QUY TRÌNH PHÂN TÍCH MẪU BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐO QUANG TRÊN THIÊT BỊ UV-VIS
AGILENT 8453
Máy tính điều khiển
Nguồn phát tia đơn sắc
Tính năng
•
Định tính, định lượng sự có mặt và nồng độ của một chất (trong đất, nước, không khí) có kh ả năng tạo màu
với chất chỉ thị tại bước sóng ʎxác định
•
•
Tự động lập phương trình đường chuẩn, xác định hệ số tương quan R 2, …..
Tự động tính toán nồng độ của chất trong mẫu cần đo dựa trên đường chu ẩn đã đ ược xây d ựng
Quy trình thực hiện
•
•
•
Bước 1. Khởi động máy
Bước 2. Thiết lập chương trình đo
Bước 3. Thực hiện thao tác đo
Bước 1. Khởi động máy
Máy gồm hai phần:
-
Nguồn phát tia đơn sắc
Máy tính điều khiển
1. Bật nguồn phát đơn sắc
2. Khởi động máy tính và click vào biểu tượng instrument 1
online
Khi xuất hiện cửa sổ này click Cancel
Màn hình điều khiển khi khởi động xong ph ần mềm
Bước 2. Thiết lập chương trình
Click hình tam giác sau đó chọn Quantification để cài đ ặt ch ương trình đo
Click khi đo mẫu phân tích
Nhập bước sóng để đo
Click khi dựng đường
Nhập bước sóng để đo
chuẩn
Không can thiệp
Click khi auto rezo mẫu
Sau khi nhập bươc sóng và đơn vị, click ok để hoàn tất việc thiết l ập ch ương trình đo
Bước 3. Đo mẫu
1cm
Mặt nhẵn
Dụng cụ sử dụng để đo trong toàn bộ quá trình đo mẫu là cuvet, có chi ều dày 1cm, g ồm 2 m ặt nh ẵn và hai m ặt
nhám. Khi thao tác không chạm tay lên hai m ặt nh ẵn (ch ỉ ti ếp xúc hai m ặt nhám). Khi đ ưa cuvet vào khe c ắm chú ý
đặt đúng mặt nhẵn theo chiều ánh sáng đ ơn s ắc chuy ền qua. Các m ặt cuvet ph ải đ ược lau kho b ằng gi ấy m ềm đ ể
tránh làm xước mặt cuvet
Độ cao mẫu đo
B1. Auto rezo mẫu
B2. Dựng đường chuẩn
B3. Đo mẫu
B1. Auto rezo
Sau khi đổ mẫu trắng vào cuvet, lau khô các mặt và cho vào khe c ắm
cuvet đúng chiều click auto rezo và chờ đến khi màn hình hi ển th ị k ết
quả auto rezo
Click Blank
B2. Dựng đường chuẩn
Sau khi auto rezo xong mẫu click nút Standard
Sau khi click nút Standard ở trên thì nút standard ở d ưới sẽ sáng. Đ ể d ựng đ ường chu ẩn l ần
lượt cho các mẫu có nồng độ từ thấp đến cao vào đo và click Standard. B ắt đ ầu t ừ m ẫu có
nồng độ bằng “0”. Vì vậy, sau khi blank xong không l ấy cuvet ra mà click standard luôn
Đặt tên cho mẫu chuẩn
Nồng độ được chuẩn bị
ABS đo được
Sau khi đo ABS các mẫu chuẩn bảng kết quả trên sẽ xu ất hi ện. Đ ể th ấy đ ược ph ương trình đ ường chu ẩn di chuy ển con
chỏ đến vị trí như hình, sau đó dịch chuy ển xuống để bôi đen c ả b ảng.
Tiếp đến click Calibrate
Tiếp đến click Show Coefficients để thấy phương trình
đường chuẩn
PT đường chuẩn
B3. Đo mẫu cần đo
•
Click lần 1
Click lần 2
•
Mẫu cần đo là các mẫu sau khi tiến hành phản ứng
thủy phân (mẫu phân tích và mẫu đối chứng)
Để đo mẫu trước tiến click nút sample ở trên sau
đó tiếp tục click sample ở dưới. Máy sẽ tự động
tính toán nồng độ mẫu cần đo không cần phải tính
toán thủ công bằng máy tính hay excel
Trên đây là hướng dẫn sơ lược các thao tác đo m ẫu trên máy đo UV-VIS Agilent 8453.
Trước khi đi thí nghiệm ngoài việc tìm hiểu trước bài thí nghiệm c ần tìm hi ểu kỹ c ả
tài liệu này
- Đánh giá độ tin cậy của đường chuẩn
- Tìm hiểu khoảng đo cho kết quả tin cây
- Tìm hiểu mẫu như thể nào có thể đem đo trực tiếp, mẫu như nào cần phải xử lý trước khi đem đo
- Kết quả thí nghiệm thu được như thế nào là đúng (logic và kết quả)