Các công đoạn cần thiết trong qui trình sản xuất vaccine phòng cúm H5N1 cho người (tt) doc

Các công đoạn cần thiết trong
qui trình sản xuất vaccine phòng
cúm H5N1 cho người(tt)



Bước 5: Đánh giá và chọn lựa
virus ứng cử làm vaccine:
Các dữ liệu về đặc điểm kháng
nguyên và trình tự gene cho phép
dự đoán chủng virus cúm sẽ lưu
hoành khoảng 8 tháng trong mùa
cúm tới và chọn lựa virus H5N1
triển khai làm vaccine. Ngay khi
chủng virus được chọn lựa làm
vaccine thì WHO sẽ khuyến cáo
trên website của WHO cho nhà sản
xuất, các viện nghiên cưu, các
phòng thí nghiệm cúm quốc gia….

Bước 6: Sự tái tổ hợp virus cúm
bằng kỹ thuật di truyền ngược:
Công đoạn này mất khoảng 6 tuần
và được thực hiện bởi WHO CC ở
Atlanta, và Memphis, và các phòng
thí nghiệm của FDA và NIBSC.
Bằng kinh nghiệm trong nhiều năm
nghiên cứu các nhà khoa học thấy
rằng virus cúm A hoang dại phát

triển kém trong trứng gà. Để khắc
phục trở ngại này, TS Edwin D
Kilbourne của trường New York
Medical College đã sáng chế ra kỹ
thuật tái tổ hợp di truyền ngược
nhằm tạo ra chủng virus tái tổ hợp
phát triển tốt hơn trong trứng gà.
Kỹ thuật này cho phép 6 gene (mã
hóa cho các protein NP, PA, PB1,
PB2, M, NS) của virus cúm
A/Puerto Rico/8/34 (thường gọi là
PR8) kết hợp với 2 gene mã hóa
cho protein HA và NA (của chủng
khuyến cáo làm vaccine) đã được
làm giảm độc lực tạo chủng virus
mới mang đặc điểm kháng nguyên
HA và NA giống với chủng khuyến
cáo làm vaccine và có thể phát triển
trong trứng nhanh kịp thời cung
cấp vaccine khi có dịch xảy ra.


Hình: Tạo vaccine cúm H5N1
bằng kỹ thuật di truyền ngược

Với virus H5N1, bằng công nghệ
di truyền ngược, người ta tạo ra
chủng virus cúm H5N1 giảm độc
lực bằng cách loại bỏ vài acid amin
tại vị trí phân cắt HA. Sự tái tổ hợp

HA và NA (đã loại bỏ phần gây
độc) của virus H5N1 với các gene
còn lại của chủng PR8 tạo nên
chủng virus giảm độc lực có thể
phát triển trong trứng gà. Sau đó,
virus được giải trình tự gene, kiểm
tra hình thái khuẩn lạc (plaquing),
và độ an toàn trong trứng, gà
và chồn sương trước khi chủng
virus được gửi đến các viện nghiên
cứu và nhà sản xuất vaccine.

Bước 7: Xác định đặc điểm
kháng nguyên và di truyền của
chủng tái tổ hợp
Công đoạn này mất khoảng 4 tuần
và được tiến hành bởi WHO CCs ở
Atlanta, London, Melbourne,
Memphis và Tokyo.
Virus tái tổ hợp H5N1 được tiêm
cho chồn sương để sản xuất kháng
huyết thanh nhằm đảm bảo chủng
virus tái tổ hợp có cùng đặc tính
kháng nguyên HA và NA của
chủng hoang dại. WHO CCs và
NIBSC cũng giải trình tự gene HA
và NA của chủng virus tái tổ hợp
để đảm bảo rằng bấy kỳ sự thay
đổi nào là không ảnh hưởng đến
các acid amin quan trọng đồi với

tính kháng nguyên hay gây bệnh.
Nếu đặc điểm kháng nguyên và di
truyền là không thoã mãn được nhu
cầu sẽ phải tiến hành kiểm tra lại và
chọn lựa lại virus ứng cử làm
vaccine.

Bước 8: Đánh giá đặc tính phát
triển của virus tái tổ hợp:
Công đoạn này mất khoảng 3 tuần
và được thực hiện bởi các nhà sản
xuất vaccine.
Trước khi virus tái tổ hợp được
chọn lọc làm vaccine ứng cử, các
nhà sản xuất vaccine phải tiến hành
kiểm tra đặc tính phát triển của
chúng trong tế bào nuôi cấy. Virus
ứng cử là vaccine H5N1 phát triển
kém hơn virus cúm A ứng cử làm
vaccine phòng cúm theo mùa hàng
năm. Đây là 1 thách thức lớn cho
các nhà sản xuất nếu cần cung cấp
lượng vaccne đủ lớn trong 1 thời
gian thật ngắn khi có đại dịch xảy
ra.

Bước 9: Chuẩn bị các hoá chất
cho vaccine bất hoạt:
Công đoạn này mất khoảng 6 tuần
và được tiến hành bởi nhà sản xuất

vaccine và các phòng thí nghiệm
của FDA, NIBSC và TGA.
Các hoá chất dùng cho vaccine
H5N1 bất hoạt được tiến hành bởi
WHO CC ở Tokyo và các phòng
thí nghiệm quốc gia ở FDA,
NIBSC và TGA. Các hoá chất này
sao đó được chuẩn hoá bởi các
phòng thí nghiệm của FDA, NIBSC
và TGA.

Sau tất cả những công đoạn chuẩn
bị trên được hoàn tất, virus tái tổ
hợp và các hóa chất đã sẵn có được
chuyển đến cho các nhà sản xuất và
bắt đầu ngay vào công việc sản
xuất vaccine. Tổng cộng thời gian
sản xuất vaccine H5N1 cho người
là khoảng 28-52 tuần.


Tài liệu tham khảo:
1. E. Hoffmann et al,
2002. Eight-plasmid system for
rapid generation of influenza virus
vaccines. Vaccine 20 (2002) 3165–
3170.
2. Kanta
Subbarao. Application of reverse
genetics to influenza vaccine

development.NIAID.
3. Ilaria Capua and
Stefano Marangon. 2003. The use
of vaccination as an option for the
control of avian influenza. OIE. 71
SG/12/CS3 E.
4. WHO. 2007. A
description of the process of
seasonal and H5N1 influenza
vaccine virus selection and
development.