PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP NHỜ AGROBACTERIUM pot

PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP
NHỜ AGROBACTERIUM
•
Là vi khuẩn gram (-)
•
Khi ở trong đất sẽ sinh
độc tố
•
Gây ung thư ở thực vật
•
mang những plasmid lớn
đặc trưng

PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP
NHỜ AGROBACTERIUM
Agrobacterium có khả
năng xâm nhiễm vào tế
bào thực vật nằng cách
chuyển 1 đoạn DNA của
nó vào tế bào thực vật
Ưu điểm: có hiệu quả
Nhược điểm: thực hiện
khó trên lớp 1 lá mầm.

Chuyển gen nhờ súng DNA “biolistic”
•
Là sử dụng các viên
đạn có kích thước hiển
vi có tỷ trọng cao để đạt
gia tốc cao xuyên qua vỏ

và màng tế bào ,đưa lớp
DNA bọc ngoài tiếp cận
với bộ máy di truyền của tế bào.
•
DNA ngại lai hội nhập với DNA tế bào và biểu hiện,
thực hiện quá trình biến nạp gen

CÁC LOẠI SÚNG BẮN GEN
•
Súng bắn gen PDS-1000
•
Súng bắn gen PDS-1000He
•
Súng bắn gen Sauter 1991

CHUYỂN GEN NHỜ VIRUS
•
Virrus dễ dàng bám và lây nhiễm vào tế bào trên
những thực vật nguyên vẹn.
•
Một số Virrus lây nhiễm vào thực vật từ vị trí xâm
nhiễm và chuyển acid nucleic của nó vào mỗi tế bào
sống của ký chủ.
•
Virrus có thể sao chép vài ngàn lần và tồn tại khoảng
10
3
-10
5
bản sao trong mỗi tế bào thực vật.

•
Gen của Virrus được đi khắp nơi và vì vậy có biểu
hiện mạnh.

PHƯƠNG PHÁP VI TIÊM
•
Là phương pháp tiêm các đại phân tử vào
trong tế bào thực vật
•
Được theo dõi bằng kính hiển vi và sự thành
công được nhận ra bằng một chất phát huỳnh
quang được cùng tiêm vào trong tế bào

KỸ THUẬT XUNG ĐIỆN
•
Làm rối loạn cấu trúc màng kép phospholipid
cho phép các phân tử DNA ngoại lai từ môi
trường xâm nhập vào bên trong tế bào
•
Kỹ thuật xung điện (electroporation) là một
phương pháp cơ học được sử dụng để đưa các
phân tử phân cực vào trong tế bào chủ qua
màng tế bào.