Khảo sát thành phần hóa học cây ô môi (cassia grandis l f) họ đậu (fabaceae) ở đồng bằng sông cửu long

VI N HÀN LÂM KHOA H C VÀ CÔNG NGH VI T NAM
C VI N KHOA H C VÀ CÔNG NGH

NGƠ QU C LN

Cơng trình
c hồn thành t i: Vi n Cơng ngh Hóa h c, Vi n Hàn lâm
Khoa h c và Công ngh Vi t Nam

Ng i h ng d n khoa h c:
1. PGS.TS. Nguy n Ng c H nh
2. GS.TS. Nguy n Kim Phi Ph ng

Ph n bi n 1:
Ph n bi n 2:
Ph n bi n 3:

KH O SÁT THÀNH PH N HÓA H C
CÂY Ô MÔI (CASSIA GRANDIS L.F), H
U
(FABACEAE)
NG B NG SÔNG C U LONG

Chuyên ngành: Hóa h c các h p ch t thiên nhiên
Mã s : 62.44.01.17

Lu n án s
c b o v tr c H i ng ánh giá lu n án ti n s c p H c vi n
p t i Vi n Cơng ngh Hóa h c, Vi n Hàn lâm Khoa h c và Công ngh
Vi t Nam, 01 M c nh Chi, Ph ng B n Nghé, Qu n 1, TP. H Chí Minh.
Vào h i

gi
phút
ngày tháng n m 2017.

TÓM T T LU N ÁN TI N S HÓA H C

Tai Lieu Chat Luong

TP. H Chí Minh - n m 2017

Có th tìm lu n án t i:
- Th vi n Qu c Gia Vi t Nam
- Th vi n H c vi n Khoa h c và Công ngh .


DANH M C CƠNG TRÌNH KHOA H C Ã CƠNG B
T QU NGHIÊN C U TRONG PH M VI LU N ÁN
1. Ngô Qu c Luân, ào Huy Phong, Tr ng Th Thu Th y, Mai ình Tr , Lê Ti n D ng, Ph m
Th Nh t Trinh, Nguy n Ng c H nh (2012), “H p ch t flavonoid t lá ơ mơi-Cassia grandis
L.f”, p chí Khoa h c và Công ngh , T p 50(3A), tr. 296–301.
2. Ngơ Qu c Ln, Lê
Huy,
Hồng Vinh, Ngơ Kh c Khơng Minh và Nguy n Ng c H nh
(2013), “Phân l p và nh n danh hai h p ch t t d ch chi t ethyl acetate c a trái ô môi Cassia
grandis L.f”, p chí Khoa h c Tr ng i h c C n Th , S 26, tr. 30–34.
3. Ngô Qu c Luân, Ngô Kh c Không Minh, Nguy n Th Thùy Trang, Tr ng Cao Thu n, Mai
ình Tr , Lê Ti n D ng, Nguy n Ng c H nh (2013), “Kh o sát thành ph n hóa h c cao etyl
axetat v cây ơ mơi (Cassia grandis L.f)”, p chí Hóa h c, T p 51(6ABC), tr. 135–140.
4. Ngô Qu c Luân, V Duy Khánh, Ngô Kh c Không Minh, Lê Ti n D ng và Nguy n Ng c
nh (2013), “Phân l p m t s h p ch t t lá và v cây ơ mơi (Cassia grandis L.f)”, p chí

phân tích Hóa, Lý và Sinh h c, T p 18(4), tr. 101–108.
5. Ngô Qu c Luân, Hu nh Minh Ti n, V Duy Khánh, Lê Ti n D ng và Nguy n Ng c H nh
(2013), “Ba h p ch t flavonoid t lá ơ mơi (Cassia grandis L.f)”, p chí khoa h c Tr ng
i h c C n Th , S 29a, tr. 111–116.
6. Ngô Qu c Luân, Lê V n Ril,
Hồng Vinh, Ngơ Kh c Khơng Minh và Nguy n Ng c H nh
(2014), “Ba h p ch t t cao ethyl acetate c a trái ô môi (Cassia grandis L.f)”, p chí khoa
c Tr ng i h c C n Th , S 30a, tr. 15–19.
7. Ngô Qu c Luân, Hu nh Th Phi Y n, Nguy n Thanh Hồi Nhân, Ngơ Kh c Khơng Minh và
Nguy n Ng c H nh (2014), “D n xu t xanthone m i t r cây ô môi (Cassia grandis L.f)”,
p chí khoa h c Tr ng i h c C n Th , S 31a, tr. 72–75.
8. Ngô Qu c Luân, Nguy n V n Ki t, Ngô Kh c Không Minh, Nguy n T n Phát, Phùng V n
Trung, Lê Ti n D ng, Nguy n Ng c H nh (2014), “M t s h p ch t t trái ơ mơi (Cassia
grandis L.f)”, p chí Khoa h c và Công ngh , T p 52(5A), tr. 174–179.
9. Ngo Quoc Luan, Huynh Thi Phi Yen, Ngo Khac Khong Minh, Phung Van Trung, Phan Nhat
Minh, Nguyen Tan Phat, Mai Dinh Tri, Le Tien Dung, Nguyen Ngoc Hanh (2014), “Natural
compounds from the root of Cassia grandis L.f”, Vietnam Journal of Chemistry, Vol. 52(5),
pp. 646–650.
10. Ngo Quoc Luan, Vu Duy Khanh, Le Tien Dung, Mai Dinh Tri, Phan Nhat Minh, Nguyen Tan
Phat, Nguyen Ngoc Hanh, Nguyen Kim Phi Phung (2015), “New benzophenone derivative
from leaves of Cassia grandis L.f”, Vietnam Journal of Chemistry, Vol. 53(6e), pp. 338–341.
11. Ngo Quoc Luan, Vu Duy Khanh, Le Tien Dung, Mai Dinh Tri, Phan Nhat Minh, Nguyen Tan
Phat, Nguyen Ngoc Hanh, Nguyen Kim Phi Phung (2015), “Novel naphthalene glycoside
derivative from leaves of Cassia grandis L.f”, Can Tho University Journal of Science, Vol. 1,
pp. 10–13.
12. Ngo Quoc Luan, Nguyen Thi Thuy Trang, Le Tien Dung, Mai Dinh Tri, Phan Nhat Minh,
Nguyen Tan Phat, Nguyen Ngoc Hanh, Nguyen Kim Phi Phung (2016), “Isolation and
characterization of three natural compounds from the stem bark of Cassia grandis L.f”, Can
Tho University Journal of Science, Vol. 3, pp. 57–60.
13. Ngo Quoc Luan, Ngo Khac Khong Minh, Nguyen Ngoc Hanh (2016), “Flavonoids from the

fruit of Cassia grandis L.f”, Journal of Science and Technology, Vol. 54(2B), pp. 26–31.
14. Ngo Quoc Luan, Nguyen Cong Tao, Vu Thi Hoai Tien, Nguyen Ba Nghia, Le Tien Dung, Mai
Dinh Tri, Nguyen Ngoc Hanh, Nguyen Kim Phi Phung (2016), “Natural compounds from
seeds of Cassia grandis L.f”, Vietnam Journal of Chemistry, Vol. 54(2), pp. 257–262.
15. Lê Ti n D ng, Mai ình Tr , Ph m Th Nh t Trinh, Ngô Qu c Luân (2013), “ nh l ng h p
ch t epicatechin trong lá ô môi (Cassia grandis L.f)”,
y u H i ngh hóa h c tồn qu c l n
th 6 (21-22/11/2013), tr. 284–290.


-1-

-24-

I. GI I THI U LU N ÁN
1.

tv n
Cây ô mơi (Cassia grandis L.f) là lồi th c v t
i

ng b ng sơng C u Long. Theo các t

Hồng H ,
có d

n v cây thu c (Ph m

Huy Bích) và kinh nghi m dân gian

c tính và m t s công d ng nh : lá t

ki t l , qu chín ch a au x
trình nghiên c u hi n
ts n

c bi t t n t i lâu
Vi t Nam thì ơ mơi

i tr h c lào, qu xanh ch a

ng, nh c m i. Trong khi ó, ch a có cơng

i nào

c cơng b trên

it

ng này.

c trên th gi i c ng có ơ mơi nh t là Nam M , n i

c

cho là ngu n g c c a lồi ơ mơi. Ngồi các cơng d ng dân gian nh
Vi t Nam, ng
i v i ng

i ta cịn cho bi t c m qu ơ mơi chín có tác d ng r t t t

i b b nh thi u máu. Các nghiên c u hi n

i ph c v y h c

nhi u nh t là xoay quanh m t s ho t tính sinh h c nh kh n ng kháng vi
sinh v t trên tơm n

c m n, kháng ái tháo

ng, kháng oxi hóa, b o v

gan, kháng viêm, gi m au… Bên c nh ó, các nghiên c u hóa h c c ng
ch m i phân l p
nghiên c u, ch a
Vì v y

c kho ng 20 h p ch t. Nh v y, cây ơ mơi cịn ít
c s gi i thích các tác d ng d

c lý c a lồi này.

tài “Kh o sát thành ph n hóa h c cây ô môi (Cassia

grandis L.f), h

u (Fabaceae)

ng b ng sông C u Long”

th c hi n nh m góp ph n gi i quy t v n
2. Ý ngh a khoa h c và th c ti n c a

c

nêu trên.
tài

- K t qu nghiên c u thành ph n hóa h c nh m góp thêm nh ng hi u bi t
hóa th c v t c a lồi ô môi
các tác d ng d

gi i thích

c lý và làm c s cho các nghiên c u ti p theo.

-Trên c s thành ph n hóa h c
nh m h

Vi t Nam, làm c s lý lu n

c bi t, th nghi m ho t tính sinh h c

ng g n h n t i nh ng ng d ng ph c v

i s ng xã h i.

3. M c tiêu và nhi m v nghiên c u c a lu n án
3.1
c tiêu

- Phân l p, tìm hi u c u trúc hóa h c c a các h p ch t tinh khi t t cây ô
môi, tìm ki m các h p ch t t nhiên có c u trúc m i, góp ph n b sung d


-23-

-2li u hóa th c v t c a lồi.

8 H p ch t l p l i so v i các cơng b tr

c ây

lồi ơ mơi g m

- Th nghi m ho t tính sinh h c c a m t s cao chi t, m t s h p ch t

quercitrin (8), nicotiflorin (10), rutin (11), (-)-epiafzelechin (15), (-)-

tinh khi t tùy theo c u trúc hóa h c

epicatechin (16), aloe-emodin (17), chrysophanol (19) và -sitosterol (27).

góp ph n gi i thích tác d ng d

c

lý c a lồi ơ mơi.

3.

3.2 Nhi m v nghiên c u c a lu n án

aloe-emodin có ho t tính gây

-Phân l p ít nh t 20 h p ch t tinh khi t t các cao chi t, trong ó có ít

G2, Lu, RD và 1 dịng t bào th

nh t 1 h p ch t m i.

9,29; 9,81 và 9,92 µg/mL. Phân

-Xác

nh c u trúc các h p ch t phân l p

lá ơ mơi có ho t tính kháng

c.

-Th m t s ho t tính sinh h c c a các phân

ã th nghi m m t s ho t tính sinh h c, k t qu cho th y h p ch t

n chi t và h p ch t tinh

i v i các dòng t bào ung th Hep-

ng Vero v i giá tr IC50 t

ng ng 6,20;

n chi t H:E 1:1 và h p ch t quercitrin
c vi khu n P. acnes gây m n tr ng cá

t nh t trong các m u th v i giá tr MIC l n l

t là 0,3 và 0,2 mg/mL.

KI N NGH

khi t.

Trên c s phân tích t ng quan và các k t qu có

4. Nh ng óng góp m i c a lu n án
1. Lu n án là cơng trình

u tiên c a Vi t Nam nghiên c u v thành ph n

hóa h c trên 5 b ph n: lá, v thân, r , trái và h t c a cây ô môi
ng sông C u Long; phân l p
2. K t qu phân l p và xác

ng

nh c u trúc óng góp

c 34 h p ch t vào

a chi Cassia và 4 h p ch t vào kho c u trúc phân t h u c trên th gi i
(xem ph n k t lu n).

c,

ngh :

1. Ti p t c phân l p thêm các h p ch t t t t c các b ph n c a cây ô
môi,
p

c 42 h p ch t t nhiên.

li u hóa th c v t c a lồi ơ mơi, 19 h p ch t vào d li u hóa th c v t

3. L n

c

c bi t là các cao ch a

c kh o sát ho c cịn ít s h p ch t phân

c nh các cao n-BuOH, cao n

c c a r , v và h t ơ mơi

có k t

qu toàn di n h n v thành ph n hóa h c c a lồi Cassia grandis L.f,

nh m xem xét kh n ng khai thác s d ng làm d

c li u.

2. Ti p t c có nh ng nghiên c u phát tri n và ánh kh n ng c ch vi
khu n P. acnes và vi khu n gây m n khác trên nh ng ch ph m làm t

u tiên m t s phân

n chi t lá ơ mơi

c th ho t tính kháng

cao LE và phân

n H:E (1:1) t lá ô môi, ti n

nb

c

u th nghi m

vi khu n Propionibacterium acnes (P. Acnes) gây m n tr ng cá. K t qu

lâm sàng trong

cho th y phân

sinh v t, kháng oxy hóa và các ho t tính sinh h c khác c a các s n ph m

n chi t H:E 1:1 và h p ch t quercitrin th hi n ho t tính

kháng virus P. acnes m nh v i giá tr MIC l n l

t là 0,3 và 0,2 mg/mL.

Lu n án g m 129 trang chính v i 10 s
tài li u tham kh o. B c c c a lu n án: M
Ch

chi t và phân l p t cây ơ mơi nh m tìm ki m thêm các kh n ng ng
ng khác t cây ô môi.

5. B c c c a lu n án

quan (24 trang), Ch

u tr m n tr ng cá. Ti p t c kh o sát ho t tính kháng vi

ng 2: Ph

, 55 b ng s li u, 19 hình, 277
u (2 trang), Ch

ng 1: T ng

ng pháp và th c nghi m (25 trang),

ng 3: K t qu và bàn lu n (76 trang), K t lu n và ki n ngh (2 trang).

Các trang th t c và tài li u tham kh o (42 trang), ph l c (214 trang).


-3-

-22-

II. N I DUNG LU N ÁN
T LU N VÀ KI N NGH

u: Ph n m

T LU N
y

các n i dung nghiên c u, trong ó

i dung tr ng tâm là kh o sát thành ph n hóa h c cây ô môi (Cassia
grandis L.f) thu hái
ã kh o sát

ng b ng sơng C u Long:

nh tính thành ph n hóa h c 5 b ph n lá, v thân, r ,

trái và h t; k t qu cho th y có s hi n di n c a h u h t 9 nhóm h p ch t
nhiên l n: flavonoid, anthranoid, alkaloid, steroid, terpenoid, glycoside,
tannin, saponin, coumarine.
2.

ã phân l p và xác

n ý ngh a khoa h c, tính th c ti n,

casgranone

C

30 H p ch t ã bi t

CH

NG 1: T NG QUAN

Ph n t ng quan t p h p các nghiên c u trong n
1.1 GI I THI U V CHI CASSIA
1.1.1

c

c và trên th gi i, g m:

m th c v t c a chi Cassia

1.1.2 Các nghiên c u v thành ph n hóa h c
1.1.3 Các nghiên c u v ho t tính sinh h c và kh n ng ng d ng

1.2.1 Phân lo i khoa h c

(41)

và

2,3-dihydroxypropyl

25-

1.2.2

c

m th c v t c a lồi Cassia grandis

1.2.3 Cơng d ng theo y h c dân gian
1.2.4 Tình hình nghiên c u

hydroxypentacosanoate (22).
các loài khác nh ng m i phát hi n

loài ô môi

m apigenin (1), apigetrin (2), kaempferol (3), astragalin (4), afzelin (5),
quercetin (6), isoquercetin (7), ombuin (9), luteolin (12), cynaroside (13),

1.2.5 Nh n xét t ng quan

CH

octacosanoate (21), di-(2,3-dihydroxypropyl) tetracosandioate (23),

-

adenosine (24), D-mannitol (25), (+)-lyoresinol (26), daucosterol (28),
brassicasterol-3-O- -D-glucopyranoside (29), lupeol (30), axit betulinic

NG 2: PH

2.1

IT

it

vitexin (14), axit parietinic (18), pulmatin (20), 2,3-dihydroxypropyl

NG PHÁP VÀ TH C NGHI M

NG NGHIÊN C U

ng nghiên c u là cây ô môi (Cassia grandis L.f.)

các t nh

Tr ng, Cà Mau) t n m 2011 n 2014. M u th c v t
Minh Quân,

i h c C n Th giám

2.2 PH

NG PHÁP NGHIÊN C U

2.2.1 Ph

ng pháp

(35), axit cinnamic (36), -L-rhamnopyranoside (38), casgranone A (39)

Ph

và moracin B (42).

tr ng.

Trong 30 h p ch t này có 15 h p ch t l n

u tiên

c phân l p t chi

ng pháp kinh

2.2.2 Ph

c thu hái

ng b ng sông C u Long (An Giang, V nh Long, C n Th , Sóc

(31), axit oleanolic (32), axit gallic (33), axit vanillic (34), axit o-anisic

Cassia.

i

1.2 GI I THI U CÂY Ô MÔI

nh c u trúc c a 42 h p ch t tinh khi t t các b

ph n cây ơ mơi. Trong ó có:
4
p ch t t nhiên m i g m casgrandxanthone A (37), casgranone B
(40),

c p

ng, m c tiêu và nhi m v nghiên c u c a lu n án.

tài ã th c hi n áp ng

1.

u

c TS.

ng

nh tên khoa h c.

nh tính các nhóm h p ch t t nhiên
n, dùng các ph n ng hóa h c cho hi n t

ng

ng pháp chi t xu t

Chi t r n-l ng (ngâm d m), l ng-l ng v i các dung môi h u c theo th
t ng d n

phân c c. Cô lo i dung môi d

i áp su t kém.

c


-21-

-42.2.3 Ph

ng pháp phân l p các h p ch t

Ph i h p các ph

ng pháp s c ký bao g m: s c ký l p m ng (TLC), và

c ký c t (SKC) pha th
2.2.4 Ph
Ph

o.

3.3.1 Ho t tính gây

ng pháp xác nh c u trúc

ng pháp chung

p gi a các
Ph kh i l

ng và pha

c

xác

nh c u trúc hóa h c c a các h p ch t là k t

m lý-hóa v i các ph

ng pháp ph hi n

ng phân gi i cao (HR-MS), ph c ng h

i bao g m:

ng t nhân (NMR),

quay c c ([ ]D).

trên các dòng HepG2, Lu, RD và Vero theo ph

ng pháp c a Skehan và

ng s (1991) và Likhiwitayawuid và c ng s (1993).
n chi t và

ng pháp khuy ch tán trên gi ng

th ch c a c a Saranraj P. et al. (2010).

-Các h p ch t chrysophanol, pulmatin cho k t qu âm tính v i 2 dòng t

Các phân

th y phân

c t bào

n H:E 1:1 và h p ch t quercitrin th hi n ho t tính kháng t t

i giá tr MIC l n l

t là 0,3 và 0,2 mg/mL.

c và tóm t t

10 s

2.1-2.10.

c ti n hành t i Vi n Hóa h c các

p ch t thiên nhiên, Vi n Hàn lâm Khoa h c và Công ngh Vi t Nam t i
Hà N i. Ho t tính kháng vi khu n P. acnes
Nghiên c u và Phát tri n công ngh sinh h c, Tr

nh c u trúc

c 42

p ch t (không k các h p ch t trùng l i gi a các b ph n). Các h p ch t

NGHI M HO T TÍNH SINH H C

Th nghi m ho t tính gây

kháng v i clindamycin và erythromycin), k t qu cho

5 b ph n c a cây ô môi ã phân l p và xác

Ph n này mô t chi ti t vi c phân l p các h p ch t t 5 b ph n c a cây,
2.5 Q TRÌNH TH

u

c th trên 9 dịng vi khu n P.

3.3 NH N XÉT CHUNG V CÁC K T QU NGHIÊN C U

2.4 QUÁ TRÌNH PHÂN L P CÁC H P CH T
n chi t

n chi t n-hexane, EtOAc, MeOH và các h p ch t aloe-

emodin, rutin, quercitrin t lá ơ mơi

NH TÍNH CÁC NHĨM H P CH T

i b ph n g m 2 phân

ng ng là 6,20; 9,29; 9,81 và 9,92 g/mL.

t qu này phù h p v i công b c a A. Yordanova [19].

Acnes (t t c

-Th ho t tính kháng vi khu n P. Acnes c a m t s phân

2.3 QUÁ TRÌNH

RD và Vero v i giá tr IC50 t

3.3.2 Ho t tính kháng vi khu n P. Acnes

c t bào c a các h p ch t nhóm anthraquinone

p ch t quercetin t lá ô môi b ng ph

c t bào

bào HepG2 và Lu.

ng pháp th ho t tính sinh h c

-Kh o sát kh n ng gây

HO T TÍNH SINH H C

-H p ch t aloe-emodin cho k t qu kháng t t 4 dòng t bào HepG2, Lu,

ph t ngo i (UV), ph h ng ngo i (IR),
2.2.5 Ph

3.3 K T QU TH

c ti n hành t i Vi n
ng

i h c C n Th .

phân l p có th x p vào các nhóm: flavonoid (16 h p ch t); anthraquinone
(6 h p ch t); polyalcol và glyceryl ester m ch dài bão hòa (4 h p ch t);
n xu t m t vòng benzene (4 h p ch t); triterpene (3 h p ch t); sterol (3
p ch t); xanthone (1 h p ch t); lignan (1 h p ch t); alkaloid (1 h p
ch t); benzophenone (1 h p ch t);

ng (1 h p ch t); benzofuran (1 h p

ch t). Do v y các h p ch t phát hi n t lồi ơ môi khá a d ng,
ng phù h p v i k t qu

u này

nh tính s b thành ph n hóa h c.

Cao chi t EtOAc và quercitrin t lá ô môi th hi n ho t tính m i phát
hi n là kháng vi khu n gây m n tr ng cá t t h n m t s thu c kháng sinh
hi n dùng. K t qu này c ng là m t trong các minh ch ng t
tác d ng y h c dân gian c a lá ô môi là dùng
da.

ng t cho

ch a h c lào, b nh ngoài


-20trí 1 và 8 c a khung s
nhóm OH
H 5,09 t

-5-

n naphthalene có mang 2 nhóm OH, trong ó

v trí 8 liên k t v i nhóm

ng rutinose b i proton anomer

ng quan v i carbon t c p vòng th m mang oxygen

Ph HMBC xác nh n proton không ghép c p
methyl

H

2,30

135,3 và carbon methine
n naphthalene

C-3 (

ng quan v i C-2;

ng quan v i carbon t c p vòng th m
C

C

-Ngâm d m, chi t nóng (50 C) v i EtOH 96%
-L c, cô c n d i áp su t th p

C 157,4.

6,93 và m t nhóm

H

u thu c vịng A vì chúng cùng có t

nhóm methyl này c ng có t

T NGUYÊN LI U

Bã chi t

Cao EtOH

C

-Phân tán trong n c m, chi t v i n-hexane
-Cô c n d i áp su t th p

119,7 ch ng t nhóm này g n vào khung

135,3). Vì v y, ngồi H-4 (

H

6,93), hai 2

Ph n khơng tan
trong n-hexane

Cao n-hexane

proton vòng th m còn l i thu c vòng B. Trên vịng B có m t carbon t

p vịng th m mang oxygen
meta

H

C

6,94 và 6,73 ch ng t hai proton này ph i

nh v y nhóm OH g n vào C-6 (

C

các v trí 5 và 7; và

c

ngh nh Hình 3.16, c u

ng t c u trúc h p ch t 5-hydroxydianellin

(B ng 3.2.7.2), nh ng khác là
p ch t 41 thì nhóm OH g n

-Chi t v i n-BuOH bão hịa n
-Cơ c n d i áp su t th p

tài li u [57]

h p ch t này t i C-5 g n nhóm OH cịn

C-6.

Ph n khơng tan
trong EtOAc

Cao EtOAc

158,2).

Nh v y, c u trúc c a h p ch t 41
trúc này t

-Chi t v i EtOAc
-Cô c n d i áp su t th p

158,2 và hai proton methine ghép c p

ây là h p ch t có c u trúc m i

c ki m tra b ng ph n m m SciFinder ngày 07-04-2014 45) và

Cao n-BuOH ho c
Cao acetone

c ho c acetone

Ph n không tan
trong n-BuOH ho c acetone
-Cô c n d

i áp su t th p

c

t tên là casgranone C.

Cao n

2.1 Quy trình chung

c

u ch các cao chi t t các b ph n cây ô môi
Cao BuOH r cây ô môi
(RB, 35 gam)
C:M 95:5

RB1

RB2

RB3

RB4

1,0 g

4,0 g

4,0 g

23,0 g

C:M 9:1

Hình 3.16 T

ng quan HMBC trong c u trúc h p ch t 41

Ghi chú:

C:M 95:5

RB14

RB23

0,13 g

0,08 g

9:1

CGRB01
(18)

CGRB02
(37)

12 mg

10 mg

-Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân
n con ch a dùng phân l p ch t không t vào s
; giai
n cu i là k t tinh l i.

2.6 Phân l p các h p ch t t cao n-BuOH r cây ô môi


-6-

-19u trúc này

Cao n c lá ô môi
(LM, 290 g)
E:M:W 20:1:1

2014 t i

c ki m tra b ng ph n m m SciFinder ngày 07-04-

i h c Reims Champagne-Ardenne (Pháp) cho bi t ây là c u

10:1:1

trúc m i. Do ó, là h p ch t 40 là h p ch t m i trong t nhiên và

LM1
29 g

LM2
27,6 g

LM3
34 g

E:M 50:1

LM4
30 g

LM5
28,7 g

10:1

LM25
821 mg
3:1

LM223
300 mg

C:M 8:1

LM2243
489 mg

LM266
1,3 g
3:1

C:M 10:1

LM2533
114 mg
C:M 12:1

C:M 9:1

C:M 10:1

3:1

LM253
300 mg

C:M 9:1

C:M 9:1

LM26
7,0 g

C:M 10:1

LM224

1,3 g

LM2232
120 mg

LM2662
776 mg
3:1
C:M 10:1

C:M 9:1

LM22322
36 mg

LM22432
319 mg

LM25332
20 mg

LM25334
16 mg

Ghi chú:

CGLM07
(40)
13 mg

CGLM04
(8)
49 mg

LM25336
18 mg

CGLM09
(41)
9 mg

CGLM08
(10)
12 mg

LM26622
260 mg
CGLM01
(11)
45 mg

-Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân
n con ch a dùng phân l p ch t không t vào s
; giai n cu i là k t tinh l i.

2.3 Phân l p các h p ch t t cao n

c lá ô môi

Cao EtOAc r cây ơ mơi
(RE, 300 gam)
H:E 10:0

Các

c tính lý hóa và d li u ph UV, IR (m c 3.2.1). Ph UV cho bi t c u

trúc có h liên h p, ph IR cho th y m t s dao

RE2
19,8 g

RE3
21,4 g

RE4
26,4g

H:E 95:5

H:E 9:1

H:E 8:2

RE23
4,5 g

RE33

1,8 g

RE42
2,0 g

H:E 95:5

RE233
34 mg

H:E 9:1

RE334
54 mg

H:E 8:2

RE423
100 mg

RE5
67,0 g
H:E 7:3

0:10

RE54
5,0 g
H:E 7:3

5:5

ng

c tr ng c a các n i O-H,

C=O, C-O, C-C... H p ch t 41 cịn cho ph n ng d

ng tính v i thu c th

FeCl3/EtOH, ch ng t thu c nhóm phenolic.
Ph HR-MS cho m i ion phân t gi m/z 563,1747 [M+Na]+ (tính
tốn lý thuy t: [C25H32O13+Na]+ = 563,17406), phù h p v i công th c
phân t C25H32O13 (540,18 vC).
1

H-NMR (CD3OD, 500 MHz) xu t hi n các tín hi u c a 3

proton vịng th m trong ó g m 2 proton ghép meta

H

2,30. Ngoài ra là các tín hi u proton c a 1

nv

13

C:M 9:1

RE62
2,7 g
C:M 8:2

RE7
13,8 g

RE8,9
57,8 g

C:M:W 8,5:1,5:0,1

RE72
1,5 g

8:2:0,1

C:M:W 8:2:0,1

RE542
67 mg

RE622
65 mg

RE722
90 mg

RE725
60 mg

CGRE01
(26)
7,2 mg

CGRE05
(15)
15 mg

CGRE04
(25)
15 mg

CGRE06
(34)
10 mg

C

CGRE02
(31)
32 mg

CGRE03
(32)
20 mg

Ghi chú: -Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân

n con ch a dùng phân l p ch t không t vào s
; giai
n cu i là k t tinh l i.

2.5 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc r cây ô môi

nv

20,3) và 2 carbon c a nhóm acetyl (

ng
C

32,6

và 208,3); cịn l i là 10 carbon vịng th m trong ó có 3 carbon methine, 3
carbon t c p mang oxygen và 4 carbon t c p không mang oxygen.
t h p v i CTPT d
chi m 3

C:M:W 8:2:0,1

H

C-NMR (CD3OD, 125 MHz) k t h p v i ph DEPT và ph

HMBC cho th y có t ng s 25 carbon g m 12 carbon c a
RE6
30,1 g

2,61 và

5,08 (8,0 Hz) và 4,77 (1,5 Hz) là các proton anomer.
Ph

0:10

H

ng rutinose v i

ốn (10

b t bão hịa), rutinose và acetyl

b t bão hòa, v y 10 carbon vòng th m (5

b t bão hòa) ph i

ghép thành 2 vòng thành 1 phân t naphthalene.
Ph HMBC (Hình 3.16) cho th y nhóm methyl

CGRE07
(30)
9,1 mg

6,94 và 6,73 (2,0

Hz) và m t proton không ghép spin 6,93 (s); 2 nhóm methyl

rutinose, 1 nhóm methyl (
RE1
12,1 g

t

tên là casgranone B (Hình 3.8).

Ph
CGLM03
(5)
12 mg

c

3.2.2.4 H p ch t 41 (casgranone C)

LM22
4,5 g
C:M 10:1

LM6
109,7 g

quan v i carbon carbonyl
vịng A c a khung s
2,61 c ng t

C

H

2,61 có t

ng

208,3 h p thành nhóm acetyl và g n vào

n naphthalene

v trí 2 b i protron nhóm methyl

ng quan v i carbon t c p vòng th m

C

123,3 (C-2).

H

v


nhóm OH
Ph HMBC cho th y proton anomer c a

ng tác v i C-1 (
C

dihydroxybenzoyl) benzoate.

nv

y c u trúc c a h p ch t 40 ch khác h p ch t (39)

Methyl 3-O-glucopyranosyl-5-hydroxymethylene-2-(2,6ng -D-glucoside

155,0) c a khung c u trúc h p ch t (39) (Hình 3.8).

ch thay th

C-1 b ng nhóm O-glucosyl (xem d li u ph NMR
B ng

3.2.2.3), có th xem là ch t chuy n hóa ti p theo sau h p ch t (39) do s

thay th nhóm OH b ng nhóm O-glucosyl. H p ch t 40 có tên IUPAC là:

2.2 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc lá ô môi

CGLE20
(39)
29 mg

LE8223
80 mg

C:M 85:15

LE822
140 mg

C:M 85:15

LE82
2,0 g

C:M 85:15

LE8
8,7 g

CGLE05
(5)
31 mg

LE1012
82 mg

C:M 7:3

LE101
1,0 g

C:M 7:3

LE102
2,0 g

LE10
3,8 g

CGLE04
(7)
8,3 mg

LE114344
60 mg

C:M 7:3

LE11434
153 mg

C:M 7:3

LE1143
200 mg

C:M 7:3

LE114
0,4 g

phân c c; : gi m d n

CGLE11
(4)
12 mg

LE10232

35 mg

C:M 7:3

LE1023
111 mg

C:M 7:3

LE9
10,1 g

u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
t vào s
; giai o n cu i là k t tinh l i.

CGLE03
(6)
20 mg

CGLE08
(8)
6,7 mg
CGLE10
(16)
8 mg

CGLE02
(3)
20 mg

CGLE01
(17)
660 mg

LE6322
45 mg

C:M 9:1

0:1

LE5323
40 mg

C:M 85:15

LE632
70 mg

C:M 9:1

C:M 95:5

LE572
90 mg

LE63
1,3 g

C:M 9:1

LE7
12,4 g

H:E 1:0

LE57
2,9 g

LE6
16,4 g

Ghi chú: -Các quá trình phân l p khơng ghi sephadex ho c RP18 thì
-Các phân o n con ch a dùng phân l p ch t khơng có ch

CGLE09
(15)
10 mg

LE563
30 mg

C:M 98:2

LE56
1,9 g

ng

LE5722
33 mg

C:M 95:5

LE532
180 mg

LE523
195 mg

LE554
800 mg

C:M 95:5

C:M 95:5
C:M 98:2

1–2 ppm do ghi ph trong dung môi khác v i h p ch t (39).

LE55
2,1 g

103,2 là carbon anomer. Các s li u có l ch kho ng

C:M 98:2

nv

LE53
2,3 g

C

m c 3.2.1) và 6 carbon c a 1

LE52
1,1 g

glucose trong ó
ng t h p ch t

LE5
15,8 g

tín hi u c a t ng s 22 carbon. Trong ó g m 16 carbon t

LE4
12,4 g

C-NMR (CD3OD, 125 MHz) k t h p v i ph DEPT cho các

LE3
14,3 g

ã bi t (39) (s li u ph
ng quan HMBC trong c u trúc h p ch t 40

LE2

15,6 g

Hình 3.8 T

LE1
11,2 g

Ph
13

Cao EtOAc lá ơ mơi
(LE, 155 g)

phân c c;

CGLE07
(10)
28 mg

Sephadex

E:M:W 15:1:1

LE1152
90 mg

E:M:W 20:1:1

LE115
1,3 g

C:M 7:3

LE11
2,6 g

CGLE06
(11)
11 mg

LE1163
103 mg

RP18, M:W
1:5 1:1

LE116
0,8 g

-18-7-


CGBE15
(42)
8 mg

BE7323
25 mg

C:M 97:3

BE732
90 mg

C:M 97:3

BE73
1,2 g

oán 2 carbon carbonyl

carboxyl. Còn l i 2 carbon t c p
1 và C-3 nh

CGBE13
(23)
10 mg

C

C

vịng B,

169,0 và 165,3 thu c 2 nhóm

135,4 và 137,0

so sánh v i d

CGBE06
(28)
1200 mg
CGBE03
(32)
660 mg

BE433
1800 mg
BE422
790 mg

C:M 95:5
C:M 98:2

BE223
309 mg

CGBE02
(31)
650 mg
CGBE01
(27)
130 mg

BE342
980 mg

5:5
H:E 8:2

H:E 8:2

2.4 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc v cây ô môi

c tính

c xác

nh là C-

li u NMR c a các h p ch t

d i hóa h c trên ph n m m Chemdraw 12.0. N u

2 nhóm carboxyl

v trí 2 và 4 thì th y khơng phù h p vì

carbon vịng A s thay
các
Ghi chú: -Các q trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;
-Các phân o n con ch a dùng phân l p ch t khơng có ch
t vào s
; giai o n cu i là k t tinh l i.

CGBE12
(30)
26 mg
CGBE09

(18)
410 mg
CGBE10
(29)
440 mg

BE5332
530 mg

C:M 98:2

BE541
89 mg
BE533
870 mg
BE442
670 mg

93:7 C:M 99:1
C:M 95:5

BE53
3,5 g
BE44
3,3 g
BE43
3,9 g
BE42
2,7 g
BE34

2,8 g
BE22
1,5 g

kh o

CGBE05
(21)
18 mg

BE5434
29 mg
BE5423
45 mg

C:M 97:3
C:M 98:2

BE543
67 mg
BE542
113 mg

C:M 98:2

BE54
4,2 g
C:M 98:2 95:5
95:5
C:M 99:1

4:6
H:E 9:1
H:E 8:2

BE4
26,4 g
BE3
22,8 g
BE2
13,6 g

u khơng th y tín hi u

methylene và methyl k oxygen nào khác nhóm methoxyl g n

CGBE07
(22)
220 mg

BE544
480 mg

C:M 98:2 95:5

BE6
30,1 g
BE5
24,7 g
3:7

BE1
2,1 g

C-4; C-1 và C-3 . Ngoài ra, trên các ph

monodictyxanthone [37], griseoxanthone C [104] (B ng 3.2.7.1) và tham

H:E 9:1

Cao EtOAc v cây ô môi
(BE, 145 g)

-17-

cho phép d

BE7
3,8 g

BE8
3,6 g

BE9
4,2 g

-8-

c

i và nh v y H-1 s có t

i l i,

c a các

C

ng quan v i C-9.

m lý, hóa và ph nghi m ã phân tích nh trên k t h p

so sánh v i tài li u tham kh o cho phép xây d ng c u trúc h p ch t 37
nh Hình 3.14, tên IUPAC là 8-hydroxy-6-methoxy-9-oxo-9H-xanthene1,3-dicarboxylic. C u trúc hóa h c này

c ki m tra b ng ph n m m

SciFinder ngày 04-11-2013 45) cho bi t ây là h p ch t t nhiên m i,

t

tên là casgrandxanthone A, (Hình 3.15).
3.2.2.3 H p ch t 40 (casgranone B)
Các

c tính lý hóa và d li u ph UV, IR (m c 3.2.1). Ph UV cho bi t c u

trúc có h liên h p, ph IR cho th y m t s dao

ng

c tr ng c a các n i O-H,

C=O, C-O, C-C... H p ch t 40 cịn cho ph n ng d

ng tính v i thu c th

FeCl3/EtOH, ch ng t thu c nhóm phenolic.
Ph HR-MS cho m i ion phân t gi
toán lý thuy t: [C22H25O12]+ = 481,1346), t

m/z 481,1245 [M+H]+ (tính
ng ng v i CTPT C22H24O12

(480,13 vC).
Ph

1

H-NMR (CD3OD, 500 MHz), xu t hi n các tín hi u c a n m

proton nhân th m
H

kho ng

H

6,3–7,8 (trong ó có m t c p t

6,32 Hz); hai proton nhóm oxymethylene

methoxy

H

hexose d ng
7,5 Hz).

H

H

ng

4,69 và ba proton nhóm

3,73. Ngồi ra cịn có các tín hi u proton c a 1
t i vùng

ng

3,2–5,0 trong ó proton anomer có

nv
H

ng

4,92 (d;

i 2 carbon

C
C

118,8. T

ng t , proton

165,3 và 122,0 còn có t

118,8 và 154,3 cho phép xác

carbon

C

154,3 là C-4a, t

nhóm carboxyl

C

8,05 ngoài t

C

ây các carbon
c xác

vùng t tr

C

C

ng th p h n

CGFE11
(8)
10 mg
CGFE09
(13)
11 mg
CGFE05
(14)
8 mg
CGFE03
(2)
10 mg

FE1243
0,45 g
FE1152
0,25 g
FE1143
0,90 g
FE1022
0,65 g

C:M 85:15
C:M 9:1
C:M 9:1
C:M 85:15

FE114
3,6 g
FE102
2,5 g

C:M 85:15

CGFE10
(9)
15 mg

FE093
1,1 g

C:M 95:5

ng ng là C-9a; C-2;

CGFE07
(12)
16 mg
CGFE02
(28)
26 mg

CGFE01
(27)
16 mg

CGFE06
(1)
6 mg

FE0823
0,75 g

C:M 9:1
C:M 95:5

FE0632
0,65 g

FE082
2,6 g
FE063
2,3 g

nh

118,8; 122,0; 119,3 và 2

nh t

C:M 95:5

v trí

154,3 và 118,8. Trên khung

g n oxygen h n. Do v y có th xác

169,0; 165,3

FE08
14,0 g

ng quan

ng quan v i 2 carbon t c p

xanthone carbon t c p t i v trí 4a có giá tr
v trí 9a do

H

nh proton này g n v i carbon

ortho ho c meta so v i các carbon
so v i carbon

v trí ortho ho c meta

FE0522
0,70 g

7,75 g n v i carbon

v trí

2.7 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc trái ơ mơi

Ghi chú: -Các q trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n phân c c;
-Các phân o n con ch a dùng phân l p ch t khơng có ch
t vào s
; giai o n cu i là k t tinh l i.

so v i carbon

H

nh 2 nhóm carbonyl c ng

FE0432
0,75 g

meta v i nhau và proton

ng quan v i

CGFE04
(36)
50 mg

118,8 cho phép xác

119,3, v a có t

8,05, v a

C:M 95:5

C

C

H

C:M 95:5

ng quan v i carbon methine

carbon t c p

C

7,75 ghép c p meta v i proton

FE052
1,8 g

có t

H

FE022

1,2 g

vịng A, proton

FE043
2,1 g

ng hồn tồn phù h p (Hình 3.15).

C:M 95:5

6,46 và 6,71

C:M 95:5

H

157,2 là C-

3:7

ng quan c a hai proton

C

C:M 98:2

nh là C-6. Nh v y

93,1 là C-5 và carbon t c p

4b. Ph HMBC cho th y t

167,1 ch ng

H:E 7:3

C

c xác

FE115
1,5 g

C:M 9:1
C:M 95:5

FE12
4,5 g
FE11
12,4 g

còn l i carbon methine

FE09
8,0 g

FE10
11,6 g

nhóm methoxyl g n v i carbon này và

C

FE07
6,3 g

ng quan duy nh t v i carbon

FE06
9,3 g

3,91) có t

103,6 là C-8a. Proton nhóm

FE05
10,7 g

H

C

162,4); và vì v y

FE04
12,5 g

methoxyl (

97,7 là C-7 và carbon

C

FE03
4,8 g

C

nh nhóm hydroxyl g n vào v trí C-8 (

162,4 và 103,6

FE02
14,7 g

carbon

C

FE01
8,5 g

cho phép xác

ng quan v i hai carbon t c p

0:10

97,7, v a có t

H:E 10:0

C

ng quan HMBC trong c u trúc h p ch t 37

Cao EtOAc trái ô môi
(FE; 168,5 g)

Hình 3.15 T

FE124
1,2 g

-9-

-16-


-15-

-10Cao n-BuOH trái ơ mơi
(FB, 150 g)
C:M 9:1

FB1
1,5 g

proton vịng benzene chia làm 2 c p

C:M 8:2

H:E E:M

FB43
5g

H

9:1

CGFB05 (33)
8 mg

C:M 95:5

6,46; J=2,0; 6,71;

H

3,91 và 1 proton nhóm hydroxyl ki m n i

12,29.

5:5

FB54
0,6 g

FB433
0,2 g

FB4333
10 mg

tr c ti p trên vòng benzene

FB5
19,2 g

E:M 98:2

H

J=2,0; 8,16; J=1,5 và 8,05; J=1,5 Hz), 3 proton c a nhóm methoxyl g n

5:5

FB4
30 g

CGFB01 (38)
4,3 mg

u ghép meta (

13

Ph

C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) k t h p v i ph DEPT cho

th y 16 tín hi u c a 16 carbon. Trong ó có b n carbon methine mang n i
ơi c a vịng benzene trong kho ng
duy nh t

C

C

93,1–122,0; m t carbon methoxyl
1

56,4 phù h p v i các tín hi u trên ph

H-NMR. Ngồi ra

cịn có tám carbon t c p mang n i ơi và ba carbon carbonyl

5:5

C

178,7;

169,0 và 165,3.

FB4334
20 mg

t khác, ph HMBC cho th y trong 3 carbon carbonyl có 2 carbon

C:M 9:1

thu c 2 nhóm carboxyl, v y h p ch t 37 có th có 4 nhóm th (1
CGFB02 (24)
5 mg

FB43342
10 mg

FB43343
8 mg

CGFB03 (6)
7 mg

CGFB04 (7)
5 mg

methoxyl, 1 hydroxyl và 2 carboxyl) g n tr c ti p vào vòng benzene. V y
khung s

Ph HSQC cho phép xác

Cao EtOAc h t ô môi
(SE, 70 g)

SE2

2,64 g

SE3
3,14 g
C:M 10:0

SE41
0,056 g

SE42
0,323 g

SE43-45
0,607 g

2 c nh phù h p v i c c u khung

trên 2 vịng A và B (Hình 3.15).

2.8 Phân l p các h p ch t t cao n-BuOH trái ô môi

SE1
0,98 g

p mang n i ôi do ghép 3 vòng

xanthone. V i 2 c p proton ghép c p meta suy ra các nhóm th phân b

Ghi chú: -Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th ng; : T ng d n
phân c c;

-Các phân
n con ch a dùng phân l p ch t không t vào s
; giai
n cu i là k t tinh l i.

H:E 10:0

n h p ch t 37 có 13 carbon v i 1 nhóm carbonyl và 8 carbon t

và 3,91 t

nh các proton

ng ng g n tr c ti p v i các carbon

SE4
3,01 g

SE5
8,12 g

7:3

C:M 8:2

SE51
0,049 g

SE52
0,458 g

SE6
40,07 g
5:5

SE53-57
0,953 g

Ph HMBC cho th y proton
carbon carbonyl

C

H

C

119,3; 122,0; 93,1;

7,75 cùng có t

CGSE02
(19)
19 mg
ng;

2.9 Phân l p các h p ch t t cao EtOAc h t ô môi

ng quan v i 2

169,0 và 165,3 (Hình 3.15) ch ng t

2 nhóm

carbonyl cùng g n vào m t vịng (cho là vịng A), vì v y hai nhóm
hydroxyl và methoxyl cịn l i ph i g n
vòng B, proton

H

vòng

i di n (vòng B).

6,46 ghép c p meta v i proton

nhóm hydroxyl và methoxyl c ng ph i

-Các quá trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th
- : T ng d n phân c c; giai
n cu i là k t tinh l i.

8,05; 7,75; 6,71; 6,46

97,7 và 56,4.

0:10

CGSE01
(35)

109 mg
Ghi chú:

H

nhóm hydroxyl ki m n i (g n C-9) v a có t

H

6,71 ch ng

v trí meta v i nhau. Proton
ng quan v i carbon methine


-11-

-141

trên ph

H-NMR; m t carbon carbonyl

methylene k nhóm carbonyl
oxygen

62,6 t

C

oxygen trên ph

ng

C

C

Cao acetone h t ô môi
(SA, 27 g)

174,5; m t carbon

34,1 và m t carbon methylene mang

E:M 10:0

ng phù h p v i các pronton methylene k
SA1
0,47 g

1

H-NMR; m t carbon methylene cách nhóm carbonyl b i

t carbon

C

0:10

SA2
2,67 g

24,8 và m t carbon methylene cách nhóm

hydroxymethylene b i m t carbon,
các proton methylene trên ph

25,7 c ng t

C

C:M 10:0

ng ng phù h p v i

SA21
0,051 g

1

H-NMR. Ngồi ra cịn có tín hi u c a

nhi u nhóm methylene trong m ch bão hòa

kho ng

C

29,1-29,6 t

SA22
0,521 g

SA3
2,83 g

SA4
3,42 g

5:5

C:M 95:5

SA23-26
1,575 g

SA5
4,96 g

SA6-7
10,01 g

SA33
0,682 g

SA34-36
1,568 g

5:5

SA31-32
0,132 g

ng
CGSA01
(20)
302 mg

ng v i các proton methylene trong m ch carbon bão hòa xu t hi n trên

CGSA02
(15)
218 mg

1

ph

H-NMR.

Ghi chú:

So v i h p ch t (21) (d li u ph
2

m là
t

m c 3.2.1) thì h p ch t 22 khác

các d ki n trên có th xác

CH

nh h p ch t 22 là m t ester c a

glycerol v i m t dây axit-alcol bão hịa g m 25 carbon [s nhóm CH2 trên

ng;

2.10 Phân l p các h p ch t t cao acetone h t ơ mơi

dài m ch carbon bão hịa ng n h n 3 nhóm methylene và

u m ch thay vì là nhóm methyl thì là nhóm hydroxymethylene.

-Các q trình phân l p u dùng s c ký c t silica gel pha th
- : T ng d n
phân c c; giai
n cu i là k t tinh l i.

NG 3. K T QU VÀ BI N LU N

3.1 K T QU
t qu

NH TÍNH THÀNH PH N HĨA H C

nh tính cho th y trong cây ơ mơi hi n di n h u h t 9 nhóm h p

dây axit=(M-C3H7O3-CO-OH):14=(472-91-28-17):14=24] có c u trúc nh

ch t kh o sát: flavonoid, steroid, terpenoid, anthranoid, coumarine...

Hình

3.2 K T QU PHÂN L P, XÁC

3.10

và

tên

theo

IUPAC

là

hydroxypentacosanoate. C u trúc này
SciFinder t i

2,3-dihydroxypropyl

25-

c ki m tra b ng ph n m m

i h c Reims Champagne-Ardenne (Pháp) ngày 17-12-

NH C U TRÚC VÀ NH N DANH

Ph n này trình bày k t qu phân tích ph và bi n lu n chi ti t xác

trúc c a 4 h p ch t m i (d li u ph 38 h p ch t ã bi t chi m 15 trang).

2013 cho bi t ây là h p ch t t nhiên m i.

3.2.1

3.2.2.2 H p ch t 37 (casgrandxanthone A)

(22) 2,3-dihydroxypropyl-25-hydroxypentacosanoate:

Các

c tính v t lý và d li u ph (m c 3.2.1). Ph UV cho bi t c u trúc có

liên h p, ph IR cho th y m t s dao

ng

C-O, C-C... H p ch t 37 còn cho ph n

c tr ng c a các n i O-H, C=O,
ng d

ng tính v i thu c th

Ph HR-MS cho m i ion phân t gi m/z 331,04536 [M+H]+ (tính
+

tốn lý thuy t: [C16H10O8+H] = 331,04539), phù h p v i công th c phân
Ph

1

m v t lý và d li u ph c a 4 h p ch t m i
25
D +10,5
-1

mp. 132-135 °C, [ ]

t màu tr ng,

(0,01M/CHCl3). FT-IR (KBr),

: 3422,
1

2848, 1735, 1467, 1178 cm . HRMS: m/z 473,42061 [C28H57O5]+. HNMR (CDCl3 & MeOD, 500MHz,

H

ppm, J Hz): 1,26-1,29 (40H; m; H-

(2H; m; H-2); 3,54-3,61 (2H; m; H-25); 3,63-3,66 (2H; m; H-3 ); 3,8613

3,89 (1H; m; H-2 ); 4,09-4,14 (2H; m; H-1 ). C-NMR (CDCl3 & MeOD,
125MHz,

b t bão hòa).

H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) cho tín hi u

c

4, 5..., 23); 1,54-1,57 (2H; m; H-24); 1,58-1,65 (2H; m; H-3); 2,33-2,36

FeCl3/EtOH, ch ng t thu c nhóm phenolic.

C16H10O8 (330,04 vC, 12

nh c u

c tr ng c a 4

C

ppm): 24,83 (C-3); 25,70 (C-23); 29,08-29,60 (C-4, 5..., 22);

32,54 (C-24); 34,12 (C-2); 62,61 (C-25); 63,22 (C-3 ); 65,07 (C-1 ); 69,98
(C-2 ); 174,48 (C-1).


-13-

-12o

(37) Casgrandxanthone A: Hình kim màu vàng s m, mp. 330 C. UV

8); 154,0 (C-1); 139,4 (C-10); 135,3 (C-3); 123,3 (C-2); 119,7 (C-4);

(MeOH),

109,7 (C-9); 105,4 (C-7); 104,7 (C-5); 104,2 (C-1'); 102,3 (C-1"); 78,1 (C-

max:

377, 402 nm. FT-IR (KBr), : 3391, 2919, 1656, 1490,

-1

+

1

1157 cm . HRMS: m/z 331,04536 [C16H11O8] . H-NMR (DMSO-d6,

3'); 77,5 (C-5'); 74,9 (C-2'); 74,1 (C-4"); 72,4 (C-3"); 72,1 (C-2"); 71,3

500MHz,

(C-4'); 69,9 (C-5"); 67,7 (C-6'); 32,6 (C-12); 20,3 (C-13); 17,9 (C-6").

H

ppm, J Hz): 7,75 (1H; d; 1,5; H-2); 8,05 (1H; d; 1,5; H-4);

6,71 (1H; d; 2,0; H-5); 6,46 (1H; d; 2,0; H-7); 3,91 (3H, s, H-6 ); 12,29
(1H, s, 1 -OH).

13

C-NMR (DMSO-d6, 125MHz,

C

ppm): 135,4 (C-1);

3.2.2 Bi n lu n chi ti t xác

nh c u trúc các h p ch t m i

3.2.2.1 H p ch t 22 (2,3-dihydroxypropyl-25-hydroxypentacosanoate)

122,0 (C-2); 137,0 (C-3); 119,3 (C-4); 155,3 (C-4a); 157,2 (C-4b); 93,1

c tính v t lý và d li u ph (m c 3.2.1). Ph IR cho th y m t s

(C-5); 167,1 (C-6); 97,7 (C-7); 162,4 (C-8); 103,6 (C-8a); 178,7 (C-9);

dao

118,8 (C-9a); 169,0 (C-1 ); 165,3 (C-3 ); 56,4 (C-6 ).

UV ch ng t c u trúc khơng có h liên h p, âm tính v i thu c th

(40) Casgranone B: Hình kim màu vàng, mp. 229-230 °C. UV (MeOH),

FeCl3/EtOH ch ng t khơng thu c nhóm phenolic.

max:

226, 258, 261, 302 nm. FT-IR (KBr), : 3379, 2923, 1628, 1461,

1276 cm-1. HR-MS: m/z 481,1245 [C22H25O12]+.
500MHz,

H

1

H-NMR (MeOD,

ppm, J Hz): 7,72 (1H; d; 1,0; H-4); 7,51 (1H; d; 1,0; H-2);

7,25 (1H; t; 8,0; H-6); 6,32 (2H; d; 8,0; H-5; H-7); 4,69 (1H; s; H-11a,b);

ng

c tr ng c a các n i O-H, C-O, C-C; không hi n v t d

i èn

Ph HR-MS cho m i ion phân t gi m/z 473,42061 [M+H]+ (tính

tốn lý thuy t: [C28H56O5+H]+ = 473,42060), t

ng ng v i công th c

phân t C28H56O5 (472,41 vC).
1

Các ph

H-NMR (CDCl3-CD3OD, 500 MHz) k t h p v i HSQC,

3,73 (1H; s; H-12); 4,92 (1H; d; 7,5; H-1'); 3,87 (1H; m; H-6'a); 3,67 (1H;

HMBC cho th y h p ch t 22 có các tín hi u c a 4 proton oxymethylene

m; H-6'b); 3,42 (1H; m; H-5'); 3,40 (1H; m; H-3'); 3,33 (1H; m; H-4'); 3,26

trong kho ng

13

(1H; m; H-2'). C-NMR (MeOD, 125MHz,

C

ppm): 202,7 (C-9); 167,6

3,86–3,89

H

3,63–4,14; m t tín hi u proton oxymethine

kho ng

H

c tr ng cho nhóm glyceryl; m t tín hi u c a 2 proton

(C-10); 163,2 (C-8; C-5a); 155,0 (C-1); 144,7 (C-3); 137,7 (C-6); 136,0

methylene k nhóm carbonyl

(C-1a); 129,4 (C-4a); 120,0 (C-2); 122,8 (C-4); 112,9 (C-8a); 108,2 (C-5;

proton methylene k oxygen

C-7); 64,4 (C-11); 52,6 (C-12); 103,2 (C-1'); 78,2 (C-5'); 77,9 (C-3'); 74,9

methylene cách nhóm carbonyl và oxygen b i m t carbon,

(C-2'); 71,1 (C-4'); 62,6 (C-6').

1,54–1,65. Ngoài ra cịn có các tín hi u proton c a nhi u nhóm methylene

(41) Casgranone C:

t màu nâu, mp. 165-166 °C. UV (MeOH),

max:

trong m ch carbon bão hòa

211, 325 nm. FT-IR (KBr), : 3442, 3083, 2920, 1703, 1630 cm . HR1

H-NMR (MeOD, 500MHz,

H

ppm, J Hz): 6,94 (1H; d; 2,0; H-5); 6,93 (1H; d; 2,0; H-4); 6,73 (1H; d;

3.86 - 3.89
2'

HO

63.2

70.0

3'

kho ng

65.1

O

2.34
2

174.5
1

H

H

2,28–2,36; m t tín hi u c a 2

3,54–3,61 và các tín hi u proton

3.58 - 3.66

3
1.64

4.09 - 4.14

29.0

1.29
22

1.26
29.1
5
1.26

29.6

15

29.6
21
1.29

29.6

1.55
24
25.7

H

62.6

OH

25
3.50

O

Hình 3.10 T

Ph

ng quan HMBC trong c u trúc h p ch t 22

13

C-NMR (CDCl3-CD3OD, 125 MHz) k t h p v i ph DEPT và

HSQC, HMBC cho th y: m t carbon oxymethine duy nh t

NMR (MeOD, 125MHz,

hai carbon oxymethylene

ppm): 208,3 (C-11); 158,2 (C-6); 157,4 (C-

32.5

23
1.43

groups); 2,61 (1H; s; H-12); 2,30 (1H; s; H-13); 1,23 (1H; d; H-6"). 13CC

kho ng

1,26–1,29.

1.29
4
24.8

34.2

1'

2,0; H-7); 5,08 (1H; d; 8,0; H-1'); 4,77 (1H; d; 1,5; H-1"); 4,10 (1H; dd;
1,5; 11,0; H-6'a); 3,95 (1H; dd; 1,5; 3,5; H-2"); 3,36-3,75 (8H; m; 8 CH

kho ng

H

OH

-1

MS: m/z 563,1747 [C25H32O13Na]+.

kho ng

C

C

70,0 và

65,1 và 63,2 phù h p v i nhóm glyceryl