Phát triển phương pháp phân tích xác định đồng thời esomeprazole và naproxen trong thuốc bằng phương pháp hplc uv

IăH CăQU CăGIAăTP.ăHCM
TR

NG

I H C BÁCH KHOA

--------------------

HU NHăTH ăXUÂNăTRANG

PHÁT TRI N PH

NG PHÁP PHỂN TệCH XÁC

NH

NG TH I ESOMEPRAZOLE VÀ NAPROXEN TRONG
THU C B NG PH

NG PHÁP HPLC-UV

Chuyênăngành:ăK ăThu tăHóaăH că
Mã s :ă8520301

LU NăV NăTH CăS

TP.ăH ăCHÍăMINH,ăthángă07 n mă2022ă


Cơngătrìnhăđ

căhồnă thànhăt i:ă Tr

ng

i H c Bách Khoa ậ

HQG ậ

HCM
Cánăb ăh

ngăd năkhoaăh c: TS.ăTr năTh ăKi uăAnh

Cánăb ăch mănh năxétă1:ăTS.ă inhăV năPhúc

Cánăb ăch mănh năxétă2:ăTS.ăTr năPh

Lu năv năth căs ăđ

căb oăv ăt iăTr

căNh tăUyên

ngă

iăh căBáchăKhoa,ă HQGăTp.ăHCMă

ngàyă28ăăthángă07ăn mă2022.

Thànhăph năH iăđ ngăđánhăgiáălu năv năth căs ăg m:
1. Ch ăt ch:ăPGS.ăTSăNguy năQuangăLong
2. Th ăkỦ:ăTS.ă

ngăB oăTrung

3. Ph năbi nă1:ăTS.ă inhăV năPhúc
4. Ph năbi nă2:ăTS.ăTr năPh

căNh tăUyên

5. yăviên:ăTS.ăTr năTh ăKi uăAnh
Xácănh năc aăCh ăt chăH iăđ ngăđánhăgiáăLVăvàăTr
ngànhăsauăkhiălu năv năđãăđ

CH T CH H I

NG

ngăKhoaăqu nălỦăchuyên

căs aăch aă(n uăcó).

TR

NG KHOA K THU T HĨA H C


C NG HÒA Xẩ H I CH NGH A VI T NAM

IăH CăQU CăGIAăTP.HCM
TR

NG

I H C BÁCH KHOA

c l p ậ T do ậ H nh phúc

NHI M V LU N V N TH C S
H ătênăh căviên: Hu nhăTh ăXuânăTrang

MSHV: 1970653

Ngày,ătháng,ăn măsinh:ă03/04/1993

N iăsinh:ăTp.ăHCM

Chuyênăngành:ăK ăThu tăHóaăh c

Mãăs :ă8520301

I.

TÊN

TÀI:

Ti ng Vi t:ă“Phátătri năph

ngăphápăphânătíchăxácăđ nhăđ ng th i esomeprazole và

naproxen trong thu c b ngăph

ng pháp HPLC-UV”ă.

Ti ng Anh:ă“Development of a rapid and simple analytical method for simultaneous
determination of esomeprazole and naproxen in binary combination by HPLC ậ UV”.
NHI M V VÀ N I DUNG
 Kh o sát quy trình chu n b m u cho q trình phân tích.
 Kh oăsátăđi u ki n s c ký.
 Th măđ nh quy trình phân tích.


ng d ng quy trình v a phát tri n phân tích m t s m u thành ph m.

II.

NGÀY GIAO NHI M V : 22/02/21

III.

NGÀY HOÀN THÀNH NHI M V : 06/06/22

IV.

CÁN B

H

NG D N: TS. Tr n Th Ki u Anh
Tp. HCM, ngày

CÁN B

H

NG D N

TR

CH NHI M B

tháng

MỌN ÀO T O

NG KHOA K THU T HÓA H C

i

n m 20


L I CÁM
Sau m t th i gian h c t p và nghiên c uăd

N

i s đ nhăh

ng và d n d t c a cô TS.

Tr n Th Ki u Anh, lu năv năth căs ăv iăđ tài:ă“Phátătri năph

ngăphápăphânătíchă

xácăđ nhăđ ng th i Esomeprazole và Naproxen trong thu c b ngăph
UV”ăđãăđ

ngăphápăHPLC-

c th c hi n và hồn thành.

Tơi xin bày t lòng bi tă năsâuăs c t i:
TS. Tr n Th Ki uăAnh,ăng

iăcơăđãăt nătìnhăh

ng d n,ăgiúpăđ và cho tơi nh ng

ki n th căquỦăbáuăđ tơi hồn thành lu năv n.ă
BanăLãnhăđ o Khoa K thu t Hoá h c và Ban Giám Hi uăTr

ngă HăBáchăKhoaă

Tp.ăHCMăđãăt oăđi u ki n thu n l i cho tôi tham gia h c t p và hoàn thành lu năv nă
đúngăth iăgianăquyăđ nh.
CN. Nguy n H u Gia B o,ăDS.ăVõăThanhăS n,ăDS.ăHàăThanhăTúăvà các b n t i B
ph n R&D - Trung tâm Ngiên c u Phát tri n Công ngh cao thu căCôngătyăCPăD

c

ph măSaViPharmăđãăgiúpăđ tơi trong q trình h c t p và nghiên c u t i công ty.
DS. Thái Hi năL

ng,ăng

iăemăvàăc ngălàăng

iăđ ng nghi păđãăđ ngăviên,ăgiúpăđ

và chia s v i nh ngăkhóăkh nătrongăcơngăvi c khi tơi th c hi n lu năv n.ă
Và cu i cùng, tôi xin chân thành c mă năgiaăđình,ăb năbèăđãăquanătâmăđ ng viên tơi
trong q trình h c t p và th c hi n lu năv n.
Tp. HCM, ngày

tháng

n m 20

H căviên
HU NH TH ăXUÂNăTRANG

ii


TịM T T LU N V N
Esomeprazole (ESP) là m t h p ch t có tác d ng c ch ti t axit d dày, h tr đi u
tr b nhătràoăng

c d dày th c qu n hi u qu . Naproxen (NPX) có ho t tính ch ng

viêmăkhơngăsteroid,ăth

ngăđ

c s d ngăđ gi m nhi u lo iăđau,ăs t, viêm. Ngày

nay, có nhi uăcơngătyăd

c ph măđi u ch k t h p NPX và ESP v i li uăl

nhau. Vì v y, m c tiêu c a nghiên c u này là phát tri n m tăph

ng khác

ngăphápăphânătíchă

nhanhăchóng,ăđángătinăc y,ăchínhăxácăvàăđ năgi năđ xácăđ nhăđ ng th i đ nh tính và
đ nhă l

ng NPX và ESP trong bào ch d

c ph m. S phână táchă đ tă đ

ct c t

HPLCăC8ă(150mmăxă4,6ămm,ă5ăµm),ăphaăđ ng s d ng g m Acetonitrile - đ m pH
7,6 có b sung ch t b t c p ion theo t l 30:70 (v/v), v i t căđ dịng 1,0 ml / phút,

b

c sóng phân tích

8,949 phút.ăPh
t

230 nm. Th iăgianăl uăc a NPX và ESP l năl

ngăphápăchoăth yăđ tuy n tính c aăđ

t là 6,950 và

ng chu n v i giá tr h s

ngăquanăr2 =ă0,9999ăđ i v i NPX và ESP. Hi u su t thu h i c a c hai lo iăd

ch t n m trong gi i h n t 98%ăđ n 102%, ch ng t đ đúngăc aăph
Các nghiên c u v đ chínhăxácăvàăđ chính xác trung gian c aăph

ngăphápănày.ă
ngăphápăm i có

đ l ch chu năt

ngăđ i (RSD) th păh nă2,0%,ăđ t yêu c uătheoăcácăh

ICH.ăDoăđó,ăph

ngăphápăHPLCă- UV thích h păđ xácăđ nhăhàmăl

ESP trong thu c và nó có th đ

c áp d ngătrongăphânătíchăthơngăth

NPX và ESP trong các công th căd

c ph m.

iii

c

ng d n c a

ng c a NPX và
ngăđ xácăđ nh


ABSTRACT
Esomeprazole (ESP) is a compound that inhibits gastric acid secretion and effective
in the treatment of gastric oesophageal reflux diseases. Naproxen (NPX) has non
steroidal anti-inflammatory activity, which is commonly used for relief of a wide
variety of pain, fever, inflammations. Nowadays, there are many pharmaceutical
companies prepare NPX and ESP combinations in different dosage strengths. Thus,
the objective of this study was to develop a rapid, reliable, reproducible, precise and
simple analytical method for qualitative and quantitative simultaneous determination
of NPX and ESP in pharmaceutical preparation. The separation was achieved from
HPLC Column C8 (150 mm x 4.6 mm, 5 µm), Acetonitrile - buffer pH 7,6 with the
addition of ion pair reagents in the ratio of 30:70 (v/v) as the mobile phase, at a flow

rate of 1.0 ml/min with UV detection at 230 nm. The retention time of NPX and ESP
was found to be 6,950 and 8,949 minutes. The method showed linear response with
a correlation coefficient value r2= 0,9999 for NPX and ESP. The recovery for both
drugs was found between 98% and 102% which demonstrated the accuracy of this
method. Intra- and intermediate precision studies of the studied method were less than
2,0 % relative standard deviation (RSD) according to ICH guidlines. Therefore, the
RP - HPLC method is suitable for determining the concentration of NPX and
ESP in tablets and it can applied for routine analysis for determination of the NPX
and ESP in pharmaceutical formulations.

iv


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

L I CAM OAN
Tơiăxinăcamăđoanăđâyălàăcơngătrìnhănghiênăc u c a riêng tôi, các s li u và k t qu
đ

c nêu trong lu năv nălàătrungăth căvàăch aăt ngăđ

c công b trong b t kì cơng

trình nghiên c u nào khác.
HU NH TH XUÂN TRANG

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

v

C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

M CL C
DANH M C VI T T T ........................................................................... VIII
DANH M C B NG BI U ........................................................................... X
DANH M C HÌNH V ............................................................................. XII
U.......................................................................................................... 1

M

M C TIÊU C A
CH

TÀI ............................................................................. 2

NG 1: T NG QUAN ....................................................................... 3
IC

1.1

NG V NAPROXEN ..................................................................... 3

1.1.1

Gi i thi u chung ...................................................................................... 3

1.1.2

C u trúc và tính ch t c a Naproxen........................................................ 3

1.1.3

Tác d ng d
IC

1.2

c lý c a Naproxen.............................................................. 3

NG V ESOMEPRAZOLE ........................................................... 4

1.2.1

Gi i thi u chung ...................................................................................... 4

1.2.2

C u trúc và tính ch t c a Esomeprazole ................................................. 5

1.2.3

Tác d ng d

c lý c a Esomeprazole ....................................................... 5

1.3 T NG QUAN V PH
KI N

NG PHÁP QUANG PH T NGO I KH

6

1.4 T NG QUAN V PH

NG PHÁP S C KÝ L NG HI U N NG CAO .. 9

1.4.1

Khái ni m................................................................................................. 9

1.4.2

Phân lo i ................................................................................................. 9

1.4.3

Pha t nh trong s c ḱ pha đ o ............................................................... 10

1.4.4

H th ng máy HPLC ............................................................................. 13

1.5 M T S PH

NG PHÁP PHÂN TÍCH NPX VÀ ESP ............................. 15

1.6 T NG QUAN V K THU T S C KÍ PHA
1.7 T NG QUAN V H

NG NGHIÊN C U ............................................... 20

1.8 T NG QUAN TH M

CH

NG 2:

2.1
2.1.1

IT

IT

O GHÉP C P ION ......... 18

NH QUY TRÌNH PHÂN TÍCH ........................... 21

NG VÀ PH

NG PHÁP NGHIÊN C U...... 29

NG NGHIÊN C U ...................................................................... 29
it

ng nghiên c u và ngun li u.................................................... 29

2.1.2

Dung mơi - Hố ch t: ............................................................................ 29

2.1.3

Thi t b - D ng c .................................................................................. 30

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

vi


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

2.1.4
2.2 PH

Chu n b hóa ch t – Ch t chu n ........................................................... 30
NG PHÁP NGHIÊN C U ................................................................ 31

2.2.1

Ki m tra đ tinh khi t c a chu n .......................................................... 31

2.2.2

Quy trình đ nh l

2.2.3

Kh o sát đi u ki n s c ký ...................................................................... 32

2.2.4

Kh o sát quy trình chu n b m u .......................................................... 32

2.2.5

ng NPX và ESP trong thu c viên ban đ u ............... 31

ng d ng quy trình đ nh l

ng ............................................................. 33

2.3 QUY TRÌNH X LÝ M U ......................................................................... 33

CH

NG 3: TH C NGHI M VÀ K T QU ...................................... 34

3.1 KH O SÁT I U KI N S C KÝ .............................................................. 34
3.1.1

Kh o sát b

3.1.2

Kh o sát c t s c ký ................................................................................ 36

3.1.3

Kh o sát pha đ ng ................................................................................. 38

3.1.4

Kh o sát th tích tiêm m u .................................................................... 42

3.1.5

Kh o sát t c đ dịng ............................................................................. 44

c sóng ............................................................................... 34

3.2 CH N I U KI N S C KÝ....................................................................... 45
3.3

ÁNH GIÁ PH

3.2.1

Tính t

NG PHÁP PHÂN TÍCH ................................................ 48

ng thích h th ng ..................................................................... 48

3.2.2

đ c hi u............................................................................................ 49

3.2.3

Tính tuy n tính ....................................................................................... 51

3.2.4

chính xác .......................................................................................... 53

3.2.5

đúng ................................................................................................. 55

3.4

CH

NG D NG QUY TRÌNH PHÂN TÍCH TRÊN M U TH T ................... 56

NG 4: K T LU N VÀ

NGH ................................................ 58

4.1 K T LU N .................................................................................................. 58
4.2

NGH ...................................................................................................... 58

TÀI LI U THAM KH O ........................................................................... 59
DANH M C PH L C ............................................................................... 63

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

vii


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

DANH M C VI T T T
STT

CH

VI T T T

TI NG ANH

TI NG VI T

1

1-HSA

1-Heptanesulfonate sodium

2

APIs

Active Pharmaceutical
Ingredients

3

ESP

Esomeprazole

4

FDA

Food and Drug

C ăquanăqu n lý

Administration

D

D

c ch t

c ph m và Th c

ph m
5

HPLC

High-Performance

S c ký l ng hi u

Liquid

n ngăcao

Chromatography
6

ICH

International Council

H iăđ ng qu c t v

for Harmonisation

s đ ng thu n

7

IPC

Ion ậ pair
chromatography

S c ký ghép c p ion

8

k

Capacity Factor

H s dungăl

9

KNV

10

LOD

Limit of Detection

Gi i h n phát hi n

11

LOQ

Limit of Quantitation

Gi i h năđ nhăl

12

NPX

Naproxen

13

NSAID

Non-steroidal antiinflammatory drug

ng

Ki m nghi m viên

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

viii

ng

Thu c ch ng viêm
không steroid


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

14

NTP

Number Theory of Plate

S đ aălýăthuy t

15

ODS

Octadodecyl silane

C18

16

RSD

Relative standard deviation

l ch chu năt

ngă

đ i
17

Rs

Resolution

phân gi i

18

R2

Coefficient of correlation

H s t

19

S/N

Signal/Noise

T l tín hi u trên

ngăquan

nhi u
20

STD

Standard

Chu n

21

STP

Standard testing procedure

Chu n làm vi c

22

Tf

Tailing Factor

H s kéo duôi

23

TBH

Tetrabutylammonium
hydroxide

24

tR

Retention time

Th iăgianăl u

25

USP

United States

D

căđi n M

Pharmacopeia
26

27

UV

Wb

Ultraviolet Visible

Quang ph t ngo i

Spectroscopy

ậ Kh ki n

Peak width

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

ix

r ng c a peak


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

DANH M C B NG BI U
B ng 1.1 M t s tính ch t v t lý c a Naproxen............................................. 3
B ng 1.2 M t s tính ch t v t lý c a Esomeprazole ..................................... 5
B ng 1.3. T ng h p m t s nghiên c u phơn tích đ ng th i NPX và
ESP................................................................................................................... 15
B ng 1.4. Các ch tiêu c n th m đ nh đ i v i m i quy trình ...................... 22
B ng 1.5. Gi i h n ch p nh n các ch tiêu th m đ nh. ............................... 27
B ng 2.1 Danh m c dung mơi ậ hóa ch t s d ng ...................................... 29
B ng 3.1 K t qu kh o sát c t s c ký ........................................................... 38
B ng 3.2 K t qu kh o sát pha đ ng h u c ............................................... 39
B ng 3.3 K t qu kh o sát h pha đ ng ACN ậ

m pH 7,6 ..................... 42

B ng 3.4 K t qu kh o sát th tích tiêm m u .............................................. 43
B ng 3.5 K t qu kh o sát t c đ dòng ........................................................ 44
B ng 3.6 K t qu thu đ

c

4 đi u ki n s c ký khác nhau ...................... 47

B ng 3.7 K t qu th m đ nh tính t
B ng 3.8 L

ng thích h th ng ............................. 49

ng cân chu n b các dung d ch th m đ nh tính đ c hi u ..... 50

B ng 3.9 K t qu th m đ nh ch tiêu tính đ c hi u ..................................... 51
B ng 3.10 Tóm t t th tích hút chu n g c d ng đ

ng chu n .................. 51

B ng 3.11 K t qu th m đ nh ch tiêu đ l p l i c a NPX ......................... 53
B ng 3.12 K t qu th m đ nh ch tiêu đ l p l i c a ESP .......................... 53
B ng 3.13 K t qu th m đ nh ch tiêu đ chính xác trung gian c a NPX 54
B ng 3.14 K t qu th m đ nh ch tiêu đ chính xác trung gian c a ESP . 55
B ng 3.15 K t qu th m đ nh ch tiêu đ đúng c a NPX và ESP ............. 56
B ng 3.16 B ng giá tr LOD, LOQ c a NPX và ESP ................................. 56

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

x


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

B ng 3.17 K t qu

ng d ng quy trình phân tích trên m t s m u th t .. 57

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

xi


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

DANH M C HÌNH V
Hình 1.1 Cơng th c c u t o phân t Naproxen ............................................ 3
Hình 1.2 Công th c c u t o phân t Esomeprazole ..................................... 5
Hình 1.3 S đ nguyên lỦ đo ph UV ậ Vis .................................................... 7
Hình 1.4 Hình minh h a c a m t thi t b UV-vis chùm tia đ n. ................. 8
Hình 1.5 Hình minh h a c a m t thi t b UV-vis chùm tia kép. ................. 8
Hình 1.6 Hình minh h a c a m t thi t b UV-vis nhi u chùm tia. .............. 8
Hình 1.7 B m t silica đư th y phơn ............................................................. 11
Hình 1.8 T o nhánh trên b m t silica ......................................................... 11
Hình 1.9 C u trúc c a c t ODS..................................................................... 12
Hình 1.10 C u trúc c t LC-DB ..................................................................... 12
Hình 1.11 C u trúc c t có g c isopropyl. ..................................................... 13
Hình 1.12 Hình nh minh h a s đ h th ng máy HPLC. ....................... 13
Hình 1.13 T

ng tác gi a tác nhân ion pair và chu i C18. ....................... 19

Hình 1.14 S đ các b

c th c hi n đ tài nghiên c u ............................... 21

Hình 3.1 Ph h p th t ngo i c a dung d ch chu n đ n NPX................. 34
Hình 3.2 Ph h p th t ngo i c a dung d ch chu n đ n ESP ................. 35
Hình 3.3 Ph h p th t ngo i c a dung d ch chu n h n h p .................. 35
Hình 3.4 S c kỦ đ kh o sát c t C18 (250mm x 4,6mm, 5 m) .................. 36

Hình 3.5 S c kỦ đ kh o sát c t C18 (150mm x 4,6mm, 5 m) .................. 37
Hình 3.6 S c kỦ đ kh o sát c t C8 (150mm x 4,6mm, 5 m) .................... 37
Hình 3.7 S c kỦ đ kh o sát pha đ ng h u c (ACN ậ H2O)..................... 38
Hình 3.8 S c kỦ đ kh o sát h pha đ ng ACN ậ

m pH 7,6 (1)............. 40

Hình 3.9 S c kỦ đ kh o sát h pha đ ng ACN ậ

m pH 7,6 (2)............. 40

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

xii


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

Hình 3.10 S c kỦ đ kh o sát h pha đ ng ACN ậ

m pH 7,6 (3)........... 41

Hình 3.11 S c kỦ đ kh o sát h pha đ ng ACN ậ

m pH 7,6 (4)........... 41

Hình 3.12 S c kỦ đ kh o sát th tích tiêm m u ......................................... 43
Hình 3.13 S c kỦ đ kh o sát t c đ dịng ................................................... 44
Hình 3.14 S c kỦ đ

đi u ki n s c ký ậ 1 .................................................. 46

Hình 3.15 S c kỦ đ

đi u ki n s c ký ậ 2 .................................................. 46

Hình 3.16 S c kỦ đ

đi u ki n s c ký ậ 3 .................................................. 47

Hình 3.17 S c kỦ đ

đi u ki n s c ký ậ 4 .................................................. 47

Hình 3.18 Hình nh bi u di n đ

ng chu n c a ESP ................................ 52

Hình 3.19 Hình nh bi u di n đ

ng chu n c a NPX ............................... 52

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

xiii


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

M

U

Naproxen (NPX) là lo i thu c kháng viêm khơng steroid (NSAID), có tác d ng gi m
đauăchoăcácătìnhătr ng b nhănh ănh căđ u,ăđauănh căc ăb p,ăviêmăgân,ăđauăr ngăvàă
đauăb ng kinh.ă

ng th i, thu c giúp gi măđau,ăs ngăvàăc ng kh p do ch ng viêm

kh p, viêm bao ho t d ch và b nh gút. Nó ho tăđ ng b ngăcáchăng năch năc ăth s n
xu t m t s ch t gây viêm [1].
NPX th

ngăđ

c s d ng ph bi n h năaxităacetylsalicylică(aspirin)ăvì s h p thu

t tăh năc a nó sau khi u ng và ít gây ra tác d ng ph h n.ăNóăho tăđ ng b ng cách
c ch c hai enzym CoX-1 và CoX-2 doăđó làm gi m n ngăđ prostaglandin [1].
Tuyănhiên,ăprostaglandinăđ

c s n xu t b i enzym CoX-1 và CoX-2,ăc ngăcóăkh

n ngăb o v d dày, h tr ti u c uăvàăđơngămáu.ăDoăđó,ăs d ng NPX th i gian dài
có th gây loét d dàyăvàăthúcăđ y ch y máu sau ch năth
h n ch tác d ng không mong mu nătrênăđ

ng tiêu hóa, ng

d ng NPX v i m t trong s các thu c b o v đ

thu c

c ch

ti t acid, thu c nhóm

ngăho c ph u thu t [2].ă
i b nh có th đ

cs

ngătiêuăhóaănh :ămisoprostol, các

c ch

b mă protonă PPIă (omeprazole,ă

esomeprazole, lansoprazole, rabeprazole) ho că nhómă đ i kháng th

th

H2

(ranitidine, famotidine...) [3].
Trong s các ho t ch t thu c nhóm c ch b măprotonăPPI,ăesomeprazole (ESP) đ ng phân (S) c aăomeprazoleălàăd

c ch tăđ

c s d ng r ngărãiătrongăđi u tr k t

h p v i NPX do ESP ki m sốt axit hi u qu h năomeprazole,ăítăcóăs thayăđ i gi a
các b nhănhân,ădoăđóăcóăkh n ngăc i thi n hi u qu h n trongăđi u tr các b nh có
s d ng NPX [3]. Hi n nay, nhi u công ty đã k t h p NPX và ESP v i các li uăl
khácănhau.ăDoăđó,ăchúngătaăc n phát tri năph
xác và năđ nhăđ đ nhătínhăvàăđ nhăl

ngăphápăphânătíchăđángătinăc y, chính

ngăđ ng th i NPX và ESP trong bào ch d

ph m.

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

1

ng

c


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

M C TIÊU C A

TÀI

Hi nănayăđãăcóăm t s cơng b v nghiên c uăph

ngăphápăphânătíchăđ ng th i NPX

vàăESPătrongăd

ngăphápăthamăkh o còn h n ch .

c ph m, tuy nhiên s l

ngăph

Quy trình x lý m u tham kh o khi áp d ng trên m u th c t không phù h p do b n
ch t m uăkhácănhau,ăđi u ki nămơiătr

ng và thi t b phân tích khác nhau d năđ n k t

qu phân tích khơng chính xác và khơng năđ nh.ăDoăđó, trong nghiên c u này m t
s v năđ đãăđ

c kh o sát bao g m:

Kh o sát quy trình chu n b m u cho q trình phân tích.
Kh oăsátăđi u ki n s c ký.
Th măđ nh quy trình phân tích.
ng d ng quy trình v a phát tri n vào vi c phân tích m t s m u thành ph m.
M c tiêu c a nghiên c u này là phát tri n m t ph

ngăphápăphân tích s d ngăk ă

thu t s căkỦăphaăđ o (RP-HPLC) đ u dò UV đ đ nhăl
trong các ch ph măd

ngăđ ng th i NPX và ESP

c ph m m tăcáchăđ năgi n, nhanh chóng, chính xác, có th

gi i quy t v năđ th c ti n t iăcôngătyăCPăD

c ph m SaVi, bên c nhăđóăcóăth đóngă

gópăthêmăt ăli uătrongăc ăs d li u v nghiên c u và xây d ngăph

ngăphápăki m

nghi măđ ng th i NPX và ESP. Cu i cùng, xác nh n giá tr s d ng c a ph
đóătheoăh
ĺ D

ngăphápă

ng d n c a H i đ ng qu c t v s đ ng thu n (ICH) và C quan qu n

c ph m và Th c ph m (FDA).

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

2


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

CH

NG 1: T NG QUAN
IăC

1.1

NGăV NAPROXEN

1.1.1 Gi i thi u chung
Naproxen là có tên g i là [(S) -6-metoxy-alpha-metyl-2- naphthaleneacetic
acid], có c u trúc liênăquanăđ n nhóm axit arylacetic ho c propionic, thu c nhóm
kháng viêm khơng steroid (NSAID). Ch đ ng phân D ho c (+) th hi n ho t tính
ch ng viêm, gi măđauăvàăh s t ph thu c vào li uăl

ng. Naproxenălàăth

s d ngăđ h s t, gi măđauăviêmăvàăc ng trongăđi u tr viêmăx

ngăđ

c

ngăkh p,ăđauăn a

đ u, viêm kh p d ng th p, viêm kh p v y n n, s i th n, b nh gút, s i th n,ăđauăb ng
kinh, viêm c t s ng dính kh p, viêm gân và viêm bao ho t d ch.
1.1.2 C u trúc và tính ch t c a Naproxen

Hình 1.1 Cơng th c c u t o phân t Naproxen
B ng 1.1 M t s tính ch t v t lý c a Naproxen

STT

Tính ch t
Kh iăl

1

Giá tr

ng phân t

230,26

2

Màu s c

Tinh th màu tr ng

3

Nhi tăđ sôi

152 ậ 155 0C

4

tan ( 250C)

5

LogKow

3,18

6

pKa

4,15

1.1.3 Tác d ngăd

15,9 mg/ L

c lý c a Naproxen

Naproxen là m t thu c ch ng viêm không steroid d n xu t t acid propionic, có
tác d ng gi măđau,ăh s t, ch ng viêm và c ch ti u c u k t dính. Nhìn chung tác

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

3


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

d ng ch ng viêm, gi măđauăc a narproxen là do c ch t ng h p prostaglandin trong
các mô c aăc ăth b ng cách c ch cyclooxygenase (CoX), m t enzym xúc tác t o
thành các ti n ch t prostaglandin (endoperoxid) t acid arachidonic. Do thu c c ch

lên c 2 lo i cyclooxygenase 1 và 2 (CoX-1 và CoX-2) nên có tác d ng không mong
mu n gi ng aspirin và các thu c ch ng viêm không steroid khác [5]. Tuy nhiên, m c
đ

c ch

uătiênălênăCoX-2 m nhăh năCoX-1 so v i aspirin, indomethacin nên m t

s tác d ng không mong mu n c a thu cătrênăđ

ngătiêuăhốăítăh n.ă

ch ng viêm ho c gi mă đau,ă n ngă đ naproxen huy tă t

có tác d ng

ngă c n có 30 - 90 g/ml.

Gi măđauăcóăth b tăđ u trong vòng 1 gi sau khi u ngănaproxenă(viênăthơngăth

ng)

và trong vịng 30 phút sau khi u ng naproxen natri. Th i gian tác d ng c a c 2 lo i
th

ng là 7 - 12 gi . Do h p thu ch m, viên bao gi i phóng ch măc ng gi măđauăch m

h n.
Viên naproxen sodium 220, 275 ho c 550 mg x p x t
naproxen 200, 250 ho că500ămg,ăt

ngă ng. Li uăl

th n tu theo nhu c uăvàăđápă ng c a t ngăng

ng ph iăđ

Ng

ngă v i viên

căđi u ch nh c n

i b nh, ph i dùng li u th p nh t mà

có hi u qu . C n ph i cân nh c dùng li u th păh năđ i v iăng
ho căng

ngă đ

i suy th n, suy gan

i cao tu i.
i l n: Li uăthôngăth

ng naproxen: 250 - 500 mg, ngày u ng 2 l n, sáng

và chi u. M t cách khác, 250 mg u ng bu i sáng và 500 mg u ng bu i chi u. Li u
sau ph iăđi u ch nh tu theoăđápă ng và dung n p c aăng
IăC

1.2

i b nhăđ i v i thu c.

NGăV ESOMEPRAZOLE

1.2.1 Gi i thi u chung
Esomeprazoleămagnesiumăđ

c bi tăđ n v m t hóa h c là 5-metoxy-2 - {(S)

- [(4-metoxy-3,5-đimetyl-2-pyridyl) methyl] sulfinyl} benzimidazole magie
trihydrate.

âyălàăch t c ch b măprotonăđ uătiênăđ

c phát tri nănh ăm tăđ ng

phân quang h c duy nh tăđ đi u tr các b nhăliênăquanăđ n axit thông qua vi c c
ch H + / K + -ATPase trong t bào thành d dày. B ng cách c ch ho tăđ ng c a
enzym này, thu căng năng a s hình thành axit d ch v [9, 10].

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

4


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

1.2.2 C u trúc và tính ch t c a Esomeprazole

Hình 1.2 Cơng th c c u t o phân t Esomeprazole
B ng 1.2 M t s tính ch t v t lý c a Esomeprazole
STT

Tính ch t
Kh iăl

1

Giá tr

ng phân t

345,40

2

Màu s c

Tinh th màu tr ng

3

Nhi tăđ sôi

155 0C

4

tan ( 250C)

5

LogKow

3,40

6

pKb

9,2

1.2.3 Tác d ngăd

1,4 x 10-4 mg/ L

c lý c a Esomeprazole

Esomeprazoleă đ

c k t h p v i thu c kháng sinh, clarithromycin và

amoxicillin (ho c metronidazole

nh ng b nh nhân quá m n c m v i penicillin)

trong li u pháp b ba ti t tr Helicobacter pylori trong 7-14 ngày [9]. Nhi m H.

pylori là y u t gây b nh trong ph n l năcácătr
d ng ph th

ng h p loét d dày tá tràng. Các tác

ng g p c a Esomeprazole bao g m nh căđ u, tiêu ch y, bu n nơn,

đ yăh i,ăgi m c măgiácăthèmă n,ătáoăbón,ăkhơămi ngăvàăđauăb ng. Các tác d ng ph
nghiêm tr ngăh nălàăph n ng d

ng nghiêm tr ng,ăđauăng c,ăn

c ti u s m màu,

timăđ p nhanh, s t, d c m,ăđauăh ng dai d ng,ăđauăd dày nghiêm tr ng, b m tím
ho c ch y máu b tăth

ng, m t m i b tăth

ch b măprotonăcóăth làmăt ngănguyăc ăgãyăx

ng và vàng m t ho c làn da. Thu c c
ngăhôngăvàătiêuăch y do Clostridium

[9, 10].
Esomeprazole có nh ngă uăđi măh năomeprazoleăv cácăđ căđi măd
h c và c ch axit. Thu căđ

c s d ng trong qu n lý b nhănhânătràoăng

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

5

căđ ng
c d dày


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

th c qu n, viêm th c qu nătràoăng

că nămònăvàăloétăd dày tá tràng. Thu c là m t

baz ăy u t p trungătrongăng năch a axit c a ng ti t c a thành t bàoăn iănóătr i qua
q trình chuy năđ i có xúc tác axit thành m t sulphenamide cation axit tetracyclic
achiral.ăSauăđó,ăch t này ph n ng v i các cystein c th d năđ n s

c ch enzym

H + / K + - ATPase [11].
T NG QUAN V PH

1.3

NGăPHÁPăQUANG PH T NGO I KH KI N

Ph UV – Vis



Ph UV-VIS là ph sinh ra do vào hi u ng h p th x y ra khi phân t v t ch t
t

ngătácăv i b c x đi n t [12].
Nguyên t c phép đo ph UV – Vis



Khi chi u m tăchùmăsángăcóăb

c sóng phù h păđiăquaăm t dung d ch ch a

ch t c n phân tích, các phân t h p th s h p th m t ph năn ngăl
m t ph n ánh sáng truy n qua dung d ch.ăXácăđ nhăc
quaăđóătaăcóăth xácăđ nhăđ

ng chùm sáng,

ngăđ chùm ánh sáng truy n

c n ngăđ c a dung d ch. S h p th ánh sáng c a dung

d chătuânătheoăđ nh lu t Bughe ậ Lambert ậ Beer [12,13]:
A = ậ lgT = lg (Io/It)ă=ă .b.Căv i T = It/Io
Trongăđó:
 Iălàăc

ngăđ ăánhăsángăđ năs căsauăkhiăđãătruy năquaădungăd ch

 I0 làăc

ngăđ ăánhăsángăđ năs căt i

 Tălàăđ ătruy năquang
Ngo i tr s có m t c a các y u t lý ậ hóa h căkhác,ăđ h p th A t l v i
đ dài quang trình d c a ánh sáng truy n qua dung d ch (b dày l p dung d ch) và
n ngăđ c c a dung d ch ch t kh o sát. S ph thu cănàyăđ
trình [12,13]:
A= .c.d
Trongăđó:ă


làăđ ăh păth ămol

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

6

c bi u th b ngăph

ngă


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

 dăđ

căbi uăth ăb ng cm.

 căđ

căbi uăth ăb ngămol/ăl
n ngăđ 1 % (kl/tt) hay 10 g/l trong m t

h p th c a dung d ch ch t tan
c căđoăcóăchi uădàyă1ăcmăvàăđoă m tăb
ch tătanăvàăđ

căsóngăxácăđ nhălàăđ h p th riêng c a

c ký hi uălàăAă(1ă%,ă1ăcm).ă

h p th riêng c a ch tătanăđ

c tính

b ng cơng th c [12,13]:
Aă(1ă%,ă1ăcm)ă=ă(10ăxă )/M
Trongăđó:ă
 Mălàăkh iăl

ng phânăt ăc aăch tăth .ă

dungămơiăxácăđ nhăvàăđoă ăm tăb

ăh păth ăriêngăc aăm tăch tătrongăm tă

c sóngăxácăđ nhălàăm tăđ cătínhăc aăch tă

đó.ăTr ănh ngăch ăd năkhácătrongăchunălu năriêng,ăng

iătaăđoăđ ăh păth ă ă

đ ădàiăsóngăquyăđ nhăvàăs ăd ngăquangătrìnhădàiă1ăcmă 19 °C đ nă21ă°C.
Cácăphépăđoăđ

c ti n hành so sánh v i dung môi ho c v i h n h p dung môi

đãădùngăđ chu n b m u th .ă
đ i chi u v iăkhơngăkhíăkhơngăđ

h p th c a dung mơi ho c h n h pădungămơiăđó
căv

t q 0,4 và t t nh tălàăd

i 0,2. Khi v ph

h p th ,ăđ tăđ h p th ho c hàm so c aăđ h p th trên tr cătungăvàăđ tăđ dài sóng
ho c hàm s c aăđ dài sóng trên tr c hồnh. Khi m t chuyên lu năriêngăđ aăraăm t
tr s riêng l cho v trí c a m t c căđ i,ăđi uănàyăđ

c hi u là tr s kh oăsátăđ

có th l ch khơng quá ± 2 nm.

Hình 1.3 S đ nguyên lý đo ph UV – Vis

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

7

c


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

Thi t b UV ậ VIS bao g m ngu n sáng (light source) (th
ho că đènă vonfram),ă giáă gi

ngă làă đènăđ teriă

m u và đ u dò (detector), b ph n t oă tiaă đ nă s c

(monochromator) (Hình 1.3).ă i u khi năchùmătiaăđ nă(Hìnhă1.4)ăcóăm t b l c ho c
m t b đ năs c gi a ngu n và m uăđ phân tích m tăb

c sóng t i m t th iăđi m.

D ng c chùm tia kép (Hình 1.5) có m t ngu năđ năvàăb đ năs c,ăsauăđóăcóăm t b
tách và m t lo tăg

ngăđ đ aăchùmătiaăt i m u chu n và m uăđ

nàyăchoăphépăđ căchínhăxácăh n.ăNg

căphânătích,ăđi u

c l i, thi t b nhi u chùm tia (Hình 1.6) khơng

có b đ năs c gi a m u và ngu n. Thayăvàoăđó,ăthi t b nhi u chùm tia có m t b dị
dãy diode cho phép thi t b phát hi năđ ng th iăđ h p th
đ ng th iăth

t t c cácăb

c sóng, đoă

ngănhanhăh năvàăhi u qu h nănhi u [14].

Hình 1.4 Hình minh h a c a m t thi t b UV-vis chùm tia đ n.

Hình 1.5 Hình minh h a c a m t thi t b UV-vis chùm tia kép.

Hình 1.6 Hình minh h a c a m t thi t b UV-vis nhi u chùm tia.

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

8


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

T NG QUAN V PH

1.4

1.4.1
Ph

NGăPHÁPăS C KÝ L NG HI UăN NGăCAO

Khái ni m
ngăphápăs c ký l ng hi uăn ngăcaoă(HPLC)ăraăđ iăn mă1967-1968ătrênăc ă

s phát tri n và c i ti n t ph

ngăphápăs c ký c t c đi n. HPLC là m tăph

ngă

pháp chiaătáchătrongăđóăphaăđ ng là ch t l ngăvàăphaăt nhăch a trong c t là ch t r n
đãăđ

căphânăchiaăd

i d ng ti u phân ho c m t ch t l ng ph lên m t ch t mang

r n, hay m t ch tămangăđãăđ
c .ăPh

c bi n b ng liên k t hóa h c v i các nhóm ch c h u

ngăphápănàyăngàyăcàngăđ

đ nh y cao, kh n ngăđ nhăl

c s d ng r ng rãi và ph bi n vì nhi u lý do: có

ng t t, thích h p tách các h p ch tăkhóăbayăh iăho c

d phân h y nhi t [15].
Ph m vi ng d ng c aăph

ngăphápăHPLCăr t r ng,ănh ăphânătíchăcácăh pă

ch tăthu c tr sâu, thu c kháng sinh, các ch t ph gia th c ph mătrongăl nhăv c th c
ph m,ăd
1.4.2

c ph m,ămôiătr

ng…

Phânălo i

D a vào s khác nhau v c ăch tách chi t s d ngătrongăHPLC,ăng

i ta chia

HPLC thành 4 lo i [16, 17]:


S c ký h p ph hay s c ký l ng r n (adsorption/liquid chromatography).



S c ký phân b (partition chromatography).



S c ký ion (ion chromatography).



S c ký rây phân t (size exclusion/gel permeation chromatography).
Trongăđó,ăs c ký phân b (SKPB)ăđ

tíchăđ

c ng d ng nhi u nh t vì có th phân

c nh ng h p ch t t không phân c căđ n nh ng h p ch t r t phân c c, h p

ch t ion có kh iăl
SKPBăđ

ng phân t không quá l n (<3000).

c chia thành hai lo i d aătrênăđ phân c căt

vàăphaăđ ng: s căkỦăphaăth

ngăđ i gi aăphaăt nhă

ng ậ SKPT (normal phase chromatography) và s c ký

phaăđ o ậ SKP ă(reversedăphaseăchromatography).

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

9


C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4..22.Tai lieu. Luan 66.55.77.99. van. Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an.Tai lieu. Luan van. Luan an. Do an

TrongăSKPT,ăphaăt nhăs d ngăcóăđ phân c căcaoăh năphaăđ ng.ăPhaăt nhălo i
này s có ái l c v i các h p ch t phân c c.ăSKPTădùngăđ tách và phân tích các h p
ch tăcóăđ phân c c cao v i phân t l

ng không l n l m.

SKP ălàăthu t ng đ ch m t lo i s căkỦătrongăđóăphaăt nhăítăphânăc căh năphaă
đ ng.ăPh

ngăphápănàyădùngăphânătíchăcácăh p ch t t khơng phân c căđ n phân

c c. H u h t các h p ch t h uăc ăcóăm ch carbon dài (ít phân c c) r t thích h p cho
phân tích b ngăSKP .ăDungămơiăs d ngătrongăSKP ălàăcácădungămơiăphânăc c,
trongăđóădungămơiăn

căđóngăvaiătrịăquanătr ng mà l i r ti n.ăDoăđó,ăSKP ăđ

c

ng d ng nhi u và ph bi năh năSKPT.
1.4.3

Phaăt nhătrongăs căkỦăphaăđ o

Trong s c ký phân b nóiăchung,ăphaăt nhălàănh ng h p ch t h uăc ăđ

cg n

lên ch t mang r n silica ho c c u thành t silica theo hai ki u [15, 16, 17]:


Phaăt nhăđ

căgi ăl iătrênăch tămangăr năb ngăc ăch ăh păph ăv tălỦă

ăs căkỦă

l ng-l ngă(liquid-liquid chromatography).


Pha t nhăliênăk tăhóaăh căv iăch tăn nă

ăs căkỦăphaăliênăk tă(bondedăphaseă

chromatography)
Trongăqătrìnhăs ăd ng,ăng

iătaănh năth yăs căkỦăphaăliênăk tăcóănhi uă uă

đi măh năs căkỦăphaăl ng-l ngăvìăm tăs ănguyênănhânăsau:
o

Phaăt nhătrongăh ăs căkỦăl ng-l ngăd ăb ăhòaătanăb iăphaăđ ngănênăd ăb ă

m tămátăphaăt nhătrongăth iăgianăs ăd ngăvàăgâyănhi măđ iăv iăh păch tă
phân tích.

o

Doăphaăt nhăc aăs căkỦăl ng-l ngăd ătanătrongăphaăđ ngănênăng
khơngăth ă ngăd ngăph

Vìăv y,ăng

iătaăth

iătaă

ngăphápăr aăgi iăgradientădungămơi.

ngăch ăquanătâmăđ nălo iăs căkỦăphânăb ăphaăliênăk tăvàă

ph năl năcácălo iăc tăs ăd ngăhi nănayătrongăs căkỦăphânăb ăđ uăcóăc uătrúcăd ngă
này.

@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

10