Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (826.77 KB, 13 trang )
<span class='text_page_counter'>(1)</span><div class='page_container' data-page=1>
Các bước nhân giống vơ tính in vitro
Chọn lọc và
chuẩn bị Nuôi cấy
khởi động Nhân nhanh
Tạo cây
hoàn chỉnh
• Là giai đoạn kích thích mơ
ni cấy phát sinh hình thái và
tăng nhanh số lượng.
• Thơng qua con đường: Hoạt
hóa chồi nách, tạo chồi bất
định và nhân phơi vơ tính.
• mơi trường có nhiều cytokinin
sẽ kích thích tạo chồi.
• Chế độ nuôi cấy thường là 25-
270C, 16 giờ chiếu sáng/
• Là giai đoạn tạo rễ cho chồi
• Chuyển sang mơi trường tạo
rễ giàu auxin
• Một số chồi tạo rễ khi chuyển
sang môi trường không chứa
chất điều tiết sinh trưởng
• Để đưa cây từ ống nghiệm ra
vườn ươm với tỷ lệ sống cao,
cây sinh trưởng tốt cần đảm
bảo một số yêu cầu sau:
– Cây trong ống nghiệm đạt
được những tiêu chuẩn
hình thái nhất định: số lá,
số rễ, chiều cao cây,...
– Có giá thể tiếp nhận cây in
vitro thích hợp: giá thể
sach, tơi xốp, thoát nước.
– Phải chủ động điều chỉnh
được ẩm độ, sự chiếu
• Làm ẩm là việc phải làm hàng ngày suốt trong năm.
• Vào mùa hạ đến giữa trưa độ ẩm này sẽ bốc hơi và phải xịt cho ẩm
trở lại. Suốt những lúc mưa nhiều vào mùa đơng thì có thể khơng
phải làm ẩm hồn tồn.
• Tốt nhất nên có hệ thống xịt nước tự động trên mái và ở phía bên
các giàn cây. Vừa có thể giữ được độ ảm mà cũng thực hiện luôn
phần tưới cây cho người chăm sóc.
• Thường sử dụng các bộ phận của cây như thân , mảnh lá, cuống hoa, dẻ
hành…
• Cần thực hiện q trình phản phân hố và tái phân hố các tế bào
• Mục đích: để các tế bào soma hình thành chồi trực tiếp hoặc gián tiếp thông
qua giai đoạn mô sẹo.
<i><b>Tạo phơi vơ tính A. Phôi nuôi cấy; B, C. Mô sẹo và mô sẹo phơi hố tạo thành từ </b></i>
<i><b>phơi non; D. Cây tái sinh; E, F, G. Mô sẹo tạo thành từ phơi ni cấy có kích thước </b></i>
• Là phơi được hình thành từ các tế bào sinh dưỡng
• Tạo phơi vơ tính cũng cần thực hiện q trình phản phân hóa và tái
phân hóa tế bào để bắt các tế bào soma hình thành phơi trực tiếp
hoặc gián tiếp thơng qua giai đoạn phát triển mơ sẹo
• Sự hình thành phơi có hai bước:
– Sự phân hóa các tế bào có khả năng phát sinh phơi: cần mơi
trường giàu auxin. Các tế bào có khả năng phát sinh phôi là các
tế bào nhỏ, nhân lớn, nhiều hạch nhân, khơng có khơng bào, tế
bào chất đậm đặc, giàu protein và mARN.