Thong tin luan an dua trang web

VIỆN HÀN LÂM
KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN
VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM
Độc lập - Tự do - Hạnh phúc
Hà Nội, ngày

tháng

năm 2014

THÔNG TIN VỀ LUẬN ÁN ĐƯA LÊN MẠNG

Tên đề tài luận án: Nghiên cứu tăng cường khả năng chống chịu các điều kiện bất lợi của
môi trường trên đối tượng cây Xoan ta (Melia azedazach L.) bằng công nghệ gen thực vật
Chuyên ngành: Di truyền học

Mã số: 62 42 01 21

Họ và tên Nghiên cứu sinh: Bùi Văn Thắng
Họ và tên cán bộ hướng dẫn: PGS.TS. Chu Hồng Hà – Viện Cơng nghệ sinh học
TS. Lê Văn Sơn – Viện Công nghệ sinh học
Cơ sở đào tạo: Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học và Cơng nghệ Việt Nam
TĨM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN
1. Xây dựng thành công quy trình chuyển gen vào cây Xoan ta thơng qua Agrobacterium
tumefaciens đạt hiệu suất chuyển gen cao từ 13,77 – 18,15%. Quy trình chuyển gen có độ lặp
lại cao nên có thể áp dụng để chuyển thành cơng các gen mục tiêu có giá trị vào cây Xoan ta
tạo giống mới.
2. Tạo được các dòng Xoan ta chuyển cấu trúc gen gus dưới sự điều khiển của promoter rd29A.
Đánh giá hoạt động của promoter rd29A ở các dòng Xoan ta chuyển gen cho thấy promoter này

hoạt động đặc hiệu ở điều kiện môi trường xử lý bởi hạn nhân tạo.
3. Tạo được 72 dòng Xoan ta chuyển gen P5CS đột biến dưới sự điều khiển của promoter
rd29A. Đánh giá khả năng chịu hạn của các dòng Xoan ta chuyển gen thu được 2 dòng (PX24
và PX30) chống chịu tốt với điều kiện mơi trường khơ hạn. Hàm lượng proline tích lũy trong lá
của các dòng Xoan ta chuyển gen cao hơn so với dịng cây đối chứng khơng chuyển gen sau
khi xử lý bởi hạn nhân tạo.
4. Thiết kế được hai cấu trúc vector chuyển gen mang gen codA dưới sự điều khiển của
promoter 35S (pBI121::TP-codA và pBI121::codA), và chuyển thành công gen TP-codA/codA
vào cây thuốc lá thông qua Agrobacterium tumefaciens. Các dịng thuốc lá chuyển gen có sự
sinh tổng hợp và tích lũy glycine betaine cao (1,10 - 6,49 mM/g lá tươi) nên tăng cường được
khả năng chịu mặn so với dịng thuốc lá khơng chuyển gen. Các dịng thuốc lá chuyển cấu trúc
gen TP-codA chịu mặn tốt hơn so với các dòng thuốc lá chuyển gen codA.


5. Tạo được 68 dòng Xoan ta chuyển cấu trúc gen TP-codA. Đánh giá các dòng Xoan ta
chuyển gen ở điều kiện hạn và mặn nhân tạo thu được 5 dòng (TX4, TX12, TX27, TX28 và
TX54) chịu hạn và mặn tốt hơn so với dịng cây đối chứng khơng chuyển gen. Hàm lượng
glycine betaine tích lũy trong lá của các dòng Xoan ta chuyển gen cao hơn nhiều so với dịng
đối chứng khơng chuyển gen ở điều kiện xử lý bởi hạn và mặn nhân tạo.

Người hướng dẫn khoa học

Nghiên cứu sinh

XÁC NHẬN
CỦA VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC


VIETNAM ACADEMY OF
SCIENCE AND TECHNOLOGY

INSTITUTE OF BIOTECHNOLOGY

Socialist Republic of Vietnam
Independence - Freedom - Happiness
Hanoi, Month….. Date…… 2014

PhD THESIS BRIEF
(For publication on Internet)
Topic: Study on improvement of abiotic stress tolerance in Xoan tree (Melia azedarach
L.) by using genetic engineering.
Major: Genetics

No.: 62 42 01 21

Full name of PhD Student: Bui Van Thang
Full name of Instructor: Assoc.Prof.PhD. Chu Hoang Ha – Institute of Biotechnology
PhD. Le Van Son - Institute of Biotechnology
Location of Research: Institute of Biotechnology, Vietnam Academy of Science and
Technology
FINDINGS AND CONCLUSIONS
1. Methods for transformation into Melia azedarach tree mediated by Agrobacterium
tumefaciens were successfully established and the transformation efficiency reached to 13,77 –
18,15% in different biological experiments. The methods were proved to be reproducible and
reliable for further application in order to genetically modify Melia azedarach tree.
2. Transgenic Melia azedarach lines overexpressing GUS driven by promoter rd29A were
successfully produced. Analyses of transgenic Melia azedarach lines confirmed the specific
induction of promoter rd29A under drought conditions.
3. 72 transgenic Melia azedarach lines overexpressing a mutated version of P5CS gene (loss of
feedback inhibition) driven by promoter rd29A were produced. Analyses of transgenic lines
exhibited that two lines PX24 and PX30 showed significantly high tolerance to drought.

Proline content accumulated in transgenic lines significantly higher than that observed in
control lines under drought conditions.
4. Two transgenic vectors pBI121 carrying codA gene driven by promoter 35S (pBI121::TPcodA và pBI121::codA) were successfully constructed. These vectors were transformed into
Agrobacterium tumefaciens strain LAB4404 for further plant transformation. Transgenic
tobacco lines overexpressing TP-codA and codA encoding choline oxidase – a key enzyme in
glycine betaine biosynthesis, respectively, were successfully produced. Analyses of transgenic
tobacco lines observed a tight correlation of the high accumulation (1.10 – 6.49 mM/g fresh
leaves) of glycine betaine and the tolerance to salinity. Moreover, it was seen that lines


overexpressing TP-codA showed higher tolerance to stress than that of lines overexpressing
only codA.
5. 68 transgenic Melia azedarach lines overexpressing TP-codA gene were produced by using
transformation approach set up in this thesis. Evaluation the tolerance to stress of these
transgenic lines resulted in 5 promising lines regarding the tolerance to drought and salinity
including TX4, TX12, TX27, TX28 và TX54. The glycine betaine content in transgenic lines
significantly higher than that observed in control lines. Therefore, these lines exhibited higher
tolerance to stress conditions.

Instructor

PhD Student

CONFIRMATION OF INSTITUTE OF BIOTECHNOLOGY