Luận án Tiến sĩ Khoa học vật liệu: Nghiên cứu cải thiện khả năng mang thuốc chống ung thư cisplatin của chất mang nano dendrimer - Trường Đại học Công nghiệp Thực phẩm Tp. Hồ Chí Minh

Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (285.91 KB, 20 trang )

<b>HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ </b>

<b>NGUYỄN NGỌC HỊA </b>

<b>NGHIÊN CỨU CẢI THIỆN KHẢ NĂNG MANG </b>

<b>THUỐC CHỐNG UNG THƯ CISPLATIN CỦA </b>

<b>CHẤT MANG NANO DENDRIMER </b>

<b>LUẬN ÁN TIẾN SĨ KHOA HỌC VẬT LIỆU </b>

</div>
<span class='text_page_counter'>(2)</span><div class='page_container' data-page=2>

<b>HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ </b>

<b>NGUYỄN NGỌC HỊA </b>

<b>NGHIÊN CỨU CẢI THIỆN KHẢ NĂNG MANG THUỐC </b>

<b>CHỐNG UNG THƯ CISPLATIN CỦA CHẤT MANG </b>

<b>NANO DENDRIMER </b>

Chuyên ngành: Vật liệu cao phân tử và tổ hợp
Mã số: 9 44 01 25

<b>LUẬN ÁN TIẾN SĨ KHOA HỌC VẬT LIỆU </b>

NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC
1. GS. TS. NGUYỄN CỬU KHOA
2. PGS. TS. TRẦN NGỌC QUYỂN

</div>
<span class='text_page_counter'>(3)</span><div class='page_container' data-page=3>

<i>Công trình được thực hiện tại phịng Vật liệu Hóa dược - Viện Khoa học </i>
<i>Vật liệu ứng dụng - Viện Hàn Lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam tại Thành </i>
<i>phố Hồ Chí Minh và phịng thí nghiệm Trung tâm Công nghệ Việt Đức - trường </i>
<i>Đại học Công nghiệp Thực phẩm Thành phố Hồ Chí Minh. Tơi xin cam đoan đây </i>
<i>là cơng trình nghiên cứu của tôi và được sự hướng dẫn khoa học của GS. TS. </i>
<i>Nguyễn Cửu Khoa và PGS. TS. Trần Ngọc Quyển. Các nội dung nghiên cứu, kết </i>
<i>quả trong đề tài này là trung thực, được hoàn thành dựa trên các kết quả nghiên </i>
<i>cứu của tôi và các kết quả của nghiên cứu này chưa được dùng cho bất cứ luận </i>
<i>văn cùng cấp nào khác. </i>

</div>
<span class='text_page_counter'>(4)</span><div class='page_container' data-page=4>

<i>Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới GS.TS. Nguyễn Cửu Khoa và PGS. </i>
<i>TS. Trần Ngọc Quyển, đã dành cho tôi sự động viên giúp đỡ tận tình và những </i>
<i>định hướng khoa học hiệu quả trong suốt q trình thực hiện luận án này. </i>

<i>Tơi xin cảm ơn sự giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi của Học viện Khoa </i>
<i>học và Công nghệ, Khoa Khoa học vật liệu và Năng lượng, Viện Khoa học Vật liệu </i>
<i>Ứng dụng đối với tôi trong quá trình thực hiện luận án. </i>

<i>Tơi xin cảm ơn sự giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi của trường Đại học </i>
<i>Cơng Nghiệp Thực phẩm TP. Hồ Chí Minh đối với tơi trong q trình thực hiện </i>

</div>
<span class='text_page_counter'>(5)</span><div class='page_container' data-page=5>

MỞ ĐẦU ... 1

Mục tiêu của luận án ... 2

Ý nghĩa khoa học của luận án ... 3

Đóng góp mới của luận án ... 4

Chương 1. TỔNG QUAN ... 6

1.1. Giới thiệu dendrimer ... 6

1.1.1. Khái niệm và phân loại ... 6

1.1.2. Tính tương hợp sinh học của dendrimer ... 10

1.1.2.1. Độc tính tế bào <i>in vitro</i> của dendrimer ... 11

1.1.2.2. Độc tính tế bào <i>in vivo</i> của dendrimer ... 12

1.1.3. Phương pháp tổng hợp dendrimer ... 12

1.1.3.1. Các phương pháp tổng hợp ... 13

1.1.3.2. Tổng hợp dendrimer polyamidoamine ... 14

1.1.4. Các phương pháp xác định tính chất của dendrimer ... 17

1.1.5. Ứng dụng của dendrimer trong trị liệu ... 18

1.1.5.1. Hoạt tính trị liệu của dendrimer ... 18

1.1.5.2. Cải thiện độ hòa tan của thuốc ... 19

1.1.5.3. Dendrimer dùng vận chuyển thuốc qua da ... 20

1.1.5.4. Dendrimer dùng vận chuyển thuốc uống ... 20

1.1.5.6. Dendrimer vận chuyển gen ... 21

1.1.5.7. Dendrimer vận chuyển vaccine ... 22

1.2. Thuốc chống ung thư chứa Platin ... 22

</div>
<span class='text_page_counter'>(6)</span><div class='page_container' data-page=6>

1.2.1.1. Tính chất của Cisplatin ... 22

1.2.1.2. Cơ chế tác động của Cisplatin đối với tế bào ... 24

1.2.1.3. Cơ chế kháng thuốc Cisplatin ... 27

1.2.1.4. Độc tính của Cisplatin ... 28

1.2.2. Sử dụng Cisplatin để điều trị ung thư ... 29

1.2.3. Các thuốc chống ung thư khác có chứa Platin ... 31

1.2.4. Điều trị kết hợp Cisplatin với các thuốc ung thư khác ... 32

1.2.5. Các hệ chất mang thuốc Cisplatin ... 33

1.2.5.1. Liposome mang thuốc Cisplatin ... 35

1.2.5.2. Viên nang nano chứa phức Cisplatin phủ lipid ... 36

1.2.5.3. Các polymer mang các thuốc chứa platin ... 37

1.2.5.4. Ống nano carbon mang thuốc Cisplatin ... 38

1.2.5.5. Polymer mixen mang thuốc platin ... 39

1.2.5.6. Hệ chất mang dendrimer - platin ... 41

1.3. Polymer nhạy nhiệt - poly(N-isopropylacrylamide) (PNIPAM) ... 45

1.4. Polymer nhạy pH - Poly Acrylic Acid (PAA) ... 46

Chương 2. NGHIÊN CỨU ... 48

2.1. Nội dung và phương pháp nghiên cứu ... 48

2.1.1. Nội dung nghiên cứu ... 48

2.1.2. Phương pháp nghiên cứu ... 48

2.2. Thực nghiệm ... 50

2.2.1. Hóa chất ... 50

2.2.2. Dụng cụ và thiết bị ... 51

</div>
<span class='text_page_counter'>(7)</span><div class='page_container' data-page=7>

2.3.1. Tổng hợp PAMAM dendrimer đến thế hệ G4.5 từ tâm ethylenediamine

(EDA) ... 53

2.3.2. Tổng hợp phức PAMAM dendrimer G3.0, G4.0 với Cisplatin ... 56

2.3.3. Tổng hợp phức PAMAM dendrimer G2.5, G3,5, G 4.5 với Cisplatin ... 57

2.3.4. Tổng hợp phức PAMAM dendrimer G2.5, G3,5, G 4.5-Cisplatin SA (có sử
dụng siêu âm) ... 58

2.3.5. Tổng hợp PAMAM dendrimer G 3.0 biến tính với PNIPAM ... 59

2.3.6. Tổng hợp PAMAM dendrimer G 3.5 biến tính với PNIPAM ... 60

2.3.7. Tổng hợp phức PAMAM dendrimer G3.5-PNIPAM với Cisplatin ... 61

2.3.8. Tổng hợp PAMAM dendrimer G3.0 biến tính với PAA ... 63

2.3.9. Tổng hợp PAMAM dendrimer G4.0 biến tính với PAA ... 64

2.3.10. Tổng hợp phức PAMAM dendrimer G3.0-PAA, PAMAM dendrimer
G4.0-PAA với Cisplatin ... 64

2.3.11. Thử nghiệm khả năng mang thuốc 5-FU của phức PAMAM dendrimer
G3.5-PNIPAM-Cisplatin ... 65

2.3.12. Xác định hàm lượng Pt bằng phương pháp ICP-MS ... 66

2.3.13. Khảo sát giải phóng thuốc <i>in vitro</i> ... 67

2.3.14. Nang hóa và giải phóng thuốc 5-FU ... 67

2.3.15. Động học và dược động học giải phóng thuốc ... 68

2.3.16. Kiểm tra độc tố tế bào ... 70

Chương 3. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN ... 72

3.1. Tổng hợp PAMAM Dendrimer các thế hệ G-0.5 đến G4.5 ... 72

3.1.1. Xác định cấu trúc các dendrimer PAMAM dựa vào phổ khối lượng MS . 72
3.1.2. Xác định cấu trúc các dendrimer PAMAM dựa vào phổ 1<sub>H-NMR ... 73</sub>

</div>
<span class='text_page_counter'>(8)</span><div class='page_container' data-page=8>

3.2.1. Phổ FTIR PAMAM Dendrimer G2.5, G3.5, G4.5 và phức G2.5-CisPt,

G3.5-CisPt, G4.5-CisPt ... 80

3.2.2. Phổ FTIR của phức PAMAM Dendrimer G3.0-Cisplatin, G4.0-Cisplatin 83
3.3. Phổ FTIR của phức G3.0-PAA với Cisplatin ... 85

3.4. Phổ FTIR của phức G4.0-PAA-Cisplatin ... 86

3.5. Kết quả phổ 1<sub>H-NMR PAMAM G3.0 và G 3.5 biến tính với PNIPAM ... 87</sub>

3.6. Kết quả 1<sub>H-NMR PAMAM G3.0 biến tính với PAA ... 90</sub>

3.7. Kết quả 1<sub>H-NMR PAMAM G4.0 biến tính với PAA ... 91</sub>

3.8. Kết quả đo hàm lượng Pt ... 92

3.8.1. Kết quả đo hàm lượng Pt của phức PAMAM dendrimer thế hệ
chẵn-Cisplatin ... 93

3.8.2. Kết quả đo hàm lượng Pt của phức PAMAM dendrimer thế hệ lẻ– Cisplatin
(không thủy phân) ... 93

3.8.3. Kết quả đo hàm lượng Pt của phức PAMAM thế hệ lẻ– Cisplatin (thủy phân)
... 94

3.8.4. Kết quả đo hàm lượng Pt của các phức G3.0-PAA-Cisplatin và
G4.0-PAA-Cisplatin (thủy phân) có sử dụng siêu âm ... 96

3.9. So sánh khả năng mang thuốc Cisplatin của các hệ chất mang trong điều kiện
khơng thủy phân và có thủy phân Cisplatin ... 96

3.10. Thử nghiệm khả năng mang đồng thời hai thuốc 5-FU và Cisplatin của hệ
chất mang PAMAM dendrimer G3.5-PNIPAM ... 98

3.11. Kết quả đo TEM, DLS và thế zeta ... 100

3.12. Kết quả và bàn luận khả năng giải phóng thuốc <i>in vitro</i> ... 106

3.12.1. Khả năng giải phóng thuốc của phức PAMAM thế hệ lẻ - Cisplatin (thủy
phân) ... 106

</div>
<span class='text_page_counter'>(9)</span><div class='page_container' data-page=9>

3.12.3. Khả năng giải phóng thuốc Cisplatin của hệ chất mang PAMAM dendrimer

G4.0-PAA ... 111

3.13. Động học q trình giải phóng thuốc Cisplatin ... 112

3.14. Dự đốn mơ hình dược động học của các hệ mang thuốc ... 115

3.15. Kết quả và bàn luận khả năng gây độc tế bào ... 117

3.15.1. Kết quả và bàn luận khả năng gây độc tế bào ung thư phổi NCI-H460 của
hệ chất mang PAMAM G4.5 ... 117

3.15.2. Kết quả và bàn luận khả năng gây độc tế bào của hệ chất mang G4.0-PAA
... 117

3.15.3. Kết quả và bàn luận khả năng gây độc tế bào của hệ chất mang PAMAM
dendrimer G3.5-PNIPAM mang hai thuốc cispaltin và 5-FU ... 122

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ... 124

KẾT LUẬN ... 124

KIẾN NGHỊ ... 126

</div>
<span class='text_page_counter'>(10)</span><div class='page_container' data-page=10>

Bảng 1.1. Độc tính gây ra do điện tích bề mặt dendrimer [6] ... 12

Bảng 1.2. Điều trị phối hợp Cisplatin và các loại thuốc ung thư khác [35] ... 33

Bảng 1.3. Các hệ chất mang liposome – platin [60] ... 35

Bảng 2.1. Các hóa chất tinh khiết dùng trong nghiên cứu thực nghiệm ... 51

Bảng 3.1. Khối lượng phân tử các dendrimer PAMAM dựa vào phổ MS ... 73

Bảng 3.2. Kết quả tính tốn KLPT Dendrimer theo 1<sub>H-NMR ... 80</sub>

Bảng 3.3. Phổ FTIR PAMAM Dendrimer G2.5, G3.5, G4.5 và phức G2.5-CisPt,
G3.5-CisPt, G4.5-CisPt ... 82

Bảng 3.4. Kết quả phổ FTIR của PAMAM dendrimer G3.0, G4.0 và phức
G3.0-Cisplatin, G4.0-Cisplatin ... 83

Bảng 3.5. Phổ FTIR của G3.0-PAA và phức G3.0-PAA-Cisplatin ... 85

Bảng 3.6. Phổ FTIR của G4.0-PAA và phức G4.0-PAA-Cisplatin ... 86

Bảng 3.7. Số nhóm PNIPAM gắn vào G3.0 và ước lượng KLPT ... 89

Bảng 3.8. Hàm lượng Pt phức PAMAM thế hệ chẵn - Cisplatin (không thủy phân)
... 93

Bảng 3.9. Hàm lượng Pt phức PAMAM thế hệ lẻ - Cisplatin (không thủy phân)
... 93

Bảng 3.10. Hàm lượng Pt trong phức G2.5-Cisplatin, G3.5-Cisplatin và
G4.5-Cisplatin ... 94

Bảng 3.11. Hàm lượng Pt trong phức G3.0-PAA-Cisplatin (thủy phân) và
G4.0-PAA-Cisplatin (thủy phân) ... 96

Bảng 3.12. Khả năng mang thuốc Cisplatin (không thủy phân) của các hệ chất
mang PAMAM dendrimer ... 97

Bảng 3.13. Khả năng mang thuốc Cisplatin (thủy phân) của các hệ chất mang
PAMAM dendrimer ... 98

</div>
<span class='text_page_counter'>(11)</span><div class='page_container' data-page=11>

Bảng 3.15. Kết quả giải phóng thuốc <i>in vitro </i>của các phứcPAMAM dendrimer:
G2.5-Cisplatin, G3.5-Cisplatin và G4.5 - Cisplatin ... 107

Bảng 3.16. Khảo sát khả năng giải phóng thuốc 5FU của hệ chất mang
G3.5-PNIPAM-CisPt và G3.5-PNIPAM-CisPt ... 110

Bảng 3.17. Kết quả giải phóng thuốc Cisplatin của hệ chất mang PAMAM
dendrimer G4.0-PAA ... 111

Bảng 3.18. Giá trị AIC và R2

hc theo từng mô hình động học của các hệ mang thuốc

Cisplatin tại pH 5,5 và pH 7,4 ... 113

Bảng 3.19. Các thông số dược động học của các hệ mang thuốc Cisplatin ... 116

Bảng 3.20. Độc tính tế bào <i>in vitro </i>của Carboxylate PAMAM dendrimer G4.5,
Cisplatin và phức chất PAMAM G4.5-Cisplatin ... 117

Bảng 3.21. Độc tính tế bào <i>in vitro </i>của PAMAM G4.0-PAA, Cisplatin và phức

chất PAMAM G4.0-PAA-Cisplatin ... 118

Bảng 3.22. Tỷ lệ (%) gây độc tế bào ung thư vú MCF-7 của các mẫu ... 122

</div>
<span class='text_page_counter'>(12)</span><div class='page_container' data-page=12>

Hình 1.1. Cấu tạo phân tử Dendrimer ... 6

Hình 1.2. Cấu trúc phân tử của Random Hyperbranched, dendrigraft, dendron và
dendrimer ... 7

Hình 1.4. Dendrimer cầu nối N và dendrimer cầu nối aryl ... 8

Hình 1.5. Dendrimer với tâm NH3 (a) và tâm BDA (b) ... 9

Hình 1.6. Tổng hợp divergent theo mơ hình tạo nhánh 1→2 ... 9

Hình 1.7. Tổng hợp divergent theo mơ hình tạo nhánh 1→3 ... 10

Hình 1.8. Tương tác sinh học giữa tế bào với dendrimer có điện tích bề mặt khác
nhau [9]. ... 10

Hình 1.9. Sơ đồ tổng hợp dendrimer theo phương pháp divergent... 13

Hình 1.10. Tổng hợp dendrimer bằng phương pháp covergent ... 14

Hình 1.11. Tổng hợp dendrimer bằng phương pháp tăng lũy thừa hai ... 14

Hình 1.12. Cơng thức phân tử của G3.0 PAMAM dendrimer ... 15

Hình 1.13. Phản ứng tổng hợp dendrimer PAMAM G -0.5 ... 16

Hình 1.14. Phản ứng tổng hợp dendrimer PAMAM G 0 ... 16

Hình 1.15. PAMAM dendrimer G 1.0 ... 16

Hình 1.16. PAMAM dendrimer G 2.0 ... 17

Hình 1.17. Các phương pháp xác định tính chất của dendrimer ... 18

Hình 1.18. Cấu trúc của dendrimer SPL7013 (MW 16.581 Da) ... 19

Hình 1.19. Dendrimer vận chyển DNA tới màng tế bào ... 21

Hình 1.20. Cấu tạo của Cisplatin ... 22

Hình 1.21. Một số loại thuốc chống ung thư Platin đã được chấp thuận đưa vào sử
dụng ... 24

</div>
<span class='text_page_counter'>(13)</span><div class='page_container' data-page=13>

Hình 1.23. Sơ đồ tạo phức và tác động của phức Pt-DNA đối với tế bào ... 26

Hình 1.24. A-Cisplatin; B-Carboplatin; C-Oxaliplatin; D-Ormaplatin; ... 31

E-Enloplatin ... 31

Hình 1.25. Các hệ chất mang khác nhau hiện đang được phát triển tiền lâm sàng
và lâm sàng ... 34

Hình 1.26. Các hệ liên hợp thuốc polymer - platin ... 38

Hình 1.27. Hệ chất mang polymer mixen mang thuốc platin ... 39

Hình 1.28. Sơ đồ tổng hợp phức PAMAM dendrimer thế hệ chẵn – Pt2+<sub> ... 43</sub>

Hình 1.29. Sơ đồ phản ứng tổng hợp phức PAMAM G 3.5-Cisplatin ... 43

Hình 1.30. Cơng thức cấu tạo của PNIPAM-COOH ... 45

Hình 1.31. Các polymer nhạy pH có chứa các nhóm acid ... 47

Hình 2.1 Sơ đồ tổng hợp PAMAM dendrimer ... 53

Hình 2.2. Sơ đồ qui trình tổng hợp các PAMAM dendrimer thế hệ lẻ ... 54

Hình 2.3. Sơ qui trình tổng hợp các PAMAM dendrimer thế hệ chẵn ... 56

Hình 2.4. Sơ đồ tổng hợp phức PAMAM G3.0-Cisplatin và PAMAM
G4.0-Cisplatin ... 57

Hình 2.5. Sơ đồ qui trình tổng hợp phức PAMAM dendrimer G2.5, G3.5,
G4.5-Cisplatin có và khơng sử dụng siêu âm ... 59

Hình 2.6. Sơ đồ quy trình tổng hợp G3.0-PNIPAM ... 60

Hình 2.7. Sơ đồ quy trình tổng hợp PAMAM dendrimer G3.5-PNIPAM ... 61

Hình 2.8. Sơ đồ quy trình tổng hợp phức PAMAM dendrimer
G3.5-PNIPAM-CisPt ... 62

Hình 2.9. Sơ đồ qui trình tổng hợp PAMAM dendrimer G3.0-PAA và G4.0-PAA

... 63

</div>
<span class='text_page_counter'>(14)</span><div class='page_container' data-page=14>

Hình 3.1.Cấu trúc PAMAM Dendrimer các thế hệ ... 72

Hình 3.2. Phổ 1<sub>H-NMR của PAMAM Dendrimer các thế hệ từ G-0.5 đến G4.5 79</sub>
Hình 3.3. Phổ FTIR của PAMAM dendrimer G2.5, G3.5, G4.5 và phức
G2.5-Cisplatin, G3.5-G2.5-Cisplatin, G4.5-Cisplatin ... 81

Hình 3.4. Phổ FTIR của PAMAM dendrimer G3.0, G4.0 và phức G3.0-Cisplatin,
G4.0-Cisplatin ... 84

Hình 3.5. Phổ FTIR của G3.0-PAA và phức G3.0-PAA-Cisplatin ... 85

Hình 3.6. Phổ FTIR của G4.0-PAA và phức G4.0-PAA-Cisplatin ... 86

Hình 3.7. Phổ 1<sub>H-NMR của chất mang nano G3.0-PNIPAM (tỉ lệ mol 1:8) ... 87</sub>

Hình 3.8. Kết quả GPC của G3.0-PINIPAM (1:8) ... 89

Hình 3.9. Phổ 1<sub>H-NMR của G3.5-PNIPAM ... 90</sub>

Hình 3.10. Phổ 1<sub>H-NMR PAMAM dendrimer G3.0 biến tính với PAA (tỉ lệ mol </sub>
1:12) ... 90

Hình 3.11. Phổ 1<sub>H-NMR PAMAM dendrimer G 4.0 biến tính với PAA (tỉ lệ mol </sub>
1:16) ... 92

Hình 3.12. Đường chuẩn xác định hàm lượng Pt ... 93

Hình 3.13. Ảnh TEM phức PAMAM dendrimer thế hệ lẻ - Cisplatin ... 100

Hình 3.14. Ảnh TEM mẫu PAMAM dendrimer G3.0, PAMAM dendrimer
G3.0-PNIPAM và DLS mẫu PAMAM dendrimer G3.0-G3.0-PNIPAM ... 101

Hình 3.15. Ảnh TEM của mẫu PNIPAM-Cisplatin và DLS mẫu
G3.5-PNIPAM-Cisplatin và mẫu G3.5-PNIPAM-Cisplatin ... 102

Hình 3.16. Ảnh TEM của PAMAM dendrimer G4.0 (A), G4.0-PAA (C) và DLS
của PAMAM dendrimer G4.0 (B), G4.0-PAA (D) ... 102

Hình 3.17. Ảnh TEM của hệ PAMAM dendrimer G3.0-PAA-Cisplatin và
PAMAM dendrimer G4.0-PAA-Cisplatin ... 103

</div>
<span class='text_page_counter'>(15)</span><div class='page_container' data-page=15>

Hình 3.19. Thế zeta của hệ chất mang G4.0-PAA (tỉ lệ mol 1:16) thay đổi theo pH:
a. pH 7,4; b. pH 7,0 và c. pH 5,5 ... 105

Hình 3.20. Thế zeta của hệ chất mang G4.0-PAA (tỉ lệ mol 1:8) thay đổi theo pH:
a. pH 7,4; b. pH 7,0 và c. pH 5,5 ... 105

Hình 3.21. Độ tan của các hệ chất mang phụ thuộc vào pH dung dịch ... 106

Hình 3.22. Khảo sát giải phóng thuốc Cisplatin <i>in vitro</i> của hệ chất mang PAMAM
G2.5, PAMAM G3.5 và PAMAM G4.5 trong môi trường đệm PBS pH 7,4 và đệm
ABS pH 5,5 ... 107

Hình 3.23. Lượng Cisplatin giải phóng theo thời gian khỏi các hệ chất mang
PAMAM dendrimer trong mơi trường đệm pH 5,5 và pH 7,4 ... 108

Hình 3.24. Biểu đồ giải phóng thuốc 5-Flourouracil (5-FU) ở mơi trường pH 7,4
và pH 5,5 tại nhiệt độ 37o<sub>C ... 111</sub>

Hình 3.25. Biểu đồ giải phóng thuốc Cisplatin ở mơi trường pH 7,4 và pH 5,5 112

Hình 3.26. Mơ hình giải phóng thuốc Korsmeyer-Peppas của các hệ mang thuốc
Cisplatin tại pH 5,5 và pH 7,4 ... 114

Hình 3.27. Nồng độ Cisplatin (dự đốn) trong plamsa ... 115

Hình 3.28. Thử nghiệm <i>in vitro</i> độc tế bào trên dòng tế bào MCF-7 với các chất
mang khác nhau (PAMAM G4.0, PAMAM G4.5 và G4.0-PAA). (A). Đánh giá
khả năng sống của tế bào MCF-7 khi thêm PAMAM dendrimer G4.0, PAMAM
dendrimer G4.5, G4.0-PAA và DMEM nồng độ 100 ppm trong 48 giờ, bằng kính
hiển vi huỳnh quang. (B). Nhuộm kép (AO/EB) đã được áp dụng để xác định các
tế bào sống, chết theo chương trình apoptosis sớm (E)/muộn (L) (tương ứng màu
xanh lá cây và màu cam/vàng) và hoại tử (N, màu đỏ). ... 119

</div>
<span class='text_page_counter'>(16)</span><div class='page_container' data-page=16></div>
<span class='text_page_counter'>(17)</span><div class='page_container' data-page=17>

1<sub>H-NMR </sub> Proton Nuclear Magnetic

Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân

5-FU 5-Fuorouracil

A Absorbance Độ hấp thu

ABS Acetate Buffer Solution Dung dịch đệm acetate

ACN Acetonitrile Acetonitrile

AIC Akaike Information Criterion Tiêu chuẩn thông tin Akaike
ATP Adenosine triphosphate Adenosine triphosphate
AUC Area Under Curve Diện tích dưới đường cong

CAT Catalase Enzyme Enzyme Catalase

Cisplatin <i>Cis</i>-diamminedichloroplatinum
(II)

<i>Cis</i>-diamminedichloroplatinum
(II)

Da Dalton Dalton

DACHPt

Dichloro(1,2-Diaminocyclohexane)
Platinum (II)

Dichloro(1,2-Diaminocyclohexane)
Platinum (II)

DI Deionized Nước khử ion

DL% % Drug loading

Hàm lượng thuốc được nang
hóa trong tổng trọng lượng chất
mang

EDA Ethylenediamine Ethylenediamine

EDC

1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)
carbodiimide hydrochloride

1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)
carbodiimide hydrochloride

EE% % drug entrapment

</div>
<span class='text_page_counter'>(18)</span><div class='page_container' data-page=18>

FTIR Fourier transform infrared
spectroscopy

Phương pháp quang phổ hồng
ngoại

GBM Glioblastoma Khối u não

GPC Gel Permeation

Chromatography

Phương pháp sắc ký thẩm thấu
gel

GPX Glutathione Peroxidase Glutathione Peroxidase

GSH Glutathione Glutathione

HPLC High Performance Liquid

Chromatography Sắc ký lỏng hiệu năng cao

HSDB Hazardous Substances Data
Bank

Ngân hàng dữ liệu các chất độc
hại

ICP-MS Inductively coupled plasma
mass spectrometry

Quang phổ nguồn Plasma cảm
ứng cao tần ghép nối khối phổ

LCST Low Critical Solution
Temperature

Dung dịch có nhiệt độ tới hạn
thấp

MA Methylacrylate Methylacrylate

MCF-7 Michigan Cancer Foudation-7 Tế bào ung thư vú của người
MPEG Methoxy Polyethylene glycol Methoxy Polyethylene glycol

MW Molecular weight Khối lượng phân tử

MWCO Molecular weight cut-off Molecular weight cut-off
NCI-H460 NCI-H460 Human Lung

Carcinoma

Tế bào ung thư phổi của người

NER Nucleotide Excision Repair Sửa chữa DNA theo hình thức
cắt bỏ

NHS N-hydroxy succinimide N-hydroxy succinimide
PAA Acid Poly acrylic Acid Poly acrylic

PAMAM Polyamidoamine Polyamidoamine

PAMAM
G2.0

Polyamidoamine generation
2.0

</div>
<span class='text_page_counter'>(19)</span><div class='page_container' data-page=19>

PAMAM
G3.0

Polyamidoamine generation
3.0

PAMAM
G4.0

Polyamidoamine generation
4.0

PAMAM
G5.0

Polyamidoamine generation
5.0

PBS Phosphate Buffered Saline Dung dịch muối đệm photphat
PNIPAM Poly N-isopropylacrylamide Poly N-isopropylacrylamide
PPI Poly propyleneimine Poly propyleneimine

ROS Radical oxygen species Dạng oxy hoạt động

SA Siêu âm

SCLCs Small Cell Lung Cancers Ung thư phổi tế bào nhỏ
SEM Scanning Electron Microscope Kính hiển vi điện tử quét
SOD Superoxide Dismutase Superoxide Dismutase

SRB Sulforhodamine B Sulforhodamine B

T Transmittance Độ truyền qua

TEM Transmission Electrons

Microscope Kính hiển vi điện tử truyền qua

UCST Upper Critical Solution
Temperature

Dung dịch có nhiệt độ tới hạn
cao

UPLC Ultra Performance Liquid

Chromatography Sắc ký lỏng siêu hiệu năng

</div>
<span class='text_page_counter'>(20)</span><div class='page_container' data-page=20>

1
<b>MỞ ĐẦU </b>

Các polymer tự nhiên cũng như polymer tổng hợp luôn là đối tượng thu hút
các nhà khoa học trong các lĩnh vực nghiên cứu hiện đại. Các vật liệu nano polymer
sinh học đang được tiếp tục nghiên cứu hoàn thiện để ứng dụng trong lĩnh vực
dược phẩm và y sinh học. Trong số các vật liệu này, các dendrimer đã nổi lên như
là một trong những chất mang nano polymer đầy triển vọng dùng để mang các loại
thuốc điều trị.

Dendrimer lần đầu tiên được tổng hợp từ năm 1970-1990 bởi hai nhóm khác
nhau (Buhleier và cộng sự; Tomalia và cộng sự). Ngược lại với các polymer cao

phân tử mạch nhánh và thẳng thông thường, các dendrimer được kiểm sốt rất chặt
chẽ về cấu trúc và có các nhóm chức bề mặt có thể biến tính rất dễ dàng tùy thuộc
vào mục đích sử dụng [1], [2].

Hiện nay, số lượng các cơng trình nghiên cứu về dendrimer được công bố
ngày càng nhiều, tập trung vào khảo sát khả năng của dendrimer trong việc vận
chuyển các hoạt chất sinh học khác nhau, ví dụ như: thuốc, oligonucleotide,
enzyme và vaccine... [3]. Các dendrimer được thiết kế để vận chuyển thuốc nhằm
gia tăng dược động học và phân phối sinh học của thuốc cũng như tăng cường khả
năng hướng đích của thuốc. Dendrimer tương tác với các phân tử thuốc bằng cách
hấp phụ trên bề mặt, bằng các tương tác tĩnh điện hoặc liên kết với các nhóm chức
bề bằng liên kết hóa trị hoặc bằng cách bao gói thuốc vào các khoang trống của
dendrimer. Các khoang trống bên trong thường có tính chất kỵ nước, cho phép
tương tác với các loại thuốc hòa tan kém. Sự tồn tại của các nguyên tử nitơ và oxy
trong cấu trúc bên trong của dendrimer cho phép tương tác bởi liên kết hydro với
thuốc. Với số lượng lớn các nhóm chức trên bề mặt của dendrimer (như amine
-NH2 và nhóm cacboxylate -COO-) cho phép gắn lượng lớn các loại thuốc khác

nhau bằng tương tác tĩnh điện và vận chuyển chúng đến đích [4].

</div>