Dự án đầu tư nâng cao năng lực nghiên cứu và phát triển giống cây nguyên liệu giấy giai đoạn 2009-2010

Viện Nghiên Cứu Cây nguyên liệu giấy









Báo cáo tổng kết dự án

Dự án đầu t nâng cao năng lực nghiên cứu
và phát triển giống cây nguyên liệu giấy
giai đoạn 2009-2010


Cnda: Hà Văn Huy










8677

Phú thọ - 2010

MỤC LỤC
 i
 ii
  iv
 1
 4
II.  6
 6
 6
 6
 6
 7
 7

 7
 8

 8

 17

 31
 35

hom 35

 41
  49
 49

 50
 50
 50
 50
 50
 50
3.5.3.3.  51
 51
b

 51
 52
 55
 55
3.6.1.  56
3.6.2.  56
 56
 56
 56
 56
 58
 58
- hom 58
 59
 60
5.5. Phân  60
 60
 60

i

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT
VNCCNLG



PN
Phù Ninh
TLCHH



HSNC

MS
Murashige và Skoog
H
chi

Chiu cao trung bình chi hu hiu
GA3
Giberellin
TLRR

SLR

L
r



TLS

I
R


ii

DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU
Bảng 01.  7
Bảng 02. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla 
10
Bảng 03. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla 
11
Bảng 04. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla 
12
Bảng 05. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla 
13
Bảng 06. 

cây
 15

Bảng 07.  

cây
 16
Bảng 08. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla 
19
Bảng 09. 
 21
Bảng 10. 
 22
Bảng 11. 
 24
Bảng 12. 
 25
Bảng 13. 
 26
Bảng 14. 


 27
Bảng 15. 
 29
Bảng 16.  32
Bảng 17.  33
Bảng 18.  36
Bảng 19.  37
iii

Bảng 20. 
. 38
Bảng 21. 
. 39
Bảng 22. 
. 39
Bảng 23. 
. 40
Bảng 24.  43
Bảng 25.   44
Bảng 26.  45
Bảng 27.  46
Bảng 28.  47
Bảng 29.  47
Bảng 30 50
Bảng 31.  51
Bảng 32
52
Bảng 33 53

iv

DANH MỤC HÌNH ẢNH

Hình 01.  
 13
Hình 02. 


 26

Hình 03.  
U6. 29
Hình 04. 
0
 30
Hình 05.  52
Hình 06.  55
1

Tóm tắt
“Đầu tư nâng cao năng lực nghiên cứu và phát triển giống cây nguyên
liệu giấy giai đoạn 2009-2010” -BCT
 



   và 
  sau:
* Mua sắm dụng cụ trang thiết bị: n
01 cái, t, m, t
* Hoàn thiện công nghệ nhân giống mô - hom
- 
          
CaCl
2
.4H
2
      
4
NO

3
, KNO
3
, KH
2
PO
4
  

1mg/l và 0.25mg/l.
+ -

0
C và 0-
27
0
C và 2500-3000          

+ Ch  n to r  ánh sáng 7-u
là 0- 11-14 ngày sau là 1000-2000 lux.
 không


- Giâm hom dòng b s dng hom t 20-25 ngày tui, hom
n ngn có chiu dài 9-12cm và hom ly vào bui sáng t 5-7 h cho t l sng và
ra r cao nht; n IBA là 0.5%; mùa v giâm hom thích h
che ph ánh sáng 50% (che 1 li).
2

- Giâm hom dòng keo lai KL2: s dng hom t 26 -n ngn

dài 14 - 17cm và hom ly vào bui sáng sm t 5 - 7 gi cho t l sng và t l ra r
cao nht; n IBA là 0.5%; mùa v giâm hom thích h che
ph ánh sáng 50% (che 1 li).
* Đào tạo và tập huấn kỹ thuật: 05 lp cho 21 CBCNV v k thut: Thu hái,
ch bin ht ging; kim nghim và bo qun ht ging; k thut x lý cây m to
chi và kho nghim ging; k thut thu chi và x lý chi; k thut nuôi cy mô
và giâm hom cây lâm nghip.


* Mua sắm dụng cụ trang thiết bị: 01 , 
giá b02 
6 
.
* Hoàn thiện công nghệ nhân giống mô - hom:

mô h
- Quy trình nu 

- 

4
NO
3
là 937.5mg/l,
KNO
3
là 1781.3 mg/l và KH
2
PO
4

là 159.4 mg/l; n    là
100mg/l, Nicotinic là 5mg/l, vitamin B1 là 1mg/l và vitamin C là 10mg/l; BAP
.
7-10 ngày

0
C và 0-
0
C và
2500-

       ABT1       
1.2mg/l.
--500
-17 ngày sau là 1000-2000 lux.
3



-  và Keo lai KL2: 


* Xây dựng hoàn thiện 04 bản hƣớng dẫn kỹ thuật cho các dòng nghiên

* Hoàn thiện cơ sở dữ liệu cho 11 giống bạch đàn 
(PN2, PN14, PN3d, PN10, PN46, PN47, PN54, PN116, PN21, PN24, PN108).
* Phân tích xác định ADN cho 11 giống Bạch đàn 

*       : Thu


.
4

I. ĐẶT VẤN ĐỀ

 
18,000 

440 
4.7m
3
àn, nh 
,000-21,000ha
ng cho
-

 



 s- 30% so



-
hom.
- 




n
-

2


m
2



5


               

- vô


, “Dự án đầu tư năng cao năng lực năng lực nghiên cứu và phát triển
giống cây nguyên liệu giấy” ng
-2010.
6

II. MỤC TIÊU VÀ NỘI DUNG THỰC HIỆN DỰ ÁN
2.1. Mục tiêu của dự án
2.1.1. Mục tiêu tổng quát
  
 c


-2015.
2.1.2. Mục tiêu năm 2010


 




.
2.2. Nội dung của dự án
a.


6 
250ml, 730.
b. 

-  PN54.
- 
PN10 và keo lai KL2.
c. 
d. 
e. 
f.  


7

III. KẾT QUẢ THỰC HIỆN

3.1. Mua sắm trang thiết bị

10 

         10       


Bảng 01. 
STT
Tên dụng cụ máy móc
Đơn vị
Số lƣợng
1
PQX-350HP
cái
01
2
SA - 300 VF
cái
01
3

cái
20
4


250
5



01
6


02
7
AIKYO, MODEL AD-9B-EU
cái
02
8
18000BTU
cái
03
9
12000BTU
cái
03
10

cái
7300
11

cái
7300

 
(phụ lục 01).
3.2. Nghiên cứu hoàn thiện quy trình kỹ thuật nuôi cây mô và giâm hom cho một số

dòng bạch đàn và keo lai
  
svà
  công 
a vs
  E. urophylla (PN2, PN14, PN3d, PN10, PN46, PN47, PN54, PN116,
PN21, PN24, PN108) và 3 dòng keo lai (KL2, KL20, KLTA3).
8

Tuy nhiên               


 và giâm hom

3.2.1. Hoàn thiện quy trình kỹ thuật nuôi cấy mô


trong 
 



N
- 
Trung tâm  


 
D  
Nông -               

--33m
3

 N54 : 
 trung bình 







9

3.2.1.1.1. Đối tƣợng nghiên cứu
-        E. urophylla     
NN&PTNT .
- 

3.2.1.1.2. Nội dung nghiên cứu
- Nghiên cu ng ca n các chng, vitamin và các cht
n hiu qu cn to chi, nhân nhanh chi dòng
PN54;
- Nghiên cu ng ca các chn hiu qu ca
n to r dòng PN54.
3.2.1.1.3. Phƣơng pháp nghiên cứu
- u kin thí nghim: Các m c nuôi c    ng thí
nghim b sung       c kh trùng  121
0
C,

1.4kg/cm
2
trong 20 phút, pH sau kh trùng là 5.8. Mc nuôi cy  u kin
nhi 27
0
C (

2
0
 m 55% (

 ánh sáng 1000-3000 lux tùy
tn nuôi cy, s dnh quang neon. Thi gian chiu
sáng t 10-11h/ngày.
- B trí thí nghim: Các th nghim i vn to và nhân nhanh chi
s dng i chng MS3; các th nghin to r s dng môi
i chng MR3 (phụ lục 02). Các công thc thí nghic b trí da trên
nguyên tc ch ng các nhân t thí nghim (t l i tùy tng
nhân t c th), gi nguyên các thành phng MS3. Mi công
thc bao gm 6 mu/bình x 10 bình, lp li 3 ln v mt thi gian.
- Thit k thí nghim bao gm:
+ Các th nghii vn to và nhân nhanh chi: 4 th nghim nh
ng ca NH
4
NO
3
, KH
2
PO
4

, KNO
3
; 2 th nghim ng ca vitamin C; 3
th nghim ng ca Inositol, nicotinic và B1; 5 th nghim v các n
BAP.
+ Các th nghii vn to r: 5 th nghim n ABT1 và 4
th nghim b sung GA3.
10

- Các ch  h s nhân chi (HSNC);T l chi hu
hiu (TLCHH); Chiu cao chi hu hiu (H
chi
); T l ra r (TLRR); S ng r
trung bình/cây (S r/cây); Chiu dài trunh bình r (L
r
); Quan sát hình thái thân, lá,
r.
- X lý thng kê các s li     ng, s dng các
10  
3.2.1.1.4. Kết quả nghiên cứu
a.    

Kt qu th nghim ng ca nhóm cht NPK lên HSNC, TLCHH và
H
chi
trong nuôi cy mô dòng PN54 c tng hp trong bng 02.

Bảng 02. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla dòng PN54 

STT
Công thức
thí nghiệm
Các chỉ tiêu theo dõi
HSNC
TLCHH (%)
H

(cm)
Hình thái
1
CT1
3.09
75.9
3.10

2
CT2
3.02
72.4
2.91

3
CT3
2.97
71.9
2.79

4
CT4

3.01
78.6
3.07

5
CT5
3.01
79.7
3.10

Phân tích thống kê
Nhóm NPK

NS
NS
*

Ghi chú: NS: Khác biệt không có ý nghĩa về mặt thống kê với p ≤ 0.05. *: khác biệt có ý nghĩa
về mặt thống kê với p ≤ 0.05. CT1) đối chứng, giữ nguyên nồng độ NH
4
NO
3
, KH
2
PO
4
, KNO
3
;
CT2) giảm nồng độ NH

4
NO3, KH
2
PO
4
, KNO
3
đi 10%; CT3) giảm nồng độ NH
4
NO
3
, KH
2
PO
4
,
KNO
3
đi 20%; CT4) tăng nồng độ NH
4
NO3, KH
2
PO
4
, KNO
3
thêm 10%; CT5) tăng nồng độ
NH
4
NO

3
, KH
2
PO
4
, KNO
3
thêm 20%.

% %


   in
vitro
11


 
 


thành.
   

CT4 là   2.91cm và
2.79cm.





 CT3.
b. nh hng ca n các cht vitamin
             
PN54 otinic, B6, B1, glycine và C

 

 
chia làm tol, nicotinic và B1; Nhóm 2: vitamin C.
* 



Bảng 03. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla dòng PN54 
STT
Công thức
thí nghiệm
Các chỉ tiêu theo dõi
HSNC
TLCHH (%)
H

(cm)
Hình thái
1
CT6 (-20%)
3.03
76.6

2.88
b


2

3.09
75.9
3.10
a


3
CT8 (+20%)
3.03
79.9
3.15
a


Phân tích thống kê
Ino + Nic + B1

NS
NS
*

12

Ghi chú: NS: Khác biệt không có ý nghĩa về mặt thống kê với p ≤ 0.05. *: khác biệt có ý nghĩa

về mặt thống kê với p ≤ 0.05. a,b: Kết quả so sánh theo Dunnett’ C. CT6) Giảm nồng độ nhóm
Inositol, nicotinic và B1 đi 20%; CT7) Đối chứng, giữ nguyên nồng độ nhóm Inositol,
nicotinic và B1; CT8) Tăng nồng độ nhóm Inositol, nicotinic và B1 thêm 20%.

3 



              
trong th  

             

 C













.
* 
 

PN54 4.

Bảng 04. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla dòng PN54 
STT
Công thức
thí nghiệm
Các chỉ tiêu theo dõi
HSNC
TLCHH (%)
H

(cm)
Hình thái
1
CT9
3.02
74.6
2.85

2

3.09
75.9
3.10

Phân tích thống kê
Vitamin C

NS
NS
NS

Ghi chú: NS: Sự sai khác không có ý nghĩa về mặt thống kê với p ≤ 0.05. CT9: không bổ sung
C và B2 vào môi trường. CT10: giữ nguyên nồng độ C và B2.

13

   4           
TLCHH và H


 








Hình 01.  
10.
Tuy nhiên, qua phân 


.

 (hình 01).






Bảng 05. HSNC, TLCHH và H

E. urophylla 
STT
Công thức
thí nghiệm
Các chỉ tiêu theo dõi
HSNC
TLCHH (%)
H

(cm)
Hình thái
1
CT11
2.60
c
69.7
1.97
c

2
CT12
2.80
c

74.2
2.49
b

3

3.09
b
75.9
3.10
a

4
CT14
3.22
ab
75.2
3.02
a

5
CT15
3.41
a
73.6
3.03
a

14

Phân tích thống kê
BAP

*
NS
*

Ghi chú: NS: Khác biệt không có ý nghĩa về mặt thống kê với p ≤ 0.05. *: khác biệt có ý nghĩa
về mặt thống kê với p ≤ 0.05. a,b,c: Kết quả phân nhóm theo tiêu chuẩn Dunnett’C. CT11: BAP
nồng độ 0.8mg/l. CT12: BAP nồng độ 0.9mg/l. CT13: BAP nồng độ 1.0mg/l (đối chứng). CT14:
BAP nồng độ 1.1mg/l. CT15: BAP nồng độ 1.2mg/l.




 
2.60 


  
            




       

    

c







cm.

  


                 




15

d. 
in vitro 
6.

Bảng 06. 



STT
Công thức
thí nghiệm
Các chỉ tiêu theo dõi

TLRR (%)

L

(cm)
Hình thái
1
CT16
62.2
3.0
b
2.27

2
CT17
66.7
3.2
a
2.3

3

71.7
3.3
a
2.35

4
CT19
75.6

3.3
a
2.35

5
CT20
77.8
3.3
a
2.26

Phân tích thống kê
ABT1

NS
*
NS

Ghi chú: NS: Khác biệt không có ý nghĩa về mặt thống kê với p ≤ 0.05. *: khác biệt có ý nghĩa
về mặt thống kê với p ≤ 0.05. a,b: Kết quả phân nhóm theo tiêu chuẩn Duncan. CT16: ABT1
nồng độ 0.8mg/l. CT17: ABT1 nồng độ 0.9mg/l. CT18: ABT1 nồng độ 1.0mg/l (đối chứng).
CT19: ABT1 nồng độ 1.1mg/l. CT20: ABT1 nồng độ 1.2mg/l.


- Thi gian xut hin r vào ngày th 5 sau khi cy;
- T l ra r n theo n ABT1. Khi n A 0.8-
 n 77.8%. Tuy nhiên, kt qu phân tích thng kê
cho thy s 
- S r trung bình/cây có s c chia làm 2
n (bng 06i chng), công thc CT19,

CT20 và công thc CT17 có s r trung bình ln nht là 3.3 r/cây và 3.2 r/cây,
công thc CT16 có s r trung bình thp nht là 3.0 rn ánh, kh
 in vitro ph thuc mt phn vào ging. S b sung cht kích thích ra r
ABT1 có tác dng kích thích ra r và s hình thành mm r  mt gii nhnh;
- Chiu dài trung bình r L
r
không ph thuc vào n ABT1.
y, công thc cho hiu qu ra r cao nht là công thc CT20 có n
ABT1 là 1.2mg/l.
16

  
PN54

                
7.

Bảng 07. GA3 



STT
Công thức
thí nghiệm
Các chỉ tiêu theo dõi
TLRR (%)

L

(cm)

Hình thái
1

71.7
3.3
2.35
b
Câ
2
CT22
74.4
3.3
2.39
b

3
CT23
76.7
3.3
2.41
b

4
CT24
77.8
3.4
2.83
a

Phân tích thống kê

GA3

NS
NS
*

Ghi chú: NS: Khác biệt không có ý nghĩa về mặt thống kê với p ≤ 0.05. *: khác biệt có ý nghĩa
về mặt thống kê với p ≤ 0.05. a,b: Kết quả phân nhóm theo tiêu chuẩn Duncan. CT21: GA3
nồng độ 0.0mg/l (đối chứng). CT22: GA3 nồng độ 0.4mg/l. CT23: GA3 nồng độ 0.8mg/l.
CT24: GA3 nồng độ 1.2mg/l.

Kt qu nghiên cu bng 07 cho thy:
- T l ra r n theo n GA3 b ng nuôi cy. Khi
n chn t n t
n 77.8%. Tuy nhiên, s t v mt thng kê;
- S r trung bình/cây có s bing trong
khong 3.3 rn 3.4 ru này
phn ánh, GA3 không có tác dng kích thích hình thành mm r;
- Chiu dài trung bình r L
r
có ph thuc vào nng  cht kích thích GA3.
L
r
cao nht  công thc b sung GA3 n t 2.83cm và thp nht  3
công thc GA3 n 0.8mg/l, GA3 n 0.4mg/l và GA3 n 0.0mg/l
vi giá tr ly, GA3 không có tác dng
kích thích s hình thành r t l sn xut t bào và kích
ng r.
17


 


3.2.1.1.5. Kết luận


- Công thc thí nghim CT1 vi n NH
4
NO
3
937.5mg/l, KNO
3
là 1781.3
mg/l và KH
2
PO
4
là 159.4 mg/l cho hiu qu nhân chi cao nht v  t
3.1lt 75.9% và Hcht 3.10cm;
- N các vitamin Inositol, Nicotinic, vitamin B1 và vitamin C thích hp
lt là 100mg/l; 5mg/l; 1mg/l và 10mg/l có tác dchng
chi;
- ng BAP có tác dng kích thích s tái sinh chi, n
BAP 1.2mg/l cho hiu qu tái sinh chi cao nht;
- Các n khác nhau ca cht kích thích ra r ABT1 trong thí nghim
không ng rõ rn t l ra r và chiu dài r n s
ng r trung bình/cây. N ABT1 1.2mg/l cho hiu qu ra r cao nht vi
t 77.8%, s r t 3.3 r và L
r

t 2.26cm;
-ng GA3 kích thích s phân chia t nh
ng r, n c b sung cho hiu qu ra r cao nht vi
t 77.78%, s r t 3.4 r và L
r
t 2.83cm.

 
 
PN54              

khí h



- Cây in vitro có th t ng hay quang hp;
18

- u kin nuôi cng in vitro làm cho n CO
2
thp, do
i sng quang d ng (s dng cng);
-  m trong bình nuôi cy quá cao làm hn ch kh 
kh  u tic t nhiên ca cây.

- u king, quang hp ca cây;
-  l s n chuyn
ca cây mm khi chuyu kin ex vitro.
3.2.1.2.1. Đối tƣợng nghiên cứu
- 

3.2.1.2.2. Nội dung nghiên cứu
-  ng cu kin nhi n to và nhân nhanh chi
dòng PN54;
- ng c n to chi, nhân nhanh chi
và to r dòng PN54;
- ng ca thi gian chin to và nhân nhanh chi
dòng PN54;
- ng c n to và nhân nhanh chi dòng PN54 và
dòng U6;
- Th nghim s dn bóng hunh quang trong
nuôi cy mô;
- .
3.2.1.2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu
- u kin thí nghim: Các m c nuôi c    ng thí
nghim b sung 30g      c kh trùng  121
0
C,
1.4kg/cm
2
trong 20 phút, pH sau kh trùng là 5.8. Mc nuôi cy  u kin
nhi 27
0
C (

2
0
 m 55% (

 ánh sáng 1000-3000 lux tùy
tn nuôi cy, s dnh quang neon. Thi gian chiu

sáng t 10-11h/ngày.
- B trí thí nghim: Các mu nghiên cu nuôi và to chi dòng PN54 nuôi cy
ng MS3 và to r ng MR3. Mu nghiên cu dòng bch
 c nuôi cy nhân tào to chng MU6. Các mc nuôi