Giới thiệu một số kỹ thuật bảo quản vi sinh vật (tt) docx

Giới thiệu một số kỹ thuật
bảo quản vi sinh vật (tt)




5. Một số phương pháp phổ biến
sử dụng trong bảo quản các nhóm
vi sinh vật cụ thể:
5.4. Phương pháp bảo quản
nấm men:
Tương tự như nấm sợi, có
nhiều phương pháp bảo quản nấm
men. Chúng tôi chỉ đề cập đến các
phương pháp thông dụng nhất đang
được sử dụng tại các bộ sưu tập
nấm men lớn trên thế giới.
a. Phương pháp cấy truyền:
Cấy truyền là phương pháp
đơn giản, nhanh và rẻ tiền cũng
như thông dụng nhất, tuy nhiên
những hạn chế của phương pháp
này là dễ tạp nhiễm cũng như
những thay đổi các đặc điểm sinh
học, tính trạng di truyền sẽ là bất
lợi khi bảo quản theo phương pháp
này.
Cấy truyền trên môi trường
dịch thể:

- Cách tiến hành rất đơn
giản là chuẩn bị 10 ml môi
trường nuôi cấy nấm men
(thông thường là môi trường
YM Yeast extract – Maltose)
trong lọ McCartney khử trùng
ở nhiệt độ 121
o
C trong 15
phút. Thường làm 2 lọ cho mỗi
chủng bảo quản.
- Một vòng que cấy chủng
nấm men bảo quản được đưa
vào môi trường bằng thao tác
vô trùng và giữ ở 25
o
C trong
72 giờ. Phải kiểm tra sự phát
triển của chủng bảo quản.
- Sau đó các mẫu được giữ
ở 4
o
C.
- Thông thường theo cách
này thời gian bảo quản các
chủng thường thay đổi từ 2- 6
tháng.
Cấy truyền trên môi trường
thạch:
Cấy truyền trên môi trường

thạch tương tự như môi trường dịch
thể nhưng ở đây môi trường được
bổ sung thạch (1.6%). Giống sau
khi cấy được giữ trong 72 giờ ở
nhiệt độ thích hợp để đạt độ phát
triển cần thiết, sau đó được để ở 4-
8
o
C. Theo phương pháp này giống
có thời gian sống lâu hơn phương
pháp cấy truyền dịch thể, thông
thường giống được bảo quản từ 3-6
tháng.
Thời gian bảo quản có thể
được kéo dài từ 2-3 năm nếu như
các ống giống được bảo quản trong
dầu parafil đã thanh trùng và được
đổ lên trên môi trường thạch sao
cho tạo một lớp dày khoảng 1cm.
b. Phương pháp bảo quản
trong lạnh sâu và đông khô (xem
phần các phương pháp dùng cho
bảo quản vi khuẩn và xạ khuẩn).

Vietsciences- Dương Văn Hợp,
Nguyễn Lân Dũng