ch c n cát và rêu. Sau vài tu n s xu t hi n nh ng
cây con có th
ng vào các ch u m i.
áp c
ng, giá thành th
n, d làm, quen v i t p quán, kinh
nghi m c
có m t s tr ng
ng 2ng gi ng
không cao, cây hoa tr ng lâu b thoái hoá, b nh virus có nhi u kh
truy n và phát tri n, t
m ph m ch t hoa.
1.3.4. Nhân gi ng in vitro
Nhân gi ng in vitro
lan trên quy mô công nghi p. So v
t
phát tri n 2pháp nuôi c y mô) s s n xu t ra m t s
kho ng 4 tri
.
S
t hi n nay có th nhân gi ng
ng
ng cây con g n
ng
ng b ng in vitro c a lan Kim tuy n nói riêng và hoa Lan nói
c ng d ng r
c sinh s n qua
d ng d hành (protocorm). Cùng m
ng t o hàng lo t
protocorm và các protocorm có th ti p t c phân chia thành các protocorm m i
ho c phát tri n thành cây hoàn ch nh.