PHYTOMENADION docx

1

PHYTOMENADION
Phytomenadionum
Vitamin K
1







C
31
H
46
O
2
P.t.l: 450,71
Phytomenadion là hỗn hợp của 2-methyl-3-[(2E)-(7R,11R)-3,7,11,15-
tetramethylhexadec-2-enyl]naphthalen-1,4-dion (trans-phytomenadion), 2-methyl-
2

3-[(2Z)-(7R,11R)-3,7,11,15-tetramethylhexadec-2-enyl]naphthalen-1,4-dion (cis-
phyto menadion) và 2,3-epoxy-2-methyl-3-[(2E)-(7R,11R)-3,7,11,15-tetramethyl
hexadec-2-enyl]-2,3-dihydronaphthalen-1,4-dion (trans-epoxyphytomenadion).
Chứa không quá 4,0% trans-epoxyphytomenadion và không ít hơn 75,0% trans-
phytomenadion. Tổng của 3 thanh phần không được ít hơn 97,0% và không được
nhiều hơn 103,0%
Tính chất

Chất lỏng dạng dầu nhớt, trong và màu vàng hoặc vàng cam, không mùi.
Dễ tan trong ether, iso octan, cloroform và dầu béo.
Hơi tan trong ethanol và methanol, thực tế không tan trong nước. Nó bị phân huỷ
dần dần và bị sẫm mầu do ánh sáng.
Chỉ số khúc xạ khoảng 1,526.
Định tính
Tiến hành nhanh chóng và tránh tác động của ánh sáng
A. Hòa tan 10,0 mg chế phẩm trong trimethylpentan (TT) và pha loãng thành
100,0 ml với cùng dung môi. Phổ tử ngoại ( phụ lục 4.1) của dung dịch thu được
trong vùng từ 275 nm đến 340 nm cho hấp thu cực đại ở 327 nm và cực tiểu ở
285 nm. A (1%; 1 cm) ở bước sóng cực đại phải từ 67 đến 73.
3

Pha loãng tiếp 10,0 ml dung dịch trên thành 50,0 ml với trimethylpentan. Phổ tử
ngoại (Phụ lục 4.1) của dung dịch này trong vùng từ 230 nm đến 280 nm, cho 4
hấp thu cực đại ở 243 nm, 249 nm, 261 nm và 270 nm
B. Trong sắc ký đồ thử Menadion và tạp chất liên quan khác: Vết chính của dung
dịch thử (2) phải tương tự về vị trí, màu sắc và kích thước với vết chính của dung
dịch đối chiếu (1)
C. Hòa tan 50 mg chế phẩm trong 10 ml methanol (TT) và thêm 1 ml dung dịch
kali hydroxyd 20% trong methanol (TT) màu xanh lục xuất hiện và trở nên tím
đỏ khi đun nóng trong cách thủy ở 40
o
C và sau đó chuyển sang màu nâu đỏ.
Độ trong của dung dịch
Hòa tan 2,5 g chế phẩm trong trimethylpentan và pha loãng thành 25 ml với cùng
dung môi. Dung dịch phải trong (Phụ lục 9.2).
Chỉ số acid
Không quá 2,0 (phụ lục 7.2) ( dùng 2,00 g chế phẩm.)
Menadion và các tạp chất liên quan khác

Xác định bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng (phụ lục 5.4)
Bản mỏng: Silica gel GF
254
(TT)
4

Dung môi khai triển: Cyclohexan - toluen (20 : 80)
Dung dịch thử (1)
Hòa tan 0,40 g chế phẩm trong cyclohexan (TT) và pha loãng thành 10 ml với
cùng dung môi
Dung dịch thử (2)
Pha loãng 1 ml dung dịch thử (1) thành 10 ml với cyclohexan (TT) .
Dung dịch đối chiếu (1)
Hòa tan 40 mg phytomenadion chuẩn (ĐC) trong cyclohexan (TT) và pha loãng
thành 10 ml với cùng dung môi
Dung dịch đối chiếu (2)
Pha loãng 1 ml dung dịch thử (2) thành 20 ml bằng cyclohexan (TT)
Dung dịch đối chiếu (3)
Hòa tan 4,0 mg menadion (TT) trong cyclohexan (TT) và pha loãng thành 50 ml
với cùng dung môi
Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 10 l mỗi dung dịch trên. Triển
khai sắc ký đến khi dung môi đi được khoảng 15 cm, lấy bản mỏng ra, để khô
5

ngoài không khí trong 5 phút. Quan sát dưới ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 254
nm và phun dung dịch acid phosphomolybdic 10% trong ethanol (TT). Sấy bản
mỏng ở 120
o
C trong 5 phút.
Quan sát dưới ánh sáng thường. Trên sắc ký đồ của dung dịch thử (1):

Bất cứ vết nào tương ứng menadion không được đậm màu hơn vết trên sắc ký đồ
của dung dịch đối chiếu (3) (0,2%); Bất cứ vết nào, khác vết chính và vết tương
ứng mennadion, không được đậm màu hơn vết của dung dịch đối chiếu (2)
(0,5%). Không Bỏ qua bất cứ vết nào nằm dưới vết chính và không tách hoàn
toàn khỏi vết chính.
Tro sulfat
Không được quá 0,1 % ( Phụ lục 9.9, phương pháp 2).
Dùng 1,0 g chế phẩm
Định lượng
Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3).
Pha động : Octanol - di-isopropyl ether - heptan (0,67 : 3,3 : 1000)
Dung dịch thử
6

Hòa tan 15,0 mg chế phẩm trong pha động và pha loãng thành 10,0 ml với pha
động.
Dung dịch đối chiếu (1)
Hòa tan 15,0 mg phytomenadion chuẩn (ĐC) trong pha động và pha loãng thành
10,0 ml với pha động.
Dung dịch đối chiếu (2)
Hòa tan 15,0 mg phytomenadion chuẩn (ĐC) và 4,0 mg trans-
epoxyphytomenadion chuẩn (ĐC) trong pha động và pha loãng thành 10,0 ml với
pha động.
Điều kiện sắc ký:
Cột thép không rỉ 0,25 m x 4,6 mm được nhồi spherical silica gel dùng cho sắc ký
(5 mm) với lỗ xốp 8 nm.
Tốc độ dòng: 0,4 ml/phút
Detector quang phổ tử ngoại đặt tại bước sóng 254 nm.
Thể tích tiêm: 20 l.
Tiêm dung dịch đối chiếu (2). Điều chỉnh độ nhạy của hệ thống sao cho chiều cao

của pic chính ít nhất bằng 50% của thang đo.
7

Phép thử chỉ có giá trị khi thứ tự rửa giải của các pic là trans-
epoxyphytomenadion, cis-phytomenadion và trans-phytomenadion. Tiến hành
tiêm dung dịch đối chiếu (1) 6 lần. Phép định lượng chỉ có giá trị khi độ lệch
chuẩn tương đối diện tích pic đồng phân trans nhỏ hơn 1,0% và độ phân giải giữa
pic tương ứng trans-phytomenadion và cis-phytomenadion ít nhất là 2,5. Tiêm
dung dịch thử và dung dịch đối chiếu, tính toán nồng độ phần trăm của trans-
phytomenadion, cis-phytomenadion và trans-epoxyphytomenadion theo các công
thức sau:
m' x A'
trans
x S
trans
Trans-phytomenadion =
m x S'
trans
m' x A'
cis
x S
cis
Cis-phytomenadion =
m x S'
cis
m' x A'
epoxy
x S
epoxy
trans – epoxyphytomenadion

m x S'
epoxy
8

m' = Khối lượng (mg) chất chuẩn trong dung dịch đối chiếu (1)
m = Khối lượng (mg) chế phẩm trong dung dịch thử
Á
trans
= Hàm lượng (%) trans-phytomenadion trong phytomenadion chuẩn
Á
cis
= Hàm lượng (%) cis-phytomenadion trong phytomenadion chuẩn
Á
epoxy
= Hàm lượng (%) trans - epoxyphytomenadion trong phytomenadion
chuẩn
S
trans
= Diện tích pic tương ứng với đồng phân trans trong sắc ký đồ của dung
dịch thử
S
cis
= Diện tích pic tương ứng với đồng phân cis trong sắc ký đồ của dung
dịch
thử
S’
epoxy
= Diện tích pic tương ứng với đồng phân trans epoxyphytomenadion -
trong sắc ký đồ của dung dịch thử
S’

trans
= Diện tích pic tương ứng với đồng phân tran trong s
ắc ký
đồ của dung dịch đối chiếu (1)
S’
cis
= Diện tích pic tương ứng với đồng phân cis trong sắc ký đồ của dung
9

dịch đối chiếu (1)
S´
epoxy
= Diện tích pic tương ứng với đồng phân trans-epoxyphytomenadion
trong sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1)
Bảo quản
Trong bao bì kín, tránh ánh sáng.
Loại thuốc
Tương tự vitamin K.
Chế phẩm
Thuốc tiêm, viên nén.