Cac ki thuat MD

Một số kỹ thuật miễn dịch

(kết hợp kn - kt)
PGS.TS. Phạm Đăng Khoa
Bộ môn Miễn dịch - Sinh lý bệnh
Trờng Đại học Y Hà Nội


đại cơng
Các kỹ thuật MD đều dựa trên sự kết hợp KN với KT.
ý nghĩa của các kỹ thuật MD: nếu đã biết trớc KN (hoặc
KT) thì có thể phát hiện đợc KT (hoặc KN) đặc hiệu với
nó.
Nguyên lý chung:
- Trên mỗi đơn phân KT có 2 paratop
- Trên mỗi KN có nhiều epitop
- Khi có tỷ lệ thích hợp KN / KT thì mạng lới kết KN-KT có
kích thớc lớn (có thể nhìn thấy bằng mắt thờng).


Mçi ®¬n ph©n KT cã 2 paratop


CÊu tróc kh¸ng thÓ (paratop vµ epitop)


Phøc hîp KN-KT (phøc hîp miÔn dÞch)


Phøc hîp KN-KT (phøc hîp miÔn dÞch)

Phøc hîp KN-KT (phøc hîp miÔn dÞch)


Ph©n tö KN cã nhiÒu epitop


M¹ng líi KN (2) vµ KT (1)


C¸c nhãm kü thuËt miÔn dÞch
1. Nhãm kü thuËt tña
2. Nhãm kü thuËt ngng kÕt
3. Nhãm kü thuËt ®¸nh dÊu


nhóm kỹ thuật tủa
Đặc điểm: KN dới dạng phân tử hoà tan
1. Kỹ thuật tủa trong môi trờng lỏng
Khi trộn dung dịch KN với dung dịch KT sẽ xảy ra hiện t
ợng tủa làm cho dung dịch từ trong suốt trở thành mờ,
đục, vẩn. Ví dụ trong chẩn đoán, trong đánh giá kết quả
gây mẫn cảm...


nhãm kü thuËt tña
2. Kü thuËt tña trong m«i trêng gel
2.1. Kü thuËt ®Þnh tÝnh
Kü thuËt khuÕch t¸n kÐp (Ouchterlony)
Kü thuËt ®iÖn di ®èi lu (Kohn)

Kü thuËt ®iÖn di miÔn dÞch


Kü thuËt Ouchterlony


Kü thuËt Ouchterlony


Kü thuËt Ouchterlony


Kü thuËt Kohn


Kü thuËt Kohn


Kü thuËt ®iÖn di miÔn dÞch


nhãm kü thuËt tña
2. Kü thuËt tña trong m«i trêng gel
2.1. Kü thuËt ®Þnh lîng
Kü thuËt khuÕch vßng (Mancini)
Kü thuËt ®iÖn di “tªn löa” (Laurell)


Kü thuËt Mancini

Kü thuËt Laurell


nhóm kỹ thuật ngng kết
Đặc điểm: KN dới dạng các tiểu thể, có thể là tế bào
(hồng cầu, bạch cầu), hạt trơ nhân tạo, có mang KN một
cách tự nhiên (KN là một cấu phần trên bề mặt tiểu thể)
hoặc KN đợc gắn vào do bệnh lý hoặc do nhân tạo.
Ưu điểm: Kích thớc tiểu thể lớn gấp bội kích thớc phân tử
---> kỹ thuật ngng kết trong miễn dịch nhạy gấp nhiều
lần kỹ thuật tủa.


nhóm kỹ thuật ngng kết
1. Kỹ thuật ngng kết chủ động (trực tiếp)
Khi KN là một cấu phần của tiểu thể (thờng là tế bào)
Ví dụ: Kỹ thuật xác định nhóm máu (hệ nhóm máu
ABO)


HÖ nhãm m¸u ABO


Kü thuËt x¸c ®Þnh nhãm m¸u (hÖ nhãm m¸u ABO)